Перспективы судебно-медицинского исследования смешанных пятен Текст научной статьи по специальности «Прочие медицинские науки»

Д. Х. Рыбалкина

СОЗЫЛМАЛЫ ТОНЗИЛЛИТ КЕЗ1ЦДЕГ1 БУККАЛЬД1 ЭПИТЕЛИЙ ЦИТОГРАММАСЫ МЕН ЦИТОМЕТ-РИЯЛЬЩ ПАРАМЕТРЛЕР1Н ТАЛДАУ

Созылмалы тонзиллит кезщде буккальдi эпителий цитограммасында эр тYрлi бенсендiлiктегi нейтро-фил фракциясыныч эпителийлi емес компонентi жорарлайды. К,абыну процесшщ вршуi кезщде эпителио-циттер тап жетiлуi мен дифференцирленушщ сипаты взгередк бдетте, бул процесс ауыз куысы шырышты кабатыныч урт аймарына тэн.

И. В. Ким

ПЕРСПЕКТИВЫ СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ СМЕШАННЫХ ПЯТЕН

Карагандинский филиал РГКП «Центр судебной медицины» МЗ рК

Преступления, совершаемые на сексуальной почве, составляют достаточно большой процент всех преступлений. При расследовании такого рода преступлений одним из основных факторов является обнаружение и, что несомненно более важно, идентификация спермы, оставленной преступником на вещественных доказательствах и/или теле жертвы. Методов обнаружения спермы известно много. Основными до сих пор остаются: физический (ультрафиолетовый свет длиной 254 и 365 нм), микроскопический анализ окрашенных препаратов, биохимический (кислая фосфатаза), специфический антиген простаты (PSA).

Выявление группоспецифических антигенов системы АВ0 в смешанных пятнах представляет собой сложную проблему, так как в основном исследуются выделения из открытых полостей человека: ротовой, вагинальной, анальной. В таком материале всегда содержится большое количество микрофлоры, обладающей серологической активностью, способной искажать истинный фенотип индивидуума, обусловливая в ряде случаев кажущееся несовпадение антигенных характеристик крови и выделений одного и того же человека. Кроме того, в разных участках одного и того же пятна может находиться различное количество клеточного материала [1].

При половых преступлениях или при подозрении на них для решения вопроса о групповой принадлежности спермы в представленных на экспертизу следах на вещественных доказательствах, которые, как правило, имеют примесь эпителиальных клеток или крови, возникает необходимость их разделения. С этой целью к уже существующим методикам разделения спермы от крови, спермы от пота экспертами-генетиками РГКП ЦСМ МЗ РК было предложено применение техники дифференциального лизиса для разделения спермы от различного вида эпителиальных клеток (влагалища, ротовой полости, прямой кишки и т.д.), используемого при ДНК-анализе выделения генетического материала сперматозоидов из смешанных следов. Этот метод основан на разнице в химическом строении клеточных

оболочек сперматозоидов и эпителиальных клеток, а именно - наличие в мембране сперматозоидов большого количества дисульфидных связей способствует повышенной устойчивости сперматозоидов к воздействию факторов внешней среды. Во время предварительной инкубации при температуре 37-56° в течение 60-120 мин в растворе, содержащем лизирующие агенты и про-теолитический фермент (протеиназа К), происходит разрушение клеточных оболочек и ядер бук-кального и влагалищного эпителия, клеток крови. Без разрушения дисульфидных связей специальными химическими агентами эти связи не позволяют эффективно расщеплять белки сперматозоидов протеолитическими ферментами (в частности, протеиназой К). После центрифугирования сперматозоиды преимущественно сохраняются, а остальные разрушенные клетки оказываются в надосадочной жидкости (супернатант) [2]. Осадок же представляет собой обогащенную фракцию сперматозоидов насильника.

При проведении судебно-медицинской экспертизы вещественных доказательств по делу об изнасиловании гр-ки К. следователем были поставлены вопросы о наличии спермы в содержимом влагалища и ее групповой принадлежности. Изнасилованная К. имеет группу крови А(11). В содержимом влагалища обнаружена сперма. При определении групповой принадлежности выявлены антигены А и В, которые могли произойти как за счет спермы лица с группой крови В (III), так и за счет спермы лица с группой крови АВ (IV). Также антиген А может происходить за счет влагалищного секрета потерпевшей. Следует отметить, что в процессе реакций, применяемых в биологической практике, не удается точно установить, какому виду выделений соответствует в данном случае антиген А. Либо он выявляется за счет влагалищных выделений, либо - за счет спермы.

Исследуемый материал (содержимое влагалища потерпевшей К.) экстрагировали 18 ч в условиях холодильника. После центрифугирования в течение 3 мин при 8000 об/мин, надосадоч-ную жидкость удаляли, а к взвеси клеточного осадка добавляли протеиназу К и инкубировали при 50° в течение 120 мин с последующим центрифугированием 9 000 об/мин - 5 мин. На данном этапе происходит разрушение клеток крови, слюны, в исследованном случае - влагалищного эпителия. Более короткие и более длительные сроки инкубации не рекомендованы, так как могут привести либо к неполному лизису эпителиальных клеток, либо к лизису сперматозоидов.

