CC BY
32
э
DOI: 10.31146/1682-8658-ecg-180-8-103-106
Патоморфологические изменения при остром экспериментальном панкреатите и способы их коррекции и профилактики*
Стяжкина С. Н., Кирьянов Н. А., Михайлов А. Ю., Васильев А. Д., Жуйкова А. А., Акимов А. А.
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Ижевская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации (Ижевск, 426043, Ижевск, ул. Коммунаров, д. 281, Россия)
Pathomorphological changes in acute experimental pancreatitis and methods of their correction and prevention*
S. N. Styazhkina, N. A. Kiryanov, A. Yu. Mikhailov, A. D. Vasiliev, A. A. Zhuikova, A. A. Akimov
Federal state budgetary educational institution of higher education "Izhevsk state medical Academy" of the Ministry of health of the Russian Federation (281, Kommunarov, Izhevsk, 426034 Russian Federation)
Для цитирования: Стяжкина С. Н., Кирьянов Н. А., Михайлов А. Ю., Васильев А. Д., Жуйкова А. А., Акимов А. А. Патоморфологические изменения при остром экспериментальном панкреатите и способы их коррекции и профилактики. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2020;180(8): 103-106. DOI: 10.31146/1682-8658-ecg-180-8-103-106
For citation: Styazhkina S. N., Kiryanov N. A., Mikhailov A. Yu., Vasiliev A. D., Zhuikova A. A., Akimov A. A. Pathomorphological changes in acute experimental pancreatitis and methods of their correction and prevention. Experimental and Clinical Gastroenterology. 2020;180(8): 103-106. (In Russ.) DOI: 10.31146/1682-8658-ecg-180-8-103-106
Стяжкина Светлана Николаевна, профессор кафедры факультетской хирургии, д.м.н. Кирьянов Николай Александрович, заведующий кафедрой патологической анатомии, Михайлов Александр Юрьевич, ассистент кафедры общей хирургии, к.м.н. Васильев Александр Дмитриевич, студент Жуйкова Алина Андреевна, студент.
Акимов Антон Александрович, аспирант кафедры факультетской хирургиии Svetlana N. Styazhkina, Professor of the department of faculty surgery, MD, PhD Nikolai A. Kiryanov, Professor, Head of chair of pathological anatomy, MD, PhD Alexander Yu. Mikhailov, assistant professor of the department of general surgery, MD, PhD Aleksandr D. Vasiliev, student Alina A. Zhuikova, student
Anton A. Akimov, PhD student of the department of faculty surgery
Резюме
Цель исследования — изучение деструктивных процессов ткани поджелудочной железы, экстрапанкреатических изменений при экспериментальном остром деструктивном панкреатите (ЭОДП) с применением комбинации имму-нокоррегирующего препарата, ингибитора протеаз, нестероидного противовоспалительного средства.
Материалы и методы. Моделирование ЭОДП осуществлено на белых крысах ежедневным пероральным введением 1,5мл 40% раствора этанола на протяжении 90 дней, с последующим (после 60 дня) добавлением жировой диеты. Сформированы 3 группы (основная № 1, группы сравнения № 2 и № 3). Группа № 1 фармакологической поддержки не получала. Группе сравнения № 2 ежедневно внутривенно в хвостовую вену вводилось 1000 КИЕ апроти-нина в 1мл 0,9% р-ра NaCl, перорально азоксимера бромид 0,1 мг. Группе сравнения № 3 ежедневно вводились диклофенак 0,1мл 0,1% внутримышечно в область бедра, 1000 КИЕ апротинина в 1мл 0,9% р-ра NaCl внутривенно
И Corresponding author:
профессор, д.м.н. Васильев
Александр Дмитриевич
Aleksandr D. Vasiliev
sasha133133@Hst.ru
* Иллюстрации к статье - на цветной вклейке в журнал.
* Illustrations to the article are on the colored inset of the Journal.
в хвостовую вену. Выведение из эксперимента осуществлялось на 60-й и 90-е дни, проводилась патоморфологиче-ская оценка изменений клеток поджелудочной железы, парапанкреатических структур, почек, брюшины, брыжейки, надпочечников.
Результаты и их обсуждение. При гистологическом исследовании поджелудочной железы на 60 день эксперимента в основной группе отмечался выраженный отек, паравазальная нейтрофильная инфильтрация, очаги субтотального некроза, в группах сравнения № 2, № 3 патоморфологические изменения менее выражены, отсутствовали зоны некроза. При гистологическом исследовании тканей, на 90 день некроз поджелудочной железы сохранялся, наблюдались экстрапанкреатические осложнения в почках, кишечнике, брюшине, брыжейке, недпочечниках; патологические изменения в тканях группы № 2 менее выражены.
