CC BY
52
СИБИРСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ
Приложение к № 2’2007
КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
УДК 616 - 092 (517.56)
Я.А. Ахременко, Е.П. Красноженов
E-mail: [email protected]
показатели колонизационной резистентности здоровых дошкольников г. ЯКУТСКА
Медицинский институт Якутского государственного университета им. М.К. Аммосова, г Якутск; Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
В настоящее время прослеживается неуклонный рост числа заболеваний, связанных с нарушением колонизационной резистентности человека. Имеющиеся нарушения проявляются и как пусковой механизм, и как фактор, усугубляющий течение основного заболевания. При этом прослеживается определенная зависимость между состоянием микрофлоры, иммунологических показателей и склонностью к тем или иным заболеваниям (4).
Целью настоящего исследования является изучение показателей колонизационной резистентности у здоровых дошкольников г. Якутска.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Обследовано 62 практически здоровых ребенка в возрасте 5-7 лет обоего пола, проживающих в условиях города Якутска и посещающих детские дошкольные учреждения. Сбор анамнестических данных осуществлялся при анализе медицинских карт и анкетировании родителей. Все дети были осмотрены педиатром и узкими
специалистами (стоматолог, оториноларинголог, хирург, эндокринолог, невропатолог) и отнесены к группе здоровья 2а. На момент нашего обследования они не имели жалоб, острых процессов и каких-либо объективных симптомов хронических заболеваний. Методы бактериологического и иммунологического обследования детей представлены в таблице. 1.
Статистическая обработка материала проводилась на персональном компьютере с помощью пакета статистических программ Statistica for Windows методами параметрической (с использованием критерия Стьюдента) и непараметрической (с использованием критерия Вилкоксона) статистики, а также дисперсионного и корреляционного анализов.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Из 62 обследованных нами детей дисбиотических нарушений не имели лишь 6 (9,7%) человек. Нарушения 1-й степени были зафиксированы у 17 (27,4%) детей, что выражалось в умеренном снижении (на
1-2 порядка от защитного уровня) бифидо- либо лактобактерий и кишечной палочки. Дисбактериоз
2-й степени имелся у 39 (62,9%) детей, когда на фоне значительного снижения индигенной флоры отмечается появление эшерихий с измененными свойствами (со сниженной ферментативной активностью, лактозонегативные, гемолитические), условно-патогенных энтеробактерий (серрация, цитробактер и др.) либо избыточное содержание клостридий.
Дефицит бифидобактерий отмечен у 46 (74,2%) детей, среднее содержание бифидофлоры составило
Таблица 1
Методы исследования
№ Методики Методические рекомендации и авторы
Бактериологические методы
1. Качественное и количественное исследование микрофлоры толстого кишечника Методические рекомендации НИИЭМ им. Г.Н. Габричевского (1986)
2. Оценка состояния микрофлоры толстого кишечника «Унифицированная рабочая классификация нарушений микробиоценоза кишечника» И.Б. Куваевой и К.С. Ладодо (1991), дополненная А.А. Воробьёвым (1995)
Иммунологические методы
3. Определение концентрации иммуноглобулинов М, G и А (секреторного) в слюне Метод радиальной диффузии по Г. Манчини (1963) с использованием моноспецифических сывороток фирмы «ИмБио» (Россия)
4. Определение активности лизоцима в слюне Нефелометрический метод по В .Г Дорофейчуку (1976)
5. Определение содержания ICAM-1 в слюне Метод ИФА с сорбцией моноклональных антител к данной молекуле с использованием планшетов и реактивов фирмы «Serotec» (Великобритания)
Я.А. Ахременко, Е.П. Красноженов
ПОКАЗАТЕЛИ КОЛОНИЗАЦИОННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ.
9,0 + 0,3 ^ КОЕ/г (при норме - 10-11 ^ КОЕ/г). Недостаточное содержание полноценных кишечных палочек выявлено у 47 (75,8%) детей. При этом у 17 (27,4%) высеяны эшерихии с измененными свойствами. Среднее же содержание кишечной палочки у детей составило 6,4 + 0,25 ^ КОЕ/г, что на 1-2 порядка ниже нормального уровня. Особый дефицит отмечен в содержании лактобактерий. Его имели 53 (85,5%) ребенка, а среднее содержание лактофлоры составило 5,6 + 0,2 ^ КОЕ/г, в то время как защитный уровень должен быть не ниже 7 ^ КОЕ/г (табл. 2).
