CC BY
21УДК 616.716.4:615.015
Мостовой С. О.1, Пикалюк В. С.2, Шульгин В.Ф.1, Пешков М. В.3
ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ НИЖНИХ ЧЕЛЮСТЕЙ ЛАБОРАТОРНЫХ БЕЛЫХ КРЫС ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ АНАЛОГА, ФОСФОРОСОДЕРЖАЩЕГО АУТОПАТОГЕНИЧНОГО ВЕЩЕСТВА
'Отдел организации научной работы, Таврическая академия ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», 295007, проспект академика Вернадского, д. 4., Республика Крым, Симферополь, Россия
2Кафедра Нормальной анатомии, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», 295051, бульвар Ленина, 5/7, Симферополь, Россия.
Муниципальное бюджетное учреждение здравоохранения «Патолого-анатомическое бюро», 347930, ул. Кузнечная, д. 142/3 Таганрог, Россия
Для корреспонденции: Мостовой Семён Олегович, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отдела организации научной работы КФУ имени В. И. Вернадского, Таврическая академия (структурное подразделение), е-mail: Semen-34@yandex.ru
For correspondence: Semen O. Mostovoy, Ph.D Senior Researcher of department of organization of scientific work V.I. Vernadsky Crimean Federal University
Information about authors: Mostovoy S. O., http://orcid.org/0000-0002-3420-5595 Pikaluk V. S., http://orcid.org/0000-0001-7889-7477 Shul'gin V. F., http://orcid.org/0000-0002-1750-3697 Peshkov M. V., http://orcid.org/0000-0003-3149-8369
РЕЗЮМЕ
Изучена динамика морфоструктурных изменений в нижнечелюстных костях лабораторных белых крыс при 30-90-суточном воздействии модельной аминофосфоновой ненаркотической примеси в дозе 63 мг/кг, образующейся при кустарном изготовлении метаамфетамина. Использовали качественные и количественные методы световой микроскопии, характеризующие структурное состояние нижнечелюстной кости, согласно аббревиатурам комитета по гистоморфометрической номенклатуре Американского общества по исследованию костей и минералов. Установлено, что введение модельной примеси в исследуемом временном промежутке приводит к развитию и нарастанию процессов гиперостоза и очаговых остеосклеротических изменений, что сходно с процессами, развивающимися при оссифицирующем остите.
Ключевые слова: аминофосфоновая кислота, остеонекроз, остеоцитарный остеолиз, нижнечелюстная кость.
PATHOMORPHOLOGICAL CHANGES IN MANDIBLES OF LABORATORY WHITE RATS UNDER THE INFLUENCE OF PHOSPORUS-CONTAINING ANALOGUE OF AUTOPATHOGENIC SUBSTANCE
S. O. Mostovoy1, V. S. Pikaluk2, V. F. Shul'gin1, M. V. Peshkov3
1Taurida Academy of V. I. Vernadsky Crimean Federal University, Simferopol, Crimea. 2Medical Academy named after S.I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia 'Postmortem Bureau, Taganrog.
SUMMARY
Behavior pattern of morphostructural changes in mandibles of laboratory white rats under the 30-90 days lasting influence of non-narcotic amino phosphonic contaminant impurity in a dose of 63 mg/kg that is a by-product in clandestine production of methamphetamine. Qualitative and quantitative methods of light microscopy which characterized a structural condition of mandible had been used according to Nomenclature of American Society for Bone and Mineral Research.
It is found that introduction of the impurity leads to development and worsening of focal abnormalities and hyperostosis symptoms. This process is similar to ossification ostitis.
Key words: amino phosphonic acid, osteonecrosis, osteocitarian osteolysis, mandible.