Выводы. Комбинация фармакологических препаратов оказывает существенное влияние на деструктивные процессы в поджелудочной железе, развитие экстрапанкреатических осложнений. Одним из основных путей формирования эндогенной недостаточности представляется энтерогенный путь, минимально зависимый от фармакологической коррекции.
Ключевые слова: острый панкреатит, фармакокоррекция, ингибитор протеаз, патоморфологические изменения
Summary
Aim of the research: The research aims to study destructive processes of pancreatic tissue, extrapancreatic lesion in experimental sharp destructive pancreatitis (ESDP) with immune-correcting medication, protease inhibitor, non-steroidal anti-inflammatory agent.
Materials and methods. Modelling of ESDP was carried out on laboratory rodents and involved peroral use of 1.0-1.5 ml of proof spirit 40% during 90 days, with the follow-up (after 60 days) introduction of fad nutrition. The research engaged three groups: group 1 was treatment group (index group) and groups 2 and 3 were experimental groups. The group 1 did not get any pharmacological treatment. Group No.2 got daily intravenous dose of 1.0 1000 KIU of aprotinin into the tail vein and peroral azoximer bromide of 3 mg. Group 3 was treated with daily intramuscular injection of diclofenac of 0.1 ml 2.5% into femoral region and intravenous dose of 1.0 1000 KIU of aprotinin. Removal from the experiment was made in 60th and 90th days with the pathomorphological study of lesion in cells of pancreas, parapancreatic structures, kidneys, peritoneum, mesentery.
Research results and discussion. In histopathological examination of tissues of pancreas the overt edema, paravasal neutrophil infiltration, focal areas of subtotal necrosis were observed on the 60th day of experiment in treatment (index) group 1, whereas groups 2 and 3 showed less evident pathomorphological lesion and pancreatic necrosis was of focus nature. In histopathological examination of tissues on the 90th day, the pancreatic necrosis was retained and extrapancreatic complications in kidneys, kidneys, intestine, peritoneum and mesentery were observable in groups 1 and 2. Pathomorphological lesion was less overt in group 3.
Conclusions. Combination of pharmacological medication has a significant impact on destructive processes in pancreas and the development of extrapancreatic complications. One way to develop endogenic impairment is enterogenous that is less responsive to medical treatment.
Keywords: sharp pancreatitis, pharmacological medication, protease inhibitor, pathomorphological lesion
Введение
Острый панкреатит (ОП) - одно из самых тяжелых заболеваний в ургентной хирургии, составляя 32-389 человек на 1 млн населения, занимает 2 место и уступает только острому аппендициту [1] В последние годы увеличивается количество больных с деструктивными формами острого панкреатита, составляя 14-55%. Это люди трудоспособного возраста, т.к. большая часть приходится на возрастную группу 30-50 лет[1,2,3,4] Летальность от тяжелых форм ОП остается на одном и том же уровне за последние 30 лет, и составляет 18-25% [5] Многообразие клинических форм и осложнений ОП, предполагает значительный спектр существующих вариантов лечения [6]. При отсутствии
гнойных осложнений в течении острого некротического панкреатита, тактика лечения остаётся преимущественно консервативной. Перспективным является поиск эффективных, патогенетически обоснованных терапевтических мероприятий [7].
Одной из основных причин летальности при ОП является прогрессирующая полиорганная недостаточность, особенно у лиц с наличием сопутствующей патологией, развитие эндогенной интоксикации и осложнений при ОП. Важную роль играет синдром кишечной недостаточности, зависящий от тяжести поражения поджелудочной железы, явления парапанкреатита [8,9]. Развитие полиорганной недостаточности усугубляется сопровождающейся
Патоморфологические изменения при остром экспериментальном панкреатите | Pathomorphological changes in acute experimental pancreatitis
при ОП иммуносупрессией, что обуславливает повышенную частоту развития деструктивных форм заболевания, приводит к повышению летальности [10] Работа посвящена анализу развития
панкреатического деструктивного процесса и экстрапанкреатических осложнений при экспериментальном остром деструктивном панкреатите (ЭОДП) при фармакологической коррекции.
Материалы и методы
В эксперименте было выбрано 40 особей белых лабораторных крыс женского пола в возрасте 3х месяцев, массой 200-220 г. Эксперименты выполнены с соблюдением принципов гуманности, изложенных в директивах Европейского сообщества. (86/609/ЕЕС) и Хельсинкской декларации.
