CC BY
25
8. Качковский М.А., Симерзин В.В., Рубаненко О.А., Кириченко Н.А. Гемостазиологические, липидемические и гемодинами-ческие показатели, ассоциированные с риском смерти от сердечнососудистых заболеваний у пациентов из групп высокого
и очень высокого риска по шкале SCORE // Терапевтический архив. -2014.-N3.-C.59-64.
Rose G. The strategyofpreventivemedicine. // Oxford: Oxford University Press.-1992. -278 p.
ПОСТУПИЛА: 18.09.2014
УДК 612.017.1-053.31
Ан.А. Сависько1, М.П. Костинов2, Г.Г. Харсеева1, А.А. Сависько1,
А.В. Шмитько2, Н.Е. Ястребова2, И.В. Подгорный1
ПОКАЗАТЕЛИ АДАПТИВНОГО ИММУНИТЕТА К УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫМ БАКТЕРИЯМ У НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ
Ростовский государственный медицинский университет, Кафедра пропедевтики детских болезней, кафедра микробиологии и вирусологии №2,
кафедра акушерства и гинекологии №2. Россия, 344022, г. Ростов-на-Дону, пер. Нахичеванский 29. Е-mail: [email protected] 2 Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, Лаборатория вакцинопрофилактики и иммунотерапии аллергических заболеваний.
Россия, 105064, г. Москва, Малый Казенный переулок, д.5а.
Цель: оценка показателей трансплацентарного адаптивного иммунитета к условно-патогенным бактериям у новорожденных детей.
Материалы и методы: обследовано 682 новорожденных ребенка, рожденных женщинами 18-40 лет с отягощенным (I гр. - 77,9%) и благоприятным (II гр. - 22,1%) инфекционным анамнезом во время беременности. Материал для исследования - пуповинная кровь, в которой с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) определяли IgG-антитела к 8 УПБ: S.aureus, S.epidermidis, S.pneumoniae, P.aerugonosa, E.coli, P.vulgaris, H.influenzae и K.pneumoniae.
Результаты: диапазон средних значений антител к УПБ составил 36,5-60,6 у.е. у всех обследованных новорожденных. При этом у детей I группы их значения были ниже (41,3-57,2 у.е.), чем во II (50,3-64,7 у.е.). В I группе новорожденных с неблагоприятным инфекционным анамнезомотмечались более низкие значения IgG-антитела к S. pneumoniaeи H. influenzae вне зависимости от локализации инфекционного процесса у их матерей во время беременности, по сравнению с детьмиП группы (р<0,05), особенно рожденных женщинами в возрасте старше 25 лет (р<0,05).
Выводы: наличие инфекционных заболеваний у женщин старше 25 лет во время беременности, может рассматриваться как фактор риска, что диктует необходимость проведения комплекса лечебно-диагностических и профилактических мероприятий с целью предупреждения развития инфекционных заболеваний, вызванных УПБ у их детей.
Ключевые слова: новорожденные; беременные; инфекционные заболевания; трансплацентарный адаптивный иммунитет; антитела.
An.A. Savisko1, M.P. Kostinov2, G.G. Harseeva1, A.A. Savisko1, A.D. Shmitko2,
N.E. Yastrebova2, I.V. Podgorniy1
INDICATORS OF ADAPTIVE IMMUNITY TO OPPORTUNISTIC BACTERIA IN NEWBORNS
1Rostov State Medical University, The Department propaedeutics childhood diseases, Department of Microbiology and Virology №2, Department of Obstetrics and Gynecology, №2. 29 lane Nakhichevan, Rostov-on-Don, 344022, Russia. E-mail: [email protected]
2Research Institute of Vaccines and Sera. II Mechnikov, Laboratory vaccinal and immunotherapy of allergic diseases. 5a Maly Kozenyi lane, Moscow, 105064, Russia.
Purpose: to evaluate the performance of transplacental adaptive immunity to opportunistic bacteria in newborns.
Materials and Methods: the study involved 682 newborn baby born to women 18-44 years old with various infectious anamnesis: weighed down (I group) and favorable infectious anamnesis (II group). Material for research is umbilical cord blood in that by linked immunosorbent analysis were determined IgG-antibody to opportunistic bacteria: S.aureus, S.epidermidis, S.pneumoniae, P.aerugonosa, E.coli, P.vulgaris, H.influenzae and K.pneumoniae.