Остеотропные свойства соединений фосфора известны ещё с XIX века. Часть из них начиная с 1960 годов используется для восстановления костного метаболизма в виде амино-бисфосфо-натных соеденений, способных предупреждать
значительную потерю костной массы, что позволяет использовать их в лечении системного остеопороза. Кроме того, эти вещества применяются для терапии костных метастазов при лечении злокачественных новообразований,
сочетающихся с синдромом гиперкальциемии. При их использовании на передний план выходят побочные эффекты в виде остеонекрозов челюстей, что особо выражено при использовании больными аминобисфосфонатосодержащих смесей [1,2,3]. Подобные процессы исследователи в последние десятилетия наблюдают у лиц, употребляющих метамфетамин кустарного производства, при изготовлении которого используется красный фосфор. В наших более ранних исследованиях приведены результаты, доказывающих аминофосфоновую природу примесей, образующихся при синтезе метаамфитамина кустарным способом, которые и являются причиной развития остеонекротических процессов в челюстных костях [4,5]. В научных публикациях, освящающих проблему остеонекрозов челюстей, возникающих на фоне приёма кустарно изготовленного метаамфитамина, достаточно полно освещены морфологические данные характеризующие фазу клинических проявлений [2,3]. Однако, в доступной нам литературе мы не выявили описания морфоструктурных преобразований нижней челюсти до момента появления клинических признаков данного заболевания.
Цель исследования. Изучить динамику морфологических преобразований в нижнечелюстных костях лабораторных белых крыс при 30 и 90 суточном воздействии фосфорсодержащей модельной примеси, образующейся при кустарном изготовлении метаамфитамина.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Экспериментальные исследования были проведены на 40 белых беспородных крысах-самцах с массой тела 150-200 г. Животные были разделены на 4 группы. Первую (контрольную) группу составляли животные, которым для создания равноценных условий опыта в течение 30 суток производили внутрижелудочное одноразовое введение 1,0 мл физиологического раствора. Во вторую группу вошли животные, которым на протяжении 30 суток производили внутрижелудочное введение модельной примеси, образующейся при кустарном изготовлении метаамфитамина в дозе 63 мг/кг. Дозу подбирали с учетом пероральной дозы, используемой наркозависимыми лицами, которая доходит до 700 мг в сутки, с учётом видовых различий в скорости метаболизма в организме человека и лабораторной крысы [6,7]. Третья (контрольная) группа состояла из животных, которым производили внутрижелудочное введение 1,0 мл физиологического раствора в течение 90 суток. Четвертую группу составляли животные, которым на протяжении 90 суток производили внутрижелудочное введение в дозе 63
мг/кг модельной примеси, образующейся при кустарном изготовлении метаамфитамина.
Животных выводили из эксперимента дека-питацией под кетаминовым наркозом из расчёта 4,4 мг/кг на 30 и 90-е сутки в соответствии с международными правилами проведения работ с экспериментальными животными [9]. Материалом для исследования служили скелетиро-ванные нижние челюсти крыс, фиксированные в 10% нейтральном забуференном формалине, более 72 часов, декальцинированные в 14% растворе трилона Б, забуференного до рН 7.0. Далее осуществляли проводку с использованием изопропанола и минерального масла, заливали ткани парафином [9,10]. Парафиновые срезы толщиной 3 мкм резали на ротационном микротоме Leica RM2245 лезвиями Surgipath DB80LX. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по Романовскому - Гимзе и Массону - Голднеру. Микроморфометрическое исследование проводили при увеличениях 100, 400, 1000 на компьютерном морфометрическом комплексе, в состав которого входят: микроскоп Olympus СХ-31, цифровая камера Olympus C5050Z.
