CC BY
49
РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА
ного набора хемокиновых рецепторов, определяющих конечный пункт миграции этих антигенпрезентирующих клеток. По нашему мнению, различия в маршруте миграции стимулированных вакцинами ДК могут оказывать существенное влияние на выбор типа иммунного ответа на вакцину.
Работа поддержана РФФИ, проект 13-04-00264.
ЛИТЕРАТУРА
2. Ярилин A.A. Иммунология. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2010.
21. Атауллаханов Р.И., Хаитов Р.М. Адъюванты в составе вакцин. Сообщение 1. Микро- и наночастицы. Иммунология. 2011; 32 (1):37—45.
22. Топтыгина А. П. Лимфоидный фолликул - территория иммунного ответа. Иммунология. 2012; 33 (3):162-9.
REFERENCES
1. Steinman R. M. The dendritic cell system and its role in immunoge-nicity. Annu. Rev. Immunol. 1991; 9: 271-96.
2. Jarilin A. A. Immunology. Moscow: GJeOTAR-Media; 2010 (in Russian).
3. Alvarez D., Vollmann E.H., von Andrian U. H. Mechanisms and consequences of dendritic cell migration. Immunity. 2008; 29(3): 325.
4. Boullart A.C.I., AarntzenE.H.J.G., VerdijkP, JacobsJ.F.M., Schuurhu-is D.H., Benitez-Ribas D. et al. Maturation of monocyte-derived dendritic cells with Toll-like receptor 3 and 7/8 ligands combined with prostaglandin E2 results in high interleukin-12 production and cell migration. Cancer Immunol. Immunother. 2008; 57: 1589-97.
5. Morel S.A., Turner M.S. Designing the optimal vaccine: the importance of cytokines and dendritic cells. Open Vaccine J. 2010; 3: 7-17.
6. Yen J.-H., Khayrullina T., Ganea D. PGE2-induced metalloproteinase-9 is essential for dendritic cell migration. Blood. 2008; 111(1): 260-70.
7. WestM.A., Prescott A.R., ChanK.M., Zhou Z., Rose-JohnS., Scheller J. et al. TLR ligand - induced podosome disassembly in dendritic cells is ADAM17 dependent. J. Cell Biol. 2008; 182(5): 993-1005.
8. JohnsonL.A., JacksonD.G. Cell Traffic and the Lymphatic Endothelium. Ann. N.Y. Acad. Sci. 2008; 1131: 119-33.
9. Randolph G. J., Angeli V., SwartzM. A. Dendritic-cell trafficking to lymph node through lymphatic vessels. Nature Rev. Immunol. 2005; 5: 617-28.
10. Martm-FontechaA., SebastianiS., Hopken U.E., UguccioniM., Lipp M., Lanzavecchia A., Sallusto F Regulation of dendritic cell migration to the draining lymph node: impact on T lymphocyte traffic and priming. J. Exp. Med. 2003; 198: 615-21.
11. KabashimaK., ShiraishiN., SugitaK., Mori T., Onoue A., Kobayashi M. et al. CXCL12-CXCR4 engagement is required formigration of cutaneous dendritic cells. Am. J. Pathol. 2007; 171: 1249-57.
12. Nakano H., Gunn M.D. Gene duplications at the chemokine locus on mouse chromosome 4: multiple strain-specific haplotypes and the deletion of secondary lymphoid-organ chemokine and EBI-1 ligand chemokine genes in the plt mutation. J. Immunol. 2001; 166: 361-9.
13. CysterJ.G. Chemokines and the homing of dendritic cells to the T cell areas of lymphoid organs. J. Exp. Med. 1999; 189: 447-50.
14. Saeki H., Wu M.T., Olasz E., Hwang S.T. A migratory population of skin-derived dendritic cells expresses CXCR5, responds to B lymphocyte chemoattractant in vitro, and co-localizes to B cell zones in lymph nodes in vivo. Eur. J. Immunol. 2000; 30: 2808-14.
15. Cyster J.G., AnselK.M., ReifK., EklandE.H., HymanP.L., TangH.L. et al. Follicular stromal cells and lymphocyte homing to follicles. Immunol. Rev. 2000; 176: 181-93.
16. Katakai T., Suto H., Sugai M., GondaH, Togawa A, Suematsu S, et al. Organizer-like reticular stromal cell layer common to adult secondary lymphoid organs. J. Immunol. 2008; 181: 6189-200.
