CC BY
31
ВЕТЕРИНАРИЯ
УДК 619.981.42:612.017.11.12
ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У МОРСКИХ СВИНОК ПРИ ВАКЦИНАЦИИ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БРУЦЕЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ
Алимов А.М.- д.в.н., профессор, зав. кафедрой; Закирова Л.А. - к.б.н. Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана
e-mail:[email protected]
Ключевые слова: бруцеллез, иммунитет, инфекция, лейкоциты, НСТ-тест, функция лейкоцитов.
Key words: brucellosis, immunity, infection, leukocytes, NBT-test, leukocytes function.
В защите организма от чужеродных антигенов участвуют неспецифические и специфические факторы [1,2].
Неспецифическая резистентность связана со специфической иммунной
реактивностью и является основой выработки полноценного иммунного ответа, возникшего в процессе эволюции [3,4,5]. Однако отдельные патогенные микроорганизмы не поглащаются фагоцитами или, если поглащаются, не перевариваются внутри фагоцитирующих клеток и переходят в персистирующую форму. К числу таких микроорганизмов относится и возбудитель бруцеллеза. Поэтому изучение клеточных показателей иммуногенеза и инфекционного процесса при бруцеллезе может дать ценную информацию по механизмам защиты организма. Для оценки клеточных механизмов весьма информативной является реакция восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) полиморфно-ядерными лейкоцитами
(ПМЯЛ) [6]. Она, отражая итоговую реакцию ферментных систем,
ответственных за цитотоксический потенциал ПМЯЛ, позволяет оценивать их бактерицидную активность. В связи с этим НСТ-тест может быть использован для оценки иммунологической перестройки организма.
Целью исследований являлось изучение активности ПМЯЛ при вакцинации и инфицировании морских свинок бруцеллами.
Материалы и методы. Четырех групп морских свинок по 15 голов иммунизировали вакцинами из штаммов B.abortш УФ-1 (1 группа), 19 (2 группа), 82
(3 группа) и УФ-1 в сочетании с иммуномодулятором (4 группа). Через 7, 15, 30 и 60 дней после вакцинации у отдельных животных брали пробы крови для исследований. В пробах крови определяли функциональную активность лейкоцитов в НСТ-тесте. Активность лейкоцитов в НСТ-тесте оценивали в спонтанном и стимулизированном тестах. Для стимуляции лейкоцитов в качестве тест-культуры использовали суспензию вирулентного штамма B.abortus 54. НСТ-тест ставили по методике представленной в монографии А.С. Козлюк с соавторами [6] в нашей модификации [7].
Для определения устойчивости к бруцеллезу морских свинок заражали культурой вирулентного штамма B.abortus 54 в дозе 80 микробных клеток через 2 месяца после вакцинации. Убой морских свинок производили через 30 дней и подвергали бактериологическим
исследованиям.
Результаты исследований.
Показатели функциональной активности лейкоцитов крови морских свинок представлены в таблице № 1. Ткак свидетельствуют полученные данные, после иммунизации происходила значительная активация лейкоцитов. У животных, вакцинированных штаммом УФ-1, на 7-й день иммунизации наблюдалось повышение этого показателя. В стимулированном тесте (АВ) количество активных клеток составляло 30±1,1, что в 2,5 раза выше по отношению показателей контрольной (непривитые) группы (12±0,12). Показатель резерва (ПР) и коэффициент метаболической активации (КМА) равнялись 1,7±0,4 и 0,7
соответственно. Аналогичная тенденция и в других опытных группах животных. Однако этот процесс был несколько слабее, чем у животных привитых вакциной из штамма 19 (2 группа). Показатели резерва и коэффициент метаболической активации у животных 1 и 2 групп, на этот срок, повышались незначительно, тогда как у 3 и 4 групп они существенно возросли. В дальнейшем, на 15 и 30 дни исследований, функциональная активность нейтрофилов крови первых трех групп возрастала, о чем свидетельствует увеличение количества активированных клеток в спонтанном,
особенно, в стимулированном тестах, а также ПР и КМА. Через 60 дней после вакцинации функциональная активность нейтрофилов крови у всех испытуемых морских свинок несколько снижалась, но оставалась на значительно более высоком уровне по сравнению с интактными животными. При сходстве тенденции активизации функции нейтрофилов у всех трех групп животных, реакция была интенсивнее у морских свинок, вакцинированных суспензией штамма бруцелл УФ-1. .
