Полиморфизм +936c>т гена сосудистого эндотелиального фактора роста как маркёр предрасположенности к облитерирующему атеросклерозу артерий нижних конечностей Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2018

УДК 616.137.83/.93-004.6-007.271-092:612.6.05

Орлова А.Ю., Артюшкова Е.Б., Суковатых Б.С., Бушуева О.Ю., Полоников А.В., Гордов М.Ю.

ПОЛИМОРФИЗМ +93БОТ ГЕНА СОСУДИСТОГО ЭНДОТЕЛИАЛЬНОГО ФАКТОРА РОСТА КАК МАРКЁР ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К ОБЛИТЕРИРУЮЩЕМУ АТЕРОСКЛЕРОЗУ АРТЕРИЙ НИЖНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ

Курский государственный медицинский университет, 305041, Курск

Цель. Изучение взаимосвязи полиморфизмов +936C>T, -460C>T, 534C>T и -2578C>A гена VEGFA с риском развития облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей в популяции русских жителей Центральной России. Материал и методы. Исследование выполнено на выборке неродственных индивидов русской национальности, проживающих в Курской области (все уроженцы Центральной России), общей численностью 350 человек, из них 202 пациента (176 мужчин и 26 женщин) с облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей и 148 относительно здоровых индивидов, являющихся контрольной группой. Исследуемые группы были сопоставимы по полу и по возрасту (p>0,05). Геномную ДНК выделяли стандартным методом фенольно-хлороформной экстракции. Ге-нотипирование полиморфизмов +936C>T (rs3025039), -460C>T (rs833061), 534C>T (rs25648) и -2578C>A (rs699947) гена VEGFA проводилось методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Для оценки ассоциаций аллелей и генотипов с риском развития облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей использовали критерий х2 и отношение шансов (ОШ) с 95% доверительным интервалом (ДИ).

Результаты. Впервые выявлено, что гомозиготное носительство по нормальному аллелю +936CC даёт протектив-ный эффект относительно риска развития заболевания у женщин (ОШ 0,25, 95% ДИ 0,07—0,93; p=0,03). При этом генотип +936CT ассоциировался с повышенным риском развития у женщин (ОШ 4,79, 95% ДИ 1,14—20,21; p =0,02). У мужчин не обнаружено ассоциаций исследуемых полиморфизмов с развитием заболевания.

Заключение. Полиморфизм +936CT гена VEGFA является фактором риска развития облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей у русских женщин, проживающих в Центральной России.

К л ю ч е в ы е с л о в а: полиморфизм гена VEGFA; облитерирующий атеросклероз артерий нижних конечностей.

Для цитирования: Орлова А.Ю., Артюшкова Е.Б., Суковатых Б.С., Бушуева О.Ю., Полоников А.В., Гордов М.Ю. Полиморфизм +936С>Т гена сосудистого эндотелиального фактора роста как маркёр предрасположенности к облитерирующему атеросклерозу артерий нижних конечностей. Клин. мед. 2018; 96(3): 234-239. DOI http://dx.doi.org/10.18821/0023-2149-2018-96-3-234-239

Для корреспонденции: Орлова Анжелика Юрьевна - канд. мед. наук, ассистент каф. общей хирургии; e-mail: anzhelika_orlova@bk.ru

Orlova A.Yu., Artyushkova E.B., Sukovatykh B. S., Bushueva O.Yu., Polonikov A.V., Gordov M.Yu.

POLYMORPHISM +936C>r OF VASCULAR ENDOTHELIAL GROWTH FACTOR AS A MARKER OF SUSCEPTIBILITY TO THE OBLITERATING ATHEROSCLEROSIS OF ARTERIES OF THE LOWER EXTREMITIES

