CC BY
33
спермы, хирурги рекомендуют использовать ручное надавливание на промежность после мочеиспускания и эякуляции. Более того, у молодых пациентов секвестрация спермы или ослабление потока спермы могут вызывать нарушение фертильности. Эти послеоперационные осложнения все еще представляются как побочные результаты любого вида пластики луковичного отдела уретры. Применение сберегающих методик может оказаться эффективным для повышения качества жизни пациентов после оперативного лечения. В будущем все виды уретропластики должны быть более анатомичными и наименее инвазивны-ми, насколько это возможно.
Заключение
Реконструктивная уретральная хирургия требует технического совершенствования. Сохранение промежностных мышц и нервов является небольшим, но значимым этапом в улучшении хирургической техники реконструкции луковичного отдела уретры с использованием минимально инвазивного доступа. Более длительный период наблюдения за большой группой пациентов необходим, чтобы подтвердить наши первичные положительные результаты данной техники, которая сохраняет мышцы и нервы, участвующие в механизме изгнания мочи и спермы из луковичного отдела уретры.
Сведения об авторах статьи:
Жарикова Татьяна Михайловна - аспирант кафедры урологии лечебного факультета ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Адрес: 119435, г. Москва, ул. Б. Пироговская, 2, стр.1. E-mail: Tanyushaz@mail.ru. Газимиев Магомед Алхазурович - д.м.н., профессор кафедры урологии лечебного факультета ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Адрес: 119435, г. Москва, ул. Б. Пироговская, 2, стр.1. E-mail: gazimiev@yandex.ru. Безруков Евгений Алексеевич - д.м.н., профессор кафедры урологии лечебного факультета ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Адрес: 119435, г. Москва, ул. Б. Пироговская, 2, стр.1. E-mail: eabezrukov@rambler.ru. Греченков Антон Сергеевич - аспирант кафедры урологии лечебного факультета ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Адрес: 119435, г. Москва, ул. Б. Пироговская, 2, стр.1. E-mail: anton_grechenkov@mail.ru.
ЛИТЕРАТУРА
1. Bulbar urethroplasty using buccal mucosa grafts placed on the ventral, dorsal or lateral surface of the urethra: Are results affected by the surgical technique? / G Barbagli [et al.]// J Urol. - 2005. - Vol. 174. - P. 955-958.
2. Muscle-and nerve-sparing bulbar urethroplasty: a new technique/ G Barbagli [et al.] // Eur Urol. - 2008. - Vol. 54. - P. 335-343.
3. Long-term follow up of bulbar end-to-end anastomosis: a retrospective analysis of 153 patients in a single center experience / G. Barbagli [et al.] // J Urol. - 2007. - Vol.178. - P. 2470-2473.
4. Oral mucosa harvest: an overview of anatomic and biologic considerations / MR. Markiewicz [et al.] // EAU-EBU Update Series. -2007. - Vol. 5. - P. 179-187.
5. Bulbar urethroplasty with dorsal onlay buccal mucosal graft and fibrin glue / G. Barbagli [et al.] //Eur Urol. - 2006. - Vol. 50. - P. 467-474.
6. Yang, CC. Somatic innervation of the human bulbocavernosus muscle / C.C. Yang, W.E. Bradley //Clinical Neurophysiology. - 1999. -Vol. 110. - P. 412-418.
7. Cortical evoked responses from the perineal nerve / EM. Uchio [et al.] // J Urol. - 1999. - Vol.162. - P.1983-1986.
8. Yang, CC. Reflex innervation of the bulbocavernosus muscle / CC Yang, WE Bradley // BJU Int. - 2000. - Vol. 85. - P. 857-863.
9. Yucel, S. Neuroanatomy of the male urethra and perineum / S.Yucel, LS. Baskin // BJU Int. - 2003. - Vol. 92. - P. 624-630.
10. Barbagli G. Words of wisdom. Re: neuroanatomy of the male urethra and perineum // Eur Urol. - 2006. - Vol. 50. - P. 1367.