Таблица 1. Функциональная активность лейкоцитов крови морских свинок,
иммунизированных противобруцеллезными вакцинами
Сроки исследо вания УФ-1 (1 гр.) 19 (2 гр.) 82 (3 гр.) УФ-1 (4 гр.)
СВ АВ ПР/ КМА СВ АВ ПР/ КМА СВ АВ ПР/ КМА СВ АВ ПР/ КМА
Контроль 8± 0,2 12± 0,1 1,5/0,5 9± 0,6 13± 0,6 1,4/0,4 8± 0,2 12± 0,2 1,5/0,5 9± 0,2 13± 0,3 1,4/ 0,4
7 день 18± 0,3 30± 1,1 1,7/0,7 15± 0,1 22± 0,6 1,5/0,5 12± 0,3 25± 0,7 1,9/0,9 12± 0,6 24± 1,2 2,0/ 1,0
15 день 24± 0,3 59± 1,2 2,4/1,4 18± 0,3 48± 1,7 2,7/1,7 17± 0,4 33± 1,1 2,0/1,2 12± 0,6 57± 1,2 4,8/ 3,8
30 день 28± 0,3 72± 1,7 2,6/1,6 21± 0,2 55± 1,2 2,6/1,6 21± 0,2 47± 0,7 2,2/1,2 9± 0,8 67± 0,6 7,4/ 6,4
60 день 19± 0,4 48± 1,0 2,6/1,5 19± 0,3 39± 1,0 2,1/1,1 9± 0,1 23± 0,6 1,7/1,6 11± 0,8 53± 0,8 4,8/ 3,8
СВ - формазан-положительные клетки в спонтанном тесте (%) АВ - формазан-положительные клетки в стимулированном тесте (%) ПР - показатель резерва = АВ:СВ
КМА - коэффициент метаболической активации = (АВ - СВ)/СВ
Несколько иная картина наблюдалась в IV группе животных (иммунизированных шт, УФ-1 в сочетании с иммуномодулятором). В частности, у этой группы морских свинок в течение вакцинного процесса показатели спонтанного теста (СВ) не претерпевали существенных изменений, т.е. были почти на исходном уровне, тогда как у других групп наблюдалось повышение активности лейкоцитов в СВ. На 7 день опыта количество формазан-положительных
нейтрофилов, в стимулированном тесте у этой группы животных, повышалось в 2 раза, что на 25% ниже по сравнению с первой группой (шт УФ-1 в
физиологическом растворе хлористого натрия). В последующие сроки исследований количество активированных клеток в стимулированном тесте у морских свинок I и IV групп почти выравнивались, но ПР и КМА у животных IV группы были значительно выше по сравнению с остальными опытными группами, что указывает на более выраженную активизацию метаболической и
переваривающей функции нейтрофилов. У всех опытных групп морских свинок функциональная активность лейкоцитов крови повышалась, достигая максимума на 30-й день после вакцинации. К 60-му дню происходило некоторое снижение
изучаемых показателей во всех опытных группах. Тем не менее, количество формазан-положительных лейкоцитов
крови у животных опытных групп было в 2,5-4 раза выше по сравнению с контрольной группой. К этому сроку исследований КМА лейкоцитов крови у вакцинированных животных 1 -3 групп повышали контрольный уровень в 2,8-3,2 раза, а у 4 группы - почти в 10 раз. Сходная тенденция сохранялась и по показателю резерва. Результаты бактериологических исследований приведенны в таблице № 2.
Полученные данные показывают, что у морских свинок, иммунизированных суспензиями бруцелл штаммов УФ-1, 19, 82 в физиологическом растворе и УФ-1, разведенной в разбавителе с иммуномодулятором, количество
активированных лейкоцитов в
стимулированном НСТ-тесте перед заражением варьировало в переделах 19-
Заключение. 1. Иммунологическая перестройка организма морских свинок после вакцинации противобруцеллезными вакцинами сопровождается усилением функциональной активности лейкоцитов, которая четко выявляется в НСТ-тесте.
2. Уровень активизации лейкоцитов коррелирует с устойчивостью морских свинок к бруцеллезу.
3. При бруцеллезной инфекции в
53%, а контрольных - 10-13%.
Вакцинированные морские свинки с показателями активированных лейкоцитов в реакции НСТ-33% и более оказались устойчивыми к контрольному заражению вирулентной культурой бруцелл 54. Вакцинированные шт. 82 две морские свинки, имевшие активированные нейтрофилы значительно ниже (17-19%), заразились. Однако их инфицирование имело региональный характер (и.и. - 7,0), в отличие от интактных (непривитые), у которых наблюдался генерализированный бруцеллезный процесс (И.И. - 94%).
