CC BY
1366
,,„ „„„„, Jj Ставрополья
научно-практическии журнал
УДК 619:616.99:636;
Ященко Е. А., Луцук С. Н., Дилекова О. В.
Yashchenko E. A., Lutsuk S. N., Dilekova O. V.
ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ КРАСНОГО КОСТНОГО МОЗГА ТРУБЧАТЫХ КОСТЕЙ ПРИ ГЕМОБАРТОНЕЛЛЁЗЕ КОШЕК
PATHOMORPHOLOGICAL CHANGES IN THE RED BONE MARROW OF LONG BONES WHEN HEMOBARTONELLA CATS
Гемобартонеллез кошек имеет повсеместное распространение. Кошки являются наиболее восприимчивым видом животных к гемобартонеллезу. Это заболевание, характеризующееся интермиттирующей лихорадкой, слабостью, потерей массы тела, анемичностью или желтушностью наружных слизистых оболочек, гиперплазией селезёнки, печени и лимфатических узлов. Возбудитель Haemobartonella felis (Eperythrozoon felis, Mycoplasma haemofelis) - облигат-ный паразит, локализующийся на поверхности или внутри эритроцитов хозяина. Поражённые эритроциты фагоцитируются макрофагами селезенки и костного мозга. Кроме того, антитела, вырабатываемые против антигенов гемо-бартонелл, вступают в перекрестную реакцию с антигенами нормальных эритроцитов. В результате такой реакции многие эритроциты, подвергаясь фагоцитозу, уходят из кровяного русла. Из-за этого возникает и развивается тяжёлая прогрессирующая анемия, выражающаяся в резком падении количества эритроцитов и снижении гемоглобина на 20-30% и более. Уменьшение содержания эритроцитов и гемоглобина в крови приводит к нарушению кислородного питания клеток и тканей, в результате чего нарушается кислотно-щелочное равновесие, развивается ацидоз. Тканевая гипоксия способствует развитию диатезных геморра-гий и дистрофии паренхиматозных органов.
Трудности диагностики гемобартонеллёза у кошек заключаются в разнообразии клинических проявлений болезни и нехарактерной патологией изменений, а также не всегда возможно обнаружить возбудителя в периферической крови.
При обобщении данных доступной нам литературы, было отмечено, что патологоанатомические изменения в красном костном мозге при данном заболевании недостаточно изучены. В своих исследованиях мы уделили особое внимание более подробному изучению патологоанатоми-ческих и патогистологических изменений в красном костном мозге трубчатых костей у кошек, павших от гемобар-тонеллёза. Нами были отмечены следующие изменения в красном костном мозге: гиперплазия, серозный отек, нарушение миелопоэза, расстройство кровообращения с преобладанием воспалительных реакций микрососудистого русла и нарушением реологических свойств крови, ведущих к сосудистой проницаемости и экссудации составных частей плазмы крови и эмиграции клеток крови.
Ключевые слова:гемобартонеллёз, аборигенные кошки, плечевая кость, лучевая кость, костные трабекулы, красный костный мозг, лимфоцитарно-лейкоцитарный инфильтрат, мегакариоциты, нарушение миелопоэза.
Hemobartonella cats is ubiquitous. Cats are the most susceptible animal species to hemobartonella. It is a disease characterized by intermittent fever, weakness, loss of body weight, anemically or yellowness of the external mucous membranes, hyperplasia of the spleen, liver and lymph nodes. The causative agent Haemobartonella felis (Eperythrozoon felis, Mycoplasma haemofelis) is an obligate parasite localized on the surface or inside the erythrocytes of the host. Phagocytized infected erythrocytes by macrophages of the spleen and bone marrow. In addition, the antibodies produced against antigens of haemobartonella, enter into cross-react with antigens of normal red blood cells. As a result of this reaction a red blood cells undergoing phagocytosis, leave blood stream. Because of this, there develop severe and progressive anemia, reflected in a sharp drop in the number of erythrocytes and reduction of hemoglobin by 20-30% or more. The decrease in the content of erythrocytes and hemoglobin in the blood leads to disruption of the oxygen supply of cells and tissues, resulting in disturbed acid-base balance, acidosis develops. Tissue hypoxia contributes to the development diateznyh of hemorrhage, and degeneration of parenchymatous organs.
