CC BY
22
ПАТОГЕНЕЗ КЛИНИЧЕСКОЙ РЕМИССИИ ХРОНИЧЕСКОГО ПИЕЛОНЕФРТА У ДЕТЕЙ, ОСОБЕННОСТИ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА
Н.А. Пекарева, Т.В. Белоусова
Кафедра факультетской педиатрии и неонатологии Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава Красный проспект, 52, Новосибирск, Россия, 630091
А.Н. Трунов
Лаборатория иммунологии репродукции Научный центр клинической и экспериментальной медицины Сибирского отделения РАМН ул. Тимакова, 2, Новосибирск, Россия, 630117
С целью выявления возможной активности воспалительного процесса и нарушений иммунного реагирования было обследовано 147 детей с клинико-лабораторной ремиссией вторичного хронического пиелонефрита. Проводилось определение концентраций ИЛ-1Р, ИЛ-6, ИЛ-4, лактоферрина, аутоантител к нативной ДНК, циркулирующих иммунных комплексов и 1§Л в сыворотке крови. Установлено, что, несмотря, на отсутствие выраженных клинических проявлений хронического воспалительного процесса и изменений общеклинических анализов, у обследованных детей тестируется активность иммуновоспалительного процесса
Это подтверждается достоверным повышением в сыворотке крови концентраций провоспалительного цитокина - ИЛ-6, осторфазового белка лактоферрина, 1§Л, уровней содержания маркеров клеточной деструкции и активации аутоиммунного реагирования - аутоантител к антигенам нативной ДНК и циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови
Ключевые слова: хронический пиелонефрит, клинико-лабораторная ремиссия, воспалительный процесс, цитокины.
Анализ литературных данных свидетельствует о распространенности хронического пиелонефрита у детей, при этом отмечается остающаяся высокой частота возникновения патологии и выраженная тенденция к хрони-зации воспалительного процесса, стертости клинической картины патологического процесса. Многими исследователями широкое распространение процессов хронизации связывается с воздействием неблагоприятных экологических факторов, несвоевременным и неадекватным лечением острых инфек-ционно-воспалительных процессов, развивающихся на фоне несовершенного иммунного ответа [1; 2; 4; 5].
Не вызывает сомнения, что для понимания механизмов хронизации патологических процессов в настоящее время представляется значимым изучение баланса цитокинов - биологически активных веществ, вырабатываемых клетками иммунной системы, способных влиять на развитие иммунного ответа и обеспечивающих межклеточную кооперацию. В современной научной литературе представлены данные исследований, посвященных оценке баланса цитокинов при остром и обострении вторичного хронического пиелонефрита [3; 6-9].
В то же время практически отсутствуют сведения о состоянии иммунной системы при клинико-лабораторной ремиссии вторичного хронического пиелонефрита у детей, что является важным для понимания механизмов развития патологического процесса.
Вышеизложенное позволило сформулировать цель настоящего исследования: изучить особенности иммуновоспалительного процесса у детей с клинико-лабораторной ремиссией вторичного хронического пиелонефрита.
Материалы и методы. В соответствии с целью и задачами исследования на базе отделения старшего детского возраста ГБУЗ НСО « Государственная Новосибирская областная клиническая больница» было обследовано 147 детей в возрасте от 3 до 14 лет с документированной полной клинико-лабораторной ремиссией вторичного хронического пиелонефрита (ХВП), продолжительность которой колебалась от 8 мес. до 6 лет. Из них 68 (46,3%) детей -с «оперированной» обструктивной уропатией в сроке после проведенной операции от 1 года до 8 лет. Нарушение пассажа мочи у оперированных детей было связано с органической патологией: у 50 детей из 68 (73,5%) выявлена стриктура ЛМС и проведена операция пластики лоханочно-мочеточникового сегмента, 18 детям (26,5%) осуществлена антирефлюксная операция по созданию урете-роцистоанастомоза по поводу первичного ПМР, связанного с отсутствием либо укорочением подслизистого отдела пиелоуретрального сегмента. У 79 (53,7%) больных из группы с вторичным ПМР (на фоне нейрогенной дисфункции мочевого пузыря с развитием интравезикальной обструкции) уродинамика восстановилась на фоне консервативной терапии (без хирургического вмешательства).