После 2-кратного отмывания осадка в лизирую-щем буфере осадок наслаивали на ниточки и определяли группоспецифические антигены системы АВ0 методом реакции абсорбции-элюции с помощью моноклональных сывороток (фаза абсорбции 2 ч при комнатной температуре, фаза элюции 25 мин при 56° в условиях термостата). Целью использования высокоспецифичных и высокочувствительных сывороток, сокращенной фазы абсорбции послужило присутствие небольшого количества разрушенных клеток влагалищного эпителия и микробной флоры, которые могли повлиять на результаты исследования. В результате реакции в содержимом влагалища выявлена сперма лица с группой крови В (III). При том, что во взятых для контроля материалах, не обработанных протеиназой К, были получены группоспецифические антигены спермы и влагалищного эпителия.

ВЫВОДЫ

1. После применения метода дифференциального лизиса в содержимом влагалища по-

терпевшей получен серологический фенотип спермы насильника. Таким образом, круг подозреваемых сужается в пределах лиц, имеющих III группу крови.

2. Этот метод не требует более тонких расчетов реактивов и выдержки временных параметров, выходящих за пределы обычных при проведении классических серологических, иммунологических и цитологических реакций, но для широкого использования в практике необходимы дальнейшие научно-методические разработки и материальное оснащение.

ЛИТЕРАТУРА

1. Барсегянц Л. О. Судебно-медицинское исследование вещественных доказательств: Рук. для судеб. медиков. - М.: Медицина, 1999. - С. 150 -270.

2. Дергай Г. Б. Современные возможности судебных экспертиз: учеб. пособие. - Минск, 2000. - С. 138 - 219.

Поступила 23.09.10

I. V. Kim

THE PERSPECTIVES OF FORENSIC MEDICAL EXAMINATION OF INTERMIXED TRACKS

The crimes, committing on the sexual ground, have sufficiently large part of all number of crime. One of the main factors during the inquest of such crimes is the revealing and (this is more important) the identification of sperm, leaved by the criminal on the material evidences and/or the victim body.

И. В. Ким

АРАЛАС ДАЦТАРДЬЩ СОТ-МЕДИЦИНАЛЬЩ ЗЕРТТЕУЛЕР1НЩ ПЕРСПЕКТИВАЛАРЫ

Жыныстык непзде жасалран кылмыстар барлык кылмыстардыч едэуiр Yлкен белИн курайды. Осы тектес кылмыстарды тексеру барысында кылмыскердщ заттай айракта немесе зорланран эйелдщ денесшде калдырран шэуетш табу жэне оны идентификациялау басты факторлардыч бiрi болып табылады.

В. Н. Матвеева

ДИФФЕРЕНЦИРОВАНИЕ АНТИГЕНОВ КРОВИ И ВЫДЕЛЕНИЙ В СМЕШАННЫХ СЛЕДАХ

Карагандинский филиал РГКП «Центр судебной медицины» МЗ рК

Групповые вещества крови и выделений имеют идентичные антигенные детерминанты, которые связаны с различными молекулярными структурами. Групповые вещества эритроцитов крови - гликолипиды, выделений - гликопротеи-ны [1].

Водные экстракты крови и выделений содержат соответствующие групповые антигены. Практически при экстрагировании в физиологический раствор хлорида натрия и дальнейшем переносе экстракта на марлю выявляются как антигены крови, так и антигены выделений (сперма, пот, слюна, моча, влагалищное содержимое). Известно, что с целью дифференцирования антигенов применяли метод экстрагирования в бутанол [2].

При проведении судебно-медицинской

экспертизы вещественных доказательств по делу об убийстве гр-на Д. следователем были поставлены вопросы о наличии крови человека и ее групповой принадлежности. На рабочем халате и шарфе потерпевшего имелись многочисленные следы крови.

При определении групповой принадлежности следов крови был выявлен антиген А, свойственный самому потерпевшему. В некоторых участках обнаружен антиген В, при этом в части контрольных участков предмета-носителя наблюдалось связывание агглютинина анти-В. От влияния предмета-носителя на сыворотки анти-А и анти-В в процессе реакции абсорбции-элюции старались избавиться, причем не всегда успешно, 3-кратными повторными элюциями антител, перекрестной абсорбцией и сокращением срока последней. Примечательно, что на материале халата, где следы переносили на стерильную марлю, увлажненную физиологическим раствором, путем накатывания при реакции абсорбции-элюции влияния не наблюдалось.

При исследовании контрольных участков, расположенных вблизи следов, на наличие в них пота, мочи и спермы с помощью хроматографи-

Медицина и экология, 2010, 4

227