CC BY
39
Часть II.
ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ, ИНФЕКЦИОННЫЕ И ИНТОКСИКАЦИОННЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ
ПОКАЗАТЕЛИ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА И МАРКЕРЫ АКТИВАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ БОЛЬНЫХ РАССЕЯННЫМ СКЛЕРОЗОМ И.Г.Жирнова, Л.В.Комелькова, Н.В. Переседова, И.В.Ганнушкина,
И.А.Завалишин
НИИ Неврологии РАМН
Согласно современным представлениям иммунопатологические реакции при РС, приводящие к деструкции миелина, инициируются активированными аутореактивными Т клетками. В последние годы появилась возможность выявления таких клеток в периферической крови с помощью моноклональных антител (МКА), специфически реагирующих с соответствующими антигенами - маркерами активации.
Исследования выполнены на 40 больных РС, в число которых вошли 24 пациента с I и И прогредиентным течением заболевания, 14 больных с ремиттирущим, причем все с обострением процесса, и 2 больных с дебютом РС.
Основной целью исследования было изучение количества различных фенотипов активированных лф. в крови больных в сопоставлении с клиническими особенностями течения заболевания и другими характеристиками иммунного статуса больных. В работе были использованы МКА производства НПЦ "Медбиоспектр", реагирующие с лимфоцитами трех фенотипов: - СД 25 + ( экспрессирующие рецептор к интерлейкину 2), считается маркером "ранней" активации; - фенотип HLA - DR +, антиген, экспрессирую-щийся на В клетках и активированных Т лф., более характерный для длительной антигенной стимуляции -маркер «поздней» активации, и, наконец, фенотип СД 95+, выявляющий Fas - антиген, опосредующий апоптоз клеток. Использовали метод непрямой иммунофлюоресценции с FITC - конъюгатами против иммуноглобулинов мыши. Результаты реакции оценивали визуально с подсчетом количества клеток на люминесцентном микроскопе. Параллельно с определением активированных клеток проводили оценку иммунного статуса больных с помощью применяемых в лаборатории и ранее методов: определяли относительное и абсолютное содержание Т- и В- лф. и отдельных субпопуляций иммунокомпетентных клеток с помощью МКА к СДЗ, СД4, СД8, СД 16 и СД 20. Функциональную оценку клеточного иммунитета выполняли с помощью РППЛ с использованием ОБМ, ганглиозидов мозга и туберкулопротеина, учитывали также влияние аутосывороток на адгезию клеток крови ( эффекты усиления и подавления адгезии). Для оценки гуморального иммунитета использовали метод определения иммуноглобулинов по Манчини и циркулирующих иммунных комплексов.
Результаты исследования:
Лф. фенотипа СД 25+ определены у 20 больных. Диапазон колебаний их количества - от 2 до 26%, среднее содержание этой популяции клеток в норме составляет не более 5%. Однако, эти данные нельзя считать общепринятыми, поскольку по данным некоторых публикаций количество этих клеток может быть и выше, - 11% (1), Кетлинский С.А., Калинина Н.М. (2) приводят еще более высокие значения - от 13 до 24%. В нашем исследовании было лишь 5 больных, у которых количество СД25+ лф. превышало 5%. Четких корреляций с клиническими особенностями РС при этом не отмечено. Четверо из этих больных имели I или II прогредиентное течение РС с длительностью до 7 лет и один больной с дебютом заболевания, у которого отмечено самое высокое содержание СД25+ лф. - 26%.