В качестве нормативных значений показателей в сыворотке крови были взяты данные клинико-лабораторного обследования 25 «практически здоровых» детей с отсутствием в анамнезе хронических инфекционно-воспали-тельных заболеваний различных органов и систем и острых воспалительных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии, перенесенных за 3 месяца до обследования.
У родителей больных и здоровых детей было получено информированное согласие на использование данных обследования в научных целях и согласие этического комитета на проведение исследования.
Определение концентраций ИЛ-1Р, ИЛ-4, ИЛ-6 в сыворотке крови выполнялись на тест-системах производства ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург). Результаты выражали в пг/мл.
Определение концентрации IgA в сыворотке крови выполняли на тест-системах производства ЗАО «Вектор-БЕСТ» (НСО, п. Кольцово) по инструкции производителя. Результаты выражали в г/л.
Определение концентрации лактоферрина в сыворотке крови выполняли на тест-системах производства ЗАО «Вектор-БЕСТ» (НСО, п. Кольцово) по инструкции производителя. Результаты выражали в нг/мл.
Аутоантитела к антигенам нативной ДНК (ААТ к АГ нДНК) определялись с помощью тест-системы «ДНК-ТЕСТ» производства ПМЦ «СибНИРкомплект» по инструкции производителя. Результаты выражали в условных единицах.
Результаты иммуноферментного анализа регистрировали на вертикальном фотометре Униплан при длине волны 450 нм.
Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) проводили методом жидкостной преципитации в 4% полиэтиленгликоля-6000 на 0,01М боратном буфере рН 8,4. Величину оптической плотности определяли при длине волны 450 нм на вертикальном спектрофотометре Multiscan MMC-340. Количество циркулирующих иммунных комплексов выражали в условных единицах: величина оптической плотности *1000 (усл. ед.).
Статистическая обработка включала вычисление средних арифметических величин (М) и ошибку репрезентативности средней арифметической (m). В работе использовали методы непараметрической статистики. Достоверным считали различия между сравниваемыми рядами с уровнем вероятности 95% (р < 0,05).
Результаты проведенных исследований. «Средняя» концентраций ИЛ-lß в сыворотке крови пациентов обследованной группы составила 49,6 ± 4,5 пг/мл, что превышает значение «средней» группы контроля (43,2 ± 4,9 пг/мл), однако достоверно от нее не отличалось. Полученное значение «средней» изучаемого показателя находилось в границах нормативных значений - 32,9-53,5 пг/мл.
При индивидуальном рассмотрении полученных данных по содержанию ИЛ-lß в сыворотке крови у больных было выявлено, что его концентрации, превышающие верхнюю границу нормативных значений показателя, тестируются у 31 ребенка, что составляет 21,1% от всех обследованных детей этой группы. У 78,1% (116) детей концентрации цитокина находились в границах нормативных значений.
«Средняя» концентрация ИЛ-6 в сыворотке крови больных составила 61,4 ± 5,6 пг/мл, что достоверно превышало «среднюю» данного показателя у детей в группе контроля (28,1 ± 4,8 пг/мл, р < 0,01). Полученное значение «средней» ИЛ-6 также превышало верхнюю границу его нормативных показателей -38,4 пг/мл.
При индивидуальном рассмотрении полученных данных по содержанию ИЛ-6 в сыворотке крови при клинической ремиссии вторичного хронического пиелонефрита было выявлено, что его концентрации, превышающие
верхнюю границу нормативных значений показателя, тестируются у 129 (87,75%) больных. Концентрации цитокина, находящиеся в границах нормативных значений, были выявлены у 18 детей (12,25%).