В статье использованы показатели и их абревиатуры, предложенные American Society of Bone and Minerai Research Histomorphometry Nomenclature Committee (комитета по гисто-морфометрической номенклатуре Американского общества по исследованию костей и минералов) [11,12]. Определяли параметры, характеризующие собственно микроархитектонику трабекулярной кости: объем губчатого вещества (Cn-BV/TV) - % содержания костного вещества между кортикальными слоями, толщину трабекул (Tb.Th., мкм). Также проводили оценку состояния костного вещества по следующим параметрам: BDS - % поверхности костного вещества подверженного некрозу; OS/BS -поверхность остеоида; процентная часть общего периметра губчатого вещества, покрытого остеоидом; OV/BV - объем остео-ида; процентная часть губчатого вещества, которая не подверглась кальцификации. А также определяли N.Oc - количество остеокластов в 1 мм2. Поскольку аббревиатуры, предложенные American Society of Bone and Mineral Research Histomorphometry Nomenclature Committee включают только статические показатели, для оценки физиологических процессов нами были исследованы четыре функциональных показателя, которым мы присвоили следующие аббревиатуры: OOL (osteocytic osteolysis, остеоцитар-ный остеолиз) - процент поверхности костного вещества, покрытого остеоцитарными лакунами с признаками литических процессов; FBM (fibrosis of the bone marrow, фиброз костного
мозга) - процент поверхности костномозговой полости, подверженной фиброзу; FN (fibrinoid necrosis) - процент поверхности костномозговой полости занятый фибриноидом с частью коллагеновых волокон подвергшихся дезорганизации, и AOS (area of osteosclerosis, площадь остеосклероза) - процент поверхности костного вещества, подверженного склерозу. Для суммарной оценки степени сцепленно-сти трабекул в губчатом веществе определяли звездчатый объем костномозговых полостей V* [13,14]. Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием методов параметрической статистики. Вычисляли среднее арифметическое значение показателя Х ,
В группе животных, повергшихся воздействию аминофосфоновой кислоты в течение 30 суток, отмечали нарушение гистоархетиктони-ки нижнечелюстной кости с преобладаниемем остеопролиферативных процессов. Выявляли зоны костного матрикса с резким утолщением трабекул, образующих обширные костные массивы с небольшим количеством средних и мелких костномозговых полостей. Качественные характеристики увеличения объёма костной ткани подтверждались морфометрически в виде уменьшения звёзчатого объёма трабекул более чем в 100 раз. В участках, примыкающих к периодонтальной щели, определяли зоны дискомплексации костных балок с хаотичным ветвлением, образующие вдоль линий роста небольшие инвентрации округлой формы с круп-
среднюю квадратическую ошибку среднего значения тх , различия средних арифметических значений и их дисперсий оценивали по 1 критерию Стьюдента для уровня значимости р < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Структурная организация костной ткани нижней челюсти животных обеих контрольных групп соответствовала возрасту. Клеточные и неклеточные элементы располагались характерным образом, что не противоречит общеизвестным данным и может служить контролем для соответствующих экспериментальных групп. Вычисленные нами морфометри-ческие показатели представлены в таблице 1.
ными костномозговыми полостями, заполненными клетками миелоидного ряда (рис 1А.,В., таб 1.) По краю костного матрикса определяли обширные зоны остеоцитарного остеолиза (ла-кунарные соты- nid d'abeilles), включающие в себя увеличенные лакуны с гипертрофированными остеоцитами и бесклеточные ячеистые структуры, заполненные зернистыми эозино-фильными массами [15]. Его интенсиность превышала аналогичные показатели контроля в 3,3 раза (см. таб 1). В межбалочных пространствах определяляли «пёструю» картину проявлений токсической васкулопатии. В центре костномозговых полостей в части сосудов выявляли парез, запустевание и некроз эндотелия, в другой части отмечали резкое полнокровие с периваскулярными кровоизлияниями, а также
