CC BY
60УДК 615.015.8:616.94-022.7
ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПОЛИГЕКСАНИДА И ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ АНТИБИОТИКОВ ФТОРХИНОЛОНОВОГО РЯДА В ОТНОШЕНИИ РЕЗИСТЕНТНЫХ STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS *
^Афиногенова А.П (руководитель испытательного лабораторного центра, профессор кафедры)*, 3околов и.н. (зав. лаб.), Афиногенов г.Е. (профессор кафедры), 4Хинтуба т.с. (врач-офтальмолог, аспирант кафедры), 5тахтаев Ю.В. (профессор кафедры), 2мадай Д.Ю. (зав. кафедрой)
1 НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера;
2 Санкт-Петербургский государственный университет (кафедра челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии); 3 СПб филиал МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова МЗ РФ; 4 Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова МЗ РФ (кафедра офтальмологии); 5 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова МЗ РФ (кафедра офтальмологии), Санкт-Петербург, Россия
©Коллектив авторов, 2016
Частота высеваемости коагулазонегативных стафилококков (КНС) у пациентов с инфекционно-воспалительными осложнениями в офтальмологии составляет 65%, из них 73% - Staphylococcus epidermidis. При этом 60% и 30% из всех изолятов КНС обладают устойчивостью, соответственно, более чем к 3 и 5 антибиотикам, т.е. являются полирезистентными, в том числе к фторхинолонам третьего и четвертого поколений. В связи с этим особое значение приобретает использование антисептиков, обладающих антимикробным действием как в отношении чувствительных, так и панре-зистентных к антибиотикам стафилококкам. Антисептик Прон-тосан" при коротких экспозициях обладает высокой бактерицидной активностью в отношении клинического изолята S. epidermidis 66, устойчивого к фторхинолонам. При исследованиях на модели культуры клеток фибробластов легкого эмбриона человека показано, что полигексанид не обладает цитотоксическим действием в концентрации 0,01% (100 мкг/мл), а также демонстрирует высокий антиадгезивный эффект в отношении тестируемого штамма стафилококка в дозе У МПК (0,06 мкг/мл). В этой же концентрации антисептик способствует усилению действия глазных капель антибиотиков фторхинолонового ряда, снижая уровень резистентности клинического изолята S. epidermidis 66 от 2,7 до 20 раз по сравнению с исходным. На основании полученных данных считаем перспективным применение антисептиков из группы полигексанидов для профилактики инфекционно-воспалительных осложнений в офтальмологии, особенно в случае устойчивости клинических изолятов КНС к фторхинолонам.
Ключевые слова: адгезия, антибиотикорезистентность, коагула-зонегативные стафилококки, культура клеток, полигексанид, фтор-хинолоны
Контактное лицо: Афиногенова Анна Геннадьевна, e-mail: spbtestcenter@mail.ru
PERSPECTIVES OF POLIHEXANIDE AND FLUOROQUINOLONE ANTIBIOTICS EYE DROPS AGAINST RESISTANT STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS
1,2Afinogenova A.G. (head of testing laboratorial centre, professor of the chair), 3okolov i.N. (head of the laboratory), Afinogenov G.E. (professor of the chair), 4Hintuba T.s. (ophthalmologist, postgraduate student), ^akhtaev Yu.v. (professor of the chair), 2Maday D.Yu. (head of the chair) 1 St. Petersburg Pasteur Institute; 2 St. Petersburg State University (chair of surgical dentistry); 3 St. Petersburg branch of IR & TC «Eye Microsurgery» named after academician S.N. Fyodorov; 4 North-Western State Medical University named after Mechnikov (chair of ophthalmology); 5 Pavlov First State Medical University of St. Petersburg (chair of ophthalmology), St. Petersburg, Russia
©Collective of authors, 2016
Frequency of coagulase-negative staphylococci (CNS) inoculation in patients with infectious and inflammatory complications in ophthalmology is 65%, including 73% - Staphylococcus epidermidis. However, 60% and 30% of all isolated CNS resistant respectively more than to 3 or 5 antibiotics, i.e. they are multidrug-resistant (MDR), including quinolones of the 3rd and the 4th generation. In this regard this important to use the antiseptics, which have antimicrobial activity against both sensitive and MDR staphylococci. Antiseptic Prontosan" during short exposures has high bactericidal activity against clinical isolate of S. epidermidis 66 resistant to fluoroquinolones. Studies on culture model of human embryo lung fibroblast cells showed that Polihexanide has no cytotoxic effect in a concentration of 0.01% (100 pg/ ml) and shows a high anti-adhesion effect against S. epidermidis 66 in У MIC (0.06 pg/ml). The same concentration of antiseptic enhances the action of fluoroquinolone antibiotics eye drops, lowering the level of resistance of clinical isolates of S. epidermidis 66 up to 20 times compared to the original. Based on these data is considered the perspective use of Polihexanide group antiseptics for the prevention of infectious and inflammatory complications in ophthalmology, especially in the case of CNS resistant to fluoroquinolones.