Difficulties in the diagnosis of hemobartonellosis in cats lies in the diversity of clinical manifestations of disease and pathology uncharacteristic changes, and it is not always possible to detect the pathogen in the peripheral blood.
When you summarize, the available us literature, it was noted that pathological changes in the red bone marrow in this disease is poorly understood. In our research we paid special attention to a more detailed study of postmortem and histopathological changes in the red bone marrow of long bones in cats, fallen from hemobartonella. We have noted the following changes in the red bone marrow: hyperplasia, serosal edema, impaired myelopoiesis, a circulatory disorder with a predominance of inflammatory reactions, microvascular and impaired rheological properties of blood, leading to vascular permeability and exudation of plasma constituents of blood and emigration of blood cells.
Keywords:hemobartonella, native cats, humerus, radius bone, bony trabeculae, red bone marrow, in-leukocyte infiltration, megakaryocytes, violation of myelopoiesis.
Ященко Евгения Алексеевна -
аспирант кафедры «Паразитологии и
ветсанэкспертизы, анатомии и патанатомии
им. профессора С.Н. Никольского»
факультета ветеринарной медицины,
ФГБОУ ВО Ставропольский государственный аграрный
университет,
г. Ставрополь
Тел: 8(919) 730-64-99
E-mail: benedict.j@mail.ru
Луцук Светлана Николаевна -
доктор ветеринарных наук,
Yashchenko Evgeniya Alekseevna-
PhD student of Department of Parasitology and
veterinary sanitary inspection,
their anatomy and pathological anatomy
Faculty of Veterinary Medicine,
Stavropol State Agrarian University, Stavropol
Tel: 8(919) 730-64-99
E-mail: benedict.j@mail.ru
Lutsuk Svetlana Nikolaevna-
Doctor of Veterinary Science,
Professor of Department of Parasitology and
veterinary sanitary inspection,
в
естник АПК
Ставрополья
:№ 2(22), 2016
Ветеринария
67
профессор кафедры «Паразитологии и
ветсанэкспертизы, анатомии и патанатомии
им. профессора С.Н. Никольского»
факультета ветеринарной медицины,
ФГБОУ ВО Ставропольский государственный аграрный
университет, г. Ставрополь
Tel: 8(918) 745-53-37
E-mail: s.lutsyk@mail.ru
Дилекова Ольга Владимировна -
кандидат биологических наук,
доцент кафедры «Паразитологии и
ветсанэкспертизы, анатомии и патанатомии
им. профессора С.Н. Никольского»
факультета ветеринарной медицины,
ФГБОУ ВО Ставропольский государственный аграрный
университет, г. Ставрополь.
Тел: 8(918) 877-94-03
E-mail: Dilekova2009@yandex.ru
their anatomy and pathological anatomy Faculty of Veterinary Medicine, Stavropol State Agrarian University, Stavropol Tel: 8(918)745-53-37 E-mail: s.lutsyk@mail.ru
Dilekova Olga Vladimirovna-
Ph.D. in biological Sciences,
Docent of Department of Parasitology and
veterinary sanitary inspection,
their anatomy and pathological anatomy
Faculty of Veterinary Medicine,
Stavropol State Agrarian University, Stavropol
Tel: 8(918)877-94-03
E-mail: Dilekova2009@yandex.ru
Гемобартонеллёзкошек, это заболевание, характеризующееся интермиттиру-ющей лихорадкой, слабостью, потерей массы тела, анемичностью или желтушно-стью наружных слизистых оболочек, гиперплазией селезёнки, печени и лимфатических узлов. Возбудитель НаетоЬаг^опеПаТеИв (Ерегу^годоопТеИв, Мусор!автаИаетоТеИв) -облигатный паразит, локализующийся на поверхности или внутри эритроцитов хозяина [1,2,4]. Поражённые эритроциты фагоцитируются макрофагами селезенки и костного мозга. Кроме того, антитела, вырабатываемые против антигенов гемобартонелл, вступают в перекрестную реакцию с антигенами нормальных эритроцитов. В результате такой реакции многие эритроциты, подвергаясь фагоцитозу, уходят из кровяного русла. Из-за этого возникает и развивается тяжёлая прогрессирующая анемия, выражающаяся в резком падении количества эритроцитов и снижении гемоглобина на 20-30% и более. Уменьшение содержания эритроцитов и гемоглобина в крови приводит к нарушению кислородного питания клеток и тканей, в результате чего нарушается кислотно-щелочное равновесие, развивается ацидоз. Тканевая гипоксия способствует развитию диатезных геморрагий и дистрофии паренхиматозных органов [1]. Клинически данные процессы проявляются длительной лихорадкой с последующими общетоксическими проявлениями и развитием сердечно-сосудистого синдрома.