Из таблицы 2 видно, что даже у детей с нормальным состоянием кишечной микрофлоры уровни индиген-ных микроорганизмов несколько ниже общепринятой нормы, и хотя эта разница статистически незначима, прослеживается тенденция к снижению постоянной микрофлоры у обследованных нами детей.
Условно-патогенные энтеробактерии: цитробак-тер (С. 1геип^1), серрации (Б. шагсезсепз, Б. о^п!ега), иерсинии (У. rohdei) в пограничной (5 ^ КОЕ) и более высоких концентрациях были высеяны у 10 (16,1%) детей со 2 степенью дисбиотических нарушений; высокий титр клостридий (более 3 ^ КОЕ) отмечен у 11 (17,7%) человек; золотистый стафилококк (Б. аше^) был выявлен в количестве 3-5 ^ КОЕ у 5 (8,1%) детей (табл. 3).
Изучение иммунологических параметров слюны у обследованных нами детей показало, что дефицит общего белка (менее 0,8 г/л по возрастной норме) в слюне наблюдался у 16 (35,6%) детей, хотя его средний уровень составил 0,9 + 0,15 г/л. Недостаточное содержание sIgA отмечалось у всех (100%) обследованных детей и составило 0,07 + 0,007 г/л по сравнению с нормой - 0,1-0,15 г/л. Самые нестабильные показатели были получены по содержанию лизоцима: нормальное содержание (в пределах возрастной нормы -17-18 мкг/мл) имели лишь 5 (11,1%) детей; дефицит этого фермента отмечался у 10 (22,2%) детей и у большинства детей (66,7%) активность лизоцима была выше нормы.
Как видно из таблицы 4, при одинаковом содержании в слюне общего белка некоторые иммунологические показатели несколько разнятся в зависимости от состояния микробного пейзажа кишечника. Особо обращает на себя внимание тот факт, что самое низкое содержание лизоцима в слюне установлено у детей с 1-й степенью нарушений микробного пейзажа толстого кишечника и составило 19,4 + 4,5 мкг/мл, в то время как уровень данного белка у детей без нарушений кишечной микрофлоры и со 2-й степенью дисбиоза составил 24,7 + 1,2 и 25,3 + 2,55 мкг/мл соответственно (р<0,05). Среднее содержание лизо-цима в слюне у обследованных нами детей было 23,1 + 2,5 мкг/мл, что несколько выше принятых нормативов - 17 - 18,1 мкг/мл. Необходимо отметить, что между уровнем лизоцима
Таблица 2
Содержание индигенной микрофлоры толстого кишечника у обследованных детей г. Якутска (частота высева 100%) по сравнению с нормой
Бактерии нормальной микрофлоры Количество (lg KOE/г) M + m
Норма, lg KOE/г Всего n=62 без дисбиоза n=6 1 степень n=17 2 степень n=39
Бифидобактерии 10-11 9,0 + 0,3 9,7 + 0,2 8,8 + 0,2 p<0,05 8,5 + 0,3 p*<0,05 p1**>0,05
Лактобактерии 7-8 5,6 + 0,2 6,8 + 0,2 5,8 + 0,2 p<0,05 4,1 + 0,3 p<0,05 p1<0,05
Полноценные эшерихии 7-8 6,4 + 0,25 7,3 + 0,4 5,9 + 0,3 p<0,05 6,0 + 0,3 p<0,05 p1>0,05
р* - по сравнению с группой детей без дисбиоза р1** - по сравнению с 1-й степенью нарушений
Таблица 3
Частота высева сопутствующей микрофлоры толстого кишечника у детей со 2-й степенью дисбиоза
Бактерии сопутствующей микрофлоры Частота высева абс. (%) Среднее содержание Допустимое содержание
Эшерихии*: - Lac- Hly+ 10 (16,1%) 5 (8,1%) 38,5% 66% до 10% 0
УПЭБ (серрации, цитробактер, иерсинии) 10 (16,1%) 5,7 + 0,03 lg КОЕ/г до 5 lg КОЕ/г
Стафилококк золотистый 5 (8,1%) 3,8 + 0,05 lg КОЕ/г 0
Клостридии 11 (17,7%) 5,2 + 0,06 lg КОЕ/г до 3 lg КОЕ/г
