УДК 636.1:619:616.99
ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ КАК ФАКТОР ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ
О.В. БЯКОВА
аспирант Л.В. ПИЛИП кандидат ветеринарных наук С.Н. БЕЛОЗЕРОВ доктор ветеринарных наук Вятская государственная сельскохозяйственная академия
С использованием метода индуцированной биохемилюминес-ценции выявлены закономерности в процессе свободноради-кальных реакций в сыворотке крови и состоянии антиоксидант-ной системы у клинически здоровых и инвазированных лошадей. У лошадей при смешанной инвазии установленные нарушения в равновесии между накоплением свободных радикалов в крови и недостаточностью антиоксидантной активности обусловлены образованием токсических продуктов жизнедеятельности гельминтов с последующим изменением гомеостаза. Дегельминтизация, приводя к освобождению организма от гельминтов, способствует снижению показателей продуктов перекисного окисления липи-дов и активизирует состояние антиоксидантной системы.
Ключевые слова: лошади, биохемилюминесценция, перекисное окисление липидов, сыворотка крови, гельминтозы, антиоксидантная система.
Особенностью большинства паразитарных заболеваний является хроническое течение, связанное с длительным присутствием возбудителя в организме больного животного. Рассматривать паразитарные болезни следует не только со стороны патогенного действия самих гельминтов, но и адекватности защитных реакций организма [5]. В зависимости от интенсивности и длительности действующих на организм факторов физической, химической и биологической природы изменения в регуляции пере-кисного окисления липидов (ПОЛ)
могут носить обратимый характер с последующим возвращением к норме или превращаться в ведущее звено патогенеза различных заболеваний [1, 7]. Активные формы кислорода и продукты ПОЛ приводят к нарушению проницаемости клеточных мембран, повреждают внутриклеточные органел-лы, нарушают метаболизм как основу эндогенной интоксикации и т. п.
Изучение роли свободноради-кальных процессов в настоящее время является интересным направлением медицины и ветеринарии, и может быть использовано для коррекции
здоровья животных, профилактики и терапии распространенных заболеваний, в том числе и паразитозов.
Использование метода хемиолю-минесценции (ХЛ) является информативным для оценки ПОЛ, а также характеристики иммунологической реактивности и выявления динамики патологического процесса [3]. Однако этот метод не позволяет проводить дифференциальную диагностику заболевания и поэтому он должен применяться в совокупности с другими показателями, отражающими определенную патологию [6].
В доступной нам литературе практически отсутствуют сведения о показателях биохемилюминисценции (БХЛ) сыворотки крови лошадей характеризующих активность процессов ПОЛ. Не проводились исследования, касающиеся влияния паразитарной патологии на уровень свободно радикального окисления (СРО) и антиок-сидантной защиты (АОЗ). Кроме того, известно, что процессы ПОЛ, протекающие в организме животных, могут варьировать в широких пределах в зависимости от многих факторов [2, 4].
Целью настоящих исследований явилась апробация использования метода БХЛ для изучения уровня ПОЛ и АОЗ у интактных животных и его изменений при смешанной инвазии у лошадей, а также изучение влияния противопаразитарной пасты алезан на данные показатели при гельминтозах лошадей.
Материалы и методы
Исследования проводили методом индукции биохемилюминесценции перекисью водорода с сульфатом железа на биохемилюминометре БХЛ-06М
(НПЦ «Биоавтоматика», г. Н. Новгород). Интенсивность активации ПОЛ определяли по значению светосуммы (Б) за 30 сек, показателю максимальной интенсивности свечения (I тах) и уровню антиокислительной активности сыворотки крови (АОА).
Работу по изучению СРО проводили на лошадях в возрасте от 2 до 5 лет, у которых в результате предварительного гельминтокопроскопическо-го исследования методом флотации по Фюллеборну были обнаружены яйца параскарисов и стронгилят желудочно-кишечного тракта. Подсчет количества яиц проводили в счетной камере ВИГИС, разработанной Мигачевой и Котельниковым (1987).
В зависимости от степени инвазии лошадей условно разделили на 3 группы по 6 голов в каждой. В первую опытную группу вошли животные с высокой степенью инвазии. Вторую группу составили животные с наличием умеренной степени инвазии. В качестве группы сравнения (контроль) использовали результаты обследования клинически здоровых лошадей.
Противопаразитарную пасту алезан (НВЦ «Агроветзащита», 10 % пра-зиквантела и 2 % ивермектина) вводили лошадям первой опытной группы. Препарат применяли однократно, пе-рорально из расчета 1 г на 100 кг массы животного при помощи шприца-дозатора перед кормлением.
Результаты и обсуждение
По результатам гельминтоово-скопии в г фекалий лошадей первой группы обнаружили 83,3± 2,65 яиц параскарисов и 776,0±80,07 яиц строн-гилят. У лошадей второй опытной группы обнаружены яйца параскари-
сов и желудочно-кишечных стронги-лят: 41,70±14,17 и 240,67±25,3 экз. соответственно.