Key words: adhesion, antibiotic resistance, cell culture, coagulase-negative staphylococci, fluoroquinolones, Polihexanide
введение
По данным отечественных и зарубежных авторов, в составе бактериальной микробиоты конъюнктивы взрослых пациентов основная доля (до 90%) приходится на грамположительные бактерии, при этом те же микроорганизмы являются и основным этиологическим фактором послеоперационных осложнений в офтальмологии (конъюнктивитов, кератоконъюнктивитов, увеитов, эндофтальмитов). Коагулазонегативные стафилококки (КНС) составляют 18,6-70%, Staphylococcus aureus - 10-21%, Streptococcus spp. - 9-19%, грамотри-цательные бактерии - 5-22%, грибы (Candida spp., Aspergillus spp., Fusarium spp.) - до 8% [1-5].
В современной научной литературе отмечено, что более половины клинических изолятов S. epidermidis проявляют резистентность к офлоксацину и левоф-локсацину, 33% и 37% - к гатифлоксацину и моксиф-локсацину соответственно. При этом 60% и 30% из всех изолятов КНС обладают устойчивостью, соответственно, более чем к 3 и 5 антибиотикам, т.е. являются полирезистентными, том числе к фторхинолонам II-IV поколения [2, 6, 7]. Резистентность микроорганизма,
■
являющегося этиологическим фактором, предполагает исключение препарата(ов) из арсенала возможных лекарственных средств.
Наряду с резистентностью к антибиотикам, большое значение имеют факторы патогенности S. epidermidis. КНС экспрессируют поверхностные адге-зины. Вирулентный потенциал S. epidermidis реализуется за счет наличия нескольких поверхностных и поверхностно-ассоциированных протеинов, а также способности микроорганизма образовывать биопленки. К их числу относят фибриноген-связывающие и колла-ген-связывающие протеины, а также гомолог протеина, ассоциированного с биопленками. Предполагают, что 50-70% КНС способны продуцировать гемолизины, гомологичные дельта-гемолизину S. aureus [8].
Наличие в хирургических отделениях резистентных штаммов бактерий вызывает трудности в лечении послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений пациентов после офтальмологических операций. Особое значение приобретает использование современных антисептиков, которые обладают антимикробным действием как в отношении чувствительных, так и панрезистентных к антибиотикам стафилококкам. Так, по данным литературы, чтобы уменьшить риск возникновения эндофтальмита, обычно перед операцией используют раствор ПВП-йода [9, 10]. В руководстве 2013 г. Европейского общества катарактальных и рефракционных хирургов (ESCRS) с целью профилактики эндофтальмита перед оперативным вмешательством рекомендуют использование ПВП-йода или хлоргекси-дина биглюконата для снижения числа колоний микроорганизмов на глазной поверхности [11]. В настоящее время в МНТК «Микрохирургия глаза» предоперационная подготовка пациента включает обработку операционного поля: кожи - 10% раствором ПВП-йода, слизистой оболочки глаза - 5% раствором ПВП-йода, экспозиция 2-3 минуты.