Таблица 1
Гистоморфометрические показатели нижней челюсти исследуемых лабораторных белых крыс (X ± тХ) (где, X - среднее арифметическое значение показателя выборки, тХ - средняя квадратическая
ошибка среднего выборочного значения ) п=10
Первая группа Вторая группа Третья группа Четвёртая группа
Cn-BV/TV, % 41,75±0,8% 76,85±0,92%* 42,75±0,8 % 87,99±0,55%**
BDS% - 12,76±0,15%* - 14,65±0,49
OS/BS % 4,57±0,28% 2,42±0,11%* 3,45±0,11% 2,55±0,14%**
OV/BV % - 20,03±0,5%* - 27,07±0,33%**
AOS % - 3,3±0,24% - 12,04±0,33%**
OOL % 3,53±0,1% 11,74±0,36%* 2,05±0,2% 16,37±0,21%**
FN % - 8,3 ±0,54% - 12,5±0,42%**
FBM % 3,89±0,33% 5,41±0,47% 2,41±0,21% 3,42±0,21%
N.Oc ед/мм2 2,67±0,97 3,20±1,02 3,2±0,97 3,5±0,47
V* мм3 0,0375±1,06 0,0031±0,01* 0,0315±1,06 0,00051±1,2**
Примечание: * Р <0,05 в сравнении с показателями 1 контрольной группы. ** в сравнении с показателями 3 контрольной группы
утолщение и фибриноидный некроз стенки сосудов с фибриновыми тромбами в их просвете. Для участков без выраженного отёка характерно развитие процессов миелофиброза - замещение ретикулярной стромы костного мозга коллаге-но-волокнистой тканью, обеднённой клеточными элементами с вытеснением клеток миелоид-ного ряда на периферию костно-мозговых полостей. В зонах выраженного отёка наблюдали процессы стромально-сосудистых дистрофических поражений различной интенсивности: вокруг одной части тромбированных сосудов они были представлены фазой мукоидного набухания, о чем говорили разволокнение части кологеновых волокон и их базофилия при сохранности пучкового строения; в других - фазой фибриноидного набухания в виде гомогенизации структуры коллагено-волокнистой ткани до явлений фибриноидного некроза, представленного диффузно окрашенными бледно-розовыми бесструктурными массами (окраска-гематоксилин эозином). В местах гомогенизации и фи-бриноидного некроза коллагено-волокнистой ткани также отмечали образование остеоид-ных масс на разных стадиях созревания - сет-чато-пучковые необызвествленные остеоидные участки примыкали к минерализующимся параллельно-волокнистым остеоидным фрагментам, что соответствует картине метапластиче-ского остеогенеза (см. рис. 1 Б, Е.). Со стороны эндоста фиброзная ткань сохраняла волокнистую структуру в виде узкой полосы с клетками миелоидного и остеобластического рядов с аппозиционным ростом пластинчатой костной ткани. В костном матриксе, прилегающем к сосудам с явлениями тромбоза, выявляли фокусы асептического остеонекроза с тремя и более пустыми лакунами и лакунами с погибающими остеоцитами. Отмечали сужение просвета га-версовых каналов вследствие аппозиционного роста кости по их окружности. В областях остеоцитарного ремоделирования выявляли интенсивное выпадение базофильного крапа, сливающегося в отдельных участках в сплошную базофильную массу, рыхло спаянную с окружающей пластинчатой костью, расцениваемая нами, как обызвествленная белковая субстанция (см. рис. 1С) [16]. В глубине костного матрикса ячеистые структуры замещались пластинчатой костной тканью с формированием бесклеточных остеосклеротических полей, которые выделялись более светлой эозино-фильной окраской и базофильными линиями, оссифицированных ячеек (см. рис. 1Е). Другая часть ячеистых структур, сливаясь, формировала обширные полости, заполненные необыз-вествленным остеоидом, окрашивавщимся
по Массон-Голднеру в темно-красный цвет с переходом в малиновый (см. рис. 1Б). По краю отдельных балок на небольшом протяжении выявляли близко расположенные друг к другу линии склеивания и тонкие прерывистые полоски минерализующегося остеоида. Встречались единичные костно-резобтивные клетки, образующие неглубокие резорбционные лакуны, количество которых не имело достоверных статистических различий с аналогичными показателями 1 контрольной группы (см. таб 1).
