CC BY
14
10. O'Donnell, J. Elevated plasma factor VIII levels - a novel risk factor for venous thromboembolism / J. O'Donnell, M. Laffan // Clin. Lab. - 2001. - Vol. 47 (1-2). - Р. 1-6.
Куртов Игорь Валентинович, кандидат медицинских наук, доцент кафедры госпитальной терапии, заведующий отделением гематологии клиники госпитальной терапии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89. тел. (846) 241-91-50, тел./факс (846) 241-92-85, е-шаП: sam-med@mail.ru.
Косякова Юлия Анатольевна, кандидат медицинских наук, ассистент кафедры госпитальной терапии с курсом трансфузиологии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоц-развития России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел. (846) 241-91-50, тел./факс (846) 241-9285, е-таП: Kossyyy1@yandex.ru.
Гриценко Тарас Алексеевич, врач гематологического отделения клиники госпитальной терапии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел. (846) 241-91-50, тел./факс (846) 241-92-85, е-таП: taras876@mail.ru.
Берман Юлия Олеговна, врач гематологического отделения клиники госпитальной терапии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 443099,
г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел. (846) 241-91-50, тел./факс (846) 241-92-85, е-mail: berman.yuliya@mail.ru.
Никулина Наталья Алексеевна, врач гематологического отделения клиники госпитальной терапии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел. (846) 241-91-50. тел./факс (846) 241-92-85.
Нетроголова Любовь Александровна, врач гематологического отделения клиники госпитальной терапии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел. (846) 241-91-50, тел./факс (846) 241-92-85, е-mail: пеМ2345@у andex.ru.
Давыдкин Игорь Леонидович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой госпитальной терапии с курсом трансфузиологии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел. (846) 264-79-72, тел./факс (846) 241-92-85, е-mail: Dagi2006@rambler.ru.
Осадчук Алексей Михайлович, доктор медицинских наук, профессор кафедры госпитальной терапии с курсом трансфузиологии ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоц-развития России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел. (846) 264-79-72, тел./факс (846) 241-9285, е-mail: maxlife2004@mail.ru.
УДК 616.155.392.8-036; 616-091.818 © Д. А. Лунев, Е.Г. Овсянникова, К. Д. Капланов, 2011
Д.А. Лунев1, Е.Г. Овсянникова1, К.Д. Капланов2 ПОКАЗАТЕЛЬ КОНЦЕНТРАЦИИ ИНДУКТОРА АПОПТОЗА БЕЛКА Р53 У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОЛЕЙКОЗОМ НА ТЕРАПИИ ГЛИВЕКОМ
1ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России 2ГБУЗ «Волгоградский областной клинический онкологический диспансер № 1»
Представлены результаты концентрации индуктора апоптоза белка р53 у 60 больных хроническим мие-лолейкозом (ХМЛ) в зависимости от всех видов ответа (оптимальный, субоптимальный, неудача терапии) получавших терапию гливеком.
Ключевые слова: хронический миелолейкоз, гливек, апоптоз, р53.
D.A. Lunyev, E.G. Ovsyannikova, K.D. Kaplanov THE CONCENTRATION INDICATORS OF APOPTOSIS PROTEIN P53 IN PATIENTS WITH CHRONIC MYELOID LEUKEMIA TO THERAPY OF GLEEVEC
The article presents the results of the concentration of inducer of apoptosis protein p53 in 60 patients with chronic myeloid leukemia (CML) according to all types of response (optimal, suboptimal, the failure of therapy), treated with gleevec.
Key words: chronic myeloid leukemia, gleevec, apoptosis, p53.
Настоящей революцией в терапии хронического миелолейкоза (ХМЛ) в конце прошлого столетия благодаря глубокому изучению патогенеза болезни стало открытие препарата с антитирозинки-назной активностью - гливека, который позволил получить полные гематологические, цитогенетические, молекулярные ответы у большого количества больных [3, 4, 7].
Однако, несмотря на полученные положительные результаты, у некоторых больных ХМЛ возникает резистентность к гливеку. Это может быть связано с мутацией BCR-ABL гена, обладающего антиапоптотическим действием на опухолевые клетки, и появлением дополнительных клональных изменений, обладающих высокой пролиферативной активностью, угнетением апоптоза [1, 5, 7, 8, 11].
Известно, что подавление онкосупрессорной функции ключевого гена р53, который принимает участие в развитии митохондриального пути апоптотической программы, способствует возникновению опухолевых заболеваний (в частности, ХМЛ), а также развитию резистентности к химиотерапии [1, 2, 6, 9].
Цель: определить клинико-диагностическое значение концентрации индуктора апоптоза белка р53 в сыворотке крови у больных ХМЛ, получающих терапию гливеком.