Опубликован ряд работ, в которых установлено, что препараты йода противопоказаны пациентам с аллергическим анамнезом или тяжелым расстройством щитовидной железы, поэтому проводили поиск альтернативных антисептических средств [9]. В рандомизированном, контролируемом, проспективном двойном слепом исследовании изучали влияние антисептика из группы полигексанидов (или полигексак-метиленбигуанидинов, ПГМГ) - препарата Лавасепт®. До операции 67 пациентам закапывали по 3 капли 0,2% Лавасепта®, 1,25% ПВП-йода или раствора Ринге-ра, при этом на слизистой конъюнктивы у них обнаруживали по 5 колониеобразующих единиц (КОЕ). Наблюдали достоверно (P=0,05) большее снижение числа КОЕ при использовании Лавасепта® по сравнению с ПВП-йод. При этом отмечали хорошую переносимость обоих препаратов пациентами, а также эффект последействия полигексанида, что делает эту группу антисептиков перспективными в качестве альтернативы йодсодержащим препаратам. Отметим, что в Германии с 2004 г. 0,04% полигексанид рекомендован для предхирургической антисептики глазной поверхности [12]. Есть ряд публикаций, в которых описано эффективное применение 0,02% полигексанида для лечения акантамёбных кератитов [13-16]. В наших исследованиях было показано, что полигексаниды обладают не только выраженным бактерицидным действием, но и
эффектом последействия, проявляя антиадгезивный эффект в небактерицидных концентрациях в отношении S. aureus и S. agalactiae, продуцирующего адгезивный белок SspB1 (sspB1+) [17, 18].
Селективное биоцидное действие полигексанидов на микроорганизмы обусловлено тем, что фосфоли-пидные клеточные бислойные мембраны микроорганизмов, состоящие только из фосфатидилглицерина или из фосфатидилглицерина и фосфатидилхолина и обладающие отрицательным суммарным электрическим зарядом, эффективно сорбируют биоцидный поликатион, который увеличивает проницаемость клеточных стенок, разрушает клеточную мембрану, коагулирует клеточное содержимое, ингибирует обменную функцию ферментов, нарушает воспроизводящую способность нуклеиновых кислот и белков, а также угнетает дыхательную систему. Такое воздействие, наряду с разрушением стенок клетки, приводит к гибели микроорганизма. При этом нейтральные бис-лои фосфатидилхолина клеток человека не вовлекаются во взаимодействие с полигексанидом. Изучено, что полигексанид в 2 раза менее токсичен, по сравнению с ПВП-йод, в исследованиях на культуре клеток, а также не оказывает цитотоксического действия в сочетаниях с полиэтиленгликолем и бетаином [19].
Эти работы послужили основанием для проведения данного исследования по оценке перспективности использования антисептика из группы полигексани-дов в офтальмологической практике в отношении клинических изолятов S. epidermidis, устойчивых к фтор-хинолонам, а именно препарата Пронтосан® (Швейцария), поскольку он разрешен для обработки ран и слизистых оболочек.
материалы и методы1
Пронтосан® - лекарственный препарат, раствор на основе 0,1% полиаминопропила бигуанида и ундеци-ленового амидопропил-бетаина, производства фирмы «В. Braun Medical AG», Швейцария.
Глазные капли антибиотиков фторхинолонового ряда: ципрофлоксацина (Ципромед®), офлоксацина (Флоксал®), левофлоксацина (Сигницеф®).
Бактерицидную активность Пронтосана® исследовали чашечно-суспензионным методом [20] при коротких экспозициях, оценивая значение коэффициента редукции (Кред) в десятичных логарифмах (lg). Микробная нагрузка выделенного от пациента с гнойным кератоконъюнктивитом и эндофтальмитом клинического изолята S. epidermidis 66, устойчивого к фторхинолонам, составила 1,5-107 КОЕ/мл, экспозиции - 5-60 мин.