Вторая субпопуляция активированных клеток HLA- DR+ была исследована у 39 больных. Отмечены колебания их содержания от 4 до 60%, а среднее содержание этих клеток у больных составило 25,4%. Как и в случае с СД 25+, в литературе нет единого мнения о числе HLA-DR+ лф. в норме. По данным одних исследователей они составляют 9-10 % (3). Другие авторы приводят более высокие цифры(2). В нашем исследовании у 69% больных РС результаты определения HLA- DR+ клеток превышали 15%, т.е. было выявлено повышение этих клеток у подавляющего большинства больных. Удалось отметить некоторые представляющие интерес тенденции при сравнении средних величин HLA DR+ лф. в подгруппах больных с различным течением и длительностью РС. В подгруппе с ремиттирующим течением среднее количество лф. данного фенотипа соста-
вило 20,8%, при прогредиентном РС, особенно при II прогредиентном, течении оно было несколько выше -23%. У больных с длительностью заболевания до 3 лет экспрессия указанного фенотипа лф была выше по сравнению с подгруппой больных с большой длительностью заболевания (более 10 лет)., эти цифры соответственно были 27,7% и 17,2% . По-видимому, хотя данный тип активации и принято считать «поздним» , однако, повышение субпопуляции этих клеток в периферической крови происходит в относительно ранние сроки болезни. С нарастанием длительности заболевания не только не повышается число клеток данного фенотипа в периферической крови, но напротив, количество их снижается. Причины этого феномена не вполне ясны, одной из них может быть задержка и накопление этих клеток в местах поражения мозга при развитии очагов воспаления и демиелинизации.
Маркер СД95+, как уже отмечалось, позволяет выявлять лф., экспрессирующие Fas-антиген, опосредующий вступление клеток в апоптоз. Клетки СД95+ исследованы у 40 больных. Следует заметить, что сигнал к вступлению иммунокомпетентных клеток в апоптоз может поступать через Т клеточный рецептор, т.е. также, как и сигнал активации, поэтому один из видов апоптоза и обозначается как «активационный». Данные о количестве лф., экспрессирующих Fas- антиген в нормальных условиях, в настоящее время немногочисленны и, также противоречивы. По данным различных исследователей число СД 95+ лф. колеблется от 4-5% до 20-30% ( 2, 5 - 7).
В единичных исследованиях отмечали разнонаправленные изменения количества СД 95+ лф. у больных РС с различным течением заболевания. Значительное, троекратное повышение их содержания при ремиттирующем течении РС по сравнению с прогредиентным выявили Бисага Г.Н. с соавт. (8). По результатам нашего исследования относительное содержание СД 95+ лф у больных РС колебалось от 6 до 54%. Значение их среднего содержания у больных составило 24,9%, причем у больных с ремиттирующим течением их количество было несколько выше, чем при прогредиентном, соответственно- 25,6% и 20%. Таким образом, наши данные подтверждают результаты Бисага Г.Н. с соавт. (8), хотя различия в содержании СД95+ клеток при прогредиентном и ремиттирующем течении РС в нашем исследовании и не были столь значительными. Возможно, это объясняется более тяжелыми формами ремиттирующего течения РС в нашем исследовании (все наши больные находились в стадии обострения заболевания. Отмеченная тенденция получила и дополнительное подтверждение при сопоставлении клинических особенностей течения РС в подгруппах больных с наиболее высокой и низкой экспрессией фенотипа СД95+ лф. В первой подгруппе среднее значение этих клеток составило 38%, во второй - 11,7%. В первой подгруппе преимущественно оказались больные с ремиттирующим течением РС, во второй, напротив, преобладали больные с прогредиентными формами ( 8 случаев из 10 больных этой подгруппы). Не было отмечено существенных различий количества СД95+ клеток у больных с различной длительностью заболевания.
Проведены также клинико-иммунологические сопоставления по результатам содержания ИК и уровней иммуноглобулинов. При прогредиентном течении РС отмечено более интенсивное образование ИК ( у 54% больных), при этом уровни Ig G и А у этих больных были снижены, a IgM -повышен. При ремиттирующем течении, в отличии от прогредиентного, повышение ИК было отмечено лишь у 27% больных, .у которых также было отмечено снижение количества IgG и Ig А . У остальных больных с ремиттирующим течением заболевания содержание иммунных комплексов не было изменено, а уровни IgG и Ig А классов были повышены, более чем у 50% больных. Содержание IgM у всех больных с ремиттирующим течением также было повышено. Проведены сравнения показателей ИК и Ig в подгруппах больных с различной длительностью заболевания: до 3 лет, от 3 до 10 лет и более. При этом отмечена четкая тенденция нарастания содержания ИК с увеличением длительности заболевания. Частота выявления повышения ИК , как правило, коррелировала со снижением уровней Ig G и IgA, при повышении IgM во всех подгруппах . Можно предположить, что образование ИК происходит за счет потребления Ig G, а также, по-видимому, и IgA класса.