Трудности диагностики гемобартонеллёзау кошек заключаются в разнообразии клинических проявлений болезни инехарактерной патологией изменений, а также не всегда возможно обнаружить возбудителя в периферической крови. [1,3,5,6].
При обобщении данных доступной нам литературы, было отмечено, что патологоанатоми-ческие изменения в красном костном мозге при данном заболеваниинедостаточно изучены.
Цель исследования - изучение патолого-анатомических и патогистологических изменений в трубчатых костях и красном костном мозге кошек, павших от гемобартонеллёза.
Материалы и методы исследования.
Работа проводилась на базе кафедры паразитологии и ветсанэкспертизы, анатомии и патанатомии им. профессора НикольскогоС. Н.и «Научно-диагностического и лечебного ветеринарного центра»Ставропольского государственного аграрного университета.
Объектом для исследований служилибеспо-родные аборигенные кошки (n=3), павшие от гемобартонеллёза.От каждого животного проводился отбор локтевой и лучевой костей, которые распиливали на кусочки толщиной 1 см3. Далее полученные кусочки фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине. Декальцинацию костей проводили в 5% растворе трихлоруксусной кислоты, в течение 5 суток с ежедневной сменой рабочего раствора. Затем материал проводили через спиртывозра-стающей концентрации и ксилол, и заливали в гистологическую среду «Гистомикс» (БиоВи-трум, Россия)с использованием гистологического процессора замкнутого типа Tissue-Tek VIP™ 5Jr и станции парафиновой заливки Tissue-Tek® TEC™ 5 фирмы Sakura (Япония). Из полученных блоков делали гистологические срезы толщиной 5 - 7 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином (Bio-Optica, Италия и БиоВитрум, Россия) на автоматическом мультистейнереР^та™1. Микроскопию срезов проводили на цифровом микроскопе OlympusBX45. С каждого гистологического препарата выполняли по 10 цифровых снимков (в формате .jpg, размером 3136*2352 пикселей в палитре 24 бит)случайно выбранных полей зрения при увеличении х100, х200, х400 и х1000.
Результаты исследований
При вскрытии павших от гемобартонеллеза кошек отмечено, что патологических изменений в костной ткани и суставах не наблюдалось. Кости белого цвета, твердой консистенции, в полости суставов незначительное количество прозрачной жидкости, суставной хрящ белого цвета без видимых патологических измене-ний.Однако при распиле плоских и трубчатых костей были выявлены патологические изменения в красном костном мозге:неоднородная пестрая окраска органа, от бледно - розового до
68 Ежеквартальный научно-практический ЖЭестник АПК |В Ставрополья
светло-красного цвета, местами с серым оттенком, мажущейся консистенции.
При гистологическом исследовании продольных и поперечных срезов костей на всех исследуемых образцах отмечается расслоение периоста, с частичной дезорганизацией его внутреннего слоя. Наблюдается врастание и фиброз наружного слоя периоста между волокнами скелетной мышечной ткани. Повсеместно визуализируются единичные участки деминерализации и резорбции компактного костного вещества в области системы наружных вставочных пластинок.Пластинчатая костная ткань на периферии кости имеет слоистое строение компактного костного вещества. Остеоны имеют «размытый» вид, в них просматриваются каналы с центрально расположенными кровеносными сосудами, вокруг которых имеются 3-4 концентрических слоя вставочных пластинок, вокруг которых костное вещество приобретает гомогенный вид с линиями цементации(Рис.1).