Для получения инокулюма готовили исходную суспензию суточной культуры стафилококка по стандарту 0,5 McFarland. Далее суспензию разводили в 31 раз в бульоне Мюллера-Хинтона, при этом полученная взвесь содержала 5-106 КОЕ/мл. Конечная нагрузка тест-штамма составила 5-104 КОЕ в 200 мкл, экспозиция - 24 часа.
Стандартный метод шахматной доски [Eliopoulos G.M., Moellering R.C. Antimicrobial combinations» in «Antibiotics in Laboratory Medicine. - 1996.] мы модифицировали для изучения бактерицидной активности полигексанида в микроразведениях [21] и для оценки усиления действия антибиотиков фторхинолонового ряда в присутствии небактерицидных концентраций
антисептика по показателям МПК антибиотиков и индекса фракционной ингибирующей концентрации (ХФИК) [22]. Трактовка £ФИК: синергизм - индекс до 0,5; индифферентность - индекс от 0,51 до 4; антагонизм - индекс более 4. Значение индекса ФИК от 0,51 до 0,6 может быть показателем наличия «потенциального синергизма».
Изучение токсичности полигексанида проводили на модели культуры клеток фибробластов легкого эмбриона человека (Биолот, Россия), оценивая их морфологическое состояние по 5-бальной шкале FDA (США) для определения цитотоксического действия (ЦТД) химических агентов: 0 баллов - отсутствие цитотоксического действия, 1 балл - слабое токсическое действие (20-25% лизированных клеток), 2 балла - мягкое токсическое действие (50% гибели клеток), 3 балла
- умеренное токсическое действие (70-75% клеточного монослоя содержат округлые и/или лизированные клетки), 4 балла - тяжелое токсическое действие (100% деструкция клеточного монослоя). Согласно данной шкале тестируемые препараты отвечают требованиям безопасности, если ни одна из опытных клеточных культур не имеет степень ЦТД более 1 [23]. Кроме того, на культуре клеток оценивали антиадгезивную активность небактерицидных концентраций антисептика в отношении клинического изолята S. epidermidis 66, определяя степень инфицированности монослоя по морфологическому состоянию клеток фибробластов и интенсивность процесса адгезии тест-штамма по следующим показателям: 1) среднее число бактериальных клеток на одной эукариотической клетке (M±m); 2) процент пораженных клеток монослоя (ПК%); 3) об-семененность 100 клеток монослоя - индекс адгезии (ИА) - вычисляли по формуле ИА = M х ПК%. Уровень адгезии микроба в опыте устанавливали по показателю индекса адгезии относительно контроля, принимаемого за 100% [Грабовская К.Б и др. Способ определения антиинфекционной активности биологически активного соединения /Авт. св-во №1359300 от 15.08.1987 г.].
Формирование конфлюэнтного монослоя фибро-бластов осуществляли на накладках Tissue Culture Coverslips 13 mm (Германия) в ростовой питательной среде Игла в течение 24 часов при 37 °С по стандартной методике [Грабовская К.Б., Тотолян А.А. // Микробиология. - 1977. - №2]. Микробная нагрузка S. epidermidis 66 составила 107 КОЕ/мл. Время инкубации - 2 часа.
результаты и их обсуждение
Результаты оценки чашечно-суспензионным методом бактерицидного действия Пронтосана® интерпретировали по значению коэффициента редукции (Кред)
- коэффициенту снижения КОЕ на чашке, а также по значению снижения уровня микробной популяции в процентах относительно контроля (табл. 1).
Таблица 1.
Оценка бактерицидного действия раствора «ПРОНТОСАН®»
Препарат Экспозиция, мин Коэффициент снижения КОЕ клинического изолята S. ер1дегт1М5 66 на чашке (Кред) и снижение уровня микробной контаминации в % (п=3; контроль - 9,3 1д КОЕ на чашке)
К ред %
5 4,53 99,99
Раствор 15 4,65 99,99
«Пронтосан®» 30 4,74 99,999
60 4,86 99,999
Антисептик Пронтосан® обладает выраженной бактерицидной активностью и в короткие экспозиции снижает уровень микробной популяции 5. epidermidis 66 более чем на 99% при высокой начальной микробной нагрузке (107 КОЕ/мл), при этом данный эффект не снижается в течение времени эксперимента.