Материалы и методы. В исследование вошли 60 больных ХМЛ, получающих терапию ингибитором тирозинкиназы первого поколения - иматинибом мезилатом (гливек), исключены больные с сопутствующими заболеваниями, при которых может изменяться концентрация белка р53.
Средний возраст больных - 52,57 ± 1,59 лет, продолжительность предшествующей гливеку терапии составляла от 1 месяца до 9 лет. Анализ эффективности проводимой терапии оценивался нами согласно рекомендациям Европейского общества по изучению хронического миелолейкоза European Leukemia Net (ELN-2009) [12].
Статистическая обработка полученных данных проводилась с помощью статистической программы SPSS Statistics 17.0. Анализ данных включал в себя среднее значение, ошибку средней арифметической. Для определения достоверности показателей использовали двусторонний Стьюдента (t). Проверка выборки на нормальность распределения проводилась по критериям Колмогорова-Смирнова с поправкой по Лилли-Фору.
Со всеми больными проводились молекулярно-генетические исследования крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени - количественная оценка экспрессии химерного гена BCR-ABL типа р210; исследования костного мозга: цитологические (миелограмма), цитохимические, цитогенетические - определение транслокации t (9; 22) (q34; q11), молекулярноцитогенетические - флуоресцентная in situ гибридизация хромосом (FISH) с ДНК зондом к слитному гену BCR-ABL.
Концентрацию белка р53 определяли с помощью иммуноферментного набора для количественного определения протеина p53 в человеческой сыворотке фирмы Bender MedSystems (Австрия). Использовалась аппаратура для иммуноферментного анализа (Universal Microplate Reader (США), Auto Strip Waiher (США), Vortemp, Bio Tek Instruments, Inc (США)).
В контрольную группу вошли 25 здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту с исследуемой группой больных ХМЛ. Среднее значение концентрации р53 у здоровых лиц составило -1,16 ± 0,18 Е/мл, что сопоставимо с данными сопроводительной аннотации к набору реагентов и принято за норму.
Ввиду того, что работа является комплексной (первые фрагменты по изучению концентрации белка р53 были выполнены А.К. Сарсенгалиевой [10] - анализ больных ХМЛ с 0 до 18 месяцев терапии гливеком), мы проанализировали значения концентрации р53 у больных ХМЛ с 18 до 36 месяцев лечения гливеком.
Отобранные для анализа больные были разделены на 3 группы: группа 1 (п = 24) - неудача терапии, группа 2 (п = 18) - оптимальный ответ, группа 3 (п = 18) - субоптимальный ответ (по критериям БЬК-2009 на 18 месяцев терапии гливеком).
Результаты исследования. Определены средние значения концентрации белка р53 в сыворотке крови для каждой группы больных ХМЛ в нескольких контрольных точках (18, 24, 30, 36 месяцев от начала терапии гливеком). Распределение значений представлено в таблицах 1, 2, 3.
Таблица 1
Средние значения концентрации белка р53 у больных ХМЛ группы 1 ______(неудача терапии к 18 месяцам терапии гливеком) (M±m)_________________________
Показатель Контрольная группа, п = 25 18 месяцев от начала терапии гливеком, п = 24 24 месяца от начала терапии гливеком, п = 24 30 месяцев от начала терапии гливеком, п = 23 36 месяцев от начала терапии гливеком, п = 21
Концентрация р53 в сыворотке крови (Е/мл) 1,16 ± 0,18 1,81 ± 0,14 (р < 0,005) 1,93 ± 0,21 (р < 0,01) (р1 > 0,05) 1,78 ± 0,21 (р < 0,05) (р1 > 0,05) (р2 > 0,05) 1,74 ± 0,13 (р < 0,01) (р1 > 0,05) (р2 > 0,05) (р3 > 0,05)
Примечание: Р — достоверность различия показателей по сравнению с контрольной группой;
Р1 — достоверность различия показателей по сравнению с 18 месяцами терапии гливеком;
Р2 — достоверность различия показателей по сравнению с 24 месяцами терапии гливеком;
Р3 — достоверность различия показателей по сравнению с 30 месяцами терапии гливеком.
Из представленной выше таблицы видно, что в группе 1 (неудача терапии) наблюдается достоверное увеличение концентрации белка р53 по сравнению с контрольной группой (р < 0,005; р < 0,05; р < 0,01). Следовательно, у данных больных повышение р53 свидетельствует как о наличии РЬ+ клона, так и о способности организма запускать апоптоз через белок р53, что способствует при пролонгации терапии гливеком достижению у больных полного цитогенетического ответа (ПЦО) (ПЦО к 18 месяцам терапии не наблюдается, через 36 месяцев ПЦО выявлен у 19 % больных) и большого/полного молекулярного ответов (БМО/ПМО) (БМО/ПМО к 18 месяцам терапии не наблюдается, через 36 месяцев БМО/ПМО отмечается у 23,8 % больных).
