Поиск биологически активных соединений в ряду гидразонов NH-бензоил-5-йодантраниловой кислоты Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Биомедицина • № 3, 2018, С. 35-45

Поиск биологически активных соединений в ряду гидразонов NH-бензоил-б-йодантраниловой кислоты

А.Ф. Газизова1, Е.Р. Курбатов1, И.П. Рудакова1, A.A. Курбатова1, Е.В. Зверева1, A.A. Бобылева1, Ю.В. Фокин2

1 - ФГБОУВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздрава России, Пермь

2 - ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России», Московская область

Контактная информация: ГазизоваАсия Фаниловна, asiya_gazizova@mail.ru

Особый интерес в области синтеза представляют производные N-замещенной антраниловой кислоты (АК) в связи с их многогранностью биологических эффектов и низкой токсичностью. Структурная модификация производных АК влияет на расширение спектра фармакологического действия, поэтому они применялись и применяются в медицинской практике в качестве противовоспалительных, анальгетических, жаропонижающих и диуретических средств. Целью работы является компьютерный прогноз с помощью программы PASS Online, синтез и экспериментальное исследование биологической активности новых соединений из ряда замещенных гидразидов NH-ацил^-йодантраниловой кислоты. Синтез новых соединений осуществили, используя методы циклизации, амидирования, конденсации. Чистоту полученных продуктов контролировали методом ТСХ на пластинках Sorbfil ПТСХ-П-В. Строение соединений установили методами ИК-спектрометрии и ЯМР 'H-спектроскопии. В лабораторных условиях изучили их антибактериальную и противовоспалительную активности. Полученные данные по прогнозированию биологического действия и проведенные испытания свидетельствуют о перспективности поиска фармакологически активных соединений в ряду R-бензилиденгидразидов NH-бензоил-5-йодантраниловой кислоты.

Ключевые слова: компьютерный прогноз биологической активности, противовоспалительная активность, антибактериальная активность, 5-йодантраниловая кислота.

Введение

Часто при лечении различных заболеваний назначаются препараты, относящиеся к группе нестероидных противовоспалительных средств (НПВС) [10], однако большинство лекарственных средств этой группы, одновременно с положительными фармакологическими свойствами, обладают рядом побочных эффектов - например, ульце-рогенное действие, гепатотоксичность, нефротоксичность [1, 9]. Поэтому актуальной задачей видится расширение

ряда НПВС препаратами, не уступающими по силе действия и с повышенным профилем безопасности, среди которых рассматриваются производные антраниловой кислоты (АК), известные своей низкой токсичностью. Для современных препаратов предпочтительно наличие многопрофильного, мульти-симптомного воздействия: например, противовоспалительного - в комплексе с анальгетическим и жаропонижающим, противовирусного, совместно с иммуномодулирующим, адаптогенным

и антитоксическим действием. Известно, что производные АК проявляют про-тивомикробное [5], противосудорожное [20], противотуберкулезное [23], анти-холинэстеразное [25], противовоспалительное [17] действие.

Большой интерес вызывают программы компьютерного моделирования, которые позволяют прогнозировать возможное фармакологическое действие и механизм его проявления, побочные эффекты, взаимодействие с ферментами и т.д. уже синтезированных веществ с подтвержденной структурой [21]. Одной из таких программ, которая находится во всеобщем доступе, является Pass Online (Prediction of Activity Spectra for Substance). Средняя точность прогноза составляет более 95%. Таким образом, использование программы Pass Online позволяет заниматься целенаправленным поиском соединений, рациональным изучением биологических активностей, что приводит к экономии времени и средств современного ученого.

Целью работы явился компьютерный прогноз, синтез и экспериментальное исследование биологической активности новых соединений из ряда замещенных гидразидов МН-ацил-5-йодантраниловой кислоты.

Материалы и методы

Используя методики органического синтеза, а именно циклизации, амидиро-вания и конденсации, нами было получено 10 соединений. Для подтверждения структуры использовали: ЯМР 1Н-спек-тры, записанные на ЯМР-спектрометре фирмы «MercuryVx-300» (США): рабочая частота - 300 МГц в ДМСО-dg (дей-терированном диметилсульфоксиде),

внутренний стандарт - ГМДС. Расчёт химических сдвигов протонов вели по шкале 8, м.д.; ИК - спектры, записанные на приборе «Бресогё М-80» в табл. с калия бромидом. Ход реакций и чистоту полученных продуктов контролировали методом ТСХ на пластинках БогЬШ ПТСХ-П-В в системе растворителей бензол-хлороформ-ацетон (9:1:1), пятна детектировали парами йода, величина КГ находилась в интервале 0,3-0,6.