Для оценки усиления действия фторхинолонов в отношении резистентного клинического изолята 5. epidermidis 66 в присутствии Пронтосана® модифицировали метод «шахматной доски», или перекрестного титрования. МПК антисептика в отношении тест-штамма составила 0,125±0 мкг/мл, МПК левофлокса-цина - 16,25±2 мкг/мл, МПК офлоксацина - 31,2±4,7 мкг/мл, МПК ципрофлоксацина - 31,2±4,7 мкг/мл. Отметим, что для использования в клинике для обработки ран и слизистых оболочек Пронтосан ® разрешен с концентрацией полигексанида 0,1% (1000 мкг/мл).
Данные рисунка 1 являются показателем достоверного снижения уровня резистентности клинического изолята 5. epidermidis 66 в присутствии суббактерицидной дозы Пронтосана® 0,06 мкг/мл.
□ Антибиотик ■ Антибиотике Пронтосаном
Рис. 1. Изменение уровня МПК глазных капель антибиотиков фторхинолонового ряда в присутствии % МПК Пронтосана®
По средним значениям результатов 3-х опытов в каждом случае наблюдали усиление действия левоф-локсацина в 20 раз, ципрофлоксацина - в 6,4 раза, офлоксацина - в 2,7 раза. В случае сочетанного применения Пронтосана® с ципрофлоксацином и офлок-сацином отмечали индифферентное действие двух антимикробных агентов, когда £ФИК составил 0,64 и 0,85 соответственно. В опыте, где изучали сочетанное действие антисептика и левофлоксацина, £ФИК был равен 0,53, что может быть показателем наличия «потенциального синергизма».
Наличие бактерицидного эффекта полигексанида при коротких экспозициях очень важно при использовании его в офтальмологической практике. Способность препарата в небактерицидной концентрации усиливать действие глазных капель антибиотиков фторхинолонового ряда свидетельствует о наличии эффекта последействия антисептика. При этом есть данные, что и фторхинолоны не только убивают бактерии, но и ингибируют их рост в течение 2-6 часов после воздействия. Этот весьма полезный эффект называют постантибиотическим [10]. Сочетанное применение этих препаратов перспективно, учитывая схему применения антисептика и антибиотика в предо-
перационном и раннем послеоперационном периоде в офтальмологии.
Поскольку задачей исследования была оценка перспективности использования Пронтосана® в офтальмологии, поэтому опыты по оценке токсичности и антиадгезивного эффекта антисептика проводили на культуре клеток фибробластов легкого эмбриона человека в присутствии 10% телячьей сыворотки, что помогло приблизить условия опыта к условиям макроорганизма.
На рисунке 2 представлена фотография нормального монослоя фибробластов легкого эмбриона человека. Морфология клеток не нарушена.
Рис. 2. Монослой фибробластов легкого эмбриона человека. Окраска по Романовскому-Гимзе, х400, 24 часа.
В дальнейшем в модельную среду вносили различные разведения антисептика Пронтосан® в присутствии 10% телячьей сыворотки и оценивали состояние монослоя фибробластов по 5-бальной шкале FDA (Рис. 3, 4).
Рис. 3. Состояние монослоя фибробластов легкого эмбриона человека после воздействия Пронтосана® в дозе 100 мкг/мл (0,01% полигексанида) в присутствии 10% телячьей сыворотки. Окраска по Романовскому-Гимзе, х400, 2 часа.
Рис. 4. Состояние монослоя фибробластов легкого
эмбриона человека после воздействия % МПК Пронтосана® в дозе 0,06 мкг/мл в присутствии 10% телячьей сыворотки. Окраска по Романовскому-Гимзе, х400, 2 часа.