Lac- - эшерихии со сниженными ферментативными свойствами и лактозонегативные; Hly+ - эшерихии с гемолитическими свойствами. Содержание выражено в % от общего количества эшерихий в кишечнике
клинические исследования
Таблица 4
Состояние местного иммунитета у детей г. Якутска в зависимости от состояния кишечной микрофлоры
Норма Всего n=62 Без дисбиоза n=6 1-я степень n=17 2-я степень n=39
Белок (г/л) 0,8-4,0 0,9 + 0,15 0,9 + 0,04 0,9 + 0,1 p>0,05 0,9 + 0,09 p*>0,05 p1**>0,05
IgG (г/л) 0,9-2,6 0,32 + 0,01 0,39 + 0,07 0,30 + 0,07 p>0,05 0,28 + 0,04 p<0,05 p1>0,05
sIgA (г/л) 0,1-0,15 0,07 + 0,007 0,08 + 0,005 0,06 + 0,001 p<0,05 0,06 + 0,003 p<0,05 p1>0,05
Лизоцим мкг/мл 17-18 23,1 + 2,5 24,7 + 1,2 19,4 + 4,5 p>0,05 25,3 + 2,55 p>0,05 p1<0,05
ICAM-1 (пкг/мл) 3,5-4,0 4,1 + 0,17 4,3 + 0,8 3,85 + 1,3 p>0,05 4,1 + 0,6 p>0,05 p1>0,05
р* - по сравнению с группой детей без дисбиоза р1** - по сравнению с 1-й степенью нарушений
в слюне и уровнем лактобактерий в кишечнике выявляется слабая обратная корреляция (коэффициент корреляции г = -0,15 при р<0,05).
Наиболее нестабильные бактериологические и иммунологические показатели были получены именно в группе детей с 1-й степенью дисбиоза. Возможно, как раз на этой стадии имеет место дисбаланс механизмов, поддерживающих колонизационную резистентность слизистых оболочек, что служит триггерным моментом для формирования дальнейших патологических состояний в пищеварительном тракте и патогенетически во всем организме. Дисбаланс иммуномикробиологических факторов, присутствующий на этой стадии, можно рассматривать как патогенетическое звено формирования премор-бидных, а в дальнейшем, и болезненных состояний в организме человека (2, 3, 5).
ЛИТЕРАТУРА
1. Ахременко Я.А. Механизмы нарушений колонизационной резистентности у детей в условиях Севера. Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. - Якутск, 2004. - 23 с.
2. Бондаренко В.М. с соавт. Дисбактериозы желудочнокишечного тракта // Рос. журн. гастроэнтерологии, ге-патологии и колопроктологии, 1998. - №1. - С. 66-70.
3. Дисбактериозы у детей // Учебное пособие для врачей и студентов под ред. А.А. Воробьева, - М., 1998. - 72 с.
4. Иммунология инфекционного процесса // Руководство для врачей под ред. В.И. Покровского. - М., 1994. - 306 с.
5. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктоло-гии, 1998. - №1. - С. 61-65.
YAKUTSK HEALTHY PRESCOOL CHILDREN COLONIZATION RESISTANCE INDEXES
Ya.A. Akhremenko, E.P. Krasnozhenov
SUMMARY
The colonization resistance condition of 62 almost healthy children in Yakutsk was examined. There was found a connection between microbiological intestinal microflora indexes and immunological parameters of saliva.
ВЫВОДЫ
1. Нарушение колонизационной резистентности слизистых оболочек, в первую очередь, проявляется развитием кишечного дисбиоза 1-й-2-й степеней, наличие которого установлено у 90,3% практически здоровых детей дошкольного возраста г. Якутска.
2. Нарушения микробного статуса характеризуются снижением содержания в кишечнике индигенной микрофлоры (лакто- и бифидобактерий), активизацией на этом фоне условно-патогенных микроорганизмов (атипичных эшерихий, УПЭБ, клостридий, стафилококков)
3. Развитие дисбиоза в организме детей сопровождается увеличением в слюне лизоцима и снижением содержания sIgA и IgG.