Методика получения гидразида NH-бeнзoил-5-йoдaнтpaнилoвoй кислоты (I)

К 0,3 г (0,00088 моль) соединения II в 5 мл этанола добавляют 0,0013 моль гидразина гидрата. Смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре 18-20°С. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат и перекристаллизовают из смеси этанола и ацетонитрила (1:1). Выход - 79,7% С14Н1202К31. Тпл (температура плавления) = 188-190°С. Спектр ЯМР 1Н (ДМС0-аб), 8, м.д.: 4,62 уш.с. (2Н, 1МН2); 7,26-8,53 м (8+1Н, 2Аг+СО№); 12,23 с (1Н, ОТСО).

Методика получения 4-хлорбензи-лиденгидразида NH-бeнзoил-5-йoдaн-траниловой кислоты (II)

К взвеси 0,001 моль гидразида МН-бензоил-5-йодантраниловой кислоты (I) в 5 мл этанола добавляют 0,0012 моль 4-бромбензальдегида и перемешивают на магнитной мешалке в течение 1 ч при температуре 18-20°С. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат и перекристалли-зовывают из ацетонитрила. Выход -51,2% С,.Н160,К.1.С1. Т =214-215°С.

' 21 16 2 3 1 пл

Спектр 1Н ЯМР (ДМС0-а6), 8, м.д.: 7,53-8,40 м (13Н, 3Аг+СН); 11,58 с (Н, СО1МН); 12,24 с (Н, 1МНСО). Соеди-

Рис. Общая структурная формула R-бензилиденгидразидов КН-бензоил-5-йодантранило-вой кислоты.

нения III-X получены аналогичным способом, общая структурная формула которых представлена на рис.

Для синтезированных веществ был осуществлен прогноз вероятности проявления биологической активности с использованием общедоступной компьютерной программы PASS Online, разработанной Институтом биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича РАМН [26].

Противовоспалительная активность

Исследования противовоспалительной активности проводились с разрешения локального этического комитета и соблюдением требований к работе с экспериментальными животными (ФЗ «О защите животных от жестокого обращения» от 01.01.1997 г., Приказ Минздрава России № 199н от 01.04.2016 г. «Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практики», Директива Совета ЕЭС). Использовали модель каррагени-нового отека. Эксперимент проводили на белых беспородных крысах массой 170-220 г, содержащихся в стандартных условиях вивария на модели острого воспалительного отека, вызванного суб-плантарным введением в заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% водного р-ра карраге-

нина (Betcon, Dickinson and Company, Sparkc, MD 21152, США). Увеличение объема стопы, свидетельствующее о развитии отека, оценивали онкометри-чески до введения и через 3 ч после введения каррагенина. Исследуемые соединения вводили в количестве 50 мг/кг перорально, предварительно растворив в 2% крахмальной слизи. Контрольной группе животных перорально вводился эквимолярный объем 2% крахмальной слизи за 1 ч до введения флогогенного агента.

Эффективность исследуемых соединений оценивали по степени подавления роста воспалительного отека в процентах к контролю [13, 14]. В качестве препарата сравнения был взят нимесулид (Нимесил, «Лабораториос Менарини С.А», Испания) - аналог по действию.

Антибактериальная активность

Антибактериальную активность полученных веществ по отношению к фармакопейным штаммам кишечной палочки (Esherichia coli ATCC 25922) и золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus ATCC 6538-Р) [11] определяли методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде [15]. Посев микроорганизмов производили в мясопептонный

бульон (рН=7,0) с различной концентрацией испытуемых соединений, при микробной нагрузке 250000 микробных тел на 1 мл. Учет результатов производили через 18-20 ч выдержки в термостате при температуре 37°С, после чего регистрировали наличие или отсутствие роста культур микроорганизмов под действием исследуемых веществ. В качестве эталонов сравнения использовали диоксидин, фурацилин, хлорамин Б. Лекарственные средства - диоксидин и фурацилин - на текущий момент применяются в медицинской практике и реализуются населению через аптечную сеть. Хлорамин Б является антисептиком и используется для дезинфекции. За действующую дозу принимали минимальную подавляющую концентрацию веществ (МПК, мкг/мл), которая задерживает рост микроорганизмов [15].