Kursk State Medical University, 305041, Kursk, Russia

Purpose. Studying of interrelation of the polymorphisms +936C>T, -460C>T, 534C>T и -2578C>A VEGFA gene with risk of development of the obliterating atherosclerosis of the lower extremities arteries in population of the russian residents of the Central Russia. Material and methods. The research was performed on selection of the unrelated individuals of the Russian nationality living in Kursk region (all natives of the Central Russia) with a total number of 350 people from which is 202 patients (176 men and 26 women) with the obliterating atherosclerosis of the lower extremities arteries and 148 rather healthy individuals who was control group. The studied groups were comparable in agree of the sex and age (р>0,05). Genomic DNA was emitted with the standard method of the phenolic and chloroform extraction. Genotyping of the polymorphisms +936C>T (rs3025039), -460C>T (rs833061), 534C>T (rs25648) and -2578C>A (rs699947) of the gene VEGFA was performed using PTsR method in the regime of «real time». For assessment of the associations alleles and genotypes with risk of the obliterating atherosclerosis of the lower extremities arteries used criterion х2 and odds ratio (OR) with 95% confidence interval (CI). Results. It is for the first time revealed that the homozygous carriage on the normal allelyu + 936CC had protective effect concerning risk of development of the disease in women: 0R=0,25; 95% Cl=0,07-0,93; р=0,03. At the same time the genotype + 936CT was associated with the increased risk of development of the disease in women: OR=4,79; 95% CI=1,14-20,21; р=0,02. At men associations of the studied polymorphisms with development of the disease were not revealed. Conclusion. The polymorphism + 936CT of the gene VEGFA is factor of the risk of the development obliterating atherosclerosis of the lower extremities arteries in the russian women of the Central Russia.

K e y w o r d s: the polymorphism of VEGFA; obliterating atherosclerosis of arteries of the lower extremities.

For citation: Orlova A.Yu., Artyushkova E.B., Sukovatykh B. S., Bushueva O.Yu., Polonikov A.V., Gordov M.Yu. A polymorphism +936C>T of vascular endothelial growth factor as a marker of susceptibility to the obliterating atherosclerosis of arteries of the lower extremities . Klin. med. 2018; 96(3): 234-239. DOI http://dx.doi.org/10.18821/0023-2149-2018-96-3-234-239

For correspondence: А^е!^ Yu. Orlova - MD, PhD, assistant of the Department. General surgery; e-mail: anzhelika_orlova@bk.ru

Conflict of interests. The authors declare no conflict of interests. Acknowlegments. The study had no sponsorship .

Received 06.03.17 Accepted 18.04.17

Клиническая медицина. 2018; 96(3)

РР! http://dx.doi.org/10.18821/0023-2149-2018-96-3-234-239

Оригинальные исследования

Проблема атеросклероза является одной из самых актуальных в современной медицине в связи с его широкой распространённостью, длительным периодом бессимптомного развития и тяжёлыми осложнениями. Согласно статистическим оценкам, смертность от сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) и в первую очередь от атеросклероза в сравнении с 1990 г. к 2020 г. будет возрастать от 28 до 31,5% [1]. Облитерирующий атеросклероз артерий нижних конечностей (ОААНК), как правило, представляет собой проявление распространённого поражения артерий и имеет высокий риск развития сердечно-сосудистых осложнений [2].

Воспаление и пролиферация в артериальной стенке - ключевые патогенетические звенья атеросклероза - в значительной степени генетически детерминированы и контролируются различными полиморфными генами, среди которых значительный вклад носят гены факторов роста [3]. Одним из основных ангиогенных факторов считается фактор роста эндотелия сосудов (УБОГ). Семейство УБОГ представлено пятью основными представителями: VEGFA, VEGFВ, VEGFС, VEGFD, а также плацентарным фактором роста. Наибольшее значение для роста кровеносных сосудов имеет УБОГА, который как оказывает собственное влияние на анги-огенез через действие на эндотелиальные клетки сосудов, так и активирует другие сосудистые факторы роста [4, 5].

До настоящего момента в литературе накоплено достаточное количество данных о взаимосвязи полиморфных вариантов гена VEGFА с риском развития ССЗ, однако имеющиеся данные противоречивы. УБОГА -важный участник артериогенеза. Показано, что он экс-прессируется на поверхности эндотелиальных клеток в растущих коллатералях [6]. Кроме того, у мышей возможно угнетение артериогенеза антагонистом УБОГА ZD4190 [7]. Хотя введение мышам с хронической окклюзией бедренной артерии растворимых рецепторов УЕОГ не угнетает артериогенез, однако введение больших доз УБОГ в бедренную артерию проксимальнее окклюзии ведёт к значительному усилению коллатерального кровотока [8].