В группе животных, подвергшихся воздействию аминофосфоновой кислоты в течение 90 суток, отмечали нарастание патологических изменений в гистоархитектонике нижнечелюстной кости. Сетевое ветвление трабекул во всех полях зрения было замещено компактным костным веществом, в массиве которого определяли единичные далеко отстоящие друг от друга средние и мелкие костномозговые полости, что морфометрически подтверждалось уменьшением звездчатого объёма в 1000 раз в сравнении с аналогичным показателем третьей контрольной группы (см рис 2А; таб 1). По краю костного матрикса формировались дугообразные инвентрации, имеющие неправильную форму. Определяли небольшое увеличение процессов остеоцитарного остеолиза, преобладавшего в основном по периферии костного матрикса в области перидонтальной щели. Его размеры в 8 раз превышали аналогичные показатели животных третьей контрольной группы (см. рис 2В; таб-1). Структура костного вещества была покрыта многочисленными хаотично ветвящимися линиями склеивания, делящими кость на «фрагменты» с различной степенью интенсивности прокрашивания, обусловленой неоднородностью процессов, протекающих в костной структуре (см. рис 2В). Отмечалось достоверное увеличение площади остеосклероза в 3,3 раза в сравнении с аналогичным показателем предыдущего срока, который был представлен бесклеточными участками го-могеного костного матрикса темно-розового цвета (окраска гематоксилин-эозином), к которым, примыкали пространства, состоящие из сплошной базофильной массы (см. рис 2В,С). Также выявляли увеличение зоны рарефици-рованой кости в виде участков неправильной формы, заполненных необызвествленным остеоидом темно-красного цвета (окраска по Масон-Голднеру), объём которого увеличился на 7% (р<0,05), в сравнении с аналогичным показателем предыдущего срока (см. рис 2Е; таб 1) В значительно уменьшенных костномозговых полостях, окруженных многочисленными линиями склеивания, отмечали нарастание
Рис 1. Микроструктура нижней челюсти группы животных, повергшихся воздействию амино-фосфоновой кислоты в течение 30 суток. А. Нарушение трабекулярной структуры зоны альвеолярного отростка нижнечелюстной кости. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение х100; В. Зона дискомплексации костных балок. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение х100; С. Отек, дезорганизация и некроз волокнистой ткани в костно-мозговых полостях (1), базофильный крап и формирование базофильных фрагментов, рыхло спаянных с пластинчатой костью (2) Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение х400; Б Миелофиброз (1), метапластическое формирование костной ткани в костно-мозговой полости (2); Окраска по Массону-Голднеру, Увеличение х400 Е бесклеточные зоны остеосклероза; Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение х400; Б. Остеоидные массы в участках рарефикации кости. Окраска по Массону-Голднеру. Увеличение х100.
дистрофических изменений, вызванных токсической васкулопатией в виде резкого полнокровия оставшихся сосудов, увеличения количества сосудов заполненных тромботическими массами на разных стадиях организации, обширных отеков с выпадением фибрина, расширения зоны фибриноидного некроза волокнистых структур и явлений остеометаплазии (см. рис 2Е,Б; таб 1). Следует отметить сохранность небольшого количества клеточно-волокнистых элементов в области эндостальных поверхностей сохранённых костномозговых полостей (см. рис 2Е). Количество остеокластов оставалось на прежнем уровне и не имело достоверных отличий в сравнении с аналогичными показателями третьей контрольной группы.
ОБСУЖДЕНИЕ
В результате проведенных исследований нижнечелюстных костей подопытных лабораторных белых крыс, которым вводили модельную ами-нофосфоновую примесь в дозе 63 мг/кг выявлены дезорганизирующие признаки течения осте-огенных процессов. После 30 суток воздействия исследуемого вещества отмечали выраженный остеопролефиративный процесс, который визу-
ализировался в виде обширных костных массивов с небольшим количеством костномозговых полостей. Процессы перестройки костной ткани осуществлялись путем остеоцитарного ре-моделирования, включающего остеоцитарный остеолиз (формирование «лакунарных сот», nid d'abeilles) на фоне низкой остеокластической активности, которая наблюдалась на протяжении всего исследования. Гипоксия, вызванная токсической васкулопатией в виде пареза, запу-стевания и некроза эндотелия сосудов, создала условия для возникновения процессов фиброза в костномозговых пространствах. Однако, интенсивная плазморагия, вследствие разрушения сосудистой стенки, вызывая процессы фибри-ноидного набухания и некроза, вызывала раз-волокнение образованной коллагено - волокнистой ткани, обуславливая возникновение ме-тапластических остеогенных процессов в костномозговых полостях, дополняя эндостальное костеобразование, которые завершались осте-осклеротическими изменениями, что является характерным для воздействия препаратов группы аминофосфоновых кислот [3, 4, 5, 17, 18, 19].