Results: it is set that a range of mean values of antibodies to opportunistic bacteria was 36,5-60,6 conventional units at all 682 inspected. Thus, for the children of I of group their range hesitated within the limits of 41,3-57,2 conventional units, in II to the group - 50,3-64,7 conventional units. Lower values detected antibodies only to two opportunisticbacteria -S. pneumoniae and H. influenzae in children in I group as compared to group II infants. And their level was lower in the umbilical cord blood of newborns born to women over the age of 25-30 years.
Summary: the presence of infectious and inflammatory diseases in women during pregnancy, especially older than 25 years can be considered as a risk factor. This fact substantiates the need for the complex medical-diagnostic and preventive measures for the prevention of controlled infectious diseases caused by opportunistic bacteria in the future in children.
Keywords: newborn; pregnant; infectious diseases; transplacental adaptive immunity; antibody.
Введение Актуальность проблемы
При развитии инфекционных и соматических заболеваний происходит нарушение биологического равновесия между человеческим организмом и представителями условно-патогенных бактерии (УПБ) [1,2], которые у здоровых людейстрого адаптированы друг к другу [3,4,5]. Данные заболевания характеризуются полиморфизмом клинических проявлений, связанным не столько с эпидемической ситуацией, сколько с возрастом и состоянием защитных сил организма человека [2,3,6]. Превалирование стертой клинической картины, отсутствие специфической патогно-моничной симптоматики, многоочаговость инфицирования в значительной степени затрудняют диагностику заболеваний, способствуя формированию хронизации инфекции, что и обусловливает медико-социальную актуальность и значимость заболеваний, вызванных УПБ [1,7,8]. Бактерии данной группы характеризуются выраженной неоднородностью, являясь, с одной стороны, представителями транзиторной нормальной микрофлоры, а с другой - возбудителями различных инфекционно-воспалительных заболеваний [9,10,11]. Так, в отличие от инфекций, возбудителями которых являются патогенные микроорганизмы, при заболеваниях, вызванных УПБ, необходимо подтвердить их патогенный потенциал [11,12], свидетельствующий об их этиологической значимости [13,14].Первостепенное значение в диагностике данных инфекций приобретает мониторинг показателей специфического иммунитета к возбудителям УПБ, который может быть важным дополнительным диагностическим критерием [15].
Цель исследования - оценка показателей трансплацентарного адаптивного иммунитета к условно-патогенным бактерияму новорожденных детей.
Материалы и методы
Проведено обследование 682 новорожденных детей, рожденных женщинами активного репродуктивного возраста (18 - 40 лет), в МБУЗ «Родильный дом №2»
г. Ростова-на-Дону. Исследование проводили с согласия женщин. Материалом для исследования явилась пупо-винная кровь, в которой с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) определяли IgG-антитела к белкам наружной мембраны следующих УПБ: S.aureus, S.epidermidis, S.pneumoniae, P.aerugonosa, E.coli, P.vulgaris,H.influenzae и K.pneumoniae. Для проведения ИФА использовали скри-нинговую иммуноферментную тест-систему для определения антител к перечисленным видам УПБ (ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова) [15]. Для определения антител использовали препараты клеточных стенок, обладающих видовой специфичностью. ИФА проводили в стандартных условиях в 96-луночных полистироловых планшетах (Медполимер, Россия), оптическую плотность (ОП) растворов в каждой ячейке измеряли с помощью многоканального автоматического фотометра «TitertechMultiscanMC» фирмы FlowLaboratories (Англия).
Статистическую обработку результатов проводили с использованием статистических пакетов «MicrosoftExel 2000» и «Statistica» для WindowsXP с использованием параметрических и непараметрических методов.
Результаты и их обсуждение
У всех 682 обследованных новорожденных значения антител к вышеуказанным УПБ в пуповинной крови находились в диапазоне от 36,5 до 60,6 у.е.(табл.1).