Таким образом, целью настоящего исследования было изучение взаимосвязи полиморфизмов +936С>Т, -460С>Т, 534С>Т и -2578С>А гена VEGFА с риском развития ОААНК в популяции русских жителей Центральной России.

Материал и методы

Материалом для исследования послужила выборка неродственных индивидов русской национальности, проживающих в Курской области (все уроженцы Центральной России), общей численностью 350 человек. Проведение исследования одобрено этическим комитетом. Всего обследовано 202 пациента (176 мужчин и 26 женщин) с ОААНК, которые находились на стационарном лечении в отделениях сосудистой хирургии Курской областной клинической больницы и Городской

больницы скорой медицинской помощи Курска в период с 2010 по 2014 г. Диагностическая программа включала лабораторные исследования, реовазографию, фотоплетизмографию, допплерографию и ультразвуковое ангиосканирование. Контрольная выборка в количестве 148 относительно здоровых индивидов была сформиро -вана из относительно здоровых добровольцев во время профессиональных осмотров на промышленных предприятиях, в лечебно-профилактических учреждениях Курска и Курской области. Средний возраст больных составил 61,01 ± 10,03 года, обследованных контрольной группы - 61,65 ± 7,98 года. Исследуемые группы были сопоставимы по полу и по возрасту (p > 0,05).

У всех обследуемых производился забор венозной крови в пробирки с антикоагулянтом - этилендиамин-тетраацетатом. Геномную ДНК выделяли стандартным методом фенольно-хлороформной экстракции. Ге-нотипирование полиморфизмов + 936C>T (rs3025039), -460C>T (rs833061), 534C>T (rs25648) и -2578C>A (rs699947) гена VEGFA проводилось методом полиме-разной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени с дискриминацией аллелей с помощью зондов TaqMan. Для генотипирования использовали опубликованные в литературе протоколы (CGF sequencing web site, http://variantgps.nci.nih.gov), праймеры и зонды TaqMan синтезировали в компании «Синтол» (Москва).

Для оценки ассоциаций аллелей и генотипов с риском развития ОААНК использовали критерий %2 и отношение шансов (ОШ) с 95% доверительным интервалом (ДИ). Статистическую обработку данных проводили на персональном компьютере с использованием программных пакетов Statistica for Windows 8.0 (StatSoft).

Результаты

Отклонения частот аллелей и генотипов полиморфизмов +936C>T, -460C>T, 534C>T и -2578C>A гена VEGFA от популяционного равновесия Харди -Вайн-берга не наблюдалось (p>0,05). Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов исследуемых полиморфизмов гена VEGFA в группах больных ОААНК и здоровых индивидов представлены в табл. 1.

Из табл. 1 видно, что частоты аллелей и генотипов исследуемых полиморфизмов в группах не различались.

Затем был проведён анализ взаимосвязи исследуемых полиморфных вариантов гена VEGFA с развитием ОААНК раздельно у мужчин и женщин; результаты представлены в табл. 2 и 3 соответственно.

Как видно из табл. 2, у мужчин не обнаружено ассоциаций исследуемых полиморфизмов с развитием ОААНК.

В то же время у больных с ОААНК женщин, как видно из табл. 3, отмечалось относительное преобладание частоты вариантного аллеля +936Т полиморфизма +936C>T, однако различия не достигали уровня статистически значимых (ОШ 2,82, 95% ДИ 0,92-8,69; p=0,06). В то же время гомозиготное носительство по нормальному аллелю

Таблица 1

Распределение аллелей и генотипов полиморфизмов +936C>T, -460C>T, 534C>T и -2578C>A гена VEGFA у пациентов с ОААНК и здоровых обследованных

Аллели, генотипы Пациенты с ОААНК (n=202) Здоровые обследованные (n=148) X2 (р2) OOI (95% ДИ)

n (%)

VEGFA +936C>T (rs3025039) частоты аллелей и генотипов

+936C 0,827 0,807 0,43 (0,51) 0,88 (0,60-1,29)

