Показатели оксидативного стресса как ранние критерии оценки состояния пациентов с тяжелой сочетанной торакальной травмой Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

Статья поступила в редакцию 28.03.2014 г.

ПОКАЗАТЕЛИ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА КАК РАННИЕ КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ ПАЦИЕНТОВ С ТЯЖЕЛОЙ СОЧЕТАННОЙ ТОРАКАЛЬНОЙ ТРАВМОЙ

OXIDATIVE STRESS MARKERS AS EARLY ASSESSMENT CRITERIA FOR PATIENTS WITH SEVERE CONCOMITANT THORACIC INJURY

Ступницкий М.А.

Kharkov National Medical University, Kharkov, Ukraine

Stupnitsky M.A.

Kharkov National Medical University, Kharkov, Ukraine

Цель исследования - поиск критериев оценки тяжести состояния пациентов в шоковом периоде травматической болезни тяжелой сочетанной торакальной травмы среди показателей оксидативного повреждения ли-пидов и белков, которые могли бы прогнозировать выживание. Материалы и методы. В плазме крови 73 пациентов мужского пола в возрасте от 20 до 68 лет определяли концентрацию карбонильных групп белков и малонового диальдегида на 1-2-е сутки после травмы и пересчитывали в относительные концентрации путем разделения на концентрацию общего белка с целью поправки на инфузионную терапию. Результаты. С помощью кластерного анализа популяция пациентов была распределена на 5 кластеров с учетом уровня летальности в каждом из них. Кластеры объединили в 3 группы с уровнем летальности пациентов 20 %, 50 % и 100 %. Путем ROC-анализа были определены достоверные точки разделения между группами, с помощью которых сформулированы критерии тяжести оксидативного стресса в шоковом периоде тяжелой сочетанной торакальной травмы.

Выводы. На основе этих критериев можно достоверно прогнозировать вероятность летального прогноза независимо от возраста пациентов, тяжести повреждения отдельных анатомических участков тела и длительности догоспитального периода. Благоприятный исход травматической болезни (20 % ожидаемая летальность) у пациентов с уровнем малонового диальдегида от 0,1004 до 0,1423 мкмоль/г белка можно ожидать в случае сочетания с концентрацией карбонильных групп белков от 14 до 17,29 мкмоль/г белка, а сомнительный (50 % ожидаемая летальность) - от 10,78 до 14 мкмоль/г белка. Очень высокие, а также очень низкие концентрации показателей оксидативного повреждения белков (менее 10,78 или больше 17,29 мкмоль/г белка) и липидов (менее 0,1004 или больше 0,1423 мкмоль/г белка) являются достоверными прогностическими признаками неблагоприятного исхода травматической болезни. Ключевые слова: сочетанная торакальная травма; перекисное окисление липидов; окислительная модификация белков; критерии оценки тяжести состояния пациентов; прогнозирование выживания.

Objective - to search the evaluation criteria for severity of state of patients in shock period of severe concomitant thoracic injury among the markers of oxidative injury to lipids and proteins, which could predict outcome.

Materials and methods. The blood plasma of 73 male patients aged from 20 to 68 was evaluated for the levels of protein carbonyl groups and malondialdehyde at the 1-2 days after trauma, with conversion into relative concentrations by means of division by total protein level for correction for infusion therapy.

Results. The patient population was divided into 5 clusters with cluster analysis taking into account the mortality level. The clusters were united into 3 groups with 20 %, 50 % and 100 % mortality. Valid cut off values between groups were determined according to ROC-analysis. According to these cut off values the oxidative stress severity criteria during shock period of severe concomitant thoracic injury were determined.

Conclusion. These criteria can make valid prediction of mortality and are independent of patient age, severity of injuries to individual anatomic regions and prehospital period duration. Favorable outcome (expected mortality - 20 %) in patients with the malondialdehyde level from 0,1004 to 0,1423 mcMl/g of protein can be expected in combination with the concentrations of the protein carbonyl groups from 14 to 17,29 mcM/g of protein, and doubtful outcome (expected mortality - 50 %) - from 10 78 to 14 mcM/g of protein. Very high and very low concentrations of proteins (less than 10,78 and more than 17,29 mcM/g of protein) and lipids (less than 0,1004 and more than 0,1423 mcM/g of protein) oxidative damage markers predict poor outcome of traumatic disease.

Key words: concomitant thoracic injury; lipid peroxidation; protein peroxidation; patient status evaluative criteria; survival prediction.