Статистическая обработка данных

Результаты обработаны способом вариационной статистики по методу Фишера - Стьюдента [12].

Результаты и их обсуждение

На протяжении многих лет на кафедре фармацевтической химии Ф00 ПГФА ведется активный поиск новых соединений ряда производных АК и изучение их возможной биологической активности. Ранее были изучены амиды М-ацил-5-галоген(Н)антраниловых кислот и исследована их биологическая активность [8]. Среди данных соединений выявлены вещества, обладающие гипо-гликемическим [6], анальгетическим и противовоспалительным действием [7]. В меньшей степени изучены (незамещенные гидразиды 1М-ацил-5-галоген(Н) антраниловых кислот. В одной из последних работ [2] представлены резуль-

таты поиска биологически активных веществ (БАВ) среди N-ацилзамещенных гидразидов моно(ди) галогенантранило-вых кислот. В ходе исследования автором выявлена зависимость ПМД от природы галогена в 5-ом положении остатка антраниловой кислоты, 1-производные оказались более активными, чем их Вг-содержащие структурные аналоги. При изучении гипогликемического действия производных данного ряда обнаружены соединения, проявляющие сахаросни-жающую активность на уровне препарта сравнения - гликлазида. Активно ведется поиск БАВ в различных рядах антраниловых кислот учеными таких стран, как Индия [18], Украина [4], Китай [24], Канада [19]. Таким образом, изучение др. видов биологических активностей среди замещенных гидразидов N-ацил-5-галоген(Н) антраниловой кислоты является целесообразным и актуальным. Учитывая разнообразие фармакологических свойств производных антраниловой кислоты, мы изучили спектр возможных биологических активностей в ряду R-бензилиденгидразидов NH-бензоил-5-йодантраниловой кислоты с помощью компьютерной программы PASS Online. Она является вспомогательным инструментом для оценки общего биологического потенциала органических молекул, для рационального поиска новых биологически активных соединений. С ее помощью можно прогнозировать более 4-х тыс. видов активностей, включая фармакологические эффекты, механизмы действия, токсические и побочные эффекты, для чего требуется только структурная формула соединения [16, 22].

Результаты исследований выражаются значениями Pa и Pi. Pa (probability

"to be active") оценивает вероятность принадлежности изучаемого соединения к субклассу активных соединений на основе схожести структуры с теми молекулами, которые являются наиболее типичными в данном субнаборе «активные». Pi (probability «to be inactive») оценивает вероятность принадлежности изучаемого соединения к субклассу неактивных соединений «неактивные».

Полученные нами скрининговые данные возможных механизмов проявления противовоспалительной и антибактериальной активности приведены в табл. 1. Вероятности проявления в эксперименте «активности» (Pa) и «неактивности» (Pi) расположены по убыванию их разности.

Проведенные исследования показали, что исследуемые нами соединения с вероятностью до 36% могут проявить противовоспалительную активность, максимальная возможность непроявления составила 2,5%. Вероятность проявления веществами общего антибак-

териального действия - около 25%, при этом наблюдается высокая вероятность проявления противотуберкулезного действия, до 79,5%.

Исходя из вышеизложенного, нам представлялось актуальным осуществить синтез производных Я-бен-зилиденгидразидов МН-бензоил-5-йодантраниловой кислоты.

Гидразид МН-бензоил-5-

йодантраниловой кислоты (I) получен амидированием 2-фенил-6-йод-3,1-бен-зоксазин-4-она гидразингидратом в среде этанола. Конденсацией соединения I с ароматическими альдегидами получены соответствующие гидразоны (П-Х), которые представляют собой кристаллические или аморфные вещества белого с желтым, зеленым оттенком или желтого цвета. Структура соединений подтверждена данными ИК-спектроме-трии и ЯМР 1Н-спектроскопии [3].