+936Т 0,173 0,193

Аллели

Генотипы +936^ 135 (66,8) 96 (64,9) 0,15 (0,70) 0,92 (0,59-1,43)

+936^ 64 (31,7) 47 (31,8) 0,00 (0,99) 1,00 (0,63-1,57)

+936ТТ 3 (1,5) 5 (3,4) 1,37 (0,24) 0,43 (0,10-1,83)

VEGFA -460C>T (rs833061) частоты аллелей и генотипов

Аллели -460C 0,490 0,557 3,10 (0,08) 1,31 (0,97-1,77)

-460Т 0,510 0,443

Генотипы -460^ 49 (24,3) 45 (30,4) 1,64 (0,20) 1,36 (0,85-2,19)

-460^ 100 (49,5) 75 (50,7) 0,05 (0,83) 0,95 (0,62-1,46)

-460ТТ 53 (26,2) 28 (18,9) 2,57 (0,11) 1,52 (0,91-2,56)

VEGFA 534C>T, (rs25648) частоты аллелей и генотипов

Аллели 534C 534Т 0,834 0,794 1,84 (0,18) 0,76 (0,52-1,13)

0,166 0,206

Генотипы 534^ 142 (70,3) 91 (63,6) 1,69 (0,19) 0,74 (0,47-1,17)

534^ 53 (26,2) 45 (31,5) 1,13 (0,29) 0,77 (0,48-1,24)

534ТТ 7 (3,5) 7 (4,9) 0,44 (0,51) 0,70 (0,24-2,03)

VEGFA -2578C>A (rs699947) частоты аллелей и генотипов

Аллели -2578C 0,502 0,568 2,91 (0,09) 1,30 (0,96-1,76)

-2578А 0,498 0,432

Генотипы -2578^ 53 (26,2) 49 (33,1) 1,95 (0,16) 1,39 (0,87-2,21)

-2578CА 97 (48,0) 70 (47,3) 0,02 (0,89) 1,03 (0,67-1,57)

-2578АА 52 (25,7) 29 (19,6) 1,82 (0,18) 1,42 (0,85-2,38)

+936СС оказывало протективное действие относительно риска развития ОААНК у женщин (ОШ 0,25, 95% ДИ 0,07-0,93, р=0,03). При этом генотип +936СТ ассоциировался с повышенным риском развития ОААНК у женщин (ОШ 4,79, 95% ДИ 1,14-20,21, />=0,02).

Обсуждение

Нами впервые исследована ассоциация полиморфизма +936С>Т гена УЕОЕА с риском развития ОААНК у русских жителей Центральной России, что согласуется с результатами исследователей, выполненных в других популяциях [9-12].

Среди белков семейства УЕОЕ фактор роста VEGFА является самым мощным проангиогенным протеином и играет ключевую роль в регулировании ангиогенеза. Ген VEGFА расположен на коротком плече хромосомы 6 (6р21.1), состоит из 6 экзонов и 5 интронов, его длина составляет 16 270 пар нуклеотидов [13]. Известно 9 изоформ гена VEGFА, которые образуются в результате альтернативного сплайсинга мРНК, кодируемой геном VEGFА. Изоформы гена VEGFА (VEGF-АШ, VEGF-А121, VEGF-А145, VEGF-А148, VEGF-А162, VEGF-А165, VEGF-А183, VEGF-А189, VEGF-А206) состоят из различного количества аминокислотных

остатков в пептидной цепи и различаются по способности взаимодействовать с гепарином, по митотическо-му потенциалу, хемотаксическим свойствам, характеру связывания рецепторов и тканеспецифичной экспрессии [14].