Сопоставляя показатели крови лошадей с умеренной степенью инвазии, отмечено достоверное повышение показателя светосуммы на 34,9 % и максимальной интенсивности свечения на 47,5 % по сравнению с группой клинически здоровых лошадей (табл. 1). С увеличением интенсивности инвазии наблюдается интенсификация процесса ПОЛ на 40,6 % и повыше-
Показатели ПОЛ и АОА у лошаде
ние показателя максимальной интенсивности свечения (I тах) на 48,6 % по сравнению с контролем. Отмечена корреляция в накоплении концентрации гидроперекисей в крови при одновременном снижении эффективности антиокислительной активности. Так, в сыворотке крови клинически здоровых лошадей показатель АОА превышает показатели лошадей первой и второй группы на 10,2 и 4,2 % соответственно.
Таблица 1 в зависимости от степени инвазии
Показатель Интенсивность инвазии
высокая средняя контрольная группа
Перекисное окисление липидов 39,21±0,76*** 35,82±1,51*** 23,31±1,39
Максимальная интенсивность свечения 6,98±0,30*** 6,84±0,29*** 3,59±0,31
Уровень антиокислительной реактивности 5,65±0,19 5,30±0,36 5,90±0,29
*(Р<0,05); **(Р<0,01); ***(Р<0,001) - по отношению к контрольным животным.
Полученные данные указывают на то, что по мере увеличения степени инвазии происходит интенсификация процессов ПОЛ и изменение состояния антиоксидантной системы. Интенсивность инвазии обусловливает высокий уровень гидроперекисей, быстрое истощение АОЗ и приводит к нарушению гомеостатических систем организма.
Анализируя показатели таблицы 2, можно отметить, что после однократного применения алезана к 7-м суткам регистрируют подавление сво-боднорадикального окисления: снижается светосумма радикалов на 14,6 % (*Р<0,01), а интенсивность вспышек -
на 26,5 %. По результатам гельминтологических исследований однократное применение противопаразитарной пасты способствовало элиминации гельминтов из организма хозяина к 10-м суткам опыта. Показатели сыворотки крови на 14 и 28-е сутки после введения препарата характеризуются уменьшением концентрации недо-окисленных продуктов на 17 и 31,8 %, а I max - на 34,4 и 46,1 % соответственно. Одновременно на протяжении всего эксперимента достоверно активизируется антиокислительный потенциал на 26 % к 14-м суткам и на 26,7 % - к 28-м суткам опыта.
Таблица 2
Изменение показателей ПОЛ и АОЗ после применения противопаразитарной пасты алезан
Показатель Время после введения препарата, сутки
0 7 14 28
Перекисное окисление липидов 39,21±0,76 33,48±1,40 * 32,56±0,87** 26,73±0,82**
Максимальная
интенсивность 6,98±0,30 5,13±0,32 4,58±0,16** 3,76±0,18**
свечения
Уровень антиокислительной 5,65±0,19 6,61±0,40 7,13±0,13** 7,16±0,17**
реактивности
*(Р<0,01); **(Р<0,001) - в сравнении с показателями до опыта.
Литература
1. Газизов В.З., Жданов С.Л., Бояринцев Л.Е. Биохимические реакции пере-кисного окисления липидов и физиологические процессы антиоксидантной защиты организма плотоядных. - Киров, 2001. - 37 с.
2. Вараксина Ж.В. // Матер. Всерос. науч.-практ. конф. - Киров, 2002. - С. 13-14.
3. Добротина Н.А., Ежова Г.П., Курова М.В., Кузьмина Е.И. Хемилюми-несценция в оценке гомеостаза человека. - Н. Новгород, 1991. - 36 с.
4. Конторщикова К.Н. Перекисное окисление липидов в норме и патологии. - Н. Новгород, 2000. - 23 с.
5. Сергиев В.П., Малышев Н.А., Дрынов И.Д. // Эпидемиол. и инфек. бол. -1999. - № 4. - С. 4-8.
6. Степанова И.П. // Ветеринария сельскохозяйственных животных. -2007. - № 1. - С. 58-60.
7. Шелякин И.Д., Кузьмичева В.Н., Кушнир И.Ю. // Матер. науч. конф. Всерос. о-ва гельминтол. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - М., 2006. - С. 447-449.
Peroxide oxidation of blood lipids as a factor of endogenic intoxication
at helminthosis
О-V. Byakova, L.V. Pilip, S.N. Belozerov
One revealed the particular objective laws of free radical reactions and antioxidative system in blood sera of healthy and infected by Parascaris equorum and gastrointestinal strongylata horses. Correction of peroxide oxidation of lipids and antioxidative system appears to be perspective trend in maintenance of productive health of animals.