Первый отечественный опыт создания клеточной культуры и оценки лекарственной устойчивости ретинобластомы Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



64 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

Заключение. Сочетание противоопухолевой активно- С.В. Саакян1, А.Ю. Цыганков1, Н.И. Моисеева2, сти со способностью усиливать эффект известных онко- А.Ф. Карамышева2, М.Г. Жильцова1, С.С. Тадевосян1 препаратов создает перспективу применения Бут для лече- ПЕрвый ОТЕчЕСТвЕННЬШ ОПыТ СОЗдАНия ния гормонозависимых опухолей. кЛЕТОЧНОЙ кУЛЬТУрЫ и ОЦЕНки лекарственной Устойчивости А.А. Рудакова, В.А. Мисюрин, А.В. Пономарев, РЕТиНОБлАСТОМЫ О.С. Бурова, М.А. Барышникова ФГБУ«МНИИГБ им. Гельмгольца» возможность моделирования Минздрава России, Москва, Россия; активности МАРкЕРОв PD-L1 и PD-L2 2ФГБУ «НМИЦонкологии им. H.H. Блохина» НА ПОвЕРХНОСТи клЕТОк мЕлАНОмЫ Минздрава России, Москва, Россия ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России введение. Культивирование клеток ретинобластомы введение. В настоящее время для лечения рака приме- in vitro является значимым методом изучения их свойств, няются следующие подходы: химиотерапия, таргетная те- в том числе за счет возможности получения аналогичной рапия и иммунотерапия. Комбинирование данных подхо- нативной опухолевой массы. дов может давать новые терапевтические эффекты. Однако Цель исследования. Попытка создания первичной кле-перед составлением комбинаций требуются тщательные точной культуры ретинобластомы и оценка ее лекарствен-лабораторные исследования. ной устойчивости к химиопрепаратам. Цель исследования. Оценить влияние лекарственных материалы и методы. В исследование вошли 19 па-форм аранозы — лиофилизата для приготовления раствора циентов в возрасте 6—64 мес (27,9 ± 17,4). У 6 (31,6 %) па-для инъекций и липосомальной, а также цисплатина, па- циентов отмечено билатеральное поражение, у 13 (68,4 %) — клитаксела и дабрафениба в монорежиме или в комби- монолатеральное. У 18 (94,7 %) пациентов выявлена нации на изменение уровня экспрессии мРНК и белков ретинобластома группы E. Во всех случаях выполнена PD-L1 и PD-L2 в клеточных линиях меланомы. энуклеация, при этом в 94,7 % случаев определена низко-материалы и методы. Исследования проводили на кле- дифференцированная ретинобластома. Взяты образцы точных линиях меланомы человека, полученных из опухо- опухолевой ткани для получения клеточной культуры с полевого материала больных, проходивших лечение в ФГБУ следующим исследованием лекарственной устойчивости «НМИЦ онкологии им. H.H. Блохина» Минздрава России. (MTT-тест). Оценивали экспрессию PD-L1 и PD-L2 на клетках без Результаты. В 4 случаях удалось получить пережи-препаратов. Затем клетки инкубировали с аранозой-лио, вающие адгезивные первичные культуры ретинобластомы. липосомальной аранозой, цисплатином, паклитакселом Проведена цитологическая верификация полученных и дабрафенибом в концентрации IC50, которая была рас- культур. При билатеральном поражении первичные куль-считана в MTT-тесте. Препараты добавляли как в моноре- туры были получены чаще (4/6), тогда как при монола-жиме, так и в комбинации. Уровень экспрессии генов PD-L1 теральном поражении клетки не приживались (0/13) и PD-L2 оценивали методом ПЦР-РВ. В реакции иммуно- (р = 0,003). Статистически значимой взаимосвязи с возра-флуоресценции оценивали экспрессию белков PD-L1 стом пациентов (р = 0,33) и наличием кальцинатов в опу-и PD-L2. Данные анализировали методами корреляцион- холи по данным ультразвукового исследования (р = 0,26) ного анализа и медианного теста. не выявлено. Проведенный MTT-тест показал отсутствие Результаты. Уровень экспрессии гена PD-L2 прямо различий в чувствительности клеточных культур к ирино-коррелировал со степенью дифференцировки клеток (ко- текану и ифосфамиду. Выраженные отличия в устойчиво-эффициент Пирсона 0,937, p <0,15). Активность гена PD-L1 сти между культурами получены только для оксалиплатина и белков PD-L1 и PD-L2 не связана со степенью диффе- и аскорбиновой кислоты. ренцировки, а также не зависит от наличия мутаций гена Заключение. В работе описан первый в РФ опыт полу-TP53. PD-L2 экспрессируется на меньшем уровне в кле- чения клеточной культуры ретинобластомы и оценки точных линиях, имеющих мутации BRAF (p = 0,0117). Ин- химиочувствительности к различным препаратам. Прове-тересно, что мутации в TP53 наблюдаются при наличии дение MTT-теста с оценкой лекарственной устойчивости мутаций гена BRAF (коэффициент Пирсона 1, p <0,15). может быть использовано как в клинической практике Араноза-лио привела к увеличению уровня экспрессии для уточнения режима химиотерапии зарегистрированны-гена PD-L1 (p = 0,23), а липосомальная араноза статис- ми препаратами, так и для разработки новых подходов тически значимо увеличивает уровень экспрессии белка к лечению ретинобластомы при оценке резистентности PD-L1 (p = 0,037). Инкубация с цисплатином в комбина- опухолевых клеток in vivo на животных моделях. ции с паклитакселом также увеличивает уровень экспрессии белка PD-L1 (p = 0,037). Дабрафениб, цисплатин и пакли-таксел в монорежиме не оказывают влияния на экспрессию белка PD—L1. Уровень экспрессии гена и белка PD-L2 снижается под действием любого препарата, но статистически незначимо (р = 0,6). Заключение. При лечении больных меланомой может быть эффективно использование ингибиторов PD1 в сочетании с химиопрепаратами.

Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