Проанализирована ассоциированность функционального полиморфизма гена УЕОЕА в позиции А-2578С (^699947) промоторного региона и в позиции С-936Т (^3025039) З'-нетранслируемого региона у здоровых обследованных, а также у пациентов с нестабильной стенокардией и инфарктом миокарда (ИМ) в анамнезе. Выявлены определённые закономерности в распределении частот генотипов -2578/+936 гена УЕОЕ у пациентов, перенёсших ИМ. Показано, что частота сложного генотипа АС/СС С-2578А/С-936Т гена УЕОЕА достоверно выше у пациентов, перенёсших ИМ, относительно таковой у здоровых обследованных). У пациентов с генотипом АС/СС с ИМ в возрасте старше 55 лет риск развития ИМ возрастает [15]. Ряд исследователей оценивают фактор роста эндотелия сосудов (УЕОЕ) как основной стимулятор клеток эндотелия сосудов, играющий двоякую роль в развитии атеросклероза. С одной стороны, УЕОЕ может выступать определённым фактором защиты, активирующим не-

Таблица 2

Распределение аллелей и генотипов полиморфизмов +936C>T, -460C>T, 534C>T и -2578C>A гена VEGFA у пациентов с ОААНК и здоровых мужчин

Аллели, генотипы Пациенты с ОААНК (n=176) Здоровые мужчины (n=122) X2 (р2) OOI (95% ДИ)

n (%)

VEGFA +936C>T (rs3025039) частоты аллелей и генотипов

Аллели +936C +936Т 0,835 0,787 2,24 (0,13) 0,73 (0,48-1,10)

0,165 0,213

Генотипы +936^ 120 (68,2) 74 (60,7) 1,80 (0,18) 0,72 (0,44-1,17)

+936^ 54 (30,7) 44 (36,1) 0,95 (0,33) 0,78 (0,48-1,28)

+936ТТ 2 (1,1) 4 (3,3) 1,68 (0,20) 0,34 (0,06-1,88)

VEGFA -460C>T (rs833061) частоты аллелей и генотипов

Аллели -460C 0,491 0,570 3,53 (0,06) 1,37 (0,99-1,90)

-460Т 0,509 0,430

Генотипы -460^ 44 (25,0) 40 (32,8) 2,16 (0,14) 1,46 (0,88-2,44)

-460^ 85 (48,3) 59 (48,4) 0,00 (0,99) 1,00 (0,63-1,58)

-460ТТ 47 (26,7) 23 (18,9) 2,47 (0,12) 1,57 (0,89-2,75)

VEGFA 534C>T, (rs25648) частоты аллелей и генотипов

Аллели 534C 534Т 0,832 0,797 1,21 (0,27) 0,79 (0,52-1,20)

0,168 0,203

Генотипы 534^ 123 (69,9) 75 (63,6) 1,29 (0,26) 0,75 (0,46-1,23)

534СТ 47 (26,7) 38 (32,2) 1,04 (0,31) 0,77 (0,46-1,28)

534ТТ 6 (3,4) 5 (4,2) 0,13 (0,71) 0,80 (0,24-2,68)

VEGFA -2578C>A (rs699947) частоты аллелей и генотипов

Аллели -2578C 0,503 0,574 2,91 (0,09) 1,33 (0,96-1,85)

-2578А 0,497 0,426

Генотипы -2578^ 47 (26,7) 42 (34,4) 2,05 (0,15) 1,44 (0,87-2,38)

-2578CА 83 (47,2) 56 (45,9) 0,05 (0,83) 1,05 (0,66-1,67)

-2578АА 46 (26,1) 24 (19,7) 1,68 (0,20) 1,44 (0,83-2,53)

оваскуляризацию при ишемии тканей склерозирован-ных сосудов, с другой - ангиогенез, активированный VEGF, может приводить к росту атеросклеротических бляшек, которые могут быть нестабильными и способствовать развитию острых коронарных событий [16, 17]. Показано, что инъекции ДНК, содержащей VEGF, в миокард приводили к нормализации общего состояния при стенокардии и способствовали улучшению сокращающей функции миокарда [18]. В то же время имеются данные о том, что неоваскуляризация атеросклероти-ческих повреждений аорты может коррелировать с риском их разрыва [19]. Об этом свидетельствует то, что в эндотелиальных клетках, полученных из зоны сильного атеросклеротического повреждения, уровень экспрессии гена VEGF выше, чем уровень его экспрессии эндотелиальными клетками при слабом атеросклеро-тическом поражении, причём эндотелиальные клетки нормальных артерий, по некоторым данным, не экс-прессируют VEGF [20]. Плазменный уровень VEGF не только повышен у пациентов с множественными поражениями сосудов [21], но и независимо ассоциирован с риском смерти при ССЗ, как показано при проспективном популяционном анализе в когортных исследованиях [22]. Низкий уровень VEGF, напротив, обеспечивает стабилизацию атеросклеротических бляшек у пациентов с ССЗ [23]. При исследовании уровня