Губчатое костное вещество представлено костными трабекулами имеющих вид слабо изогнутых балок различной толщины, связанных между собой. Между трабекулами находятся костные ячейки с красным костным мозгом (Рис.2). Повсеместно встречаются небольшие костные ячейки, в которых происходит закладка красного костного мозга, а костное вещество имеет вид ретикулофиброзной костной ткани.
В красном костном мозге отмечается выраженный отек органа за счет выпота в межклеточное пространство большого количества се-
розной жидкости. Просматриваются картины отторжения органа от костных трабекул с образованием плотных клеточных «конгломератов» в виде детрита, пропитанного серозным экссудатом (Рис.3).
Клеточный состав красного костного мозга представлен клетками на разной стадии диффе-ренцировки, с инфильтрацией эозинофильных лейкоцитов, плазмоцитов, лимфоцитов, макрофагов. Вокруг кровеносных сосудов просматривается появление крупных клеток с выраженной грануляцией, что, по нашему мнению, характеризует их как тучные клетки. Вместе с дифференцирующимися клетками и лимфоцитарно-лейкоцитарным инфильтратом наблюдаются клетки в состоянии некроза с карио- и цитопик-нозом, а также на стадии апоптоза.
В микроциркуляторном русле эндоваскулит, стаз. Имеются единичные очаги фибриноидно-го набухания стенки сосудов и окружающих их тканей с образованием в сосудах пристеночных тромбов. Имеются незначительные очаги кровоизлияний.
Повсеместномежду волокнами ретикулярной стромы визуализируются гигантские многоядерные клеткис оксифильной цитоплазмой и сильно выраженными базофильными ядрами, связанными между собой тонкими «кари-оплазматическими» мостиками, что придает им вид сегментации, предположительно, этомегакариоцитыИ и III степени зрелости (Рис. 4). В единичных мегакариоцитах II! степени зрелости наблюдается процесс отщепле-
Рисунок 1 - Компактное костное вещество трубчатой кости с линиями цементации. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. об. 40, ок. 10.
Рисунок 2 - Губчатое костное вещество трубчатой кости. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. об. 10, ок. 10.
Рисунок 3 - Серозный отек красного костного мозга. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. об. 20, ок. 10.
Рисунок 4 - Мегакариоцит II степени зрелости.
Рисунок 5 - Деление клетки миело-идного ряда амитозом.
EF\ »jr • ^^
_________«hv?:
Рисунок 6 - Кариорексис и вакуолизация мегакариоцитов. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. об. 100, ок. 10.
в
естник АПК
Ставрополья
:№ 2(22), 2016
Ветеринария
69
ния пластинок. Также отмечаются клетки, в которых происходит амитотическое деление без цитотомии цитоплазмы (Рис. 5). В данном случае, клетки являются производными миелоид-ного островка кроветворения и из-за деления в костном мозге могут быть причиной нарушения миелопоэза. Отмечены единичные зоны, в которых наблюдаются процессы кариорекси-са и вакуолизации цитоплазмы мегакариоци-тов (Рис.6).
Обсуждение полученных данных
Боляхина С. А. в своей работе упоминает о наблюдениях Э.С. ЫЫег, в которых говорится о том, что собаки с тяжёлыми иммунологическими расстройствами так же болеют гемо-бартонеллёзом. Согласно описанию Э. С. И1Ь!ег, у больных животных основными симптомами и патологическими изменениями являются: ане-
мия, эритрофагоцитоз и гиперплазия селезёнки и красного костного мозга [1, 7]. Подобные изменения мы наблюдалипри гемобартонеллё-зеу кошек.
В своих исследованиях мы уделили особое внимание более подробному изучению патоло-гоанатомических и патогистологических изменений в красном костном мозге трубчатых костей у кошек, павших от гемобартонеллёза.