«Средняя» концентраций ИЛ-4 в сыворотке крови больных составила 79,1 ± 8,9 пг/мл. Полученное значение «средней» изучаемого показателя было выше и достоверно отличалось от «средней» значений аналогичного показателя в сыворотке крови детей группы контроля (35,1 ± 4,3 пг/мл, р < 0,05). Выведенная «средняя» показателей ИЛ-4 также превышала верхнюю границу нормативных значений - 44,7 пг/мл. При индивидуальном рассмотрении полученных данных по содержанию ИЛ-4 в сыворотке крови было выявлено, что его концентрации, превышающие верхнюю границу нормативных значений, тестируются у 121 (82,3%) больного этой группы. Концентрации ИЛ-4, находящиеся в границах нормативных значений, были выявлены у 26 (17,7%) детей.
«Средняя» концентраций острофазового полифункционального белка лактоферрина в сыворотке крови обследованных пациентов составила 807 ± 104 нг/мл. Полученное значение «средней» было выше и достоверно отличалось от «средней» значений лактоферрина в сыворотке крови детей, составивших группу контроля 523 ± 49 нг/мл (р < 0,05). Выведенная «средняя» значений изучаемого показателя находилась выше верхней границы нормативных значений - 635 нг/мл. При индивидуальном рассмотрении полученных данных по содержанию лактоферрина в сыворотке крови у больных детей было выявлено, что его концентрации, превышающие верхнюю границу нормативных значений, тестируются у 105 (71,4%) детей.
При тестировании уровней аутоантител к антигенам нативной ДНК, являющихся маркером деструктивных процессов и аутоиммунных реакций, а также уровней ЦИК, иммуноглобулина А в сыворотке крови были получены следующие данные:
- «средняя» уровней ААТ к АГ нДНК в сыворотке крови у больных составила 1,42 ± 0,11 усл. ед. Полученное значение «средней» изучаемого показателя было выше «средней» содержания ААТ к АГ нДНК в группе контроля - 0,88 ± 0,14 усл. ед. и достоверно от нее отличалось (р < 0,05). «Средняя» значений изучаемого показателя находилась выше верхней границы нормативных значений - 1,22 усл. ед. Индивидуальный анализ полученных данных позволил зафиксировать, что у 106 (72,1%) детей в сыворотке крови тестируются уровни содержания ААТ к АГ нДНК, превышающие верхнюю границу нормативных значений показателей, а у 41 (27,9%) больных уровни изучаемого показателя находились в границах нормы;
- «средняя» уровней содержания ЦИК в сыворотке крови обследованных детей составила 106 ± 8,8 усл. ед., что было выше «средней» уровней ЦИК в группе контроля - 54,2 ± 4,8 усл. ед. и достоверно от нее отличалось (р < 0,05). Выведенная «средняя» значений ЦИК в сыворотке крови находи-
лась выше верхней границы нормативных значений - 64,4 усл. ед. Индивидуальный анализ полученных данных позволил констатировать, что у 147 обследованных детей (100%) тестировались уровни ЦИК, превышающие верхнюю границу нормативных значений показателя;
- «средняя» концентраций иммуноглобулина А в сыворотке крови составила 1,54 ± 0,12 г/л. Полученное значение «средней» изучаемого показателя было выше «средней» концентраций IgA в контрольной группе - 1,05 ± 0,09 г/л и достоверно от нее отличалось (р < 0,05). Выведенная «средняя» значений IgA в сыворотке крови обследованной группы детей находилась выше верхней границы нормативных значений - 1,29 г/л. Индивидуальный анализ полученных данных позволил зафиксировать, что у 104 (70,7%) детей содержание сывороточного иммуноглобулина А было выше верхней границы нормативных значений показателей.
Заключение. В результате проведенных исследований нами было установлено, что отсутствие клинико-лабораторных проявлений вторичного хронического пиелонефрита (лейкоцитоза, нормативные значения СОЭ в гемограмме и содержания С-реактивного протеина, отсутствие лейкоциту-рии и бактериурии) не являются свидетельством отсутствия активности воспалительного процесса в организме обследованных детей. Это подтверждается достоверным повышением содержания провоспалительного цитокина-ИЛ-6, острофазового белка лактоферрина, маркеров клеточной деструкции и развития аутоиммунных реакций - аутоантител к антигенам нативной в сыворотке крови относительно величин показателей в группе контроля. Развитие воспалительного процесса сопровождается активацией иммунного реагирования с повышением концентраций индуктора Т-хелпер-2 опосредованного иммунного ответа - ИЛ-4, циркулирующих иммунных комплексов и IgA в сыворотке крови.