УДК 616.65-006.6-07:575.224 © Коллектив авторов, 2015
12 12 2 3
Г.Б. Кунсбаева ' , И.Р. Гилязова ' , Е.А. Климентова , А.А. Измайлов ,
Р.И. Сафиуллин3, Э.Х. Хасанов3, А.Т. Мустафин3, А.О. Папоян3, И.М. Султанов3, А.Ф. Иткулов3, В.Н. Павлов3, Э.К. Хуснутдинова1,2 ПОИСК МУТАЦИЙ В ГЕНЕ СИНДРОМА БЛУМА (БЬМ) У БОЛЬНЫХ РАКОМ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный университет», г. Уфа 2 ФГБУН «Институт биохимии и генетики» Уфимского научного центра РАН, г. Уфа 3ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа
Ген BLM кодирует белок, который относится к классу RecQ-хеликаз, участвует в поддержании стабильности генома и репарации ДНК. В случае гомозиготного носительства мутаций в гене BLM развивается редкое аутосомно-рецессивное заболевание - синдром Блума. Заболевание характеризуется высокой частотой разрывов и перестроек в хромосомах больного человека, у которого значительно повышается риск онкологического заболевания (лейкозы, лимфомы и карциномы). Обнаружено, что мутация Q548X в гене BLM связана с 6-кратным увеличением риска развития рака молочной железы в России, Белоруссии и Украине, но ее роль в этиологии РПЖ исследована недостаточно. С целью поиска мутаций в гене BLM нами проанализированы 53 парных образца ДНК, выделенных из опухолевой ткани простаты и соответствующей ей нормальной ткани неродственных больных с аденокарциномой простаты, проживающих на территории Республики Башкортостан. Мутация Q548X в гене BLM у больных раком предстательной железы не обнаружена. У одного пациента с РПЖ в гене BLM выявлен полиморфный вариант ^28385011 (1,89%), не приводящий к замене аминокислот в белке.
Ключевые слова: рак предстательной железы, ген синдрома Блума.
G.B. Kunsbaeva, I.R. Gilyazova, E.A. Klimentova, A.A. Izmailov, R.I. Safiullin, E.Kh. Khasanov, A.T. Mustafin, A.O. Papoyan, I.M. Sultanov, А.F. Itkulov, V.N. Pavlov, E.K. Khusnutdinova MUTATIONS IN THE BLOOM SYNDROME (BLM) GENE IN PROSTATE CANCER PATIENTS
The BLM gene decodes the protein belonging to the RecQ helicase family and takes parts in the maintenance of genomic stability. Homozygous germline mutations in the BLM gene cause chromosomal instability clinical syndrome, called Bloom syndrome. Recently, a recurrent truncating mutation of BLM (Q548X) has been associated with a 6-fold increased risk of breast cancer in Russia, Belarus and Ukraine, but its role in prostate cancer etiology and survival has not been yet investigated. We hypothesized that BLM is a candidate gene for prostate cancer (PC) predisposition. To reveal Q548X mutation in BLM gene we analyzed 53 paired samples of DNA extracted from the tumor and normal tissues of the prostate cancer patients with adenocarcinoma, from the Republic of Bashkortostan. The mutation Q548X in the BLM gene of prostate cancer patients is not detected, but we identified polymorphism rs28385011 (1,89%) in the BLM gene in one prostate cancer patient, that does not result in amino acid replacement in the protein.
Key words: prostate cancer, Bloom syndrome gene.
Рак предстательной железы (РПЖ) является одним из наиболее часто встречающихся злокачественных новообразований во всем мире, занимающий четвертое место среди всех онкологических заболеваний с учетом обоих полов и второе среди злокачественных новообразований у мужчин. По оценкам 2012 года у 1,1 миллиона мужчин в мире был диагностирован рак простаты, что составляет 15% от онкологических заболеваний, диагностируемых у мужчин, при этом почти 70% случаев (759 000) зарегистрированы в развитых странах. Самые высокие показатели заболеваемости РПЖ наблюдаются в Австралии/Новой Зеландии и Северной Америке (111,6 и 97,2 на 100 000 соответственно), а также в Западной и Северной Европе. Показатели заболеваемости РПЖ в азиатских популяциях остаются на низком уровне, составляя 10,5 и 4,5 в Восточной и Юго-Центральной Азии [1]. На 2012 год в России было зарегистрировано 29082 новых больных РПЖ. За десятилетний период (2002 -2012 гг.) прирост абсолютного числа заболевших составил 119,6%. В структуре заболеваемости мужского населения России РПЖ занял второе место (12,1%) после опухолей бронхо-легочной системы [2].
РПЖ - заболевание со сложной этиологией, которое ассоциировано с такими факторами риска, как возраст, гормональный статус организма, наследственность, контакт с канцерогенами, воспалительные и инфекционные заболевания предстательной железы, питание [3,4]. Существует множество исследований, доказывающих, что наличие родственников первой степени с РПЖ увеличивает риск развития заболевания более чем вдвое. Риск возрастает еще больше, если среди первостепенных родственников двое или более заболевших РПЖ.