В таблице 2 приведены данные по концентрации индуктора апоптоза белка р53 в сыворотке крови у больных группы 2 с оптимальным ответом.
Было выявлено, что к 18 и 24 месяцам от начала терапии гливеком значения белка р53 не отличаются от показателя р53 контрольной группы (р > 0,05). Однако в более поздние сроки от начала терапии гливеком наблюдается повышение концентрации белка р53 до 3,72 Е/мл в 30 месяцев и до 3,39 Е/мл в 36 месяцев (р < 0,001).
Таблица 2
Средние значения концентрации белка р53 у больных ХМЛ группы 2
(оптимальный ответ к 18 месяцам терапии гливеком) (M±m)______________________
Показатель Контрольная группа п = 25 18 месяцев от начала терапии гливеком, п = 18 24 месяца от начала терапии гливеком, п = 18 30 месяцев от начала терапии гливеком, п = 18 36 месяцев от начала терапии гливеком, п = 18
Концентрация р53 в сыворотке крови (Е/мл) 1,16 ± 0,18 1,29 ± 0,10 (р > 0,05) 1,08 ± 0,09 (р > 0,05) (р1 > 0,05) 3,72 ± 0,28 (р < 0,001) (р1 < 0,001) (р2 < 0,001) 3,39 ± 0,15 (р < 0,001) (р1 < 0,001) (р2 < 0,001) (р3 > 0,05)
Примечание: Р — достоверность различия показателей по сравнению с контрольной группой;
Р1 — достоверность различия показателей по сравнению с 18 месяцами терапии гливеком; Р2 — достоверность различия показателей по сравнению с 24 месяцами терапии гливеком; Р3 — достоверность различия показателей по сравнению с 30 месяцами терапии гливеком.
Можно считать, что у больных ХМЛ через 18-36 месяцев терапии гливеком нормальные значения концентрации белка р53 на 18 и 24 месяца терапии свидетельствуют об элиминации опухолевого клона. Увеличение концентрации белка р53 к 30 и 36 месяцам происходит из-за возникновения вторичной резистентности у ряда больных в связи с утратой цитогенетических и молекулярных ответов. Таким образом, белок р53 отражает патогенез ХМЛ (при отсутствии РЬ клона нет необходимости в активации апоптоза, возврат РЬ клона стимулирует ответную реакцию организма: запуск апоптоза через белок р53).
Мы проанализировали значения концентрации белка р53 в сыворотке крови у больных ХМЛ группы 3 (субоптимальный ответ). Полученные значения продемонстрированы в таблице 3.
Таблица 3
Средние значения концентрации белка р53 у больных ХМЛ группы 3 (субоптимальный ответ к 18 месяцам терапии гливеком) (M±m)
Показатель Контрольная группа, п = 18 18 месяцев от начала терапии гливеком, п = 18 24 месяца от начала терапии гливеком, п = 18 30 месяцев от начала терапии гливеком, п = 18 36 месяцев от начала терапии гливеком, п = 18
Концентрация р53 в сыворотке крови (Е/мл) 1,16 ± 0,18 0,99 ± 0,05 (р > 0,05) 1,54 ± 0,12 (р < 0,05) (р1 < 0,001) 1,68 ± 0,15 (р < 0,05) (р1 < 0,001) (р2 > 0,05) 0,69 ± 0,10 (р < 0,01) (р1 < 0,001) (р2 < 0,001) (р3 < 0,001)
Примечание: Р - достоверность различия показателей по сравнению с контрольной группой;
Р1 — достоверность различия показателей по сравнению с 18 месяцами терапии гливеком;
Р2 - достоверность различия показателей по сравнению с 24 месяцами терапии гливеком;
Р3 — достоверность различия показателей по сравнению с 30 месяцами терапии гливеком.
Больные группы субоптимального ответа являются самыми непредсказуемыми по дальнейшим результатам (одни больные достигают большого молекулярного ответа, другие могут потерять все виды генетических и молекулярных ответов). Из представленных в таблице данных следует, что концентрация белка р53 ведет себя лабильно. Самым настораживающим фактом по неблагоприятному прогнозу является низкая концентрация белка р53 в этой группе при наличии РЬ клона (отсутствует необходимый запуск апоптоза через белок р53).
Заключение. Проведенный анализ показал практическую значимость выполненного определения концентрации белка р53. Доказано, что апоптоз через белок р53 у больных ХМЛ в большинстве случаев работает по требованию. Соответственно, есть РЬ клон - программа апоптоза работает, нет РЬ клона - нет необходимости усиления апоптоза через белок р53.