17. LeonB., Ballesteros-TatoA., Browning J.L., Dunn R., Randall T.D., Lund F.E. Regulation of TH2 development by CXCR5+ dendritic cells and lymphotoxin-expressing B cells. Nature Immunol. 2012; 13(7): 681-90.
18. Sprott G. D., Dicaire C. J., Gurnani K., SadS., KrishnanL. Activation of dendritic cells by liposomes prepared from phosphatidylinositol mannosides from Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guerin and adjuvant activity in vivo. Infect. and Immun. 2004; 72: 5235-5246.
19. Andersen C.S., AggerE.M., RosenkrandsI., Gomes J.M., Bhowruth V, Gibson K.J. et al. Simple mycobacterial monomycolated glycerol lipid has potent immunostimulatory activity. J. Immunol. 2009; 182: 424-32.
20. Op den Brouw M. L., Binda R. S., Geijtenbeek T. B., Janssen H. L., Woltman A. M. The mannose receptor acts as hepatitis B virus surface antigen receptor mediating interaction with intrahepatic dendritic cells. virology. 2009; 393: 84-90.
21. Ataullakhanov R. I., Khaitov R. M. Vaccine adjuvants. 1. Micro- and nanoparticles. Immunologia. 2011; 32 (1):37- 45 (in Russian).
22. Toptygina A.P. The lymphoid follicles - the immune response zone. Immunologia. 2012; 33(3): 162-9 (in Russian).
Поступила 06.07.13
РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 618.3-06:616.98:579.882.11]-078.33
В.Н. Зорина1, И.А. Ботвиньева2, Л.В. Ренге2, Р.М. Зорина1, Т.С. Чирикова1, Н.А.Зорин1 ПОЛИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ БЕЛКИ-ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ И ЦИТОКИНЫ
у беременных женщин при антителоносительстве к chlamydia
TRACHOMATIS
1ГБОУ ДПО Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей Минздрава России, 654005, г Новокузнецк; 2МБ ЛПУ Зональный перинатальный центр, 654041, г Новокузнецк, ул. Сеченова
Изучено содержание а2-макроглобулина (а2-МГ), лактоферрина (ЛФ), альбумина (Алб), интерлейкина (ИЛ)-6, ИЛ-8 и фактора некроза опухоли а (ФНОа) в сыворотке крови (Сыв), пуповинной сыворотке (ПС) и околоплодных водах (ОВ) у рожениц-носительниц IgG-антител (АТ) к Chlamydia trachomatis для оценки их возможной роли в развитии внутриутробной инфекции (ВУИ). Установлено, что при антителоносительстве и развитии ВУИ наблюдается значительное повышение уровня а2-МГ, Алб, ИЛ-8, ФНОа, а также снижение содержания ЛФ в ОВ. В Сыв антителоносительниц при рождении детей с ВУИ повышен уровень ЛФ, ИЛ-6 и ФНОа. В ПС при антителоносительстве и развитии ВУИ увеличено количество ЛФ и ИЛ-6. Соотношение уровня изученных белков в Сыв, ПС и ОВ в норме и при антителоносительстве также различается - нарушена проницаемость гематоамниотического барьера при ВУИ. Нарушения синтеза и функций полифункциональных ЛФ, а2-МГ вносят свой вклад в развитие патологии, оказывая патологическое влияние на взаимозависимый транспорт цитокинов, так и напрямую повреждая ткани.
Ключевые слова: Chlamydia trachomatis, внутриутробная инфекция, а2-макроглобулин, лактоферрин, цитокины
- 323 -
ИММУНОЛОГИЯ № 6, 2013
VN. Zorina1, I.A. Botvin’eva2, L.VRenge2, R.M. Zorina1, T.S. Chirikova1, N.A. Zorin1
POLIFUNCTIONAL PROTEINS WITH IMMUNOMODULATORY FUNCTIONS AT PREGNANCY WITH ANTIBODIES TO CHLAMYDIA TRACHOMATIS IN CIRCULATION
Novokuznetsk State Institute of Postgraduate medicine of Ministry of Healthcare, 654005, Novokuznetsk, Russian Federation; 2Budget medical institution of therapy and prophylactics “zonal perinatal center”, 654041 Novokuznetsk, Russian Federation
We had investigated the concentrations of alpha-2-macroglobulin (a2-MG), lactoferrin (Lf), albumin (Alb), IL-6, IL-8, TNF-a in maternal sera, sera from umbilical cord and in amniotic liquid from women in labor with IgG antibodies against Chlamydia trachomatis, for evaluation of their possible role in intrauterine infection development. It was shown, that intrauterine infection development at the presence of antibodies to Chlamydia trachomatis in blood of women in labor leads to significant increase of a2-MG, Alb, IL-8, TNF-a levels and decrease of Lf levels in amniotic liquid, following by increase of Lf, IL-6, TNF-a concentrations in maternal sera and increase of Lf, IL-6 levels in sera from umbilical cord. Moreover, the correlations between proteins concentrations in above mentioned biological fluids were different in control group and in group of women with antibodies to Chlamydia trachomatis. These results can be accepted as the evidence of penetration of hemato-amniotic barrier during intrauterine infection development, and as the evidence of abnormal synthesis and breaching of functions of polyfunctional Lf and a2-MG what leads to damages of their regulation of cytokine synthesis and to direct damage of tissues.