Данный факт позволяет сделать заключение о существовании в организме пациентов постоянной антигенной стимуляции организма, которая при срыве адаптационных механизмов может привести к развитию иммунной недостаточности и является базой для возникновения периодических обострений патологического процесса. В то же время тестируемая активация иммунной системы не приводит к санации организма, что, вероятно, связано с низкоиммуногенными свойствами этиологического фактора и его способностью «ускользать» из-под контроля иммунной системы.
ЛИТЕРАТУРА
[1] Паунова С.С., Кучеренко А.Г., Смирнов И.Е. и др. Цитокины в патогенезе рефлюкс-нефропатии у детей // Нефрология и диализ. - 2003. - Т. 5. - № 3. - С. 207-211.
[2] Iacobelli S., Bonsante F., Guignard J.P. Urinary tract infections in children // Arch. Pedi-atr. - 2009. - V. 16. - № 7. - Р. 1073-1079.
[3] Puczko-Michalczuk A., Zoch-Zwierz W., Wasilewska A. et al. Evaluation of inflammatory and renal injury markers in youngest children with pyelonephritis // Pol. Merkur. Lekar-ski. - 2008. - V. 25. - P. 451-454.
[4] Rudaitis S., Pundziene B., Jievaltas M. et al. Recurrent urinary tract infection in girls: do urodynamic, behavioral and functional abnormalities play a role? // J. Nephrol. - 2009. -V. 22. - № 6. - P. 766-773.
[5] Shaikh N., Morone N.E., Bost J.E. et al. Prevalence of urinary tract infection in childhood: a meta-analysis // Pediatr. Infect. Dis. J. - 2008. - V. 27. - № 4. - P. 302-308.
[6] Sheu J.N., Chen S.M., Meng M.H. et al. The role of serum and urine interleukin-8 on acute pyelonephritis and subsequent renal scarring in children // Pediatr. Infect. Dis. J. - 2009. -V. 28. - № 10. - P. 885-890.
[7] Sheu J.N., Chen M.C., Chen S.M. et al. Relationship between serum and urine interleukin-6 elevations and renal scarring in children with acute pyelonephritis // Scand. J. Urol. Nephrol. - 2009. - V. 43. - № 2. - P. 133-137.
[8] Webb N.J., Brenchley P.E. Cytokines and cell adhesion molecules in the inflammatory response during acute pyelonephritis // Nephron. Exp. Nephrol. - 2004. - Vol. 96. - № 1. -P. 1-6.
PATHOGENESIS CLINICAL REMISSION OF CHRONIC PYELONEPHRITIS IN CHILDREN, FEATURES INFLAMMATORY PROCESS
N.A. Pekarevа, T.V.Belousova
Department of faculty pediatrics and neonatology
Novosibirsk State Medical University Krasny Prospekt, 52, Novosibirsk, Russia, 630091
A.N. Trunov
Laboratory of immunology reproduction Research Center of Clinical and Experimental medical, SB RAMS Timakova Str., 2, Novosibirsk, Russia, 630117
To determine the inflammatory activity and violations of the immune response, surveyed 147 children with complete clinical and laboratory remission of secondary chronic pyelonephritis. The study was conducted the concentrations of IL-1P, IL-4, IL-6, lactoferrin, IgA circulating immune complexes, autoantibodies to antigens of native DNA in serum. Found that despite the absence of pronounced clinical manifestations of chronic inflammatory process and regulatory general clinical tests in children is determined by the activity of the immu-noinflammatory processes. This is confirmed by a significant increase in the content of proinflammatory cytokine, IL-6, acute phase proteins lactoferrin, a marker of cell destruction and development of autoimmune reactions - autoantibodies to antigens of native DNA, IgA and circulating immune complexes in serum.
Key words: chronic pyelonephritis, clinical and laboratory remission, the inflammatory process, cytokines.
