ПОИСК НОВЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ-АНТАГОНИСТОВ ГАЛЛОВЫХ НЕМАТОД Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

ПОИСК НОВЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ -АНТАГОНИСТОВ ГАЛЛОВЫХ НЕМАТОД

Лычагина C.B., Конрат АЛ., Мигунова В Д.

ВНИИП - филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН

Введение. В современных технологиях выращивания и защиты сельскохозяйственных культур от различных вредных организмов все больше внимание уделяется биоагентам, что является экологически оправданным способом защиты растений. К этому же подталкивает ужесточение экологических требований в сфере производства сельскохозяйственной продукции.

Все больше научных публикаций посвященны исследованию роли бактерий как агентам биологического контроля популяционной численности личинок мелойдогин. Проблема борьбы с мелойдогинозом сельскохозяйственных культур является актуальной для многих стран. Сиддики и Щука [2] в опытах по применению бактерий отмечают снижение галлообразования на корнях томата при общем снижении численности личинок Meloidogyne javanica. Дованн [1] указывает на нематостатический эффект четырех штаммов Bacillus thuringiensis в отношении личинок Meloidogyne incognita.

Цель работы. Выделить новые микроорганизмы, проявляющие антагонизм в отношении галловых нематод.

Материалы и методы. В лабораторных условиях материалом для исследования служила популяция галловых нематод, полученная из корней растений Лазаревской ОСЗР ВНИИБЗР г. Сочи. Поддерживается популяция в фитобоксе на растениях томата, с которых получаем галлы с самками и оотеками, а также личинок.

Для выделения микроорганизмов с галл, срезали оотеки и извлекли самок. Оотека - это желатиноподобный яйцевой мешок, который самка формирует, откладывая яйца. На предметном стекле оотеку разделили скальпелем на части. Полученные частички оотек и извлеченных самок разложили по чашкам Петри на агаризированную среду LB для роста бактериальных колоний, и на среду Чапека - для роста грибов. По прошествии некоторого времени вокруг разложенных частичек выросли колонии микроорганизмов. В дальнейшем, путём многократных пересевов были выделены изоляты микроорганизмов в чистых культурах. Было получено несколько бактериальных изолятов и штамм хищного гриба, обладающий спонтанным ловушкообразованием в воде.

Объектом дальнейших исследований стали, выделенные из полученных образцов 2 изолята бактериальных культур. Первый формировал культуру белого цвета (№1), второй оранжевого (№2). Антагонистическую активность бактериальных изолятов определяли по влиянию их жидкой культуры (ЖК) на личинок галловых нематод.

Для получения необходимого количества личинок галловых нематод с галл, при помощи двух препаровальных игл отделили обнаруженные яйцевые мешки янтарно-бурого цвета и перенесли в чашку Петри с водой. Личинки начали выходить из оотек через 3 суток в течение двух недель. Собирали личинок пипеткой со дна чашки Петри в пробирку, без взмучивая. Суспензию личинок хранили в холодильной камере при t +6 +8° С, частично меняя воду каждые 4-5 дней.

Для получения ЖК-стерилизованную 925 среду (Langley, Kado, 1972) инокулировали выделеными бактериями для наращивания на качалке (190 об/мин., 29°С). Тест состоял из трёх вариантов в шести повторностях: 1-Контроль: чистая водопроводная вода, 2- ЖК бактерии №1, 3- ЖК бактерии №2. В ячейки внесли по 1мл водной суспензии личинок галловых нематод (100 экземпляров/мл). Накрыли стеклом и оставили на 24 часа.

Результаты и обсуждение. Через сутки личинки в ячейках контрольного варианта сохраняли подвижность, а в ячейках с бактериями не двигались. Провели промывку личинок. Для этого личинок пипеткой из ячеек перенесли в чашки Петри с чистой водой. На вторые сутки личинки во втором варианте опыта проявляли подвижность в 50%, а в третьем оставались обездвиженными. На четвертые сутки при осмотре личинок из варианта «Контроль» - оставались активными все 100%. В варианте «2» - 99% личинок восстановили подвижность, а в варианте «3» все 100% погибли.

Полученные данные позволяют предположить о наличии у выделенных бактериальных изолятов №1 и №2 антагонистических свойств. В отношении бактерии №1 - как нематостатическое, а №2 - нематицидное. Необходимо дальнейшее их изучение.

Очевидно, что в процессе выделения новых штаммов микроорганизмов, появятся новые возможности биологического контроля численности вредных организмов.

Литература: l.Dhawan S.C., Sarvjeet К., Aqbal S J. //Nematology.-2004.-Vol. 34(1).- P.98-99. 2.Siddiqui I.A., Shaukat S.S.//Phytopatolog.- 2002.- V. 150. -№ 8-9. 4.

Search for new microorganisms - antagonists of root-knot nematodes.

Lychagina S.V., Konrat A.N., Migunova V.D. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants.

Summary. Two bacterial strains were isolated from egg masses of root knot nematode. The first strain formed white colonies on agar medium. The second one formed orange colonies. All strains had antagonistic properties to larvae of root knot nematode.