VEGF у больных с острым ИМ показано, что содержание сывороточного VEGF у них постепенно растёт после приступа, достигая максимума на 14-е сутки, а уровень VEGF, секретируемый мононуклеарами периферической крови, - на 7-е сутки после приступа. Максимальный уровень сывороточного VEGF показал высокую корреляционную связь с максимальным уровнем креатинфосфокиназы (+0,7). Уровень VEGF в мононуклеарах повышался у больных, у которых отмечено улучшение левожелудочковой систолической функции, в отличие от такового у больных, у которых такого улучшения не наблюдалось. Авторы считают, что VEGF, продуцируемый при ИМ, способствует ан-гиогенезу и реэндотелизации [24].

Несмотря на описанную выше значительную роль гена VEGFA в формировании и дальнейшем развитии сосудистой системы, данных о связи вариабельности гена VEGFA с его концентрацией и о существенном вкладе коллатерального кровотока в сохранении кровоснабжения миокарда при ишемической болезни сердца крайне недостаточно. Существует лишь одна работа по изучению ассоциации однонуклеотидных полиморфизмов с состоянием коллатерального кровотока [25], в которой 393 пациента с ишемической болезнью сердца и стенозом коронарных артерий не менее 70% по результатам коронарографии были разделены

Таблица 3

Распределение аллелей и генотипов полиморфизмов +936C>T, -460C>T, 534C>T и -2578C>A гена VEGFA у пациентов с ОААНК и здоровых женщин

Аллели, генотипы Пациенты с ОААНК (n=26) Здоровые женщины (n=26) X2 (р2) OOI (95% ДИ)

n (%)

VEGFA +936C>T (rs3025039) частоты аллелей и генотипов

Аллели +936C 0,769 0,904 3,45 (0,06) 2,82 (0,92-8,69)

+936Т 0,231 0,096

Генотипы +936^ 15 (57,7) 22 (84,6) 4,59 (0,03*) 0,25 (0,07-0,93)

+936^ 10 (38,5) 3 (11,5) 5,03 (0,02*) 4,79 (1,14-20,21)

+936ТТ 1 (3,8) 1 (3,8) 0,00 (1,00) 1,00 (0,06-16,89)

VEGFA -460C>T (rs833061) частоты аллелей и генотипов

Аллели -460C 0,481 0,500 0,04 (0,84) 1,08 (0,50-2,33)

-460Т 0,519 0,500

Генотипы -460^ 5 (19,2) 5 (19,2) 0,00 (1,00) 1,00 (0,25-3,97)

-460^ 15 (57,7) 16 (61,5) 0,08 (0,78) 0,85 (0,28-2,58)

-460ТТ 6 (23,1) 5 (19,2) 0,12 (0,73) 1,26 (0,33-4,79)

VEGFA 534C>T, (rs25648) частоты аллелей и генотипов

Аллели 534C 534Т 0,846 0,780 0,74 (0,39) 0,64 (0,24-1,77)

0,154 0,220

Генотипы 534^ 19 (73,1) 16 (64,0) 0,49 (0,48) 0,65 (0,20-2,15)

534^ 6 (23,1) 7 (28,0) 0,16 (0,69) 0,77 (0,22-2,73)

534ТТ 1 (3,8) 2 (8,0) 0,40 (0,53) 0,46 (0,04-5,42)

VEGFA -2578C>A (rs699947) частоты аллелей и генотипов

Аллели -2578C 0,500 0,538 0,15 (0,69) 1,17 (0,54-2,52)

-2578А 0,500 0,462

Генотипы -2578^ 6 (23,1) 7 (26,9) 0,10 (0,75) 1,23 (0,35-4,32)

-2578CА 14 (53,8) 14 (53,8) 0,00 (1,00) 1,00 (0,34-2,98)

-2578АА 6 (23,1) 5 (19,2) 0,12 (0,73) 1,26 (0,33-4,79)

на 2 группы в зависимости от состояния коллатерального кровотока: на группу с «хорошими» коллатера-лями и группу с «плохими» коллатералями. Удалось установить, что состояние коллатерального кровотока ассоциировано с однонуклеотидным полиморфизмом ^2010963 (+405 С^) и ^699947 (-2578С>А): частота +405С и -2578А была выше в группе с хорошо развитыми коллатералями.