Всем особям ежедневно на протяжении 60 дней вводился 40% раствор этанола в объеме 3 мл перо-рально. Лабораторные крысы были разделены на 3 группы: группа № 1 (10 крыс) - основная, не получающая фармакологической поддержки; группа сравнения № 2 (15 особей), с ежедневным введением 1 мл 1000 КИЕ апротинина внутривенно и азокси-мера бромида 0,1 мг перорально; группа сравнения № 3 (15 особей), с ежедневным введением диклофе-нака 0,1 мл 0,1% внутримышечно и 1 мл 1000 КИЕ апротинина внутривенно. По истечению 60 дней 5 особей из каждой группы лабораторных крыс были
выведены из эксперимента под эфирным наркозом посредством декапитации. Производился забор ткани поджелудочной железы для дальнейшего гистологического исследования с окраской гематоксилин-эозином.
На последующие 30 дней оставшиеся в эксперименте лабораторные крысы были переведены на жировую диету, при этом введение препаратов продолжалось в том же объеме. Использовалась следующая схема жировой диеты: 443 ккал / 100 г, белки 17%, углеводы 60%, 16% жиры [11]. По истечению 30 дней (90 день от начала эксперимента) крысы были выведены из эксперимента под эфирным наркозом посредством декапитации. Производился забор тканей почек, кишечника, брюшины, брыжейки для последующего гистологического исследования с окраской гематоксилин-эозином на световом микроскопе с 400-кратным увеличением.
Результаты
При гистологическом исследования ткани поджелудочной железы, на 60 день эксперимента (Рис. 1. на цветной вклейке в журнал) патоморфологические изменения можно увидеть у всех 3х групп, но выраженность данных различна. Субтотальный некроз был выявлен только у группы № 1, хотя признаки воспалительного процесса наблюдались во всех группах, выраженность их минимальна в гистологическом препарате группы № 2; переполнение цитоплазмы гранулами зимогена наблюдается во всех группах; застой секрета в выводящих протоках, деформация ацинусов наиболее выражена в основной группе № 1 и в группе сравнения № 3, у группы сравнения № 2 они также присутствует, хотя и в меньшей степени чем у других групп.
При проведении гистологического исследования на 90 день эксперимента были отмечены различные патоморфологические изменения в тканях лабораторных крыс. Так, изменения в почках (Рис. 2.) в ходе эксперимента возникли во всех группах, при этом деструктивные изменения наиболее были выражены в группах № 2 и № 3 в виде явлений белковой дистрофии дистальных и проксимальных канальцев, кровоизлияниями в почечную ткань (группа № 3) и очагами некроза (группа № 2); у основной группы № 1 обнаружилась белковая дистрофия дистальных и проксимальных канальцев.
Наиболее сильные деструктивные изменения в стенке кишечника (Рис. 3.) были выражены при гистологическом исследовании группы № 3 - тотальное разрушение слизистой оболочки. При исследовании ткани кишечника у лабораторных крыс из группы № 2 отмечено повреждение эпителия слизистой оболочки.
При исследовании состояния брюшины (Рис. 4.) у группы № 2 отмечена небольшая лейкоцитарная инфильтрация; в группе № 3 инфильтрация носила больший характер.
Гистологическое состояние брыжейки (Рис. 5.) во всех трех группах также различно. Существенные деструктивные процессы выражены в ткани брыжейки группы № 3 - очаги жирового некроза. В основной № 1 и группе сравнения № 2 отмечена умеренная инфильтрация ткани брыжейки, также в группе № 1 выявлен васкулит.
Анализ структуры надпочечников (Рис. 6.) выявил следующие изменения: в основной группе № 1 и группе сравнения № 2 были выявления изменения в виде вакуолизации клеток пучковой зоны коркового вещества надпочечников. При оценке структуры надпочечников группы сравнения № 3 вакуолизация цитоплазмы клеток распространялась уже на всю толщу коркового вещества.
Обсуждение
Модель ЭОДП показала свою информативность, эффективность, с успехом предоставив возможность рассмотреть процесс развития ОП и формирования экстрапанкреатических осложнений,
а также позволяет апробировать эффективную схему консервативного лечения острого панкреатита.