В поздние сроки исследования (90 суточное воздействие препарата) отмечено нарастание
Рис 2. Микроструктура нижней челюсти группы животных, повергшихся воздействию амино-фосфоновой кислоты в течение 90 суток. А - Гиперостоз нижней челюсти. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение х100; В - Зоны остеоцитарного остеолиза (1) сочетающиеся с участками интенсивной базофилии костного матрикса (2). Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение х400; С - зоны остеосклероза Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение х 400; Б - остео-идные массы в участках рарефикации кости. Окраска по Массону-Голднеру. Увеличение х100; Е Процессы метапластического остеогенеза (1) и миелофиброза (2) в костномозговой полости. Окраска по Массону-Голднеру. Увеличение х400; Б - Начало процесса облитерации гаверсова канала в центре которого разрушенный сосуд с фибриноилным некрозом стенки. Окраска гематоксилином
и эозином Увеличение х100.
диспластических изменений. Это проявлялось:в усилении явлений токсической васкулопатии в виде генерализации глубины сосудистых поражений и увеличения площади фибриноидного некроза на 4%(р<0,05) в сравнении с аналогичным показателем предыдущего срока; статистически значимым увеличением зон необызвест-вленного остеоида и процессов остеоцитарного остеолиза на 7% и 5% (р<0,05) соответственно, в сравнении с аналогичными показателями предыдущего срока, что свидетельствует о нарастании интенсивности остеогенных процессов; нарушеним тинкториальных свойств исследуемой кости, вызванные интенсивным осаждением минерального компонента, подтверждаемое наличием базофильных вкраплений и петри-фикатов во всех зонах костного матрикса (вероятно, соединения фосфата кальция и модельной смеси, не поддавшиеся декальцинации) [4, 5, 16]; увеличеним на 9%(р<0,05), в сравнении с аналогичными показателями предыдущего срока, остеосклеротических изменений, вызванных продолжающимися остеопролифератив-ными процессами аппозиционного и метапла-стического типов, с преобладанием последних.
Таким образом, воздействие исследуемого вещества приводило к блокированию активности остеокластического компонента, что смещало процессы перестройки кости в сторону остеоци-тарного ремоделирования как компенсаторного процесса. Явления токсической васкулопатии, осложнённой фибриноидным некрозом, а также высокие минерализирующие свойства исследуемого вещества приводили к возникновению остеометапластических процессов, которые дополняли остеопролиферативный аппозиционный рост кости, что приводило к гиперостозу с формированием афункциональных хрупких костных остеосклеротических масс. Динамика данной патологии сходна с процессами, развивающимися при оссифицирующем остите [20].
ВЫВОДЫ
1. При воздействии фосфорсодержащей модельной примеси процессы перестройки костной ткани нижней челюсти ограничены остеоцитарным ремоделированием.
2. Фосфоросодержащая модельная примесь, образующаяся при кустарном изготовлении метаамфитамина, при введении лабо-
раторным белым крысам в дозе 63 мкг/кг в ранние сроки воздействия (30 суток) обладает остеопролиферативными свойствами, несмотря на начальные проявления токсических поражений в виде васкулопатических изменений, осложнённых фиброзным некрозом, являющимся «матрицей» для развития в последующем метапластических остеогеных процессов.
3. Введение исследуемой примеси лабораторным белым крысам в течение 90 суток привело к гиперостозу и остеосклерозу. Динамика данной патологии сходна с процессами, развивающимися при оссифицирующем остите.
Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации (базовая часть государственного задания в сфере научной деятельности, проект № 387).
