CC BY
13УДК 616.211-006.5-078
ПОКАЗАТЕЛИ ЦИТОКИНОВ IL-2, IL-4, IL-8 В СЫВОРОТКЕ КРОВИ
ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ ХРОНИЧЕСКИХ ПОЛИПОЗНЫХ РИНОСИНУСИТОВ
У. Н. Вохидов
INDICATORS OF CYTOKINES IL-2, IL-4, IL-8 IN SERUM IN DIFFERENT FORMS OF CHRONIC POLYPOID RHINOSINUSITIS
U. N. Vokhidov
ГУ «Ташкентская медицинская академия», Ташкент, Республика Узбекистан (Зав. каф. оториноларингологии - проф. Х. Э. Шайхова) Институт иммунологии и аллергологии АН РУз, Ташкент, Узбекистан (Директор - проф. Т. У. Арипова)
Целью исследования явилось изучение показателей сывороточного уровня цитокинов, продуцируемых Thl-типом и ТЬ2-типом клеток у больных хроническим полипозным риносинуситом. Нами были исследованы 50 больных хроническим полипозным риносинуситом, которым проводилось иммунологическое исследование сыворотки крови на цитокины IL-2, IL-4 и IL-8. Исследование показало, что у больных с «эозинофильным» полипозным риносинуситом отмечается нарушение иммунитета с аллер-гизацией организма, у больных с «нейтрофильным» полипозным риносинуситом отмечается нарушение иммунитета с наличием хронического воспаления.
Ключевые слова: хронический полипозный риносинусит, цитокины, иммунологическое исследование, морфологическое исследование.
Библиография: 8 источников.
The purpose was to study the performance review serum cytokines produced by Thl-type and Th2-type in patients with chronic polypoid rhinosinusitis. We studied 50 patients with chronic polypoid rhinosinusitis, which conducted the study immunological cytokines IL-2, IL-4 and IL-8 in serum. The study showed that patients with «eosinophilic» polypoid rhinosinusitis there is a violation of immunity with allergy of the body, patients with «neutrophilic» polypoid rhinosinusitis there is a violation of immunity to the presence of chronic inflammation.
Key words: chronic polypoid rhinosinusitis, cytokines, immunological research, morphological research.
Bibliography: 8 sources.
Проблема лечения хронического полипозного риносинусита (ХПРС) на сегодняшний день остается одной из важных в ринологии, поэтому ХПРС имеет большую медико-социальную значимость, что подтверждается широкой распространенностью, склонностью к росту; высоким уровнем отягощенности заболевания и необходимостью проведения лечебных, реабилитационных, социальных и других мероприятий в течение значительного периода жизни больных.
В России насчитывается около 1 млн 400 тыс. больных ХПРС [2]. Актуальность изучения проблемы обусловлена патогенетической связью ХПРС с такими заболеваниями, как бронхиальная астма, муковисцидоз, синдром Картагенера, непереносимость нестероидных противовоспалительных средств, а также частыми рецидивами ХПРС [1].
ХПРС является хроническим воспалительным заболеванием, характеризующимся интенсивной эозинофилией и нейтрофилией, а также тканевой реконструкцией, состоящей из эпителиальных распространений, гиперплазий бокаловидных клеток, псевдокист, утолщенной базальной мембраны и отеков [7, 8]. В настоящее время эози-
нофильное воспаление широко связывают с Th2-иммунным ответом. Исходя из этого развитие ХПРС можно характеризовать с высвобождением ТЪ2-цитокинов. В своих исследованиях Van Zele T и др. (2006) указывали на то, что показатель IL-5, эозинофильный катионный протеин и IgE увеличиваются до 80% в сравнении с ХРС без носовых полипов и носовыми полипами у больных с муковисцидозом [3]. Тем не менее некоторые исследования показали, что ХПРС является смешанным ТМ/^2-воспалением с инфильтрацией нескольких воспалительных клеток, таких как CD8 +-лимфоциты, Th1-лимфоциты, плазматические клетки, тучные клетки и макрофаги [7]. Большинство исследователей считают, что носовые полипы являются конечным результатом хронического воспаления околоносовых пазух, так как клеточные и цитокиновые показатели не зависят от аллергического состояния в большинстве исследований [6].
Хотя литературные данные свидетельствуют о выявлении различных цитокинов, которые коррелируют с фенотипом ХПРС, относительно мало известны механизмы, приводящие к изменению показателей цитокинов в ХПРС и причинно-след-
: 61-я науч.-практ. конф. «Молодые ученые - российской оториноларингологии»
ственные связи между изменениями продукции цитокинов и формированием носовых полипов.