Несмотря на то, что генетические факторы играют немаловажную роль в развитии РПЖ, до сих пор не существует генетических маркеров и тест-систем, одобренных для использования в клинике. Поэтому идентифика-
ция генетических маркеров с более высокой точностью и специфичностью до сих пор остается актуальной.
Ген ВЬМ локализован на хромосоме 15 в области 15q26.1 и состоит из 22 экзонов, его протяженность составляет около 100 т.п.н. Белок, кодируемый геном ВЬМ, относится к классу RecQ-хеликаз, участвует в поддержании стабильности генома, репарации ДНК. В случае гомозиготного носительства мутаций в гене BLM развивается редкое аутосомно-рецессивное заболевание - синдром Блума. Заболевание характеризуется высокой частотой разрывов и перестроек в хромосомах больного человека, у которого значительно повышается риск заболеть раком (лейкозы, лимфомы и карциномы) в раннем возрасте - до 30 лет. В ряде работ было показано, что гетерозиготное носи-тельство мутаций в гене BLM повышает риск развития наследственного рака молочной и предстательной желез [5]. Согласно литературным данным мутация с.1642С>Т (Q548X) в гене BLM была выявлена Anisimenkо й я1. у женщин, больных раком молочной железы (РМЖ) [6]. Данная мутация приводит к формированию преждевременного стоп-кодона в позиции 548 аминокислотной последовательности белка. Примечательно, что спектр мутаций данного гена у женщин славянского происхождения ограничивается единственным вариантом с.1642 С>Т (0548Х) [7].
Обнаружено, что мутация Q548X в гене ВЬМ связана с 6-кратным увеличением риска развития рака молочной железы в России, Белоруссии и Украине [5,8], но ее роль в этиологии РПЖ исследована недостаточно.
Материал и методы
С целью поиска мутаций в гене ВЬМ нами проанализировано 53 парных образца ДНК, выделенных из опухолевой ткани простаты и соответствующей ей нормальной ткани неродственных больных с аденокарцино-мой простаты, проживающих на территории Республики Башкортостан. Все обследован-
ные были пациентами Республиканской клинической больницы им. Куватова и клиники БГМУ г. Уфы. Забор образцов тканей проводился сотрудниками кафедры урологии с курсом ИПО в соответствии с этическими стандартами биоэтического комитета, разработанными Хельсинкской декларацией Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека». В исследуемой группе 45 (85%) индивидов имели начальные стадии заболевания (I-II стадии злокачественного процесса по TNM-классификации) и 8 (15%) человек имели поздние (III-IV) стадии заболевания. Возраст пациентов на момент постановки диагноза варьировал от 45 до 80 лет. У всех обследуемых лиц образцы тканей предстательной железы и крови были получены с их информированного согласия.
Выделение ДНК из периферической крови проводили методом последовательной фенольно-хлороформной экстракции [9]. В работе применялись следующие методы: по-лимеразная цепная реакция (ПЦР); анализ кривых плавления с высокой разрешающей способностью (HRM) на CFX96 Touch™ RealTime PCR Detection System с использованием флуоресцентного красителя Eva Green; прямое секвенирование на автоматическом се-квенаторе ABI PRISM 3100 согласно протоколу фирмы производителя.
Результаты и обсуждение
Мутация Q548X в гене BLM у пациентов с РПЖ не обнаружена. У одного пациента с РПЖ в гене BLM выявлен полиморфный вариант rs28385011 (1,89%), не приводящий к замене аминокислот в белке.
Продукт гена BLM является частью BRCAl-ассоциированного комплекса, который отвечает за репарацию повреждений ДНК [10]. В частности, белок BLM играет важную роль при рекомбинационной репарации: он узнает повреждение ДНК, является аттрактан-том для других белков, которые участвуют в процессе репарации ДНК, обеспечивая точность гомологичной рекомбинации [11].