На рисунках 3 и 4 показано, что при воздействии
разведения Пронтосана® в концентрации 100 мкг/мл (0,01% полигексанида) и У МПК 0,06 мкг/мл не наблюдали какого-либо воздействия на морфологию фибробластов: монослой не нарушен, клетки сохранили свою целостность. Степень цитотоксического действия - 0 баллов.
В таблице 2 представлены результаты оценки показателей адгезии клинического изолята 5. ер1йетш1й1$ 66 к клеткам монослоя фибробластов в присутствии 10% телячьей сыворотки и У МПК Пронтосана®.
Таблица 2.
Адгезивная активность & ерШегтШв 66 в присутствии / МПК Пронтосана® 0,06 мкг/мл и 10% телячьей сыворотки
Тест-объект Показатели интен S. epidermidis 66 ивности процессе адгезии экспозиция 2 часа, n=5)
ИА % ПК МН % адгезии от контроля % подавления адгезии тест-штамма
Контроль: фибробла-сты + S. epidermidis 66 22,6±0,96 84,8±0,96 1916,48 100 -
Опыт: фибробласты + S. epidermidis 66 + 10% сыворотка 21,0±0,77 80,0±0,77 1680,0 87,7 12,3
фибробласты + S. epidermidis 66 + У МПК Пронтосана® 13,0±0,77 55,6±0,58 722,8 37,7 62,3
фибробласты + S. epidermidis 66 + У МПК Пронтосана® + 10% сыворотка 3,0±0,4 31,2±0,58 93,6 4,9 95,1
Как видно из таблицы, 10% телячья сыворотка обладает собственной антиадгезивной активностью и снижает адгезию тест-штамма на 12%. Наличие в среде У МПК Пронтосана® (0,06 мкг/мл полигексанида) приводило к снижению уровня адгезии стафилококка на 62,3%, тогда как сочетанное использование антисептика и 10% телячьей сыворотки способствовало предотвращению адгезии 5. ер1йетш1сИ$ 66 на 95,1%. Полученные данные являются показателем наличия выраженного эффекта последействия антисептика, который в небактерицидных концентрациях почти полностью предотвращает адгезию тест-штамма стафилококка к фибробластам.
На рисунках 5-8 показана адгезия клинического изолята 5. ер1йетш1й1$ 66 к клеткам монослоя фибро-бластов и в присутствии тестируемых агентов - 10% телячьей сыворотки и У МПК антисептика Пронтоса-на®. На рисунке 5 показана адгезия стафилококка: значительное число микроорганизмов в межклеточном пространстве, на поверхности и внутри фибробластов, монослой частично разрушен, степень ЦТД - 2 балла.
Рис. 5. Адгезия S. epidermidis 66 к фибробластам. Окраска по Романовскому-Гимзе, х400, 2 часа.
На рисунке 6 отмечена собственная антиадгезивная активность 10% телячьей сыворотки: количество адгезированных микробов снижено, монослой нарушен не значительно, степень ЦТД - 1 балл.
ЦТД - 0 баллов.
Рис. 6. Адгезия Я. ерШегтШк 66 к фибробластам в присутствии 10% телячьей сыворотки. Окраска по Романовскому-Гимзе, х400, 2 часа.
На рисунке 7 показано достоверное снижение степени адгезии стафилококка к фибробластам в присутствии суббактерицидной концентрации Пронтосана®, микробы расположены на поверхности эукариоти-ческих клеток и в межклеточном пространстве. При этом наблюдали сохранение морфологии клеток монослоя, его целостность, степень ЦТД - 0 баллов.
Рис. 7. Адгезия Б.ерШегтШк 66 к фибробластам в присутствии 0,06 мкг/мл Пронтосана®. Окраска по Романовскому-Гимзе, х1000, иммерсия, 2 часа. Снижение адгезии на 62%.