Цель исследования. Изучение показателей цитокинов, продуцируемых Thl-типом и ТЪ2-типом в сыворотке крови больных с различными формами хронических полипозных риносинуситов.
Пациенты и методы исследования. Нами были обследованы 50 больных с ХПРС, находившихся на стационарном лечении в ЛОР-отделении 3-й клиники Ташкентской медицинской академии в 2010-2013 гг. Диагноз ХПРС выставлялся на основании данных анамнеза, объективного статуса, состояния ЛОРорганов, эндоскопического, рентгенологического и компьютерно-томографического исследования. Больные с бронхиальной астмой и специфическими заболеваниями (аспирининдуцированная астма, синдром Картагенера, Янга и т. д.), а также больные с сопутствующей патологией в это исследование не включались. Контрольную группу составили 20 здоровых добровольцев, которые дали согласие на проведение исследования.
Всем пациентам было выполнено хирургическое вмешательство, соответствующее распространенности полипозного процесса. Биопсийный материал, полученный в результате хирургических вмешательств, исследован гистологически с морфологической оценкой (на кафедре патологической анатомии 3 клиники Ташкентской медицинской академии). Готовились срезы толщиной 7-9 мкм, которые окрашивались гематоксилином и эозином.
В послеоперационном периоде всем пациентам было проведено иммунологическое исследование сыворотки крови на цитокины IL-2, IL-4, IL-8 в лаборатории Института иммунологии Академии наук Республики Узбекистан. Для определения цитокинов использованы тест-системы производства «Вектор-Бест». Тест-системы основаны на сэндвич-методе твердофазного иммуно-ферментного анализа с применением перокси-дазы хрена в качестве индикаторного фермента. Статические данные были обработаны с помощью Microsoft Excel 2010.
Результаты и их обсуждения. Больные ХПРС часто жаловались на затруднение носового дыхания (92,5%), выделения из носа (78,4%), чихание (56%), нарушение обоняния (52,2%). Кроме этого, больные часто отмечали головные боли (78,4%).
При риноэндоскопии визуализировались полипы, частично [31 пациент (62%)] или полностью [12 пациент (24%)] обтурирующие общий носовой ход. У остальных 7 пациентов (14%) при рентгенографии и (или) компьютерной томографии определялось полипозное затемнение околоносовых пазух, хотя при риноэндоскопии видимых изменений не отмечалось.
Рентгенографическое и компьютер-томографическое исследования околоносовых пазух у 18 пациентов выявило полипозное затемнение этмоидальных пазух и полости носа, у 21 - этмо-идальных, гайморовых пазух и полости носа, у 7 - только гайморовых пазух, у 4 - всех околоносовых пазух и полости носа.
Всем пациентам было проведено хирургическое вмешательство, соответствующее по объему распространенности полипозного процесса:
- 18 пациентам была выполнена эндоскопическая эндоназальная полипотомия носа со вскрытием решетчатых клеток;
- 21 - эндоскопическая эндоназальная поли-потомия носа со вскрытием решетчатой и гайморовой пазухи;
- 7 - экстраназальная эндоскопическая гай-моротомия;
- 4 - эндоскопическая полипотомия носа со вскрытием всех околоносовых пазух.
Послеоперационный материал подвергся па-тогистологическому исследованию с морфологической оценкой.
Морфологическое исследование операционного материала показало, что полипы представляют собой соединительнотканные образования, покрытые реснитчатым эпителием, содержащим единичные слизистые железы в строме. Строение покровного эпителия носило неравномерный характер: определялись зоны атрофии, оголения базальной мембраны, бокаловидно-клеточной гиперплазии. Во всех случаях в строме полипов прослеживались признаки воспаления: гиперемия, отек и воспалительная инфильтрация. При морфологическом исследовании послеоперационного материала у 34 пациентов отмечалось преобладание эозинофильной инфильтрации стромы слизистой оболочки носа и околоносовых пазух, а у 16 пациентов отмечалось преобладание нейтрофильной инфильтрации стромы слизистой оболочки носа и околоносовых пазух. Морфологическое исследование слизистой оболочки носа у здоровых добровольцев проводили методом взятия соскоба с нижних и средних носовых раковин. При этом определялся интактный эпителий без инфильтрации клеток.
Результаты иммунологического исследования сыворотки крови больных с различными формами ХПРС показаны в таблице.