В дальнейшем представляло интерес выявить различия в зависимости от детального анализа инфекционного анамнеза матерей обследованных новорожденных, на основании чего были выделены две группы. В состав I группы вошли новорожденные (531 чел. - 77,9%), у матерей которых были верифицированы различные инфекцион-но-воспалительные заболевания во время беременности. В зависимости от локализации инфекционно-воспали-тельного процесса в данной клинической группе были выделены три подгруппы: IA-подгруппа (16,7%) - дети, рожденные женщинами, перенесшими один или несколько эпизодов ОРЗ с развитием острых или обострения хронических очагов инфекции со стороны ЛОР-органов; Ш-подгруппа (41,7%) - дети, рожденные женщинами с
наличием острых или обострения хронических инфекци-онно-воспалительных заболеваний со стороны мочевой системы и урогенитального тракта; 1В-подгруппа (19,4%) - дети, рожденные женщинами, у которых одновременно были зарегистрированы патологические изменения со стороны органов дыхательной системы, мочевого и урогени-тального тракта во время беременности.Сравнивая средние значения показателей трансплацентарных антител к УПБ в двух клинических группах установлено, что у детей I группы их диапазон колебался в пределах 41,3-57,2 у.е.,
во II группе был несколько выше и составил 50,3-64,7 у.е.
При этом показатели адаптивного иммунитета имели достоверные различия в двух исследуемых группах. Так, у новорожденных I группы, матери которых перенесли различные инфекционно-воспалительные заболевания во время беременности, значения ^О-антител к 8.рпеишошае и НлпАиепгае были достоверно ниже по сравнению с новорожденными II группы с благоприятным инфекционным анамнезом (табл. 1). В отношении других представителей УПБ достоверных различий выявить не удалось.
Таблица 1
Средние значения IgG-антител (у.е.) к возбудителям УПБ у новорожденных детей в зависимости от
инфекционного анамнеза их матерей
Клинические группы Всего (n-682 чел) I группа (n-531 чел) II группа (n-151)
УПБ
S.aureus 60,6±0,83 57,2±1,68 54,6±2,68
S.epidermidis 57,0±0,64 55,01±1,49 57,9±2,15
S.pneumoniae 47,9±0,67 47,8±1,05* 55,3±1,50
P.aerugonosa 52,8±1,01 52,8±2,05 53,6±2,18
E.coli 41,6±0,58 46,9±1,63 50,3±2,29
P.vulgaris 39,2±0,86 46,1±2,95 50,5±4,60
H.influenzae 36,5±0,55 41,3±1,61* 50,6±2,66
K.pneumoniae 46,7±1,09 56,4±3,22 64,7±5,92
Примечание: * - достоверность различий (р<0,05) между аналогичными показателями у детей I и II групп.
Кроме того, при более детальном анализе анамнестических данных детей I группы были выявлены различия уровней антител в зависимости от локализацииперене-сенного воспалительного процесса у их матерей во время беременности.
Так у детей 1А-подгруппы (115 чел. - 21,7%), матери которых перенесли во время беременности ОРЗ с развитием бактериальных осложнений респираторного тракта, средние значения антител к P. vulgaris (34,9±3,65у.е.), H. influenzae (37,5±4,78у.е.), S. pneumoniae (41,4±2,25у.е.) и S. epidermidis (47,8±2,99у.е.) были ниже (р<0,05) по сравнению с аналогичными показателями у детей II группы (табл. 3). В 1Б-подгруппе детей (284 чел. - 53,5%), рожденных женщинами с инфекционной патологией органов мо-
чеполовой системы, более низкие значения IgG-антител (р<0,05) верифицировались к H. influenzae(42,7±1,80у.е.) по сравнению с детьми II группы, рожденными с благоприятным инфекционным анамнезом (50,6±2,66у.е.) (табл. 3). При сравнении средних значений уровней антител в IB-подгруппе детей (132 чел. - 24,8%) у матерей которых развивались инфекционные заболевания со стороны респираторного и урогенитального трактов во время беременности, выявлены более низкие значения антител такжек H. influenzae(41,4±3,19у.е.) и S. pneumoniae (47,0±2,21у.е.), чем у детей II группы (50,6±2,66 и 55,3±1,50 соответственно) (табл. 2). При определении специфических IgG-антител к другим УПБ достоверных различий в двух исследованных клинических группах детей не выявлено.