Оценивая результаты собственных исследований и данные литературы можно предположить, что снижение содержания в крови больных РС фенотипа СД95+ лф. является прогностически неблагоприятным показателем. Однако данное положение нуждается в дальнейшем накоплении данных, в том числе требует динамического наблюдения за указанными показателями на фоне лечения. Значение данных о количестве различных фенотипов активированных клеток у больных РС для оценки прогноза заболевания, а также уточнение их роли в патогенезе РС подлежит дальнейшему изучению в сопоставлении с другими показателями иммунитета, в том числе, Ig и фракционно- молекулярного состава иммунных комплексов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Макаров А.И., Бойко А.Н., Салмаси Ж.М., Порядин Г.В. Значение подсчета числа СД25 лимфоцитов в периферической крови для диагностики рассеянного склероза.//Первый Российский конгресс по патофизиологии. Тезисы докл. М. 1996, С. 152.
2. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. Санкт- Петербург, 1998. 156 с.
3. Ковальчук Л.В., Павлюк А.С., Веселова А.В., Дементьева Е.Г., Ильина Н.И., Прокопенко В.Д. Экспрессия маркеров активации на субпопуляциях Т-линфоцитов при различных формах бронхиальной астмы. // Первый Российский конгресс по патофизиологии. Тезисы докладов. М. 1996, С. 151.
4. Полосухина Е.Р., Заботина Т.Н., Шишкин Ю.В., Кадагидзе З.Г., Барышников А.Ю.
5. Получение и характеристика моноклональных антител ICCM60 против антигена СД 95 (Fas/APO-1), апосредующего апоптоз. // Бюлл. зксперим. биол. мед. 1998, Т.125, N 6, С. 670 - 673.
6. Солнцева О С. Калинина Н М Бычкова Н.В. Гребенюк А.Н., Тимошевский A.A. Роль цитокинов в осуществлении апопто-тических процессов клеток иммунной системы у лиц, подвергшихся воздействию ионизирующей радиации в малых дозах. // Иммунология,- 2000.-N. 3.- С. 22-24.
7. Baryshnikov A. Yu, Polosukhina Е. R., Zabotina T.N. Lazareva N.I., Lukashina M.I., Shishkin Yu. V., Chinarjova I.Y., Tenuta M. R., Metelitsa I.S., Kadagidze Z. G. Fas ( APO- 1/CD 95) Antigen: New Activation Marker for Evaluation of the Immune Status.//Russion Journal of Immunology.- 1997,- Vol. 2,- P. 116-120.
8. Барышников А.Ю., Полосухитна E.P., Шишкин Ю.В., Тупицын H.H., Сыркин А.Б., Гаврикова Н.В., Андреева Л.Ю., Забо-тинаТ.Н., Маякова С.А., Курмашев В.И., Кадагидзе З.Г. // Гематол. и трансфизиол. -1998.- Т. 43, N.2.- С. 8-11.
9. Бисага Г.Н., Каланина Н.М., Акимов С.Б., Давыдова Н.И. Иммунопатогенети ческие различия ремиттирующего и про-гредиентного рассеянного склероза. // Иммунология,- 2000.- N. 3.- С. 41-44.