Синдром Блума особенно часто диагностируется среди еврейского населения Ашкена-зи в связи с наличием часто встречающегося аллеля c.2207_2212delATCTOAmsTAGATTC-BLMAsh (1%) в этой группе населения [12]. BLMAsh аллель отвечает за 20% всех клинических случаев синдрома Блума, зарегистрированных на сегодняшний день во всем мире. Известны другие, менее распространенные мутации в гене BLM (более 60 вариантов), приво-
дящие к различным заболеваниям, в том числе и к синдрому Блума [13]. Мутация Q548X в гене BLM была выявлена в единичных случаях при синдроме Блума, однако информация об этническом происхождении пациентов была недоступна [13]. В исследовании польских ученых обнаружена мутация Q548X в гене BLM, распространенность мутантного аллеля у пациентов составляет 0,6%, что больше по сравнению с зарегистрированными частотами аллелей в России и Белоруссии (0,2-0,3%). В Польше, России и Белоруссии проживает преимущественно этническая группа славян, поэтому польские ученые предполагают, что мутантная аллель с Q548X, главным образом, будет распространена у населения славянского происхождения [14]. Antczak A. et al. также утверждает, что мутация Q548X может быть основным фактором синдрома Блума в славянских популяциях, в том числе у населения Польши, России, Белорусии, Чехии и других балтийских и балканских стран [14].
Предполагают, что мутация c.1642 C>T (Q548X) в гене BLM не влияет на предрасположенность к развитию рака предстательной железы и выживаемость мужчин при раке простаты в этнической группе поляков. Интересно, что мутации в других генах, вызывающие синдромы хромосомной нестабильности (т.е. гены BRCA2 и NBS1 при анемии Фанко-ни и синдроме Ниймегена соответственно), приводят к ухудшению прогноза рака простаты, однако мутация в гене синдрома Блума, похоже, не влияет на развитие рака предстательной железы [15,16]. Объяснением такому расхождению результатов является то, что гены BRCA2 и NBS1 действуют как классические гены, супрессоры опухоли, (потеря гете-розиготности (LOH) в генах NBS1 и BRCA2 наблюдается при большинстве раковых заболеваний; продукты генов NBS1 и BRCA2 не экспрессируются в опухолевых клетках). По-видимому, белок BLM действует через гапло-недостаточность, у носителей мутантной аллели в гене BLM не наблюдается потери гете-розиготности, а нормальный белок экспресси-руется в опухолевых клетках [17,18]. Поэтому, возможно, что BLM гаплонедостаточ-ность не является обязательным условием для развития опухоли в предстательной железе.
Выводы
Таким образом, для установления спектра, частоты и роли мутаций в гене BLM при РПЖ необходимы дальнейшие исследования на расширенных группах пациентов и здоровых индивидов.
Сведения об авторах статьи: Кунсбаева Гульназ Бахтияровна - аспирант кафедры генетики и фундаментальной медицины ФГБОУ ВПО БГУ. Адрес: 450074, г. Уфа, ул. Заки Валиди, 32. E-mail: kuncbaevagulnaz@mail.ru.
Гилязова Ирина Ришатовна - к.б.н., н.с. лаборатории молекулярной генетики человека ФГБУН «Институт биохимии и генетики» УНЦ РАН. Адрес: 450054, г. Уфа, ул. Проспект Октября, 71. E-mail: gilyasova_irina@mail.ru. Климентова Елизавета Алексеевна - аспирант лаборатории молекулярной генетики человека ФГБУН «Институт биохимии и генетики» УНЦ РАН. Адрес: 450054, г. Уфа, ул. Проспект Октября, 71.
Измайлов Адель Альбертович - д.м.н., доцент кафедры урологии с курсом ИПО ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Сафиуллин Руслан Ильясович - д.м.н., профессор кафедры урологии с курсом ИПО ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Хасанов Эльзар Халитович - клинический ординатор кафедры урологии с курсом ИПО ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Мустафин Артур Тагирович - к.м.н., доцент кафедры урологии с курсом ИПО ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Папоян Анушаван Оганесович - врач-уролог клиники БГМУ. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Шафиева, 2.
Султанов Ильнур Миндиахметович - аспирант кафедры урологии с курсом ИПО ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России.
Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Иткулов Артур Фиргатович - клинический ординатор кафедры урологии с курсом ИПО ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Павлов Валентин Николаевич - д.м.н., профессор, зав. кафедрой урологии с курсом ИПО, ректор ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Хуснутдинова Эльза Камилевна - д.б.н., проф., зав. лабораторией молекулярной генетики человека ФГБУН «Институт биохимии и генетики» УНЦ РАН. Адрес: 450054, г. Уфа, ул. Проспект Октября, 71.
ЛИТЕРАТУРА
1. Анализ уронефрологической заболеваемости и смертности в Российской Федерации за десятилетний период (2002-2012 гг.) по данным официальной статистики / О.И. Аполихин [и др.] // Экспериментальная и клиническая урология. - 2014. - Т. 2. - С. 4-12.
2. The frequency of the BLM p. Q548X (c. 1642C> T) mutation in breast cancer patients from Russia is no higher than in the general population / M.S. Anisimenko [et al.] //Breast cancer research and treatment. - 2014. - Т. 148, № 3. - С. 689-690.