После заражения невакцинированных морских свинок вирулентным штаммом происходило угнетение активности нейтрофилов, о чем свидетельствует снижение количества активированных клеток в 2-4 раза по сравнению с исходным уровнем.
отличие от вакцинного процесса, наблюдается значительное угнетение функциональной активности лейкоцитов.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Воронин Е.С. Иммунология / Воронин Е.С., Петров Р.В., Седых М.М., Дедвинов Д.А. / М.: Колос - Пресс -2002. -384 с.
2. Езенчук Ю.В. Патогенность как функция биомолекул. М. «Мерцание» -
Таблица 2 - Результаты заражения морских свинок и показатели НСТ-теста
Группа животных Количество животных Иммунных (%) ИИ. Показатели НСТ-теста в стимулир. варианте
В опыте Из них заразились
1.3аражен. вакцин.шт. УФ-1 в дозе 4 млрд.м.к. 7 0 100,0 0 48,0±0,2
2.заражен. шт. 19 (2 млрд.м.к.) 7 0 100,0 0 39,0±0,4
3.заражен. вакцин.шт.82 (2 млрд.м.к.) 7 2 71,4 7,0 33,0±0,6 (у заразившихся) 19,0±0,3 17,0±1,8
4.заражен. вакцин.шт. УФ-1 (2 млрд.м.к.) + иммуномодулятор 7 0 100,0 0 45,3±0,8
5. контроль -непривитые 5 5 0 94,0 До заражения: 12,0±0,3; Через 30 дней после зараж.: 4,2±0,2
1988. - 240 с.
3. Бойд У. Основы иммунологии. Пер. с английского под ред. гуровича А.Е., М. «Мир» - 1969.-648 с.
4. Петров Р.В. Иммунология / Петров Р.В. - М. «Мерцание» - 1982.-368 с.
5. Davis C.P. Evidence for a Bladder cells glicolipid receptore E.coli and effect of
neuramic acid colominic acid adherence / Davis C.P. // Infect Immunal/ - 1981/ - v.34. №3.P.144 - 148.
6. Алимов А.М., Зарипова И.Р. Методические указания по определению активности ПМЯЛ в НСТ-тесте / Казань -1990. - 4с.
ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У МОРСКИХ СВИНОК ПРИ ВАКЦИНАЦИИ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БРУЦЕЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ
Алимов А.М., Закирова Л.А. Резюме
Проведены исследования по определению функциональной активности полиморфно-ядерных лейкоцитов. Использовали тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест). Иммунологическая перестройка организма морских свинок после вакцинации противобруцеллезными вакцинами сопровождается усилением функциональной активности лейкоцитов, которая четко выявляется в НСТ-тесте. Уровень активизации лейкоцитов коррелирует с устойчивостью морских свинок к бруцеллезу. При бруцеллезной инфекции в отличие от вакцинного процесса, наблюдается значительное угнетение функциональной активности лейкоцитов.
DATA OF CELL IMMUNITY AT GUINEA PIGS THROUGH VACCINATION AND EXPERIMENTAL BRUCELLOUS INFECTION
Alimov A.M., Zakirova L.A.
Summary
Functional activity test of polymorphonuclear leukocytes was explored. The Nitro Blue Tetrazolium Reduction Test was used. Immunologic alteration of the guinea pigs after the vaccination through brucellosis vaccines is attended by increase in functional activity of leukocytes that positively reveals in NBT-test. The leukocyte activation level correlates with the brucellosis resistance of the guinea pigs. In case of brucellosis infection in contrast to vaccine process, the suppression of the leukocyte functional activity is observed.
УДК 616-085.636.92
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТОВ ФЕРРАМИНОВИТ И ФЕРРАНИМАЛ-75 НА ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКУ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ У ТЕЛЯТ
Алимов А.М. - д.в.н., профессор, зав. кафедрой; *Злобин А.В. - аспирант, начальник
Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана *БУ УР «Алнашская районная станция по борьбе с болезнями животных»
тел.8 (34150) 3-11-01
Ключевые слова: телята, кровь, гематологические, биохимические показатели, ферраминовит, ферранимал-75.
Key words: calves, blood, hematologis, biochemical variables, ferraminovit, ferranimalum-75.
Выращивание здорового молодняка крупного рогатого скота, его сохранность составляют основу для дальнейшего получения и увеличения животноводческой
продукции.
Хорошо известно, что заболеваемость новорожденных телят наносит
значительный вред дальнейшему развитию