Несмотря на положительное влияние комплекса препаратов в нивелировании некротической
трансформации панкреатоцитов в основной группе, в группе № 3, отмечены значительные эк-трапанкреатические изменения полиорганного характера, протекающего по типу «фатального каскада» Так со стороны органов выделения отмечены дистрофия канальцев и клубочков и кровоизлияния в ткань почек, органов пищеварения -выраженная деструкция слизистой оболочки толстого кишечника, воспалительная инфильтрация брюшины и брыжейки (вплоть до некроза жировой ткани брыжейки). Существенные изменения отмечены в тканях надпочечеников группы № 3- множественные очаги вакуолизации клеток по всей толще коркового вещества надпочечников. В группе сравнения № 2 отмечены менее выраженные деструктивные изменения пакреатоцитов чем в других группах, белковая дистрофия канальцев
почек (с очагами некроза), слущивание эпителия ворсин толстого кишечника, умеренная инфильтрация тканей брыжейки и незначительная у тканей брюшины.
Комбинация фармакологических препаратов оказывает существенное влияние на деструктивные процессы в поджелудочной железе и развитие экстрапанкреатических осложнений. Одним из основных путей формирования эндогенной недостаточности представляется энтерогенный путь, минимально зависимый от фармакологической коррекции.
Преобладающими в развитии неблагоприятных исходов при ОП является нарастающая полиорганная недостаточность, требующая индивидуального аналитического подхода в каждом клиническом случае.
Литература | References
1. Острый панкреатит. Клинические рекомендации МЗ РФ. 2019. С. 6.
Acute pancreatitis. Clinical recommendation MH RF. 2019. P. 6.
2. Рахимов Р. Р. Комплексный подход к диагностике и лечению инфицированного панкреонекроза / Р. Р. Рахимов // Пермский медицинский журнал. -2016. - XXXIII, № 6. - С. 36-41.
Rakhimov R. R. Complex approach to diagnostics and management of infected pancreatonecrosis. Permian medical journal. 2016; XXXIII(6):36-41.
3. Munigala S., Yadav D. Case -fatality from acute pancreatitis is decreasing but its population shows little change. Pancreatologie. 2016;16 (4): 512-550.
4. Seidi W., Sterel H., Depisch D. Die bilivre Pankreatitis neue Behandlungkonzepte. Ada chir. Austriaca. 2017, vol.21, no.4, pp. 225-259.
5. Багненко С. Ф., Гольцов В. Р., Савелло В. Е., Вашетко Р. В. Классификация острого панкреатита: современное состояние проблемы / Вестник хирургии им. Грекова. 2015. Т. 174, № 5. С. 86-92.
Bagnenko S. F., Golcov V. R., Savello V. E., Vashetko R. V. Classification of acute pancreatitis: current status of problem. Grekov's Bulletin of Surgery. 2015, Vol.174. no. 5, pp. 86-92.
6. Родоман Г. В. Возможности коррекции системных нарушений при лечении больных с острым некротическим панкреатитом. // Родоман Г. В., Шалаева Т. И., Барганджия А. Б. / Хирургия. Журнал им. Н. И. Пирогова. - 2016 № 11
Rodoman G. V. Systemic disorders management in patients with acute pancreatic necrosis. Pirogov Russian Journal of Surgery. 2016, no. 11.
7. Ермолов А. С. Отдаленные результаты лечения тяжелого острого панкреатита / А. С. Ермолов,
Д. А. Благовестнов, М. А. Рогаль, Д. А. Омельянович // Хирургия. - 2016. № 10.С. 11-15. Ermolov A. S. Long-term results of severe acute pancreatitis management. The surgery. 2016, no.10, pp. 11-15
8. Романов Э. И. Факторы летального исхода при панкреонекрозе / Э. И. Романов, П. С. Зубеев, М. К. Рыжков, А. А. Бодров // Вестник хирургии им. Грекова. 2014.Т 173. № 4. С. 39-42.
Romanov E. I. Risk factors of fatal outcome in pancreatonecrosis. Grekov's Bulletin of Surgery. 2014, Vol.173, no.4, pp.39-42
9. Лызиков А. Н. Морфологические особенности экс-трапакреатического поражения внутренних органов при остром ферментативном парапанкреати-те / А. Н. Лызиков, В. М. Майоров, З. А. Дундаров, Ю. Н. Авижец // Проблемы здоровья и экологии.2014. № 1 (39) С. 61-66.
Lyzikov A. N. Morphological features of extrapancreatic lesion of internal organs in acute enzymatic parapancre-atitis. Problems of health and ecology. 2014;1(39):61-66.
10. Акимов А. А. Острый панкреатит в молодом возрасте / The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium" / А. А. Акимов, С. Н. Стяжкина, А. А. Валинуров и др. 2018. Vol. 20. № 4. С. 18-21. Akimov A. A. et al. Acute pancreatitis in young age/ The Journal of scientific articles «Health and Education Millennium». 2018, Vol. 20, no. 4, pp.18-21.