3. A common nonsense mutation of the BLM gene and prostate cancer risk and survival / [Antczak A. et al.] // Gene. - 2013. - Т. 532, №. 2 - С. 173-176.
4. The frequency of the BLM* p. Q548X (c. 1642C> T) mutation in breast cancer patients from Russia / E. Imyanitov [et al.] //Breast cancer research and treatment. - 2014. - Т. 148, № 3. - С. 695-696.
5. Nonsense mutation p. Q548X in BLM, the gene mutated in Bloom's syndrome, is associated with breast cancer in Slavic populations / D. Prokofyeva [et al.] //Breast cancer research and treatment. - 2013. - Т. 137, №. 2. - С. 533-539.
6. Mathew C. G. P. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA //Nucleic Acids. - Humana Press, 1984. - С. 31-34.
7. GLOBOCAN 2012 // URL: http://globocan.iarc.fr/Default.aspx Gallagher R.P., Fleshner N. Prostate cancer: 3. Individual risk factors //CMAJ: Canadian Medical Association Journal. - 1998. - Т. 159, № 7. - С. 807.
8. Nanoways to overcome docetaxel resistance in prostate cancer / A. Ganju [et al.] //Drug Resistance Updates. - 2014. - Т. 17, № 1. - P. 13-23.
9. High prevalence and breast cancer predisposing role of the BLM c. 1642 C> T (Q548X) mutation in Russia / A.P. Sokolenko [et al.] //International Journal of Cancer. - 2012. - Т. 130, № 12. - P. 2867-2873.
10. Futaki M. Chromosomal breakage syndromes and the BRCA1 genome surveillance complex / M. Futaki, J.M. Liu //Trends in molecular medicine. - 2001. - Т. 7, № 12. - P. 560-565.
11. Tikoo S. Time to bloom / S. Tikoo, S. Sengupta //Genome Integr. - 2010. - Т. 1, № 1. - P. 14-14.
12. Carrier frequency of autosomal-recessive disorders in the Ashkenazi Jewish population: should the rationale for mutation choice for screening be reevaluated? / F. Fares [et al.] //Prenatal diagnosis. - 2008. - Т. 28, № 3. - P. 236-241.
13. Syndrome causing mutations of the BLM gene in persons in the Bloom's Syndrome Registry / J. German [et al.] //Human mutation. -2007. - Т. 28, № 8. - P. 743-753.
14. Germline BRCA mutations are associated with higher risk of nodal involvement, distant metastasis, and poor survival outcomes in prostate cancer / E. Castro [et al.] //Journal of Clinical Oncology. - 2013. - Т. 31, № 14. - P. 1748-1757.
15. An inherited NBN mutation is associated with poor prognosis prostate cancer / C. Cybulski [et al.] //British journal of cancer. - 2013. -Т. 108, № 2. - P. 461-468.
16. NBS1 is a prostate cancer susceptibility gene / C. Cybulski [et al.] //Cancer research. - 2004. - Т. 64, № 4. - P. 1215-1219.
17. Loss of heterozygosity at the BRCA2 locus detected by multiplex ligation-dependent probe amplification is common in prostate cancers from men with a germline BRCA2 mutation / A. J. Willems [et al.] //Clinical Cancer Research. - 2008. - Т. 14, № 10. - P. 2953-2961.
УДК 616.65-089.168.1-06-08-072.1 © А.Г. Мартов, Д.О. Джалилов, Д.А. Абдуллаев, 2015
А.Г. Мартов1,2,3, Д.О. Джалилов1, Д.А. Абдуллаев1,3 ГОЛЬМИЕВАЯ РЕЗЕКЦИЯ И ИНЦИЗИЯ (НОЬЯ) В ЛЕЧЕНИИ РЕЦИДИВНЫХ СТРИКТУР УРЕТРОЦИСТОАНАСТОМОЗА ПОСЛЕ РАДИКАЛЬНОЙ ПРОСТАТЭКТОМИИ
'ГБОУДПО «Российская медицинская академия последипломного образования»
Минздрава России, г. Москва 2 ФГБОУ ДПО «Институт повышения квалификации» ФМБА России, г. Москва 3Городская клиническая больница № 57, г. Москва
Данная работа посвящена оценке результатов применения методов эндоскопической коррекции уретропузырного анастомоза после радикальной простатэктомии (РПЭ), основанных на использовании энергии гольмиевого лазера. В исследо-