Заключение

В рамках настоящего исследования впервые установлено, что полиморфизм +936СТ гена УБОЕА может представлять собой значимый фактор риска развития облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей у русских женщин, проживающих в Центральной России. В то же время полученные результаты требуют проведения независимых исследований в других популяциях с целью подтверждения ассоциации. Указанный маркёр может использоваться в качестве предиктора при прогнозировании риска развития облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей в семьях с повышенным генетическим риском развития болезни. Полученные результаты расширяют представления о генетической детерминации нарушений в системе липидного обмена, свободно-радикального повреждения, которые играют важную

роль в патогенезе атеросклероза и могут быть востребованы при разработке и совершенствовании подходов к антиоксидантной и антигиперхолистеринснижающей терапии атеросклероза.

Перспективен дальнейший поиск индивидуальных генетических факторов риска развития атеросклероти-ческого поражения сосудистого русла. Скрининг большого числа вариантных участков кандидатных генов позволит выявить достоверные ассоциативные связи между аллельными вариантами полиморфных участков ДНК с маркёрами повреждения и защиты сосудистой стенки, установить новые диагностические критерии предрасположенности к развитию сосудистых катастроф и разработать современные патогенетические средства терапии заболевания.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.

ЛИТЕРАТУРА (остальные источники см. REFERENCES) 2. Лутай, М.И. Мультифокальный атеросклероз: польза статинов.

Дiабет i сердце. 2011; 152(6): 40-4. 4. Противовоспалительные механизмы в сосудистой стенке при атеросклерозе [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http:// yondertoxin.narod.ru/doclad01.htm 15. Шевченко А.В., Коненков В.И., Караськов A.M. Полиморфизмы С-2578А и С+936Т гена VEGF среди мужчин европеоидного происхождения с коронарными осложнениями атеросклероза.

Клиническая медицина. 2018; 96(3)

DOI http://dx.doi.org/10.18821/0023-2149-2018-96-3-234-239

Оригинальные исследования

Иммунология. 2013; (3):144-8.

REFERENCES

1. Essick E.E., Ouchi N., Wilson R.M. et al. Adiponectin mediates cardioprotection in oxidative stress-induced cardiac myocyte remodeling . Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2011; 301(3): 984-93.

2. Lutay M. I. Multifocal atherosclerosis: advantage of the statins. Dia-bet i serdce. 2011; 152( 6): 40-4. (in Russian)

3 . Schierling W., Troidl K., Troidl C. et al. The role of angiogenic growth factors in arteriogenesis . J. Vasc. Res. 2009;46: 365-74.

4. Antiinflammatory mechanisms in the vascular wall at the atherosclerosis [Electronic resource]. - Access mode: http://yondertoxin.narod. ru/doclad01.htm (in Russian)

5. Takahashi T, Yamaguchi S, Chida K, Shibuya M. A single autophos-phorylation site on KDR/Flk-1 is essential for VEGF-A-dependent activation of PLC-gamma and DNA synthesis in vascular endothelial cells . EMBO J. 2001; 20(11): 2768-78.

6 . Schaper W. Collateral circulation: Past and present. Basic. Res. Cardiol. 2009; 104: 5-21.

7. Lloyd P.G., Prior B.M., Li H. et al. VEGF receptor antagonism blocks arteriogenesis, but only partially inhibits angiogenesis, in skeletal muscle of exercise-trained rats . Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2005;288: 759-68.

8. Schierling W., Troidl K., Troidl C. et al. The role of angiogenic growth factors in arteriogenesis . J. Vasc. Res. 2009;46: 365-74.

9 . Carmeliet P., Ng Y.S., Nuyens D. et al. Impaired myocardial angio-genesis and ischemic cardiomyopathy in mice lacking the vascular endothelial growth factor isoforms VEGF164 and VEGF188. Nat. Med. 1999;5: 495-502.