Key words: Chlamydia trachomatis, intrauterine infection, alpha-2-macroglobulin, lactoferrin, cytokine
Хламидиоз обычно протекает бессимптомно, однако пер-систирующая инфекция либо повторное заражение могут вызвать развитие тяжелых осложнений и оказать значительное влияние на фертильность. chlamydia trachomatis выявляют у многих женщин с трубным фактором бесплодия - эта инфекция способствует развитию воспаления и последующему образованию спаек в трубах и яичниках [7]. Данный возбудитель нередко обнаруживают при спонтанных выкидышах, замершей и эктопической беременности [4, 8]. Беременность на фоне хламидийной инфекции часто заканчивается преждевременными родами в сроке 32-35 нед, а внутриутробное инфицирование плода либо заражение во время родов приводит к развитию пневмонии, конъюнктивита у новорожденных и последующему развитию заболеваний ЦНС [6]. При этом механизмы, позволяющие ch. trachomatis оказывать столь негативное влияние на плод, до сих пор не установлены. Все большее распространение получают теории о том, что повреждающее воздействие оказывает даже не сам патоген, а провоцируемый им синтез аутоантител к клеткам матери и плода [8]. В частности, известно, что белок теплового шока 60 (HSP60) бактерии на 60% гомологичен своему аналогу у человека и на него могут синтезироваться аутоантитела [7]. Предполагают, что подобное развитие аутоиммунных процессов приводит к гиперактивации клеток иммунной системы, последующему дисбалансу синтеза провоспалительных цитокинов и, как следствие, к повреждениям, наблюдаемым при данной патологии [8]. Однако до настоящего времени активно изучается лишь синтез самих цитокинов без учета изменений модулирующих их синтез иммунорегуляторных белков. К подобным белкам относятся а2-макроглобулин (а2-МГ) и лактоферрин (ЛФ). Оба белка являются металлопротеинами, а также гликопротеинами, осуществляют транспорт разнообразных ионов и белков к клеткам, регулируют межклеточные взаимодействия, модулируют синтез цитокинов, а также способны взаимодействовать с бактериальными агентами напрямую, являясь активными компонентами врожденного иммунитета [2, 5].
Цель нашей работы - изучить уровень иммунорегуляторных белков (а2-МГ, ЛФ), цитокинов и альбумина (Алб) в сыворотке (Сыв) крови, пуповинной сыворотке (ПС) и околоплодных водах (ОВ) для оценки их возможной роли в развитии внутриутробной инфекции (ВУИ) у рожениц - носительниц IgG-антител к Ch. trachomatis.
Материалы и методы. Обследованы 121 роженица в сроках гестации 38-40 нед, поступивших в родильное отделение клинического родильного дома МБ ЛПУ Зональный перинатальный центр г. Новокузнецка. Основную группу составили 86 женщин с наличием АТ класса G к Ch. trachomatis в низких титрах (1:20, 1:40), без клинических проявлений заболевания, не имевших специфического лечения в течение беременности и относящих-
ся к группе риска по развитию ВУИ у плода. По данным ретроспективного анализа всех рожениц основной группы разделили на две подгруппы: 1-я подгруппа (n = 49) - с благоприятным перинатальным исходом родов и рождением здорового ребенка (8-9 баллов по шкале Апгар); 2-я (n = 37) - с неблагоприятным перинатальным исходом родов (менее 7 баллов по шкале Апгар, у всех диагностирована ВУИ разной степени тяжести) и патологическим течением раннего неонатального периода. В контрольную группу вошли 35 практически здоровых рожениц с отсутствием отклонений в развитии плода, благоприятным исходом родов для плода (8-9 баллов по шкале Апгар) и физиологическим течением раннего неонатального периода.