ЭПИЛЕПТИЧЕСКИЕ ПРИСТУПЫ ПРИ ГЕРПЕТИЧЕСКОМ ЭНЦЕФАЛИТЕ У ДЕТЕЙ. КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ И ПРОГНОЗ М.М. Соколова ***., И.Н. Мартыненко *, Е.П. Деконенко *,
A.C. Петрухин ***, К.Ю. Мухин ***, И.Я. Леонтьева **, И.В. Митрофанова **, М.И. Прыткова **, Ж.Р. Идрисова***
* Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова РАМН **1 Городская клиническая инфекционная больница ***Российский Государственный Медицинский Университет
Герпетический энцефалит (ГЭ) относится к наиболее тяжелым инфекционным поражениям головного мозга. Он характеризуется деструктивным процессом с образованием массивных некрозов в коре головного мозга, преимущественно лобных и височно-теменных долей, что определяет в большинстве случаев заболеваний неблагоприятное течение, нередко заканчивающееся летальным исходом или выздоровлением с выраженным дефектом ЦНС [1,3].
ГЭ один из наиболее распространенных вирусных энцефалитов в странах Европы и Америки. Его удельный вес в структуре вирусных энцефалитов составляет около 20%, а частота достигает 2-2,5 случаев на 1 млн. населения в год. Заболеваемость ГЭ наблюдается равномерно в течение года [3].
Поражение нервной системы при ГЭ вызвано сочетанием повреждающего действия вируса простого герпеса 1 типа (ВПГ-1) и иммунопатологических реакций. Вирус проникает в головной мозг двумя путями: гематогенным и нейрональным. Как правило, первичное инфицирование человека ВПГ-1 происходит в возрасте от 0 до 4-6 лет. Считается, что у детей и неимунных лиц молодого возраста ГЭ является следствием первичной инфекции, в то время как в старших возрастных группах он является следствием реактивации латентной инфекции [1,5].
Эпилептические приступы относятся к одним из наиболее типичных про-явлений ГЭ. В результате локального нейрокластического процесса в первые дни заболевания они часто имеют четкий фокальный компонент. Однако на фо-не прогрессирования процесса и развития отека головного мозга приступы ста-новятся вторично-генерализованными [3,6].
Наличие структурного дефекта в веществе головного мозга может служить причиной формирования стойкого очага патологической активности в резидуальном периоде ГЭ, что может привести к повторному возникновению эпилептических приступов.
Материалы и методы.
В отделении острых детских нейроинфекций 1 инфекционной клиниче-ской больницы г. Москвы в 1988-2000 годы было госпитализировано 26 детей с ГЭ. Возраст детей - от 6 мес. до 10 лет (в 17 случаях 0,5-3 года), среди них 14 мальчиков и 12 девочек. 20 детей наблюдались от момента начала заболевания до периода реконвалесценции и далее в катамнезе в течение 1-10 лет. 5 детей поступили в отделение спустя 6-12 мес. после острого периода ГЭ. Один ребенок умер.
Герпетическая природа заболевания у 18 детей была подтверждена ме-тодом иммуноферментного анализа с исследованием специфических антител к ВПГ-1 в сыворотке и цереброспинальной жидкости (ЦСЖ), у 3 - в реакции связывания комплемента в сыворотке и ЦСЖ. При этом соотношение уровня антител в сыворотке к уровню в ЦСЖ было менее 20:1, что подтверждало их интратекальную выработку. У 4 пациентов диагноз ГЭ был доказан по совокупности клинических и инструментальных данных, с выявлением анти-гена ВПГ-1 в ЦСЖ. Всем больным проводилось комплексное неврологическое и инструментальное исследование, включавшее общеклиническое обследование, исследование ЦСЖ, глазного дна, ЭЭГ в динамике болезни и нейрови-зуализацию, включавшую компьютерную (KT) и магнитно - резонансную томо-графию (МРТ).
Целью исследования являлось определение роли и характера эпилепти-ческих приступов в клинической картине ГЭ и риска их повторного возник-новения.
Результаты исследования
У всех детей заболевание начиналось остро, с повышения температуры те-ла до фебрильных цифр (38-39°С), общей интоксикации, у 14(56%) детей - с ка-таральными явлениями и у 2(8%) - с кишечным синдромом.
Неврологические нарушения развивались на 1-7 сутки болезни (2,5±0,6). У всех детей в остром периоде ГЭ отмечались эпилептические приступы, в 21 (84%) случае они являлись первым клиническим симптомом