Список литературы
1. Абелев, Г. И. Клиническая онкогематология : руководство для врачей / Г. И. Абелев, Н. Е. Андреева, Б. В. Афанасьев и др.; под ред. М. А. Волковой. - М. : Медицина, 2001. - 576 с.
2. Владимирская, Е. Б. Механизмы апоптотической смерти клеток / Е. Б. Владимирская // Гематология и трансфузиология. - 2002. - Т. 47. - № 2. - С. 35-40.
3. Волкова, М. А. Хронический миелолейкоз / М. А. Волкова // Клиническая онкогематология : руководство для врачей / под ред. М. А. Волковой. - М. : Медицина, 2001. - С. 237-258.
4. Домрачева, Е. В. Цитогенетика хронического миелолейкоза / Е. В. Домрачева, А. В. Захарова, Е. А. Асеева // Гематология и трансфузиология. - 2005. - Т. 50. - № 2. - С. 44-49.
5. Зарицкий, А. Ю. Факторы прогноза при терапии иматиниба мезилатом у больных в хронической фазе РЬ-позитивного хронического миелолейкоза : данные многоцентрового нерандомизированного исследования в России / А. Ю. Зарицкий, Е. Г. Ломаиа, О. Ю. Виноградова и др. // Терапевтический архив. - 2007. - № 8. - С. 17-22.
6. Иванова, А. А. Влияние тимических пептидов на апоптоз клеток крови человека А. А. Иванова, В. И. Дейгин, Е. Б. Владимирская и др. // Гематология и трансфузиология. - 2000. -Т. 45. - № 4. - С. 9-10.
7. Кузнецов, С. В. Новые подходы к лечению хронического миелолейкоза / С. В. Кузнецов // Гематология и трансфузиология. - 2007. - Т. 52. - № 2. - С. 41-46.
8. Петухов, В. Е. Роль Fas-опосредованного апоптоза в реализации противоопухолевого эффекта а-интерферона при хроническом миелолейкозе / В. Е. Петухов // Гематология и трансфузиология. - 2000. - Т. 45. - № 4. - С. 29-33.
9. Райхлин, Н. Т. Регуляция и проявления апоптоза в физиологических условиях и в опухолях / Н. Т. Райхлин, А. Н. Райхлин // Вопросы онкологии. - 2002. - Т. 48. - № 2. - С. 159-171.
10. Сарсенгалиева, А. К. Значение маркера апоптоза Р53 у больных хроническим миелолейко-зом в диагностике и прогнозировании стандартных ответов на терапию гливеком : автореф. дис. ... канд. мед. наук / А. К. Сарсенгалиева. - Астрахань, 2010. - 23 с.
11. Современная диагностика и лечение хронического миелолейкоза : учеб. пос. / Л. В. Закля-кова, Е. Г. Овсянникова, А. К. Сарсенгалиева - Астрахань : АГМА, 2010. - 65 с.
12. Baccarani, M. Chronic myeloid leukemia: an update of concepts and management recommendations of European LeukemiaNet / M. Baccarani, J. Cortes, F. Pane et al. // J. Clin. Oncol. - 2009. -Vol. 27 (35). - Р. 6041-6051.
Лунев Дмитрий Александрович, ассистент кафедры факультетской терапии и профессиональных болезней с курсом последипломного образования ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел: (8512) 26-07-10, е-таіі: lunev-agma@mail.ru
Овсянникова Елена Георгиевна, кандидат медицинских наук, докторант кафедры факультетской терапии и профессиональных болезней с курсом последипломного образования ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская,
д. 121, тел: (8512) 26-07-10, е-таіі: elenaagma@mail.ru.
Капланов Камил Даниялович, кандидат медицинских наук, заведующий отделением гематологии ГБУЗ «Волгоградский областной клинический онкологический диспансер № 1», Россия, 400138, г. Волгоград, ул. Землячки, д. 78.
УДК б1б. 126-0S9 © О.В. Петрова, 2011
О.В. Петрова ДИНАМИКА ФЕРРИТИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ, ОПЕРИРОВАННЫХ ПО ПОВОДУ ИНФЕКЦИОННОГО ЭНДОКАРДИТА
ФГБУ «Федеральный центр сердечно-сосудистой хирургии» Минздравсоцразвития России,
г. Астрахань
Изучено содержание ферритина в сыворотке крови больных, оперированных по поводу инфекционного эндокардита. Показано, что ферритин отражает степень активности инфекционного эндокардита. Динамическое наблюдение за уровнем ферритина у пациентов с инфекционным эндокардитом позволяет прогнозировать исход лечения и состояние пациентов в послеоперационном периоде.
Ключевые слова: ферритин, белки острой фазы, инфекционный эндокардит.