Вначале XXI века травма как причина летальности занимает четвертое место среди всех возрастных категорий, но для лиц возрастом до 50 лет эта причина занимает первое место [1]. Около 30 % пострадавших с сочетанной травмой имеют тяжелые повреждения грудной клетки [2]. После черепно-мозговой травмы торакальная травма является самой частой причиной

летальных исходов, вызванных несчастными случаями [3].

Патогенез торакальной травмы включает все возможные пусковые факторы для развития оксидативного стресса: гипоксию в результате вентиляционных нарушений, а также прямого повреждения паренхимы легких [4]; феномен ише-мии/реперфузии за счет снижения сердечного выброса в результате

повышения внутригрудного давления; кровопотерю, которая при условиях даже изолированной торакальной травмы может достигать 1-1,5 л [5]. Наиболее драматически оксидативные процессы протекают именно в первые 1-2 суток после травмы, в так называемый шоковый период травматической болезни [6, 7], поскольку именно тогда проводится инфузионно-трансфу-

■ ■ 42

ПОЛИТРАВМА

зионная терапия с целью возобновления объема циркулирующей крови, декомпрессия плевральных полостей, оксигенотерапия и аппаратная поддержка функции внешнего дыхания. Часто такие пациенты нуждаются в адреномимети-ческой поддержке для обеспечения достаточного уровня артериального давления. Ранний послеоперационный период вносит свой отдельный вклад в общий объем травматических повреждений (теория двух ударов) [8]. Все вышеуказанное наводит на мысль, что маркеры окси-дативного стресса должны отображать тяжесть нарушения гомеоста-за пациентов с тяжелой сочетанной торакальной травмой в шоковом периоде травматической болезни. Однако на данный момент не определено четких критериев среди показателей, которые характеризуют оксидативный стресс и могут помочь оценить тяжесть травматического шока, а также функциональное состояние пациентов с тяжелой сочетанной торакальной травмой.

Цель исследования — поиск критериев оценки тяжести состояния пациентов в шоковом периоде травматической болезни тяжелой сочетанной торакальной травмы среди показателей оксидативного повреждения липидов и белков, которые могли бы прогнозировать выживание.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Обследованы 73 пациента мужского пола в возрасте от 20 до 68 лет с тяжелой сочетанной травмой грудной клетки, которые находились на лечении в отделении анестезиологии и интенсивной терапии для пациентов с сочетанной травмой Харьковской городской клинической больницы скорой и неотложной медицинской помощи имени проф. О.И. Мещанинова. Для исследования избирались пациенты с сочетанной закрытой травмой грудной клетки при наличии вну-тригрудных объемов, ушибов легких, сердца, повреждения костного каркаса. Все пациенты получали интенсивную инфузионно-транс-фузионную, обезболивающую, противовоспалительную, антибактериальною, метаболическую терапию, профилактику стрессовых язв

желудочно-кишечного тракта в соответствии с тяжестью полученных повреждений и состоянием пациентов. Исследование проводилось на 1-2-е сутки (3-33,5 часа) после травмы. В контрольную группу вошли 15 здоровых добровольцев мужского пола аналогичной возрастной категории.

Концентрацию малонового ди-альдегида в плазме крови определяли по ТБК-активности депроте-инизированной плазмы [9], а уровень карбонильных групп белков оценивали с помощью реакции с динитрофенилгидразином экстрагированных из плазмы белков [10]. Для поправки на гемодилюцию на фоне значительных объемов инфу-зионно-трансфузионной терапии коцентрации маркеров оксидатив-ного повреждения биомолекул разделяли на значение концентрации общего белка плазмы крови, которую определяли биуретовым методом [11]. Тяжесть повреждения отдельных анатомических участков тела оценивали с помощью шкалы AIS (Abbreviated injury score), а сочетанной травмы — с помощью ISS (Injury severity score). Тяжесть состояния пациентов на момент госпитализации рассчитывали по шкале RTS (Revised trauma score) [12].

Для стратификации пациентов применяли кластерный анализ, который выполняли с помощью программы STATGRAPHICS Plus 5.0. Мерой дистанции между объектами служил квадрат Эвклидового расстояния, а разделение на кластеры проводили с помощью невзвешен-ного центроидного метода. По ден-дрограмме определяли количество кластеров, на которые разбивали популяцию пациентов. Статистическую обработку данных проводили с помощью программы GraphPad Prism 5.03. Достоверность разницы между группами определяли с помощью теста Kruskal-Wallis.

