CC BY
19
Мулдашев Э.Р., Галимова В.У., Нураева А.Б.
ФГУ «Всероссийский центр глазной и пластической хирургии Росздрава», г. Уфа
ПОКАЗАТЕЛИ УРОВНЯ КОНЕЧНЫХ СТАБИЛЬНЫХ МЕТАБОЛИТОВ ОКСИДА АЗОТА ПАЦИЕНТОВ С БУЛЛЕЗНОЙ КЕРАТОПАТИЕЙ
В работе представлены результаты исследования показателей уровня конечных стабильных метаболитов оксида азота у больных с эндотелиалъно-эштелиалъной дистрофией роговицы. Рекомендуется учитывать показатели уровня оксида азота в слезной жидкости больных с эндотелиаль-но-эштелиалъьной дистрофией как критерий выраженности воспалительного процесса роговицы.
Актуальность
Одной из важнейших биологических сигнальных молекул является оксид азота (NO). Оксид азота является регулятором иммунных реакций, воспаления, сосудистой проницаемости и тонуса сосудов. Продукция оксида азота осуществляется ферментом индуци-бельной азот-синтазой (iNOS), экспрессированной, в основном, в клетках макрофагаль-ного ряда, причем основными индукторами iNOS являются противовоспалительные ци-токины [1]. Активация NO-синтазы, индукция образования NO и последующий катаболизм NO сопровождается повышением содержания конечных метаболитов - NO2, NO3, NOX. Эпителиальные и стромальные клетки роговицы при буллезной кератопатии продуцируют повышенное количество провос-палительных цитокинов (1Ь-1а 1Ь - 8) [4] и в ткани при этом заболевании наблюдается повышенная экспрессия некоторых ростовых факторов металлопротеиназ (ЮР - 4, ВМР - 4) [3], которые являются индукторами iNOS. В этой связи представляется интересным оценить состояние локальных и системных нитроксидергических процессов у больных буллезной кератопатией.
Целью настоящего исследования явилось изучение показателей уровня конечных стабильных метаболитов оксида азота у пациентов с буллезной кератопатией.
Материалы и методы
Исследование уровня конечных стабильных метаболитов оксида азота в слезной жидкости и в сыворотке крови проводилось у 35 больных буллезной кератопатией из основной и контрольной групп выборочно.
Для определения метаболитов N0 слезную жидкость в объеме 0,1 - 0,2 мл собирали с помощью меланжера из нижнего конъюн-
ктивального свода. Забор крови осуществляли из локтевой вены. Уровень содержания конечных стабильных метаболитов NO (NO2/ NO3) определяли методом Емченко H.A. (1994), адаптированным к малым объемам. Результаты учитывались спектрофотометрически при длине волны 540 нм. Концентрацию оксида азота оценивали по содержанию стабильных конечных метаболитов NO2/ NO3 и выражали в мкмоль/л. Контролем служили тест пробы слезной жидкости и сыворотки крови здоровых лиц (20 человек).
Нормальные показатели оксида азота слезной жидкости, по нашим данным, составили 2,39±0,2 мкмоль/л, в сыворотке крови 20,6±2,8 мкмоль/л.
Результаты и обсуждение
Проведенные исследования позволили выявить, что уровень стабильных конечных метаболитов оксида азота в слезной жидкости у больных буллезной кератопатией в 4 раза превышал таковой у здоровых доноров (p<0,001). Уровень NOX в сыворотке крови у пациентов с буллезной кератопатией также был существенно повышен (p<0,001). По нашему мнению, повышение уровня метаболитов NO в слезе и сыворотке крови у больных буллезной кератопатией объясняется повышением синтеза индуцибильной формы iNOS, которая играет важную роль в развитии иммунного воспаления.
В таблице представлены данные, характеризующие содержание конечных стабильных метаболитов оксида азота (NOX) в сыворотке крови и слезной жидкости.
Известно, что избыток NO увеличивает проницаемость сосудов, способствует отеку тканей, оказывает прямое цитоток-сическое действие, тем самым определение количества NO в слезной жидкости и сыво-
Таблица 1. Уровень стабильных конечных метаболитов оксида азота в слезной жидкости и сыворотке крови у больных с буллезной кератопатией и у здоровых доноров.
Группы n Концентрация метаболитов NOx в слезе, M±m (мкмоль/л) Концентрация метаболитов NOx в сыворотке крови, M±m (мкмоль/л)
Пациенты с буллезной кератопатией 35 10,5±1,5 39,7±3,1
Группа здоровых доноров 20 2,39±0,2 20,6±2,8
ротке крови может являться показателем активности воспалительного и дистрофического процесса, т. е. степени выраженности буллезной кератопатии. Эти данные согласуются с результатами, полученными К.В^Ш й а1. (2002), которые обнаружили увеличение экспрессии iN0S и эндотелиальной азот-синтазы (eN0S) при кератокону-се, буллезной кератопатии и гетерохромном циклите. В то же время, при буллезной кератопатии, в отличие от кератоконуса, авторы не обнаружили увеличения содер-
жания пероксинитрита - наиболее токсичного продукта взаимодействия активных форм кислорода и NO.
Заключение
Таким образом, определение уровня конечных стабильных метаболитов оксида азота у пациентов с буллезной кератопатией является прогностическим критерием оценки степени воспаления роговицы для подбора патогенетически ориентированного метода лечения.
Список использованной литературы:
1. Бондаренко, В.М. Антимикробная активность окиси азота и ее роль в инфекционном процессе / В.М.Бондаренко, Н.А. Виноградов, В.В. Малеев // Клиническая микробиология и эпидемиология. - 1999. - №6. - С.61-66.
2. Емченко, Н.Л. Универсальный метод определения нитратов в биосредах организма / Н.Л.емченко, О.И.Цыганенко, Т.В.Ковалевская // Клин. Лаб.Диагностика. - 1994. - №6. - С.19-20.
3. Altered expression of growth factors and cytokines in keratoconus, bullosd keratopathy and diabetic human corneas / M. Sadhizadeh, Chwa M., Aoki A., Lin B. et al. // Exp.Eye Res. - 2001. - Vol.73. - P.179 - 189.
4. Detection of mRNA for the cytokines, interleukin-1 alpha and interleukin-8, in corneas from patients with pseudophakic bullos keratopathy / J. Rosenbaum, S.Planck, Huang X., I. Rich et al. // Invest. Ophtalm. Vis. Sci. - 1995. - Vol.36. - P.2151 - 2155.
5. Evidence of oxidative stress in human corneal diseases / R.Buddi, B.Lin, S. Atilano, N. Zorapapel et al // J.Histochem.Cytochem. - 2002. - Vol.50. - P.341-351.