Исследовали Сыв крови рожениц в сроке гестации 38-40 нед, ПС плода, а также ОВ, полученные при родах.
Модификацию метода количественного низковольтного иммуноэлектрофореза в пластинах агарозного геля [1] с увеличением длины канавки и расстояния между канавками для предотвращения смешивания образцов использовали для определения концентрации а2-МГ в Сыв и ПС, а также Алб в ОВ. Применяли 5-точечную калибровку со ступенчатым разведением и контрольные образцы для стандартизации результатов.
С помощью метода твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием тест-систем, сконструированных в исследовательских целях на базе НИЛ иммунологии ГБОУ ДПО Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей Минздрава России, определяли содержание а2-МГ в ОВ; коммерческие тест-системы для ИФА (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск) использовали при определении уровня ЛФ, ФНОа, ИЛ-6, иЛ-8 в Сыв, ПС и Ов.
Содержание Алб в Сыв и ПС оценивали стандартным биохимическим тестом с помощью коммерческих тестсистем (SpinReact, Испания).
Полученные данные статистически обрабатывали, используя программу для биостатистики “InStat 2.0” (Graph-Pad, США). Статистически достоверными считали различия между группами р < 0,05.
Результаты. Согласно полученным данным, у носительниц АТ класса G к Ch. trachomatis уровень а2-МГ в Сыв, а также в ПС был сопоставим по значениям, статистически значимо не отличался от контрольных показателей у здоровых рожениц и не зависел от исхода беременности (см. таблицу). В то же время содержание а2-МГ в ОВ было значительно ниже - в 50-54 раза, чем в норме и 1-й подгруппе, и только в 18 раз при антителоносительстве и развитии ВУИ (2-я подгруппа). Соответственно, содержание а2-МГ в ОВ при ВУИ было в 3 раза выше, чем у здоровых родильниц и антителоносительниц, родивших здорового ребенка.
Иные тенденции выявили при изучении содержания ЛФ: в ПС оно было статистически значимо ниже на 30%, чем в
- 324 -
РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА
Содержание изученных белков и цитокинов в различных биожидкостях на фоне антителоносительства к Ch. trachomatis
Показатель Группа новорожденных Сыв рожениц (38-40 нед) ПС ОВ
а2-МГ, г/л Контроль 2,87 ± 0,14 3,02 ± 0,08 0,056 ± 0,021
р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
IgG к ch. trachomatis:
здоровые 2,66 ± 0,12 2,96 ± 0,10 0,056 ± 0,018
р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
ВУИ 3,05 ± 0,11 3,00 ± 0,15 0,169 ± 0,029
р2 = 0,0283 р1 = 0,0039; р2 = 0,0015; р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
ЛФ, мг/л Контроль 3,53 ± 0,16 2,72 ± 0,12 6,78 ± 0,62
IgG к ch. trachomatis: р3 = 0,0002 р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
здоровые 4,24 ± 0,22 3,59 ± 0,17 5,78 ± 0,33
р3 = 0,0182 р1 = 0,0002; р3 = 0,0221 р3 = 0,0002; р4 = 0,0001
ВУИ 6,03 ± 0,36 3,52 ± 0,29 5,02 ± 0,49
рх = 0,0001; р2 = 0,0001 рх = 0,0102; р3 = 0,0001 р3 = 0,0451; р4 = 0,0150
Алб,-г/л Контроль 40,82 ± 0,79 40,52 ± 1,20 2,29 ± 0,37
IgG к ch. trachomatis: р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
здоровые 40,57 ± 0,90 40,91 ± 1,14 1,91 ± 0,11
р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
ВУИ 39,33 ± 0,92 40,57 ± 1,30 31,34 ± 6,53
р1 = 0,0001; р2 = 0,0001; р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
ИЛ-6, пг/мл Контроль 969,7 ± 246,1 161,4 ± 43,0 р3 = 0,0029 15945± 3534 р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
IgG к Ch. trachomatis:
здоровые 579,7 ± 141,4 759,0 ± 191,8 р3 = 0,0121 5794 ± 1956,5 р3 = 0,0105; р3 = 0,0010; р4 = 0,0042
ВУИ 1649,8 ± 423,2 р1 = 0,0067 880,0 ± 233,2 р1 = 0,0050 14820,0 ± 5206 р2 = 0,0498; р3 = 0,0003; р4 = 0,0002
ИЛ-8, пг/мл Контроль IgG к ch. trachomatis: 4698,8 ± 1044 1918,9 ± 437 р3 = 0,0303 14601 ± 2949,2 р3 = 0,0002; р4 = 0,0001
здоровые 4676,4 ± 1029 63067 ± 1211 р1 = 0,0099 14530 ± 2806,8 р3 = 0,0003; р4 = 0,0034
ВУИ 6901,9 ± 1312 4803 ± 1486 26325,0 ± 4330,6 р3 = 0,0235; р2 = 0,0324; р3 = 0,0001; р4 = 0,0001
ФНОа, пг/ мл Контроль IgG к ch. trachomatis: 1,7 ± 0,7 2,3 ± 1,0 20,3 ± 5,1 р3 = 0,0006; р4 = 0,0458
здоровые 6,7 ± 2,0 9,7 ± 2,2 16,1 ± 5,5
ВУИ 9,6 ± 2,8 р, = 0,0163 10,3 ± 3,3 39,7 ± 9,2 р1 = 0,0497; р2 = 0,0318; р3 = 0,0001; р4 = 0,0019
Примечание. р1 - отличия от показателя в контроле в пределах одной биожидкости; р2 - различия между показателями в группах сравнения в пределах одной биожидкости; р3 - отличие от уровня Сыв рожениц; р4 - отличия от содержания ПС.
Сыв рожениц как в норме, так и при антителоносительстве. В 1-й подгруппе содержание ЛФ в Сыв повышалось на 20% по сравнению с таковым в контроле, однако при рождении детей с ВУИ уровень ЛФ в Сыв был значительно выше при сравнении с аналогичным показателем как у здоровых рожениц (на 70%), так и у антителоносительниц 1-й подгруппы, родивших здорового ребенка (на 40%). Содержание ЛФ в ОВ, напротив, оказалось сниженным при развитии ВУИ (на 25% по сравнению с таковым в контроле). Таким образом, при рождении здорового ребенка уровень данного белка в ОВ в 1,5-2 раза превышал его значение в ПС и Сыв рожениц (как в контроле, так и в 1-й подгруппе), а при ВУИ концентрация ЛФ в ОВ была ниже, чем в Сыв на 15-20%.
Уровень Алб в Сыв и ПС был сопоставим с аналогичным показателем у здоровых рожениц и не различался с его концентрацией у антителоносительниц в обеих подгруппах. Однако содержание Алб в ОВ у здоровых (контроль) и при рождении здоровых детей на фоне антителоносительства (1-я подгруппа) было в среднем в 18-21 раз ниже, чем в Сыв
и ПС, в то время как при рождении детей с ВУИ средняя концентрация Алб в ОВ была значительно выше (в 13-16 раз), чем в вышеупомянутых группах, и практически не отличалась от уровня Алб в Сыв и ПС при ВУИ.
Содержание цитокинов в изученных биожидкостях было подвержено значительной индивидуальной вариабельности. При изучении уровня ИЛ-6 в Сыв выявили достоверное его повышение только при рождении в последующем ребенка с ВУИ. При этом содержание ИЛ-6 в ПС при антителоноси-тельстве было повышено (в 5 раз) по сравнению с таковым в контроле вне зависимости от наличия или отсутствия ВУИ. Напротив, концентрация ИЛ-6 в ОВ 1-й подгруппы была ниже, чем у рожениц контрольной группы, а при ВУИ не различалась с нормативной. Необходимо отметить, что в контрольной группе наивысшее содержание ИЛ-6 наблюдали в ОВ, в Сыв рожениц оно было в среднем в 16 раз ниже, а в ПС - в 98 раз. При антителоносительстве также больше всего ИЛ-6 было в ОВ, однако его концентрация в ПС и Сыв рожениц была сопоставима и лишь в 8-16 раз меньше, чем в ОВ.
- 325 -
ИММУНОЛОГИЯ № 6, 2013
Содержание ИЛ-8 в норме оказалось максимальным в ОВ - в 3 раза меньше в Сыв и в 8 раз меньше в ПС. При анти-телоносительстве уровень ИЛ-8 в Сыв и ПС был сопоставим и не отличался статистически значимо от контроля. Однако в ОВ при развитии ВУИ уровень ИЛ-8 был практически в 2 раза выше, чем в контроле и у рожениц 1-й подгруппы.