Анализ статистической достоверности таблиц сопряженности определяли с помощью %2-теста. Для определения точек разделения (cut-off value) между группами использовали ROC-анализ (Receiver Operating Characteristic). Достоверно значимой считали разницу при условиях P < 0,005.

Пациентов и добровольцев контрольной группы включали в исследование с их согласия в соответствии с принципами Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации врачей «Этические принципы проведения научных и медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Порядком проведения клинических испытаний лекарственных веществ и экспертизы материалов клинических исследований» и «Типичного положения про комиссии по вопросам этики», утвержденными Приказом Минздрава Украины от 23.09.2009 г. № 690. Протокол исследования одобрен Комиссией по вопросам этики и биоэтики Харьковского национального медицинского университета № 5 от 17.05.2011 г.

РЕЗУЛЬТАТЫ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Учитывая факт, что оксидатив-ные процессы липидов и белков не могут протекать отдельно один от другого, а являются частями одного процесса — оксидативного стресса, мы решили применить метод кластерного анализа для распределения пациентов за обоими показателями одновременно.

На рисунке изображен результат кластерного анализа с указанием выживания пациентов (Лет — пациенты с летальным исходом; Выж — пациенты, которые выжили; А, В, С, D и Е — выделенные кластеры).

Популяцию распределили на 5 кластеров в соответствии с распределением. Кластеры объединили в 3 группы в зависимости от уровня выживания. В первую группу вошли пациенты кластера А, во вторую группу — пациенты кластеров В и С. В третьей группе пациентов были объединены кластеры D и Е. Интересно, что пациенты кластера D характеризовались наибольшими концентрациями показателей оксидативного повреждения как белков, так и липидов, а пациенты кластера Е имели самые низкие показатели среди всей популяции, однако летальность в обоих кластерах составляла 100 % (табл. 1). Такие данные можно объяснить тем фактом, что снижение оксида-тивных процессов ниже нормы яв-

Рисунок

Результат кластерного анализа популяции пациентов на 1-2-е сутки после травмы Figure

Results of cluster analysis of patient population at 1-2 days after trauma

ляется прогностически неблагоприятным, поскольку свидетельствует о тяжелых нарушениях процессов утилизации кислорода [5].

Наблюдается достоверное отличие между группами пациентов по уровню летальности (табл. 1), что свидетельствует о возможности прогнозирования результата травматической болезни уже на 1-2-е сутки после травмы. Наличие достоверного отличия между группами по числу пациентов, которые нуждались в проведении гемотранс-фузионной терапии, показывает, что данные критерии способны отражать тяжесть кровопотери (травматического шока). Концентрация малонового диальдегида является менее специфическим показателем для дифференциации пациентов между I и II группами. Возможно, это связано с тем, что малоновый диальдегид способен преодолевать почечный барьер и выводиться из крови, особенно в условиях интенсивной инфузионной терапии. Возможно также и то, что процессы пе-роксидации липидов не происходят

пропорционально процессам окислительной модификации белков.

Для определения точек разделения между отдельными группами применяли метод ROC-анализа. Учитывая отсутствие достоверной разницы по концентрации малонового диальдегида между I и II группами пациентов (табл. 1), мы объединили эти две группы (кластеры А, B и С) в одну. Результаты представлены в таблице 2.

Полученные таким образом точки разделения являются достоверными и имеют высокие показатели чувствительности и специфичности, что подтверждает их высокую диагностическую ценность. Таким образом, выходя из статистических данных, можно предложить следующие критерии оценки оксида-тивных процессов белков и липи-дов, исходя из уровня летальности (табл. 3).

Для пациентов с вероятным уровнем летальности 20 % и 50 % характерна одинаковая относительная концентрация малонового диальдегида — 0,102-0,1448 мкмоль/г

белка. Дифференцирование между этими группами возможно за счет определения относительной концентрации карбонильных групп белков — для группы с летальным прогнозом 20 % характерна концентрация карбонильных групп 14,14-17,46 мкмоль/г белка, а для группы 50 %—10,77-14,14 мкмоль/г белка. В случае проведения кластерного анализа с использованием относительных концентраций малонового диальдегида или карбонильных групп белков отдельно один от другого мы не получили ни аналогичных, ни даже похожих дендрограмм к той, которая была построена с применением обоих маркеров оксидативного стресса одновременно. Это свидетельствует о том, что оценивать интенсивность оксидативных процессов по одному показателю невозможно, ведь свободные радикалы, как известно, поражают все классы биомолекул путем определенных промежуточных стадий и химических реакций, отличных для каждого из них [11].