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Маланчук В.А., Бродецкий И.С. Остеомиелит челюстей у больных на фоне наркотической зависимости: Учебное пособие Национальная академия медицинских наук Украины. К., 2013:252
2. Медведев Ю.А. Басин Е.М. Остеонекрозы костей лицевого скелета у лиц с наркотической зависимостью: клиника, диагностика, принципы лечения. Врач. 2012;(2):55-60.
3. Rustemeye J., Melenberg A., Junker K., Sari-Rieger A. Osteonecrosis of the maxilla related to long-standing methamphetamine abuse: a possible new aspect in the etiology of osteonecrosis of the jaw // Oral and Maxillofacial Surgery. 2014;18(2):237-41.
4. Semen O. Mostovoy, Viktor F. Shul'gin, Elena M. Maksimova, Igor A. Nauhatsky et al. Mineralizing process and morphological structure of the femoral bone in rats under influence of aminophosphonates. J Exp Integr Med. 2014;4(2):81-84.
5. Мостовой С.О., Остапенко О.В., Кутя С.А., Дем-чук Н.И., Структурная организация бед- ренных костей лабораторных белых крыс при применении препаратов аминофосфонатной и аминобифосфонатной групп. Морфология. 2014;8(3)-С.50-56.
6. Врублевський А.Г. Наркомании и токсикомании:Клинические формы наркоманий токсико-маний Лекции по наркологии [под. ред. Н.Н. Иванца] - М.: Медицина. 2000:241.
7. Рыболовлев Ю.Р. Рыболовлев Р.С. Дозирование веществ для млекопитающих по константе биологической активности. Доклады АН СССР 1979;247(6):1513-1516.
8. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purpose: Council of Europe.18.03.1986. - Strasbourg,1986:52.
9. Волков А.В. Гистоморфометрия костной ткани в регенеративной медицине. Клиническая и экспериментальная морфология. 2013;(3):65-72.
10. Пешков М.В. Декальцинация в гистологической лабораторной технике. Архив патологии. 2012;(6):44 - 46.
11. Пикалюк В.С., Кутя С.А., Шадуро Д.В. Модификация методики гистологического исследования костной ткани. Морфолопя. 2010;IV(3):72-76.
12. Dempster D.W., Compston J.E., Drezner M.K., Glorieux F.H. et al. Standardized Nomenclature, Symbols, and Units for Bone Histomorphometry: A 2012 Update of the Report of the ASBMR Histomorphometry Nomenclature Committee. Journal of Bone and Mineral Research. 2013; 28 (1): 1 - 16.
13. Vesterby A. Star volume in bone research. A histomorphometric analysis of trabecular bone structure using vertical sections Anat. Rec.1993;235 (2):325 - 334.
14. С.А. Кутя «Звездчатый объем» - эффективный гистоморфометрический показатель степени соединенности элементов трабекулярной сетью. Таврический медико-биологический вестник. 2012;15;4(60):212-214.
15. Аврунин А.С. Остеоцитарное ремоделирование: история вопроса, современные представления и возможности клинической оценки. Травматология и ортопедия России. 2012; 63 (1):128-134.
16. Русаков А. В. Введение в физиологию и патологию костной ткани. Многотомное руководство по патологической анатомии. М,: Медгиз. 1959;5:35-54, 505,532.
17. Toussaint N.D., Lau K.K., Strauss D.J. et al. Effect of alendronate on vascular calcification in CKD stage 3 and 4: a pilot randomized controlled trial. Am. J. Kidney Dis. 2010; 56.(1): 57-68.
18. London G.M., Marty C., Marchais S.J. et al. Arterial calcifications and bone histomorphometry in end-stage renal disease // J. Am. Soc. Nephrol. 2004;15(7):1943-1951.
19. Matthew R., Allen I., Ruggiero S.L. Osteonecrosis of the Jaw: Recent Clinical and Preclinical Advances 2011 International Bone & Mineral Society. March; 8(3):141-53.
20. Абрикосов А.И. Частная патологическая анатомия. М.: Медгиз - 1947;2:303.
