ПАТОГЕНЕЗ И ДИАГНОСТИКА ИММУНОПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ. Аллергические заболевания Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Медицинская иммунология 2001, Т. 3, №2 О 2001, СПб РО РА А К И

ПАТОГЕНЕЗ И ДИАГНОСТИКА ИММУНОПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ

АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ

КОРПОРАТИВНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ НЕЙРОМЕДИАТОРНЫХ И ИММУННЫХ РЕЦЕПТОРОВ

Адо А.Д., Федосеева В.Н., Камышева В.А., Кравченко С.А.

ГНЦ РФ — Институт иммунологии Минздрава России, Москва

А.Д.Адо и его школой в течение ряда лет изучалось взаимодействие иммунных (антигенсвязывающих) рецепторов с холинорецетггорами лимфоцитов. С этой целью исследовалось влияние агонистов (ацетилхолин, карбахолин, фосфорилхолин, бензоилхолин) и антагонистов (’Н-квинуклидинилбензилат) на функции антигенсвязывающих рецепторов иммунокомпе-тентных клеток (ИКК).

Как агонисты, так и антагонисты ацетилхолина (атропин) существенно угнетали функции лимфоцитов. Действие бензо-илхолина и фосфорилхолина зависело от используемых концентраций препарата. Акгивность холиновых соединений оказалась на несколько порядков выше, чем гистамина и катехоламина.

Чрезвычайно важным направлением является изучение связи между иммунными процессами в организме и нейроме-диаторным контролем их интенсивности. Показано, что блокада холиновых рецепторов антихолпнорецепторными антителами и холинергичсским агонистом карбахолпном ведет к снижению функции антигенсвязывающих рецепторов. Это может свидетельствовать о взаимосвязи холиновых и антигенсвязывающих рецепторов, что имеет значение для понимания механизма регуляции иммунных реакций на уровне и м му но ком п стс нти ы х клеток.

Важнейшим из путей взаимодействия иммунной и нервной систем является влияние нервной системы на иммунокомпе-тептные клетки через рецепторы ее медиаторов и электрические сигналы, а иммунокомпетентых клеток,- через их медиаторы (лимфокины и др.) и гуморальные факторы иммунитета (антитела и др.) на функции нервных клеток. Существуют также биологически активные вещества, действующие на обе указанные системы (некоторые интерлейкины, например 1Ь-1, 1Ь-2, 1Ь-6 и др.), эндорфины, интерфероны и др.

Таким образом, организуется молекулярный механизм взамодействня этих систем, о чем свидетельствуют данные наших многолетних исследований.

ДИНАМИКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ У БОЛЬНЫХ С ИНФЕКЦИОННОЙ АЛЛЕРГИЕЙ (ИА) В ПРОЦЕССЕ ИММУНОТЕРАПИИ (ИТ) БАКТЕРИАЛЬНЫМИ АЛЛЕРГЕНАМИ

Баранова Н.И., Молотнлов Б.А., Костина Е.М., Болдина С.Н.

Институт усовершенствования врачей,

Пенза, Россия

До настоящего времени дискутируется вопрос о применении бактериальных аллергенов для лечения больных с ИА.

Изучение иммунных механизмов в процессе лечения является важнейшим критерием этого метода лечения.

В этой связи мы изучили динамику показателей №N7 и общего до лечения и в процессе ИТ бактериальными аллергенами (золотистый стафилококк, пиогенный стрептококк, кишечная палочка, нейссерия перфлава) у больных с ИА (ИА ринит, ИА бронхиальная астма, хроническая рецидивирующая крапивница).

Было обследовано 32 больных в возрасте от 17 до 52 лет. После проведенной ИТ бактериальными аллергенами уровень 1ИЫу повысился с 2,4 пг/мл до 12,5 пг/мл (норма 2,5 пг/мл) у 80% обследованных больных после лечения. Показатели общего ^Е снизились с 210 до 65 МЕ/мл. У 20% больных уровень №N7 повысился до 6,0 пг/мл, а показатели общего 1§Е составили 490 МЕ/мл. Этот факт одновременного повышения изучаемых показателей можно объяснить тем, что большинство клонов Т-клеток, специфичных к бактериальным компонентам, способны к одновременной продукции обоих цитокинов (1Ь-4 и ШЫу). Как известно, 1Ь-4 стимулирует В-клетки к синтезу 1цЕ, а №N7 блокирует эту функцию В-клеток. Сопоставление полученных результатов с клиникой заболевания показало, что хороший и отличный эффект от ИТ бактериальными аллергенами сопровождается, как правило, снижением показателей общего 1§Е и достоверным повышением уровня №N7.