44

ПОЛИТРАВМА

Таблица 1

Характеристика групп пациентов Table 1

Characteristics of patient groups

Показатель Indicator I группа кластер А Group I Cluster A II группа кластеры В и С Group II Clusters B, C Ill группа кластер D Group III Cluster D III группа кластер Е Group III Cluster E Вероятность ошибки Error probability

Количество пациентов в группе Amount of patients in a group 30 35 4 4 -

Летальность, чел. Mortality, person (%) 6 (20) 17 (48,6) 4 (100) 4(100) Р = 0,0005* Д R

Количество пациентов с ИВЛ, чел. Amount of patients with ALV, person (%) 14 (46,6) 26 (74,3) 4 (100) 4(100) Р = 0,0173* НД NR

Количество пациентов с адреномиметической поддержкой, чел. Amount of patients with adrenomimetic support, person (%) 6 (20) 9 (25,7) 1 (25) 4(100) Р = 0,0094* НД NR

Количество пациентов, которые нуждались в гемотрансфузии, чел. Amount of patients who needed hemotransfusion, person (%) 8 (26,6) 21 (60) 3 (75) 4(100) Р = 0,0048* Д R

Средний возраст пациентов Mean age of patients (М ± SE) 42,43 ± 2,029 39,94 ± 1,974 49,5 ± 9,403 41,55 ± 5,588 Р = 0,6413** НД NR

Тяжесть сочетанной травмы, баллы ISS Severity of concomitant injury, ISS points (M ± SE) 23,37 ± 1,066 31,14 ± 1,865 47 ± 5,05 39,75 ± 1,25 Р < 0,0001** Д R

Тяжесть травмы головы, баллы AIS Head injury severity, AIS points (М ± SE) 1,333 ± 0,2507 2,143 ± 0,3044 3,75 ± 0,9465 2,5 ± 1,19 Р = 0,0454** НД NR

Тяжесть травмы грудной клетки, баллы AIS Chest injury severity, AIS points (М ± SE) 3,767 ± 0,0785 3,771 ± 0,072 4 ± 0 4 ± 0 Р = 0,5137** НД NR

Тяжесть абдоминальной травмы, баллы AIS Abdominal injury severity, AIS points (М ± SE) 0,633 ± 0,1625 1,6 ± 0,2631 2,75 ± 0,9465 2,25 ± 1,031 Р = 0,017** НД NR

Тяжесть скелетной травмы, баллы AIS Skeletal injury severity, AIS points (М ± SE) 1,467 ± 0,2525 1,857 ± 0,2136 2 ± 0,9129 2 ± 0,7071 Р = 0,5524** НД NR

Тяжесть состояния на момент госпитализации, баллы RTS Severity of state on admission, RTS points (М ± SE) 7,4 ± 0,1398 6,433 ± 0,2776 6,769 ± 0,4055 4,596 ± 0,51 Р = 0,002** Д R

Среднее время от момента травмы до момента госпитализации, часы Mean time from injury to admission, hours (М ± SE) 1,579 ± 0,3936 1,691 ± 0,6078 0,9792 ± 0,2215 0,5625 ± 0,1573 Р = 0,1711** НД NR

Средний объем противошоковой инфузионно-трансфузионной терпии, мл Mean volume of anti-shock infusion transfusion therapy, ml (М ± SE) 2979 ± 356 4406 ± 398,4 6533 ± 2080 4730 ± 1009 Р=0,0091** нд NR

Средняя длительность пребывания в отделении интенсивной терапии, дни Mean time of stay in intensive care unit, days (М ± SE) 8,676 ± 1,001 23 ± 4,515 8,25 ± 1,702 1,25 ± 0,25 Р = 0,001** Д R

Концентрация малонового диальдегида, мкмоль/г белка Malondialdehyde levels, mcM/g of protein (М ± SE) 0,127 ± 0,0017 0,123 ± 0,0022 0,15 ± 0,0014 0,093 ± 0,0031 Р < 0,0001** Д R

Концентрация карбонильных групп белков, мкмоль/г белка Levels of protein carbonyl groups, mcM/g of protein (М ± SE) 15,39 ± 0,165 13,02 ± 0,16 18,55 ± 0,213 9,893 ± 0,098 Р < 0,0001** Д R