Концентрация ФНОа в контрольной группе и у антителоносительниц 1-й подгруппы также была сопоставима в Сыв и ПС и достоверно не различалась. В ОВ в норме и при антителоносительстве содержание ФНОа было выше, чем в других биожидкостях, в среднем в 5-10 раз. При развитии ВУИ уровень ФНОа в Сыв и ОВ был достоверно повышен по сравнению с аналогичным показателем в контроле.
Обсуждение. Отсутствие изменений уровня а2-МГ в Сыв свидетельствует о том, что средние и низкие титры АТ класса G к Ch. trachomatis в циркуляции не вызывают выраженных системных изменений, способных привести к активному расходованию а2-МГ в качестве ингибитора протеиназ, что отчасти подтверждается отсутствием изменений в Сыв уровня Алб, также выполняющего функции скавенджера. Однако в Сыв антителоносительниц, родивших детей с признаками ВУИ, значительно повышена концентрация ЛФ, являющегося чувствительным позитивным реактантом воспаления [5], а также ИЛ-6 и ФНОа. В связи с этим относительная неизменность уровня а2-МГ в Сыв может объясняться не отсутствием изменений в активности синтеза и утилизации, а наличием двух разнонаправленных процессов, маскирующих эффекты друг друга. С одной стороны, происходит расходование а2-МГ на связывание и выведение из циркуляции протеиназ [2], высвобождающихся при вялотекущем воспалении, которое вызвано хламидиозом. С другой - продукты кислородного взрыва (в развитии которого избыток ЛФ принимает активное участие), высвобождающиеся при воспалении, повреждают структуру а2-МГ, приводя к снижению его сродства к рецепторам, изменению сродства к транспортируемым цитокинам (повышается сродство к ФНОа и пр.) [9] и накоплению в циркуляции, маскирующему расходование а2-МГ при воспалении.
Необходимо отметить, что а2-МГ участвует не только в транспорте, но и в регуляции синтеза цитокинов по типу обратной связи [2]. Создаваемый при окислении его молекул дисбаланс может быть одной из причин неконтролируемого гиперсинтеза ряда цитокинов у антителоносительниц, наблюдаемого разными авторами [3] и подтвержденного результатами наших исследований (при ВУИ достоверно повышается содержание ФНОа и ИЛ-6, синтез которого взаимосвязан с ФНОа, но не острофазового ИЛ-8). Модулирующее воздействие на синтез цитокинов, особенно на синтез ИЛ-8, способен оказывать и ЛФ [5], однако мы не выявили взаимозависимого повышения их уровня при антителоносительстве, что также свидетельствует о патологическом дисбалансе содержания иммунорегуляторных белков и транспортируемых ими цитокинов при инфицировании ch. trachomatis.
Использованный методический подход позволил оценить функционирование двух барьеров - мать-плацента-плод и гематоамниотического. При неосложненной беременности первый не обладает селективностью к различающимся по размеру белкам крови - Алб (67 кД) и а2-МГ (725 кД), поскольку их концентрация в Сыв и ПС была сопоставима. Биотранспорт ЛФ, ИЛ-6 и ИЛ-8 от матери к плоду снижен, хотя по молекулярной массе они существенно уступают а2-МГ. Поскольку и АЛБ и а2-МГ относятся к регуляторно-транспортным белкам, можно полагать, что селективность проницаемости барьера мать-плацента-плод при неосложненной беременности зависит от функций, а не от размера белка. Гематоамниотический барьер представляет несравнимо большее препятствие для биотранспорта, поскольку, по нашим данным, удерживает даже низкомолекулярные цитокины. ЛФ и цитокины, обнаруживающиеся ОВ, имеют местное происхождение [3, 5, 8] и синтезируются амнионом, а Алб и а2-МГ - вероятно, преимущественно плодовое.
Антителоносительство без ВУИ мало затрагивает барьер мать-плацента-плод. В ПС и ОВ повышается концентрация ИЛ-6 (стимулятор биосинтеза а2-МГ, Алб и трансферрина), од-
нако уровень а2-МГ и Алб остается неизменным. Следовательно, синтез последних либо нивелируется их расходованием, либо не активируется. Активируются взаимозависимый синтез ИЛ-8, ЛФ и, вероятно, связанный с ними хемотаксис. Известно, что ch. trachomatis способна индуцировать синтез цитокинов и нарушать регуляцию межклеточных взаимодействий через NFkB [3, 8], что может объяснять обнаруживаемый дисбаланс синтеза. Это дает основания полагать, что антителоноситель-ство к ch. trachomatis даже при рождении здорового ребенка сопровождается напряженностью факторов врожденного иммунитета (в том числе нейтрофильного звена) даже в отсутствие значимых повреждений барьерных функций.