Рисунок 8 также является показателем достоверного на 95% подавления адгезии 5. epidermidis 66 к фибробластам в присутствии суббактерицидной концентрации Пронтосана® и 10% телячьей сыворотки; оставшиеся микробные клетки расположены в межклеточном пространстве, монослой сохранен, степень
Рис. 8. Адгезия Б.ерШегтШ'к 66 к фибробластам в присутствии 0,06 мкг/мл Пронтосана® и 10% телячьей сыворотки. Окраска по Романовскому-Гимзе, х1000, иммерсия, 2 часа. Снижение адгезии на 95%.
заключение
Препарат Пронтосан® при коротких экспозициях обладает высокой бактерицидной активностью в отношении клинического изолята 5. epidermidis 66, устойчивого к фторхинолонам. МПК антисептика составила 0,125 мкг/мл, что значительно меньше его клинически разрешенной дозы (1000 мкг/мл). При исследованиях на модели культуры клеток фибробластов легкого эмбриона человека выявили, что полигексанид не обладает цитотоксическим действием в концентрации 0,01% (100 мкг/мл), а также демонстрирует высокий антиадгезивный эффект в отношении тестируемого штамма стафилококка в дозе У МПК (0,06 мкг/мл). В этой же концентрации антисептик способствует усилению действия глазных капель антибиотиков фтор-хинолонового ряда, снижая уровень резистентности клинического изолята 5. epidermidis 66 от 2,7 до 20 раз по сравнению с исходным. Отметим, что, несмотря на индифферентное действие сочетания антибиотиков и антисептика по показателям индекса ФИК, наблюдали уменьшение значений МПК антибиотиков в присутствии суббактерицидной дозы полигексанида, что может быть показателем аддитивного действия двух антимикробных агентов.
На основании полученных данных можно считать перспективным применение антисептиков из группы полигексанидов для профилактики инфекционно-вос-палительных осложнений в офтальмологии, особенно в случае устойчивости клинических изолятов КНС к фторхинолонам.
2.
цитированная литература
Mollan S.P., Gao A., Lockwood A., et al. Postcataract endophthalmitis: Incidence and microbial isolates in a United Kingdom region from 1996 through 2004 // J. Cataract Refract. Surg. - 2007. - Vol. 33, №2. - P. 265-268.
Kim S., Toma H., Midha N., et al. Antibiotic resistance of conjunctiva and nasopharynx evaluation study: a prospective study of patients undergoing intravitreal injections // Ophthalmology. - 2010. - Vol. 17, №12. - P. 2372-2378.
Брусина Е.Б. Эпидемиология ВБИ в офтальмологических отделениях. Руководство по медицинской микробиологии. Книга III. Том 2. Оппортунистические инфекции: клинико-эпидемиологические аспекты / Колл. авторов под ред. А.С. Лабинской, Е.Г. Волиной, Е.П. Ковалевой. - М.: БИНОМ, 2014. - С. 682.
Поляк М.С., Околов И.Н., Пирогов Ю.И. Антибиотики в офтальмологии. - СПб. : Нестор-История, 2015. - 352 с. Майчук Д.Ю., Дехнич А.В., Сухорукова М.В. Оценка перспективности применения нетилмицина для топической терапии бактериальных инфекций в офтальмологии с учётом чувствительности основных возбудителей в РФ // Клин. микробиол. Антимикроб. химиотер. - 2015. - Т. 17, №3. - С. 241-249.
Bispo P., Alfonso E., Flynn H., Miller D. Emerging 8-Methoxy-fluoroquinolone resistance among methicillin-susceptible Staphylococcus epidermidis isolates recovered from patients with endophthalmitis // J. Clin. Microbiol. - 2013. - Vol. 51, №9. - P. 2959-2963.
7. Holland E., McDonald M., Parekh J., Sheppard J. Antibiotic resistance in acute postoperative endophthalmitis // Ophthalmology.
- 2014. - Vol. 121, Suppl. 11. - P. S1-S9.