Примечание: * критерий x2, ** Kruskal-Wallis тест, Д - достоверно, НД - недостоверно, ИВЛ - искусственная вентиляция легких, М - среднее арифметическое, SE - стандартная ошибка среднего

Note: * x2 test, ** Kruskal-Wallis test, R - reliable, NR - not reliable, ALV - artificial lung ventilation, M - mean, SE - standard error

Таблица 2

Точки разделения между группами пациентов

Table 2

Separation points between groups of patients

Точка разделения Separation point Чувствительность, % (95 % доверительный интервал) Sensitivity, % (95 % CI) Специфичность, % (95 % доверительный интервал) Specificity, % (95 % CI) Вероятность ошибки Error probability

> 0,1448 100 (39,76-100) 100 (94,48-100) Р = 0,00085

< 0,1023 100 (39,76-100) 95,38 (87,1-99,04) P = 0,00112

< 14,14 85,71 (69,74-95,19) 100 (88,43-100) Р < 0,0001

< 10,77 100 (39,76-100) 100 (90-100) Р = 0,0012

> 17,46 100 (39,76-100) 100 (88,43-100) Р = 0,00135

Таблица 3

Критерии тяжести оксидативного стресса в шоковом периоде тяжелой сочетанной торакальной травмы

Table 3

Criteria for severity of oxidative stress during shock period of severe concomitant thoracic injury

Вероятный уровень летальности Probable level of mortality, % Концентрация малонового диальдегида, мкмоль/г белка Malondialdehyde level, mcM/g of protein Концентрация карбонильных групп белков, мкмоль/г белка Levels of carbonyl group proteins, mcM/g of protein

20 0,1023-0,1448 14,14-17,46

50 10,77-14,14

100 < 0,1023 или (or) > 0,1448 < 10,77 или (or) > 17,46

Нормальные значения показателей оксидативного повреждения биомолекул, которые были получены путем обследования добровольцев из контрольной группы, составляют 0,1005 ± 0,003 мкмоль/г белка для малонового диальдегида и 11,998 ± 0,5793 мкмоль/г белка для карбонильных групп белков. В случае травматической болезни тяжелой сочетанной торакальной травмы аналогичные значения характерны для группы пациентов с вероятностью летального прогноза 50 % и не могут трактоваться как удовлетворительные. Хорошими прогностическими критериями являются несколько повышенные по сравнению с нормой относительные концентрации малонового диальдегида и карбонильных групп белков на 1-2-е сутки после получения травмы.

Учитывая полученные статистические данные из таблицы 1,

данные критерии можно считать дополнительными диагностическими критериями тяжести состояния пациентов с тяжелой сочетанной торакальной травмой в шоковом периоде травматической болезни.

ВЫВОДЫ:

1. Прогнозирование летального результата травматической болезни тяжелой соединенной торакальной травмы возможно на 1-2-е сутки после травмы на основе оценки интенсивности оксидатив-ных процессов с помощью относительных концентраций малонового диальдегида и карбонильных групп белков.

2. Благоприятный исход травматической болезни (20 % ожидаемая летальность) у пациентов с уровнем малонового диальдегида от 0,1023 до 0,1448 мкмоль/г белка можно

ожидать в случае сочетания с концентрацией карбонильных групп белков от 14,14 до 17,46 мкмоль/г белка, а сомнительный (50 % ожидаемая летальность) — от 10,77 до 14,14 мкмоль/г белка.

З.Очень высокие, а также очень низкие концентрации показателей оксидативного повреждения белков (менее 10,77 или больше 17,46 мкмоль/г белка) и липи-дов (менее 0,1023 или больше 0,1448 мкмоль/г белка) являются достоверными прогностическими признаками неблагоприятного исхода травматической болезни.

4.Данные критерии способны достоверно прогнозировать вероятность летального прогноза и не зависят от возраста пациентов, тяжести повреждения отдельных анатомических участков тела и длительности догоспитального периода.

/ под ред. B.C. Савельева. М. : Медиа Медика, 2010. С. 292295.)

Miller DL, Mansour KA. Blunt Traumatic Lung Injuries. Thorac. Surg. Clin. 2007; 17 (1): 57-61.