В спектрах ЯМР 1Н-соединений наблюдаются сигналы ароматических протонов в виде мультиплета в области

Таблица 1

Прогноз биологической активности в программе Pass Online

Соединение Агонист интерлейкина12 Агонист интерлейкина Бактериостатиче-ская активность Противотуберкулезная активность

Pa Pi Pa Pi Pa Pi Pa Pi

I - - - - 0,251 0,082 0,757 0,004

II 0,192 0,005 0,361 0,008 0,286 0,065 0,795 0,003

III 0,161 0,009 0,295 0,018 0,264 0,075 0,652 0,005

IV 0,163 0,008 0,308 0,016 0,264 0,076 0,757 0,004

V 0,192 0,005 0,361 0,008 0,286 0,065 0,776 0,003

VI 0,189 0,005 0,357 0,009 0,289 0,064 0,708 0,004

VII 0,143 0,014 0,266 0,025 0,231 0,094 0,735 0,004

VIII 0,0165 0,008 0,317 0,014 0,218 0,103 0,729 0,004

IX 0,155 0,038 0,284 0,020 0,209 0,109 0,690 0,004

X 0,154 0,004 0,286 0,020 0,215 0,105 0,683 0,004

6,57-8,77 м.д., синглеты протонов ги-дразидных групп - при 11,58-11,96 м.д., синглеты протонов амидных групп -при 11,91-12,28 м.д. В ИК-спектрах соединений присутствуют полосы валентных колебаний амидных групп при 3544-3280 см1, гидразидного карбонила

- при 1680-1640 см1, амидного карбонила - при 1695-1660 см1, азометиновой группы - при 1600-1590 см1.

Результаты экспериментального исследования биологического действия обобщены и представлены в табл. 2.

Таблица 2

Противовоспалительная и антибактериальная активность Я-бензилиденгидразидов КН-бензоил-5-йодантраниловой кислоты

Соединение R Противовоспалительная активность Антибактериальная активность, МПК, мкг/мл

Прирост объема стопы через 3 ч, % Торможение реакции через 3 ч,% аигеив АТСС6 6538-Р Е. ооП АТСС 25922

II Н 42,8±2,9* р<0,05 35,2 н/а 1000

III 4-Вг 54,42±8,96 р>0,05 17,7 1000 1000

IV 4-М(СНз)2 48,3±6,49 р<0,05 26,9 >1000 >1000

V 4-! 40,95±4,46* р<0,05 38,0 >1000 >1000

VI 4-Ы02 47,7±9,8 р>0,05 27,8 >1000 >1000

VII 2,4-ОСН3 63,0±5,9 р>0,05 4,7 1000 1000

VIII 4-С1 86,9±4,0 р<0,05 0 н/а 1000

IX 4-М(С2Н5)2 51,42±13,15 р>0,05 22,2 >1000 >1000

X 2-Ы02 78,98±23,74 р>0,05 0 >1000 >1000

I 32,32±6,13* р<0,05 51,1 - -

Нимесулид 33,9±6,8 р<0,05 48,7 - -

Контроль 66,1±6,7 - - -

Диоксидин - - 500 31

Фурацилин - - 250 125

Хлорамин Б - - 500 250

Примечания: р<0,05 - достоверность в сравнении с контролем; н/а - нет активности; МПК - минимальная подавляющая концентрация.

Данные, полученные с помощью программы Pass Online, о возможности проявления биологического действия подтверждены экспериментально.

Исследования антибактериальной активности показали, что МПК полученных веществ составляет 1000 мкг/кг, что в 2-6 раз ниже, чем у препаратов сравнения. Бензилиденгидразид NH-бензоил-5-йодантраниловой кислоты (II) не проявил активности по отношению к золотистому стафилококку и оказал противомикробное действие (ПМД) в отношении кишечной палочки в концентрации 1000 мкг/мг. Введение в 4-е положение бензилиденового фрагмента атома хлора (VIII) не привело к изменению активности. Замена атома хлора в 4-ом положении на йод, диметиламино-, нитро-, диэтиламиногруппы привело к снижению активности в отношении обоих штаммов микроорганизмов. Перемещение нитрогруппы из 4-го положения во 2-е не привело к увеличению активности. Введение в 4-е положение атома брома или во 2-е и 4-е положение двух метоксигрупп привело к увеличению ПМД в отношении золотистого стафилококка при сохранении активности в отношении кишечной палочки. Таким образом, проведенные испытания показали, что замещенные гидразиды II-X проявляют слабую антибактериальную активность.

При исследовании противовоспалительного действия (ПВД) было установлено, что введение флогогенного агента вызывает увеличение объема стопы животных, которое получило максимальное развитие к третьему часу наблюдения. Прирост объема стопы у крыс при этом достигал 66,1% и был принят за контрольную величину.