REFERENCES
1. Malanchyk V.A., Brodeckiy I.S. Osteomyelitis of the jaws in patients on the background of drug abuse: a Training manual of national Academy of medical Sciences of Ukraine. K., 2013:252 (In Russian)
2. Yu. Medvedev, MD; E. Basin Facial osteonecroses in persons with drug addiction: clinical picture, diagnosis, principles of treatment Vrach 2012;(2):55-60. (In Russian)
3. Rustemeye J., Melenberg A., Junker K., Sari-Rieger A. Osteonecrosis of the maxilla related to long-standing methamphetamine abuse: a possible new aspect in the etiology of osteonecrosis of the jaw // Oral and Maxillofacial Surgery. 2014;18(2):237-41.
4. Semen O. Mostovoy, Viktor F. Shul'gin, Elena M. Maksimova, Igor A. Nauhatsky et al. Mineralizing process and morphological structure of the femoral bone in rats under influence of aminophosphonates. J Exp Integr Med. 2014;4(2):81-84. (In Russian)
5. Mostovoy S.O., Ostapenko O.V., Kutya S.A., Demchuk N.I. Structural organisation of femoral bones of white laboratory rats associated with aminophosphonates and aminobisphosphonates. Morphologia. - 2014. - T.8, № 3 - C.50-56(In Russian)
6. Wroblewski AG. Addiction and substance abuse: clinical forms of substance abuse addictions. In: Ivantca NN (ed) Lectures on Drug Abuse - Medical Practice 2000;241. (In Russian)
7. Rybolovlev YR, Rybolovlev RS. Dosing of substances to mammals in the constant biological activity. Rep USSR Acad Sci 1979; 247:1513-6.(In Russian)
8. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purpose: Council of Europe. 18.03.1986. - Strasbourg, 1986:52.
9. Volkov A.V., Bolshakova G.B. Bone histomorphometry in regenerative medicine. Clinical and Experimental Morphology 2013; (3):65-72. (In Russian)
10. Peshkov M.V. Decalcification in histology laboratory techniques. Arkhiv patologii 2012;(6):44 - 46. (In Russian)
11. Pikalyuk V.S., Kutya S.A., Shaduro D.V.Modification of method of histological investigation of bone tissue Morphologia 2010;IV(3):72-76.(In Russian)
12. Dempster D.W., Compston J.E.,Drezner M.K., Glorieux F.H. et al. Standardized Nomenclature, Symbols,
and Units for Bone Histomorphometry: A 2012 Update of the Report of the ASBMR Histomorphometry Nomenclature Committee. Journal of Bone and Mineral Research. 2013;28 (1):1 - 16.
13. Vesterby A. Star volume in bone research. A histomorphometric analysis of trabecular bone structure using vertical sections Anat. Rec. 1993;235(2):325-334.
14. Kutya S.A. "Star volume" - effective histomorphometric parameter of trabeculae connectivity Tavrichecheskiy Mediko - Biologicheskiy vestninik 2012; 15; 4 (60) :212-214. (In Russian)
15. Avrunin A.S. Osteocytic remodeling: question history, modern representations and possibilities of the clinical estimation Traumatologya and orthopedya in Russia. 2012;63(1):128-134 (In Russian)
16. Rusakov A.V. Introduction to the physiology and pathology of bone tissue. A multivolume guide to pathological anatomy. M: Medgiz. 1959;5:35-54, 505, 532. (In Russian)
17. Toussaint N.D., Lau K.K., Strauss D.J. et al. Effect of alendronate on vascular calcification in CKD stage 3 and 4: a pilot randomized controlled trial. Am. J. Kidney Dis. 2010;56. (1):57-68.
18. London G.M., Marty C., Marchais S.J. et al. Arterial calcifications and bone histomorphometry in end-stage renal disease // J. Am. Soc. Nephrol. 2004;15(7):1943-1951.
19. Matthew R., Allen I., Ruggiero S.L. Osteonecrosis of the Jaw: Recent Clinical and Preclinical Advances 2011 International Bone & Mineral Society. March; 8(3):141-53.
20. Abrikosov A.I. Private pathological anatomy. M .: Medgiz - 1947;2:303(In Russian)