10. Loupakis F., Ruzzo A., Salvatore L. et al. Retrospective exploratory analysis of VEGF polymorphisms in the prediction of benefit from first-line FOLFIRI plus bevacizumab in metastatic colorectal cancer. BMC Cancer. 2011;11: 247.

11. Churchill A.J., Carter J.G., Ramsden C. et al. VEGF polymorphisms are associated with severity of diabetic retinopathy. Invest . Ophthalmol. Vis. Sci. 2008;49: 3611-16.

12. Churchill A.J., Carter J.G., Lovell H.C. et al. VEGF polymorphisms are associated with neovascular age-related macular degeneration . Hum. Mol. Genet. 2006;15: 2955-61.

13. Vincenti V., Cassano C., Rocchi M., Persico G. Assignment of the vascular endothelial growth factor gene to human chromosome 6p21.3. Circulation. 1996; 93: 1493-5.

14. Watson C.J., Webb N.J., Bottomley M.J., Brenchley P.E. Identifica-

tion of polymorphisms within the vascular endothelial growth factor (VEGF) gene:correlation with variation in VEGF protein production. Cytokine .2000; 12: 1232-5.

15. Shevchenko A. V., Konenkov V. I., Karaskov A.M. Polymorphisms of C-2578A and C + 936T of VEGF gene among men of the Caucasian origin with coronary complications of the atherosclerosis Immunologya. 2013; 3: 144-8. (in Russian)

16. Ferrara N., Gerber H.P., LeCouter J. The biology of VEGF and its receptors Nature Med. 2003; 9: 669-76.

17. Roy H., Bhardwaj S., Yla-Herttuala S. Biology of vascular endothelial growth factors . FEBSLett. 2006; 580: 2879-87.

18. Gyongyosi М., Khorsand A., Zamini S., Sperker W., Strehblow С., Kastrup J. et al. NOGA-guided analysis of regional myocardial perfusion abnormalities treated with intramyocardial injections of plas-mid encoding vascular endothelial growth factor A-165 in patients with chronic myocardial ischemia: subanalysis of the EUROIN-JECT-ONE multicenter double-blind randomized study. Circulation . 2005; 112: I157-65.

19. Moreno P.R., Purushothaman K.R., Fuster V., Echeverri D., Truszc-zynska H., Sharma S.K. et al. Plaque neovascularization is increased in ruptured atherosclerotic lesions of human aorta: implications for plaque vulnerability. Circulation. 2004; 110: 2032-8.

20. Morsi W.G., Shaker O.G., Ismail E.F., Ahmed H.H., El-Serafi T.I., Maklady F.A. et al. HO-1 and VGEF gene expression in human arteries with advanced atherosclerosis Clin. Biochem. 2006; 39: 1057-62.

21. Nakajima K., Tabata S., Yamashita T., Kusuhara M., Arakawa K., Ohmori R. et al. Plasma vascular endothelial growth factor level is elevated in patients with multivessel coronary artery disease Clin. Cardiol. 2004; 27: 281-6.

22. Eaton C.B., Gramling R., Parker D.R., Roberts M.B., Lu B., Ridker P.M. Prospective association of vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A) with coronary heart disease mortality in southeastern New England. Atherosclerosis. 2008; 200: 221-7.

23. Jaumdally R.J., Goon P.K., Varma C., Blann A.D., Lip G.Y. Effects of atorvastatin on circulating CD34+/CD133+/. J. Intern. Med. 2010; 267: 385-93.

24. Giurgea A.G., Margeta С., Maca T., Rezaie-Majd A., Bucek R.A., Manavi M. et al. Simvastatin reduces serum level of VEGF in hyper-cholesterolemic patients . J. Cardiovasc. Pharmacol. 2006; 47: 30-6.

25. Lin T.-H., Wang C.-L., Su H.-M. Functional vascular endothelial growth factor gene polymorphisms and diabetes: Effect on coronary collaterals in patients with significant coronary artery disease. Clinica ChimicaActa. 2010;411:1688-93.

Поступила 06.03.17 Принята в печать 18.04.17