Использование препарата сравнения (нимесулида) вызывало статистически достоверное по сравнению с контрольным показателем уменьшение прироста объема стопы у крыс до 33,9%, т.е. торможение воспаления составило 48,7%.

ПВД исходного гидразида NН-бензоил-5-йодантраниловой кислоты (I) оказалось на уровне препарата сравнения - нимесулида. Введение в аминогруппу гидразидного фрагмента бензилиденового заместителя (II) приводит к снижению ПВД на 13%. При введении в 4-е положение атома хлора (VIII), во 2-е - нитрогруппы (X) или двух метоксигрупп, во 2-е и 4-е положение - бензилиденового фрагмента (VII) приводит к потере ПВД. Замена атома хлора в 4-м (VIII) положении на бром (III) или йод (V) ведет к увеличению процента торможения отека до 17,7% и 38,0% соответственно. Перемещение нитрогруппы из 2-го положения (X) в 4-е (VI) приводит к появлению ПВД, и торможение развития отека составляет 27,8%. Введение в 4-е положение бензилиденового фрагмента (II) диметиламино- (IV) или диэтиламиногруппы (IX) приводит к снижению ПВД до 26,9% и 22,2% соответственно.

Заключение

Таким образом, целесообразно подтверждение данных, полученных с помощью программы Pass Online, экспериментальными исследованиями противотуберкулезного действия, а полученные результаты компьютерного прогноза и проведенные испытания ПВД свидетельствуют о перспективности поиска соединений, обладающих противовоспалительной активностью, в ряду R-бензилиденгидразидов NH-бензоил-5-йодантраниловой кислоты.

Список литературы

1. Белоусова Е.А., Никитина Н.В. Химио-профилактика колоректального рака: молекулярные механизмы антиканцерогенного действия аминосалицилатов и нестероидных противовоспалительных препаратов // Фар-матека. - 2006. -№14.-С. 109.

2. Власова Н.А. Синтез, свойства и биологическая активность производных Ы-ацил-5(3,5) моно(ди)галогенантраниловых кислот, их эфиров, амидов, гидразидов, 3,1-бензоксазин-4-онов и хиназолин-4(ЗН)-онов: Автореф. дис. канд. фарм. наук. - Пермь, 2011. - С. 20.

3. Газизова А.Ф., Курбатов Е.Р., Бобылева А.А. Синтез, свойства и противомикроб-ная активность R-бензилиденгидразидов ЫН-бензоил-5-йодантраниловой кислоты // Мат-лы III межд. науч.-практ. конф. «Современные проблемы развития фундаментальных и прикладных наук». - Прага, 2016. -Т. 1.-С. 31-35.

4. Григорьева Л.В. Поиск новых антипсихотических и психостимулирующих средств среди производных фенилантраниловой кислоты // Актуальт проблеми фармаци та фар-макотерапи. -2014.-№ 1.-С. 197-203.

5. Коркодинова Л.М., Курбатов Е.Р., Газизова А.Ф., Новикова В.В. Синтез, свойства и противомикробная активность NH-(N'-R-бензилиденгидразинооксалил) антраниловых кислот // Вестник ВГУ, серия: Химия. Биология. Фармация. - 2017. - № 1.-С. 160-163.

6. Курбатов Е.Р. Гипогликемическая активность замещенных амидов галогенантрани-ловых кислот // Хим.-фармац. журн. - 2014.

- Т. 48, № 10. - С. 37-38.

7. Курбатов Е.Р. Исследование противовоспалительной, анальгетической активности и токсичности синтезированных амидов N

- аллилоксамоил - 5-бром(Н) антраниловой кислоты // Вопр. биол., мед. и фармац. химии.

- 2011. -№ 11.-С. 60-63.

8. Курбатов Е.Р., Коркодинова Л.М., Гольд-штейн А.Г. Синтез, противовоспалительная и анальгетическая активность замещённых амидов №дихлорацетил-5-йодантраниловой кислоты // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. -2014. - С. 63-64.

9. Насонов Е.Л. Кардиоваскулярные осложнения ингибиторов ЦОГ-2 - вопросов больше, чем ответов // Рус. мед. журн. - 2005. -№ 13(7). - С. 383-391.

10. Насонов Е.Л. Клинические рекомендации. Ревматология. - М.: Гэотар-Медиа, 2006. -288 с.

11. 0ФС.1.2.4.0002.15 Микробиологическая чистота.