Таблица 2
Средние значения IgG-антител (у.е.) к возбудителям УПБ у новорожденных детей в зависимости от
инфекционного анамнеза их матерей
Клинические группы IA-подгруппа (n-115 чел.) IБ-подгруппа (n-284 чел.) IB-подгруппа (n-132 чел.) II группа (n-151)
УПБ
S.aureus 48,1±2,79 60,8±2,40 57,4±3,26 54,6±2,68
S.epidermidis 47,8±2,99* 58,3±2,06 54,2±2,85 57,9±2,15
S.pneumoniae 41,4±2,25* 55,1±1,92 47,0±2,21* 55,3±1,50
P.aerugonosa 53,3±5,09 58,3±2,74 49,7±3,63 53,6±2,18
E.coli 44,8±2,99 50,4±2,35 44,8±2,87 50,3±2,29
P.vulgaris 34,9±3,65* 53,7±4,97 39,2±3,00 50,5±4,60
H.influenzae 37,5±4,78* 42,7±1,80* 41,4±3,19* 50,6±2,66
K.pneumoniae 47,0±6,81 62,2±4,61 52,1±5,66 64,7±5,92
Примечание: * - достоверность различий (р<0,05) между аналогичными показателями у детей !А-, !Б -, Ш-подгруппы и II группы.
Помимо вышеизложенного, было проведено сравнение показателей трансплацентарного адаптивного иммунитета в I и II клинических группах в зависимости от возраста матерей обследованных детей. В каждой из них выделены три возрастные группы: в 1 группу вошли дети, рожденные женщинами 18-24 лет, во 2 - 25-30 лет, в 3 группу - 31-44 лет. Следует отметить, что закономерных возрастных различий уровней антител к УПБ выявить не удалось, за исключением S. pneumoniae и H. influenzae. Так, достоверные различия между показателями средних значений антител к S. pneumoniae у новорожденных I и II группы были выявлены у детей, рожденных женщинами 25-30 лет (I гр.- 46,9 у.е.±1,60 ; II гр.- 57,0 у.е.±2,66)и 31-44 лет (I гр.- 46,4 у.е. ±1,92; II гр.- 56,5 у.е.±2,90, р<0,05).
Аналогичные данные были получены и в отношении H. influenzae. У детей I клинической группы, рожденных женщинами с различными инфекционными заболеваниями во время беременности, наблюдали более низкие значения противогемофильных антител по сравнению с детьми II группы, рожденными женщинами 25-30 лет (I гр.- 43,9 у.е.±2,95; II гр.- 60,0у.е. ±5,25, р<0,05) и 31-44 лет (I гр.- 37,6 у.е.±2,63; II гр.- 49,6 у.е.±2,21, р<0,05).
Таким образом, в ходе исследования было установлено, что уровни трансплацентарных IgG-антител к S. pneumoniae иН. influenzae имеют различия не только в зависимости от отягощенности инфекционного анамнеза, но и от возраста матерей. У детей, рожденных женщинами, перенесшими различные микробно-воспалительные заболевания во время беременности, выявлены более низкие уровни противопневмококковых и противогимо-фильных антител. Более низкие их значения были зарегистрированы у женщин старше 25 лет. Это свидетельствует о повышении риска развития гемофильной и пневмококковой инфекций у детей, рожденных женщинами указанного возраста. Полученные данные позволяют мо-
нивировать необходимость проведения дополнительной вакцинации женщинам старше 25-30 лет на этапах планирования беременности. Большое значение имеет и проти-воинфекционная профилактика женщины, прежде всего старше 25-30 лет, в период подготовки к беременности, заключающаяся в санации хронических очагов инфекции, прежде всего со стороны Лор-органов и мочеполовой системы, проведения бактериологического обследования и определение уровня антибактериальных антител к УПБ. Это позволит значительно минимизировать риски развития инфекционно-воспалительных заболеваний у женщин в этот период и в последующем у их новорожденных детей. Возникает необходимо рассмотреть вопрос о внесение дополнений в схему вакцинации детей грудного возраста, которая сегодня является обязательной против пневмококковой инфекции, рожденных женщинами с отягощенным инфекционным анамнезом, расцениваемых как группа риска развития данных инфекций.