11. Ковшик Г.Г., Храпова М. В., Душкин М. И. Особенности липидного и глюкозного обмена ги-пертензивной линии крыс НИСАГ. // Сибирский научный медицинский журнал. 2013. Т. 33. № 4. С. 5-11. Kovshik G. G., Khrapova M. V., Dushkin M. I. Peculiarities of lipid and glucose metabolism in hypertensive rats of starin ISIAH. Siberian scientific medical journal. 2013, Vol. 33, no.4, pp. 5-11.
К статье
Патоморфологические изменения при остром экспериментальном панкреатите и способы их коррекции и профилактики (стр. 103-106)
To article
Pathomorphological changes in acute experimental pancreatitis and methods of their correction and prevention (p. 103-106)
Рисунок 1.
Поджелудочная железа. 60 день эксперимента. Ув Х400. Окраска гематоксилином и эозином.
А - основная группа № 1. Некроз ткани железы, лейкоцитарная инфильтрация стромы органа. Выраженная деформация ацинусов с застоем секрета в выводящих потоках. Переполнение цитоплазмы панкреатоцитов гранулами зимогена.
В - группа сравнения № 3. Лейкоцитарная инфильтрация стромы органа. Застой секрета в выводящих протоках железы. Цитоплазма панкреатоцитов полна гранул зимогена.
С - группа сравнения № 2. Лейкоцитарная инфильтрация стромы органа. Деформация ацинусов с застоем секрета в выводящих потоках. Переполнение цитоплазмы панкреатоцитов гранулами зимогена.
, s Г-V.
Ci».. . > ?
А - основная группа № 1. Белковая дистрофия проксимальных и дистальных канальцев.
В - группа сравнения № 2.Белковая дистрофия проксимальных и дис-тальных канальцев с очагами некроза эпителиоцитов.
ттт^лш
, - " шт
■ш
»
Уж
шттш
С - группа сравнения № 3. Белковая дистрофия проксимальных и дисталь-ных канальцев, очаги геморрагий.
Рисунок 2.
Почка. 90 день эксперимента. Ув Х400. Окраска гематоксилином и эозином
А - основная группа № 1. Поверхностные изъязвления слизистой оболочки кишечника, интенсивная лейкоцитарная инфильтрация подслизистого слоя.
В - группа сравнения № 2. Слущива-ние эпителиальных клеток ворсин (оголение ворсин), лимфоцитарная инфильтрация подслизистого слоя.
щъ ШВШЯВЯЯЯГ
Ш ШЖШ.&
г. ■ алвШ*лxü*. twiw
1
m
■И'
si
ж жщтш'^мш^. * £
■ ДЧ -
Ш1
С - группа сравнения № 3. Интенсивная деструкция слизистой оболочки кишечника и инфильтрация лейкоцитами с развитием энтерита.
Рисунок 3.
Стенка толстого кишечника. 90 день эксперимента. Ув. Х400. Окраска гематоксилином и эозином.
Рисунок 4.
Брюшина. 90 день эксперимента. Ув. х400. Окраска гематоксилином и эозином.
- :*■ ' . ч •
'.Г! -
» I л
А - основная группа № 1. Отек и интенсивная инфильтрация лейкоцитами брюшины.
Рисунок 5.
Брыжейка. 90 день эксперимента. Ув. х400. Окраска гематоксилином и эозином.
//л •• .. -ч-- ) -
V • V/
• >. - ¿¿ЯГ ч--Т', >
• 7 у/Ч""-* Г'уЛЛм!
■ ■ у I •••„■' \ • ■
. ( - А "г
А - основная группа № 1. Васкулиты в ткани брыжейки.
Рисунок 6.
Надпочечник. 90 день эксперимента. Ув. х400. Окраска гематоксилином и эозин.
А - основная группа № 1. Повышенная вакуолизация клеток пучковой зоны коркового вещества.
. /
А /
В - группа сравнения № 2. Незначительная лейкоцитарная инфильтрация брюшины.
с
Т ¿''Я • 4Щ
, ч > Ч Л \.гй 9 Л
С - группа сравнения № 3. Умеренная воспалительная инфильтрация брюшины.
ржи /Щг ;< йтк < :1:У ...
В - группа сравнения № 2. Умеренная инфильтрация лейкоцитами ткани брыжейки.
С - группа сравнения № 3. Умеренная инфильтрация лейкоцитами ткани брыжейки. Очаги жирового некроза брыжейки с массивной лейкоцитарной инфильтрацией.
В - группа сравнения № 2. Повышенная вакуолизация клеток пучковой зоны коркового вещества.
С - группа сравнения № 3. Повышенная вакуолизация клеток коркового слоя.