Таким образом, механизмы ИТ бактериальными аллергенами сложны и продолжают изучаться. Однако уже сейчас можно предположить, что эти механизмы будут иные, чем при ИТ нсбактериальными аллергенами.

ГИПЕРРЕАКТИВНОСТЬ В-ЛИМФОЦИТОВ - ВАЖНЫЙ МЕХАНИЗМ ПАТОГЕНЕЗА АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Бережная Н.М., Котова С.А., Белова О.Б.

Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, Киев, Украина

В развитии предыдущих исследований, которые показали, что у больных атопическими заболеваниями повышена функциональная активность В-лимфоцитов: усилен ответ на В-клеточные митогены и аллергены, экспрессия т^Е, трансформация в плазматические клетки, изменена активность И1 -и Н2-рецепторов и т.д. Были изучены некоторые аспекты регуляции на уровне цитокинов: экспрессия рецепторов к 1Ь-2, ответ В-лимфоцитов на 1Ь-2 под влиянием специфических и не специфических стимулов и характер влияния трансформирующего фактора роста (3 на различные этапы дифференци-ровки В-лимфоцитов в плазматические клетки. Параллельно была изучена экспрессия ряда адгезивных молекул, характеризующих межклеточные взаимодействия В- и Т-лимфоци-тов и нейтрофилов (С040, СВ54, СБ11Ь), а также способность лимфоцитов больных к апоптозу (определение Сй95) с использованием соответствующих моноклональных антител и метода иммунофлюоресценции.

В результате было показано, что при атопии изменена регуляция на уровне указанных цитокинов и межклеточные взаимодействия, что особенно проявилось на взаимодействии Т-и В-лимфоцитов.

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ И ИММУНО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ АЛЛЕРГЕНОВ И АЛЛЕРГОИДОВ ИЗ КЛЕЩЕЙ РОДА DERMA TOPHAGOIDES

Бержец В.М., Хлгатнн С.В., Петрова Н.С., Барашкииа О.Ф., Ппщулииа J1.A.

Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН,

Москва, Россия

Специфическая диагностика и специфическая иммунотерапия (СИТ) в противоаллергическом лечении тесно связаны с оценкой эффективности используемых препаратов. В настоящее время для СИТ широко применяются водно-солевые экстракты аллергенов из клещей Dennatophagoides farinae и Dennatophagoides pteronyssiiuis, т.к. в этнологии таких аллер-гозов, как бронхиальная астма, атопический дерматит, ринит и др. у больных наблюдается повышенная чувствительность преимущественно к этим двум основным видам клещей домашней пыли. Однако в качестве основных ограничений использования водно-солевых экстрактов для СИТ являются необходимость проведения продолжительного курса инъекций и риск возникновения аллергических осложнений, что связано с высокой аллергенной активностью данных препаратов.

Снижение аллергенности водно-солевых препаратов путем модификации их различными химическими агентами делает СИТ более безопасной и эффективной. В этой связи разработка новых лечебных форм клещевых аллергенов является особенно актуальной. В последние годы широкое распространение в клинической практике получили аллергоиды - препараты аллергенов, модифицированных альдегидами.