12. Прозоровский В.В. Статистическая обработка результатов фармакологических исследований // Психофармакология и биологическая наркология. - 2007. - №№ 7(3-4). - С. 2090-2120.

13. Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских исследованиях / Под ред. Н.Н. Каркищенко, С.В. Грачева. - М.: Профиль-2С, 2010. - 358 с.

14. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К. -2012.- 944 с.

15. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Д.А. Хабриева.

- М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. -С. 516-522.

16. Филимонов Д.А., Порейков В.В. Прогноз спектра биологической активности органических соединений // Рос. хим. журн. - 2006. -Т. 50, № 2. - С. 66-75.

17. Abdel-Aziz А.А.-М., Abou-Zeid L.A., El Ta-hir K.E.H., MohamedМ.А., Abu El-Enin М.А., El-Azab A.S. Design, synthesis of 2,3-disub-stitued 4(3H)-quinazolinone derivatives as antiinflammatory and analgesic agents: COX-1/2 inhibitory activities and molecular docking studies // Bioorganic & Medicinal Chemistry. - 2016.

- Vol. 24, No. 16. - Pр. 444-457.

18. Beniwal M., Lather V., Judge V. Anti-inflammatory, antimicrobial activity and QSAR studies of anthranilic acid derivative // Worldjournal of pharmacy and pharmaceutical sciences - 2015. -Vol. 4,^.9.^. 1443-1451.

19. Culf A.S., Tin H., Monro S., Ghosh A., Barnett D.A., Ouellette R.J., Cuperlovic-Culf M., McFarland S.A. A spectroscopic study of substituted anthranilic acids as sensitive environmental probes for detecting cancer cells // Bioorganic & Medicinal Chemistry. - 2016. - Vol. 24, No. 5.^р. 929-937.

20. El-Azab A.S., Abdel-Hamide S.G., Sayed-Ahmed M.M., Hassan G.S. Novel 4(3H)-quin-azolinone analogs: synthesis and anticonvulsant activity // Med Chem Res. - 2013. - No. 22. -Pр. 2815-2827.

21. Filimonov D.A., LaguninA.A., Gloriozova T.A., Rudik A.V., Druzhilovskii D.S., Pogodin P.V.,

Poroikov V.V. Prediction of the Biological Activity Spectra of Organic Compounds Using the Pass Online Web Resource // Chemistry of Heterocyclic Compounds. - 2014. - Vol. 3, No. 50. -Pp. 3818-3828.

22. Habibyar A.F., Sharma N, Khurana N. PASS assisted prediction and pharmacological evaluation of hesperidin against scopolamine induced amnesia in mice // Eur. J. of Pharmacology. -2016. - No. 789. - Pp. 385-394.

23. Myangar K.N., Akhaja T.N., Naik D.R., Ra-val J.P. Thiazolidinyl-quinazolin-4-one derivatives: design, synthesis and in vitro evaluation of antitubercular // Chemistry & Biology Interface. - 2012. - No. 2(3). - Pp. 157-171.

24. Shi L. Anthranilic acid-based diamides derivatives incorporating arylisoxazoline pharmacophore as potential anticancer agents: design, synthesis and biological evaluation // Eur. J. of Medicinal Chemistry. - 2012. - No. 54. -Pp. 549-556.

25. Uraz M., Karaku§ S., Mohsen U.A., Kaplancikli Z.A., Rolla S. The synthesis and evaluation of anti-acetylcholinesterase activity of some 4(3H)-quinazolinone derivatives bearing substituted 1,3,4- thiadiazole // Marmara Pharm. J. - 2017. - No. 21.-Pp. 96-101.

26. http://www.pharmaexpert.ru/PASSOnline/index. php.

References

1. Belousova E.A., Nikitina N. V. Khimioprofilaktika kolorektal'nogoraka:molekulyarnyyemekhanizmy antikantserogennogo deystviya aminosalitsilatov i nesteroidnykh protivovospalitel'nykh preparatov [Chemoprophylaxis of colorectal cancer: molecular mechanisms of anticarcinogenic action of aminosalicylates and non-steroidal antiinflammatory drugs]. Pharmatec. 2006. No. 14. P. 109. (In Russian).