Нами были отмечены следующие изменения в красном костном мозге:гиперплазия,серозный отек,нарушение миелопоэза, расстройствокро-вообращенияс преобладанием воспалитель-ныхреакций микрососудистого русла и нарушением реологических свойств крови, ведущих к сосудистой проницаемости и экссудации составных частей плазмы крови и эмиграции клеток крови.
Литература
1. Боляхина С. А. Гемобартонеллез кошек в условиях крупного промышленного города: Распространение, клиническое проявление, этиотропное лечение : автореф. дис. ... канд. вет. наук. Новосибирск, 2001. 128 с.
2. Демкин В. В. Гемотропные микоплазмозы (гемоплазмы, гемобартонеллы) кошек и собак // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. 2014. № 4. С. 23-28.
3. Колабский Н. А. Паразитарные включения в эритроцитах крови при эпизоотическом заболевании кошек // Сб. / ЛВИ. 1951. Вып. XII. С. 177-180.
4. Колич Н. Б., Панкратьева Я. Некоторые аспекты патоморфологии инфекционной анемии кошек // Научный вестник Нубип Украины. Серия : Ветеринарная медицина, качество и безопасность продукции животноводства. 2013. № 188-1. С. 195-199.
5. Revision of haemotrophic Mycoplasma species names / H. Neimark, K. E. Johansson,Y. Rikihisa, J. G. Tully // Int J Syst Evol Microbiol. 2002. Vol. 52. Pp. 683-684.
6. Prevalence and geographical distribution of canine hemotropic mycoplasma infections in Mediterranean countries and analysis of risk factors for infection. / M. Novacco, M.L. Meli,
F. Gentilini, F. Marsilio, C. Ceci, M.G. Pennisi,
G. Lombardo, A. Lloret, L. Santos, T. Carrapi-co, B. Willi, G. Wolf, H. Lutz, R. Hofmann-Lehmann // Vet Microbiol. 2010. Vol. 142, no. 3-4. Pp. 276-284.
7. Hibler S. C., Hoskins J. D., Greene C. Rickett-sial infections in dogs. Pt 3. Salmon disease complex and haemobartonellosis // Compendium on continuing Educate. Practicing Veter. 1986. Vol. 8, no. 1. Pp. 251-256.
References
1. Balahina S. A. Hemobartonella cats in conditions of large industrial city: the Distribution, clinical manifestation, causative treatment: author. dis. ... candidate.vet. Sciences, protected, 2001, Novosibirsk, 2001. 128 p.
2. Demkin V. V. Gemorroynyemycoplasmosis (homoplasmy, hemobartonella) cats and dogs // Russian veterinary journal. Small domestic and wild animals.2014. No. 4. P. 23-28.
3. Kolaski N. And. Parasitic inclusions in erythrocytes of blood in the epizootic disease of cats // SB. LVI. 1951. Vol. XII. P. 177-180.
4. Number N. B., Pankratiev. Some aspects of pathomorphology infectious anemia cats / Scientific Bulletin of Nulesu. // Series: Veterinary medicine, quality and safety of livestock products. 2013. No. 188-1. P. 195199.
5. Neimark H. Revision of haemotrophic Mycoplasma species names / Neimark, H., K. E. Johansson,Y. Rikihisa, and J. G. Tully // Int J SystEvolMicrobiol. 2002. V. 52. P. 683-684.
6. Novacco M. Prevalence and geographical distribution of canine hemotropic mycoplasma infections in Mediterranean countries and analysis of risk factors for infection. / M. Novacco, M. L. Meli, F. Gentilini, F. Marsilio, C. Ceci, M. G. Pennisi, G. Lombardo, A. Lloret, L. Santos, T. Carrapico, B. Willi, G. Wolf, H. Lutz, R. Hofmann-Lehmann // Vet Microbiol. 2010. V. 142. N. 3-4. P. 276-284.
7. Hibler S.C., Hoskins J.D., Greene C. Rickettsial infections in dogs. Pt 3. Salmon disease complex and haemobartonellosis // Compendium on continuing Educate. Practicing Veter. 1986. V. 8. №1. P. 251-256.