Целью настоящего исследования явилось сравнительное изучение свойств полученных препаратов аллергенов п ал-лергоидов из клещей D. farinae и D. pteronyssiiuis

Сырьем для аллергенного препарата служили культуры клещей D. Jarinae и D. pteronyssiiuis, выращенных па домашней пыли. Разработанная технология одноэтапной формали-низации клещевых аллергенов позволила нам получить препараты аллергондов. Показано, что в результате формалнни-зации происходят химические и конформационные преобразования компонентов клещевого аллергена. Одновременное изоэлектрофокусирование образцов исходного клещевого аллергена и формалинизированного препарата (аллергоида) позволили выявить различия в значениях pH белковых фракций этих препаратов. Обнаружено, что фракции немодпфицпро-ванного аллергена более гетерогенны по заряду и располагаются в нейтральной и кислой областях градиента pH (pH от 3,5 до 7,4). Фракции аллергоида фокусируются в пределах узкого интервала pH (pH от 3,5 до 4,85), максимально концентрируясь в кислых зонах с pH 3,4-3,6 и 4,0-4,5. Кроме того, для модифицированного препарата показано значительное снижение эстеразной активности. Она составила лишь 8% активности клещевого аллергена.

Сравнительное изучение антигенных свойств клещевых аллергенов и аллергондов показало, что модифицированный препарат способен индуцировать выработку специфических антител к немоднфицнрованному клещевому аллергену в орга-

низме животных (кролика и морской свинки). Обнаружено, что аллергоид вызывает выработку антител того же спектра, что и клещевой аллерген.

Анализ аллергенных свойств двух препаратов выявил снижение способности клещевых аллергондов связывать специфические ^Е-антитела человека. На модели секреции гистамина тучными клетками показано, что аллергенная активность аллергоида в 500 раз ниже активности клещевого аллергена. Снижение аллергенных свойств модифицированных препаратов также было выявлено методами НДТК и аналитического микроэлектрофореза эритроцитов и лимфоцитов.

Таким образом, полученные аллергены обладают высокой аллергенностью и иммуногенностью. В отличие от аллергенов, модифицированные препараты - аллергоиды из клещей О. /агтае и О. р1егопу^1пих практически лишены эстеразной активности, обладают высокой иммуногенностью и проявляют сниженные аллергенные свойства, что может служить основанием для успешного применения их в специфической диагностике и СИТ.

ВЛИЯНИЕ ЭКСПОЗИЦИИ КЛЕЩЕВЫХ АЛЛЕРГЕНОВ НА ФОРМИРОВАНИЕ И ТЯЖЕСТЬ ТЕЧЕНИЯ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Гервазиева В.Б., Петрова Т.И.*, Желтикова Т.М.

НИИВС им.И.И. Мечникова РАМН, г. Москва,

* Чувашский государственный университет, г. Чебоксары

Клещи семейства Pyroglyphidae - наиболее распространенные источники клещевых аллергенов в домашней пыли (ДП), большинство из которых обладает ферментными свойствами. Уровень численности клещей и концентрация клещевых аллергенов определяет развитие аллергических заболеваний и, прежде всего, бронхиальной астмы.

Нами проведен акарологический анализ образцов ДП жилых помещений в г. Чебоксары и с помощью авидин-биоти-нового метода ИФА определены концентрации основных клещевых аллергенов {Вег р!, Оег /1).

Доминирующим в акарофауне ДП как по встречаемости (79,9%), так и по обилию (19%) оказались клещи сем. Pymglyphidae. Ядром фауны были два вида клещей -0.р1ею!№5ти.ч и О./агтае. Кроме того, выявлены клещи амбар-но-зернового комплекса - Т.рМгеэсепИае (3,8%) и С/г. АгсиаПи (2,5%) сем. АсшМае и Glycyphagidae, соответственно.

Учитывая, что доминирующими в акарофауне ДП являются клещи 0./;/егоп;у.шшлу и О. /агтае, нами определены концентрации аллергенов первой группы йегр1 и Оег/1 в 23 квартирах, в которых проживали дети с аллергическими заболеваниями (16) и здоровые дети (7). Всего клещевые аллергены Оег р] выявлены в 82,6% квартир, а Оег/1 - в 47,8% квартир. В половине образцов ДП присутствовали оба клещевых аллергена.