2. Vlasova N.A. Sintez, svoystva i biologicheskaya aktivnost' proizvodnykh N-atsil-5(3,5) mono(di) galogenantranilovykh kislot, ikhefirov, amidov, gidrazidov,3,1-benzoksazin-4-onov i khinazolin-4(3H)-onov [Synthesis, properties and biological activity of N-acyl-5 (3,5) mono (di) halogenantranilic acid derivatives, their esters, amides, hydrazides, 3,1-benzoxazin-4-ones andquinazoline-4 (3H)-ones]: Avtoref. dis. kand. farm. nauk [Syn. of diss. of cand. pharm. sciences]. Perm', 2011. P. 20. (In Russian).

3. Gazizova A.F., Kurbatov E.R., Bobyleva A.A. Sintez, svoystva i protivomikrobnaya

aktivnost' R-benzilidengidrazidov NH-benzoil-5-yodantranilovoy kisloty [Synthesis, properties and antimicrobial activity of R-benzylidenehydrazides of NH-benzoyl-5-iodoanthranilic acid]. Mat-ly III mezhd. nauch.-prakt. konf. «Sovremennye problemy razvitiya fundamental'nykh i prikladnykh nauk» [Materials of the III international scientific-practical conference «The main directions in the development of basic and applied sciences»]. Prague. 2016. V. 1. Pp. 31-35. (In Russian).

4. Grigor'yeva L.V. Poisk novykh antipsikhoticheskikh i psikhostimuliruyushchikh sredstv sredi proizvodnykh fenilantranilovoy kisloty [Search for new antipsychotic and psychostimulating agents among phenylantranilic acid derivatives]. Aktual'ni problem farmatsii ta farmakoterapii [Actual problems of pharmacy and pharmacotherapy]. 2014. No. 1. Pp. 197-203. (InRussian).

5. Korkodinova L.M., Kurbatov E.R., Gazizova A.F., Novikova V.V. Sintez, svoystva i protivomikrobnaya aktivnost' NH-(N'-R-benzilidengidrazinooksalil) antranilovykh kislot [Synthesis, properties and antimicrobial activity of NH-(N'-R-benzylidenehydrazinooxalyl) anthranilic acids]. Vestnik VGU, seriya: Khimiya. Biologiya. Farmatsiya [Bulletin of VSU, series: Chemistry. Biology. Pharmacy]. 2017. No. 1. Pp. 160-163. (InRussian).

6. Kurbatov E.R. Gipoglikemicheskaya aktivnost' zameshchennykh amidov galogenantranilovykh kislot [Hypoglycemic activity of substituted amides of haloanthranilic acids]. Khim.-farmats. zhurn. [Chem.-farm. Journ.]. 2014. No. 10. Vol. 48. Pp. 37-38. (In Russian).

7. Kurbatov E.R. Issledovaniye protivo-vospalitel'noy, anal'geticheskoy aktivnosti i toksichnosti sintezirovannykh amidov N -alliloksamoil - 5-brom(N) antranilovoy kisloty [Research of anti-inflammatory, analgesic activity and toxicity of synthesized amides of N-allyloxamoyl-5-bromo (H) anthranilic acid]. Vopr. biol., med. i farmats. khimii [Questions of biol., med. and farm. chemistry]. 2011. No. 11. Pp. 60-63. (InRussian).

8. Kurbatov E.R., Korkodinova L.M., Gol'dshteyn A.G. Sintez, protivospalitel'naya i anal'geticheskaya aktivnost' zameshchonnykh amidov N-dikhloratsetil-5-yodantranilovoy kisloty [Synthesis, antiinflammatory and analgesic activity of substituted amides of

N-dichloroacetyl-5-iodoanthranilic acid],

Vestnik Volgogradskogo gosudarstvennogo meditsinskogo universiteta [Bulletin of Volgograd State Medical University], 2014. Pp. 63-64. (In Russian).

9. Nasonov E.L. Kardiovaskulyarnyye oslozhneniya ingibitorov TSOG-2 - voprosov bol'she, chem otvetov [Cardiovascular complications of COX-2 inhibitors - there are more questions than answers], Rus. med. zhurnal [Rus. med.journal]. 2005. V. 13(7). Pp. 383-391. (In Russian).

10. Nasonov E.L. Klinicheskiye rekomendatsii. Revmatologiya [Clinical recommendations. Rheumatology]. Moscow: Geotar-Media, 2006. 288 p. (In Russian).

11. 0FS.1.2.4.0002.15 Mikrobiologicheskaya chistota [GPA Microbiological purity]. (In Russian).