Smolle J, Prause G, Smolle-Juttner F-M. Emergency treatment of chest trauma - an e-learning simulation model for undergraduate

ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES:

1. Ermolov AS. Main principles of the combined trauma diagnostics

and treatmant. In: 50 lectures about surgery : coll. Savel'ev VS, 2. editor. Moscow: Media Medica Publ., 2010. p. 292-295. Russian (Ермолов A.C. Основные принципы диагностики и лечения тя- 3. желой сочетанной травмы // 50 лекций по хирургии : сборник

ПОЛИТРАВМА

medical students. Eur. J. Cardio-Thoracic Surg. 2007; 32 (4): 644647.

4. Chavko M, Adeeb S, Ahlers ST, McCarron RM. Attenuation of pulmonary inflammation after exposure to blast overpressure by n-acet-ylcysteine amide. Shock. 2009; 32 (3): 325-331.

5. Duvigneau JC, Kozlov AV, Zifko C, Postl A, Hartl RT, Miller I, et al. Reperfusion does not induce oxidative stress but sustained endoplasmic reticulum stress in livers of rats subjected to traumatic-hemorrhagic shock. Shock. 2010; 33 (3): 289-298.

6. Regeda MS, Kresyun VY, Frayt VM, Gayduchok IG, Trutyak IR, Kima-kovich VY, et al. Emergency states. Lvov : Magnoliya Publ., 2008. 835 p. Ukrainian (Perega M.C., KpecioH B.M., OpaMT B.M., raway^OK I.r., TpyTAK I.P., KÏMaKOBMH B.M. Ta iH. HeBiflKnaflm cTaHU. IbBiB : MarHO.nifl, 2008. 835 c.)

7. Zheng W, Huang L-Z, Zhao L, Wang B, Xu HB, Wang GY, et al. Superoxide dismutase activity and malondialdehyde level in plasma and morphological evaluation of acute severe hemorrhagic shock in rats. Am. J. Emerg. Med. 2008; 26 (1): 54-58.

8. Frink M, Zeckey C, Mommsen P, Haasoer C, Krettek C, Hildebrand F. Polytrauma management - a single centre experience. Injury. 2009; 40 (Suppl. 4): S5-S11.

9. Shcherban' NG, Gorbatch TV, Guseva NR, Mishura AI, Denisenko SA, Gilum LI, et al. Laboratory methods for study of the body an-

tioxidant system status and the lipoperoxidation level : methodical reccomendations for doctors, graduate students, masters, scientific reserchers. Kharkov : KhSMU Publ., 2004. 36 p. Russian (Щербань Н.Г., Горбач Т.В., Гусева Н.Р., Мишура А.И., Денисенко С.А., Ги-лум Л.И. и др. Лабораторные методики для изучения состояния антиоксидантной системы организма и уровня перекисного окисления липидов : метод. рекомендации для докторов, аспирантов, магистров, исполнителей НИР. Харьков : ХГМУ, 2004. 36 с.)

10. Dubinina EE, Burmistrov SO, Khodov DA, Porotov IG. Oxidative modification of human blood serum proteins: a method for its estimation. Questions of medical chemistry. 1995; 41 (1): 24-26. Russian (Дубинина Е.Е., Бурмистров С.О., Ходов Д.А., Поротов И.Г. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод ее определения // Вопросы медицинской химии. 1995. Т. 41, № 1. С. 24-26.)

11. Ulovitsina TI. Methods of the individual proteins estimation. Krasnoyarsk, 1991. 384 p. Russian (Уловицина Т.И. Методы определения индивидуальных белков. Красноярск, 1991. 384 с.)

12. Gumanenko EK, Boyarintsev VV, Suprun TY, Lyashedko PP. Objective evaluation of the trauma severity : the manual. St. Petersburg, 1999. 111 p. Russian (Гуманенко Е.К., Бояринцев В.В., Супрун Т.Ю., Ляшедько П.П. Объективная оценка тяжести травм : учебное пособие. Санкт-Петербург, 1999. 111 с.)

Сведения об авторе: Information about author:

Ступницкий М.А., соискатель научной степени кандидата меди- Stupnitsky M.A., applicant for candidate of medical science,

цинских наук, кафедра биохимии, Харьковский национальный меди- Kharkov National Medical University, biochemistry chair, Kharkov,

цинский университет, г. Харьков, Украина. Ukraine.

Адрес для переписки: Address for correspondence:

Ступницкий М.А., пл. Лыпнева, 10/8, г. Львов, Украина, 79018 Stupnitsky M.A., Lypneva Sq., 10/8, Lviv, Ukraine, 79018

Тел: +380 (97) 128-63-73 Tel: +380 (97) 128-63-73

E-mail: [email protected] E-mail: [email protected]

■