Выводы
1. Наличие инфекционно-воспалительных заболеваний у женщин во время беременности, прежде всего старше 25 лет, может рассматриваться как фактор риска, что диктует необходимость проведения комплекса лечебно-диагностических и профилактических мероприя-тийс целью предупреждения развития управляемых инфекционных заболеваний, вызванных УПБ у их детей.
2. Определение трансплацентарных антител к возбудителям превмотропных бактериальных управляемых инфекций может быть использовано для выделения групп риска, а низкое их содержание в пуповинной крови расценено как ранний прогностический маркер развития данных инфекций у детей грудного возраста.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бондаренко В.М. Роль условно-патогенных бактерий при хронических воспалительных процессах различной локализации. -Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2011. - 88 с.
2. Парфенов А.И., Бондаренко В.М. Регуляция соотношения между нормальной и патологической микрофлорой кишечника // ConsiliumMedicum. 2009. №2. С. 67-70.
3. Tlaskalova-Hogenova Н., Stepankova R., Hudcovic T. et al. Commensal bacteria (normal microflora), mucosal immunity and chronic inflammatory and autoimmune diseases. Immunol. Lett. 2004, 93 (2-3): С. 97-108.
4. Карханин Н.П., Абдалкин М.Е., Абдалкина Е.Н., Билёв А.Е., Би-лёва Н.А. Условно-патогенные микробы и «неинфекционные» болезни. В журн. Успехи современного естествознания: Материалы IV общероссийской научнойконференции «Современные проблемы науки и образования». М.; 2009; №2: С. 40-41.
5. Анганова Е.В., Чемезова Н.Н., Ермолаева Н.В., Распопина Л.А. Характеристика условно-патогенных возбудителей острых кишечных инфекций. Журн. инфекционной патологии. 2010; 17, (1): С. 12-13.
6. Бондаренко В.М. Роль условно-патогенных бактерий кишечника в полиорганной патологии человека. М.- Тверь: Триада, 2007. 64 с.
7. Бондаренко В.М. Роль дисфункции кишечного барьера в поддержании хронического воспалительного процесса различной локализации // Журн. микробиолю 2010. №1. С. 92-100.
8. Balzan S., Quadros C.A., Cleva R.B. et al. Bacterial translocation: Overview of mechanisms and clinical impact. J. Gastroenterol.
Hepatol. 2007, 22 (4): 464-471.
9. Липова Е.В., Витвицкая Ю.Г. Особенности клинического течения урогенитальных инфекций у женщин на современном этапе// Вестник последипломного медицинского образования. -2009.-№1. - С.15-16.
10. Анганова Е.В., Чемезова Н.Н., Ермолаева Н.В., Распопина Л.А. Характеристика условно-патогенных возбудителей острых кишечных инфекций // Журн. инфекционной патологии.-2010.-Т.17.-№1-2. - С. 12-13.
11. Нилова Л. Ю. Характеристика условно-патогенных микроорганизмов, выделенных при диагностике дисбактериоза толстого кишечника: диссертация ... кандидата медицинских наук:.-Санкт-Петербург, 2009.- 129 с.
12. Потехин O.E., Малышев B.C. Современное состояние иммунологической диагностики аутоиммунных заболеваний // Иммунопатология, аллергология, инфектология.- 2000.-№1.- С. 44-49.
13. Липова Е.В., Болдырева М.Н., Витвицкая Ю.Г. Новый способ выявления дисбаланса биоты урогенитального тракта // Вестник последипломного медицинского образования. - 2009.-№1.-с.47-48.
14. Липова Е.В., Витвицкая Ю.Г. Возможные причины диагностических ошибок при обследовании женщин на урогенитальные инфекции// Вестник последипломного медицинского образования. - 2009.-№1. - с.22-23.
15. Ястребова Н.Е. Результаты мониторинга антибактериальных и противотканевых антител у здоровых и больных различными заболеваниями людей. Журнал микробиологии. 2007; (3): 42-47.
ПОСТУПИЛА: 15.07.2015