8. Дмитренко О.А. Род Staphylococcus. Руководство по медицинской микробиологии. Книга III. Том 1. Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика. Колл. авторов / Составитель А.С. Лабинская, редактор Н.Н. Костюкова. - М.: БИНОМ, 2014. - C. 67.
9. Hansmann F., Kramer A., Ohgke Н., et al. Lavasept as an alternative to PVP-iodine as a preoperative antiseptic in ophthalmic surgery. Randomized, controlled, prospective double-blind trial // Ophthalmology. - 2005. - Vol. 102, №11. - Р. 1043-1046, 1048-1050.
10. Астахов С.Ю., Вохмяков А.В. Офтальмологические фторхинолоны в лечении и профилактике глазных инфекций // РМЖ. Клиническая офтальмология. - 2008. - Т. 9, №1. - С. 28-29.
11. Руководство ESCRS по профилактике и лечению эндофтальмита после операции по удалению катаракты: данные, дилеммы и выводы: http://escrs.org/endophthalmitis/guidelines/RUSSIAN.pdf.
12. Hansmann F., Kramer A., Ohgke H., et al. Polyhexamethylbiguanid (PHMB) as preoperative antiseptic for cataract surgery // Ophthalmology. - 2004. - Vol. 101. - P. 377-383.
13. Lee J.E., Oum B.S., Choi H.Y., et al. Cysticidal effect on acanthamoeba and toxicity on human keratocytes by polyhexamethylene biguanide and chlorhexidine // Cornea. - 2007. - Vol. 26. - Р. 736-741.
14. Lim N., Goh D., Bunce C., et al. Comparison of polyhexamethylene biguanide and chlorhexidine as monotherapy agents in the treatment of Acanthamoeba keratitis // Amer. J. of Ophtalmology. - 2008. - Vol. 145. - Р. 130-135.
15. Dart J.K.G., Saw V.P.J., Kinvilgton S. Acanthamoeba keratitis: diagnosis and treatment. Update 2009 // Amer. J. of Ophtalmology. - 2009. - Vol. 148. - Р. 487-499.
16. Бикбов М.М., Суркова В.К., Усубов Э.Л., Никитин Н.А. Акантамебный кератит и результаты его лечения (клинические случаи) // Офтальмология. - 2015. - T. 12, №4. - C. 80-83.
17. Афиногенова А.Г., Грабовская К.Б., Кулешевич Е.В. и др. Влияние бигуанидов на формирование стрептококковой биопленки на модели культуры клеток фибробластов кожи эмбриона человека // Инфекции в хирургии. - 2011. - Т. 9, №1.
- С. 5-13.
18. Афиногенова А.Г. Микробиологические аспекты разработки и применения антисептиков и антисептических средств для профилактики и лечения раневых инфекций: Автореф. дисс...док. биол. наук. - М., 2011. - 50 с.
19. Hubner N.O., Kramer A. Review on the efficacy, safety and clinical applications of polihexanide, a modern wound antiseptic // Skin Pharmacol Physiol. - 2010. - Suppl. 23. - Р. 17-27.
20. Афиногенов Г.Е., Краснова М.В. Чашечный метод оценки эффективности дезинфектантов и антисептиков. Методические рекомендации МЗ РФ № 2003/17. - 2004. - 13 с.
21. Афиногенова А.Г., Ворошилова Т.М., Афиногенов Г.Е., Родионов Г.Г. «Метод шахматной доски» как тест для оценки снижения уровня резистентности грамотрицательных микроорганизмов к карбапенемам в присутствии бисфосфоната // Клин. микробиол. Антимикроб. химиотер. - 2015. - Т. 17, №1. - С. 24-32.
22. Поляк М.С. Лабораторное обеспечение антибиотикотерапии. - СПб.: ООО «Анатолия», 2012. - 256 с., илл.
23. Оценка токсичности материалов, изделий и объектов окружающей среды на альтернативных биологических моделях (экспресс-методы). - М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. - 220 с.
Поступила в редакцию журнала 01.07.2016
Рецензент: В.Н. Чеботкевич