12. Prozorovskiy V.V. Statisticheskaya obrabotka rezul'tatov farmakologicheskikh issledovaniy [Statistical processing of the results of pharmacological studies]. Psikhofarmakologiya i bio-logicheskaya narkologiya [Psychopharmacology and biological narcology]. 2007. No. 7(3-4). Pp. 2090-2120. (InRussian).

13. Rukovodstvo po laboratornym zhivotnym i al'ternativnym modeljam v biomedicinskih issledovanijah [Guide to laboratory animals and alternative models in biomedical research]. Ed. by N.N. Karkischenko, S.V. Grachev. Moscow: Profil'-2S. 2010. 358 p. (In Russian).

14. Rukovodstvo po provedeniyu doklinicheskikh issledovaniy lekarstvennykh sredstv [A guide to preclinical drug research]. Ed. by A.N. Mironov. Moscow: Greef i K. 2012. 944 p. (In Russian).

15. Rukovodstvo po eksperimental'nomu (doklin-icheskomu) izucheniyu novykh farmakologicheskikh veshchestv [Manual on experimental (preclinical) study of new pharmacological substances]. Ed. by R.U. Khabriyev. Moscow: OAO «Izdatel'stvo «Meditsina». 2005. Pp. 516522. (In Russian).

16. Filimonov D.A., Poreykov V.V. Prognoz spektra biologicheskoy aktivnosti organicheskikh soye-dineniy [Forecast of the spectrum of biological activity of organic compounds]. Ros. khim. zhurn. [Russian chemical journal]. 2006. V. 50, No. 2. Pp. 66-75. (In Russian).

17. Abdel-Aziz A.A.-M., Abou-Zeid L.A., El Ta-hir K.E.H., MohamedM.A.,Abu El-Enin M.A., El-Azab A.S. Design, synthesis of 2,3-disub-

stitued 4(3H)-quinazolinone derivatives as antiinflammatory and analgesic agents: COX-1/2 inhibitory activities and molecular docking studies. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2016. Vol. 24, No. 16. Pp. 444-457.

18. Beniwal M., Lather V., Judge V. Anti-inflammatory, antimicrobial activity and QSAR studies of anthranilic acid derivative. World journal of pharmacy and pharmaceutical sciences 2015. Vol. 4, No. 9. Pp. 1443-1451.

19. CulfA.S, Tin H., Monro S., Ghosh A., Barnett D.A., Ouellette R.J., Cuperlovic-Culf M., McFarland S.A. A spectroscopic study of substituted anthranilic acids as sensitive environmental probes for detecting cancer cells. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2016. Vol. 24, No. 5. Pp. 929-937.

20. El-Azab A.S., Abdel-Hamide S.G., Sayed-Ahmed M.M., Hassan G.S. Novel 4(3H)-quinazolinone analogs: synthesis and anticonvulsant activity. Med Chem Res. 2013. No. 22. Pp. 2815-2827.

21. Filimonov D.A., Lagunin A.A., Gloriozo-va T.A., Rudik A.V., Druzhilovskii D.S., Pogo-din P.V., Poroikov V.V. Prediction of the Biological Activity Spectra of Organic Compounds Using the Pass Online Web Resource. Chemistry of Heterocyclic Compounds. 2014. Vol. 3, No. 50. Pp. 3818-3828.

22. Habibyar A.F., Sharma N, Khurana N. PASS assisted prediction and pharmacological evaluation of hesperidin against scopolamine induced amnesia in mice. Eur. J. of Pharmacology. 2016. No. 789. Pp. 385-394.

23. Myangar K.N., Akhaja T.N., Naik D.R., Ra-val J.P. Thiazolidinyl-quinazolin-4-one derivatives: design, synthesis and in vitro evaluation of antitubercular. Chemistry & Biology Interface. 2012. No. 2(3). Pp. 157-171.

24. Shi L. Anthranilic acid-based diamides derivatives incorporating arylisoxazoline pharmacophore as potential anticancer agents: design, synthesis and biological evaluation. Eur. J. of Medicinal Chemistry. 2012. No. 54. Pp. 549-556.

25. Uraz M., Karaku§ S., Mohsen U.A., Kaplancikli Z.A., Rolla S. The synthesis and evaluation of anti-acetylcholinesterase activity of some 4(3H)-quinazolinone derivatives bearing substituted 1,3,4- thiadiazole. Marmara Pharm. J. 2017. No. 21. Pp. 96-101.

26. http://www.pharmaexpert.ru/PASSOnline/index. php.