При ВУИ в ПС наблюдаются повышение содержания ИЛ-6, ЛФ и тенденция к повышению уровня ФНОа при неизменном уровне Алб и а2-МГ. Вероятно, как и при рождении здорового ребенка, хламидиоз вносит дисбаланс в регуляторно-транспортные взаимосвязи, но в целом не оказывает критического воздействия на плод. Совсем другую картину обнаружили в ОВ - повышение концентрации провоспалительных ИЛ-8 и ФНОа, что в норме должно подавлять синтез Алб и а2-МГ, однако их концентрация тоже значительно повышается. Это свидетельствует о серьезном увеличении проницаемости гематоамниотического барьера при ВУИ. Избыток ФНОа активирует явления апоптоза и синтез металлопротеиназ, способных повреждать ткани микроокружения. Протеиназы в комплексе с избытком а2-МГ также частично сохраняют литическую активность [2] и способны повреждать ткани. Локальный синтез обладающего антибактериальными свойствами ЛФ [5], несмотря на избыток ИЛ-8, либо маскируется активным расходованием на нейтрализацию патогенов, либо изначально недостаточен, вследствие чего бактерицидный потенциал ОВ при ВУИ снижается. Все это создает крайне негативный воспалительный фон и предпосылки к заражению плода в родах.
ЛИТЕРАТУРА
5. Зорин Н.А., Зорина В.Н., Зорина Р.М., Левченко В.Г. Универсальный регулятор - а2-макроглобулин (Обзор литературы). Клиническая и лабораторная диагностика. 2004; 11: 18-22.
7. Зорин Н.А. Высокочувствительные варианты количественного иммуноэлектрофореза. Лабораторное дело. 1983; 10: 40-3.
REFERENCES
1. Stephens A.J., Aubuchon M., Schust D.J. Antichlamydial antibodies, human fertility, and pregnancy wastage. Infect. Dis. Obstetr. Gynecol. 2011; 2011: 525182.
2. Baud D., Goy G., Jaton K., OsterheldM., Blumer S., Borel N. et al. Role of Chlamydia trachomatis in miscarriage. Emerg. Infect. Dis. 2011, 17 (9): 1630-5.
3. TorreE.,MullaMJ, YuA.G., LeeS.-J, KavathasP.B., Abrahams VM. Chlamydia trachomatis infection modulates trophoblast cytokine/ chemokine production. J. Immunol. 2009; 182 (6): 3735-45.
4. Rours G.I.J.G., Duijts L., Moll H.A., Arends L.R., de Groot R., Jaddoe V.W. et al. Chlamydia trachomatis infection during pregnancy associated with preterm delivery: a population-based prospective cohort study. Eur. J. Epidemiol. 2011; 26 (6): 493-502.
5. Zorin N.A., Zorina V.N., Zorina R.M., Levchenko V.G. Universal regulator alpha2-macroglobulin (literature review) Olinical and laboratory diagnostics. 2004; (11): 18-22 (in Russian).
6. Legrand D., Elass E., Carpenter M., Mazurer J. Lactoferrin: a modulator of immune and inflammatory responses. Cell. Mol. Life Sci. 2005; 6: 2549-59.
7. Zorin N.A. High-frequency variants of quantitative immunoelectrophoresis. Laboratory work. 1983; 10: 40-3 (in Russian).
8. Wu S.M., Patel D.D., Pizzo S.V Oxidized alpha2-macroglobulin (alpha 2M) differentially regulates receptor binding by cytokines/ growth factors: implications for tissue injury and repair mechanisms in inflammation. J. Immunol. 1998; 161 (8): 4356-65.
9. Agrawal T., Vats V., Wallace P., Salhan S., Mittal A. Role of cervical dendritic cell subsets, co-stimulatory molecules, cytokine secretion profile and beta-estradiol in development of sequalae to Chlamydia trachomatis infection. Reprod. Biol. Endocrinol. 2008; 6: 46.
Поступила 29.04.13
- 326