Повышение Ш-2 наблюдалось у больных обеих групп, что свидетельствует о нарушении иммунитета, но оно резко повышено у больных с так называемыми «нейтрофильными» носовыми полипами. Ш-2 является важным провоспали-тельным цитокином, который стимулирует пролиферацию и дифференцировку активированных Т-лимфоцитов в эффекторные ТИ-лимфоциты или цитотоксические Т-клетки. Ш-2 может стимули-
Т а б л и ц а
Результаты иммунологического исследования сыворотки крови больных с различными формами
хронических полипозных риносинуситов
Цитокины Больные с ЭНП (n = 34) Больные с ННП (n = 16) Контроль (n = 20)
IL-2 8,2±2,6 пг/мл 16,8±7,5 пг/мл 5,7±0,8 пг/мл
IL-4 7,1±1,9 пг/мл 6,6±0,8 пг/мл 4,7±1,6 пг/мл
IL-8 * У 1 больного был по 6,2±1,4 пг/мл )вышен в 42 раза (428,2 пг/мл). 11,6±2,8 пг/мл* 5,5±0,9 пг/мл
Примечание. ЭНП - «эозинофильные» носовые полипы, ННП - «нейтрофильные» носовые полипы.
ровать крупные гранулярные лимфоциты, макрофаги и В-клетки. Ш-2 усиливает В-клеточный рост и синтез иммуноглобулинов, интерферона, модулирует экспрессию рецептора Ш-2. Ш-2 индуцирует пролиферацию В-лифоцитов, активирует цитотоксические Т-лимфоциты, стимулирует естественные киллеры и генерирует лимфокин-активированные киллеры ^АК) [8].
Другой показатель Ш-4 был повышен у больных с так называемыми «эозинофильными» носовыми полипами, что может указывать на аллерги-зацию организма. Ш-4 выделяется ТИ2-клетками, эозинофилами, базофилами, естественными клетками-киллерами и тучными клетками. Ш-4 стимулирует развитие ТИО-лимфоцитов в дифференцированных ТИ2-клетках и является важным кофактором в предотвращении апоптоза активированных Т-клеток. ИЛ-4 является основным цито-кином, ответственным за переход на фенотип ^Е иммуноглобулинов класса В-клеток [6].
Повышения IL-8 наблюдался у больных с «ней-трофильными» носовыми полипами, что может свидетельствовать о наличии вялотекущего хро-
нического воспаления. Ш-8 синтезируется макрофагами, лимфоцитами, нейтрофилами и структурными элементами. IL-8 представляет собой хемоатрактант для нейтрофилов и Т-лимфоцитов. Он также может ингибировать производство ^Е и высвобождение гистамина. Было предположено, что носовая нейтрофилия коррелирует с показателем Ш-8 [4]. Повышение уровня может являться признаком нейтрофильного воспаления. В целом Ш-8 выделяется макрофагами и эпителиальными клетками и может являться неспецифичным маркером для хронического воспаления слизистой оболочки носа и околоносовых пазух.
Данное исследование подразумевает разделение больных с ХПРС на «нейтрофильные» и «эозинофильные», что в свою очередь упрощает тактику ведения больных. Иммунологическое исследование сыворотки крови указывает на общее нарушение иммунного ответа. Такое длительное нарушение иммунитета может вызывать повторное рецидивирование полипозного процесса в слизистой оболочке носа и околоносовых пазух.
Выводы
У больных с «эозинофильным» полипозным риносинуситом отмечается нарушение иммунитета с аллергизацией организма, у больных с «нейтрофильным» полипозным риносинуситом отмечается нарушение иммунитета с наличием хронического воспаления.
Изучение цитокинового профиля может стать ключевым моментом для врача-оториноларинголога при выборе тактики противорецидивного лечения и послеоперационного ведения больных с различными формами хронических полипозных риносинуситов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Пелишенко Т. Г., Пискунов Г. З. Методы оценки состояния слизистой оболочки носа и ее функций у больных с заболеваниями носа и околоносовых пазух до и после хирургического вмешательства // Рос. ринология. -2002. - № 4. - С. 31-34.
2. Рязанцев C. В., Марьяновский A. A. Полипозные риносинуситы: этиология, патогенез, клиника и современные методы лечения: метод. рекомендации. - СПб.: Политехника, 2006. - 36 с.
3. Differentiation of chronic sinus diseases by measurement of inflammatory mediators / T. Van Zele [et al.] // Allergy. -
2006. - N 61. - P. 1280-1289.
4. Eosinophilia and cell activation mediators in nasal secretions / C. Besancon-Watelet [et al.] // Laryngoscope. -2002. - N 112 (1). - P. 43-46.
5. Expression of MCP-4 by TLR ligand stimulated nasal polyp fibroblasts / M. Nonaka [et al.] // Acta Otolaryngol. -
2007. - P. 1-6.
6. Inflammatory mediators and eosinophilia in atopic and nonatopic patients with nasal polyposis / M. C. Scavuzzo [et al.] // Biomed. Pharmacother. - 2005. - N 59. - P. 323-329.