Изучение экспозиции главных, клинически значимых клещевых аллергенов пироглифидных клещей показало, что их концентрация изменялась для Оегр1 от 0,2 до 383 мкг/г пыли, для Оег/1 - от 0,2 до 102 мкг/г пыли. При этом, концентрация йегр! и Оег/1 в 34,8% и 17,4% квартир, соответственно, была больше 2 мкг/г пыли (при которой, по данным ВОЗ, у больных с предрасположенностью к атопии развивается сенсибилизация к клещевым аллергенам), а в 13,0% и 8,7% - больше

10 мкг/г пыли (концентрация, при которой возникают приступы у больных с клещевой астмой). Концентрация клешс-

вого аллергена Оег р1 составила в среднем 46,1±26,8 мкг/г пыли, Оег (1- 17,8± 10,7, причем в жилищах детей с аллергическими заболеваниями она была значительно выше, чем в квартирах здоровых.

В образцах ДП из квартир, где проживали здоровые дети, частота обнаружения клещевых аллергенов составила 23,8±9,3%, а в квартирах больных - в 2-3 раза чаще (57,3±3,3%, Р<0,001). При этом, особенно часто клещевые аллергены встречались в ДГ1 больных с тяжелым и средне-тяжелым течением бронхиальной астмы (72,7±9,5% и 59,2±7,0%, соответственно) и аллергическим риносинуситом (58,3±10,1%).

Доминирующими в квартирах больных были клещи О.ргетпухх'ишх (84,9%) и аллерген Оегр! (93,7%). Клещи Л /аппае и их аллерген Оег/1 обнаружены в 34,4% и 62,5% образцов ДП, соответственно. При этом коэффициенты корреляции между численностью клещей и концентрацией клещевых аллергенов были высокими: г=0,96 - для О./Ятлтошшл и Оег р!, и г=0,86 - для Д. /аппае и Оег/1 ■

При исследовании иммунного ответа на клещевые аллергены был выявлен повышенный уровень общего ^Е у 95,1% детей с клещевой сенсибилизацией, причем более чем у половины он был более 300 КЕ/л и превышал таковой у здоровых в 2,5-12 раз в зависимости от тяжести заболевания. Аллегенспецифичес-кие 1§Е-АТ чаще всего выявляли к клещам сем. Руго$1урЫс1ае, что коррелировало с концентрацией клещевых аллергенов Оег р! и Оег/1 в ДП. У всех детей с аллергическими заболеваниями, обусловленными сенсибилизацией к пироглнфидным клещам, выявили также повышенное содержание аллергенспецифичес-ких 1§С- и ^С4-АТ, что, по-видимому, отражало высокую экспозицию клещевых аллергенов в окружении больных.

Выраженные сенсибилизирующие свойства аллергенов клещей ДП обусловлены, прежде всего, их биологическими свойствами. Оег р1, будучи по своей природе цистеиновой протеазой, способствует протеолитическому выделению низкоаффинного рецептора СЭ23 и С025 с мембраны В-клеток и Т-клсток, соответственно, что приводит к увеличенному синтезу ^Е. Кроме того, этот аллерген может обусловить разрыв межклеточных соединений слизистых оболочек верхних дыхательных путей (ВДП) и отслойку бронхиального эпителия, что увеличивает проницаемость ВДП и облегчает свободное проникновение клещевого аллергена к дендритным антиген-презентирующим клеткам.

В этой связи, экспозиция клещевых аллергенов в окружении ребенка является одним из важных факторов риска формирования ранней сенсибилизации и тяжелого течения аллергического заболевания. Своевременное обнаружение клещей в ДП представляется необходимым для разработки стратегии адекватных санитарно-гигиенических мероприятий, направленных на снижение экспозиции клещевых аллергенов, с последующим проведением специфической иммунотерапии больных.

МЕТОД АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ АЛЬТЕРАЦИИ ЛЕЙКОЦИТОВ В ДИАГНОСТИКЕ АЛЛЕРГИИ К ЛАТЕКСУ

Гюнтер Е.А., Гервазиева В.Б.

НИИВС им. И.И. Мечникова РАМН, г. Москва

За последние 20 лет проблема аллергии к латексу стала одной из ведущих проблем практической медицины в связи с увеличением ее распространенности в целом по популяции и в профессиональных группах риска. Увеличение частоты латексной аллергии вызвано не только возросшим применением латексных изделий как универсального средства профилактики заражения СПИ-

Дом и другими вирусными инфекциями, но и наличием перекрестной реактивности к латексным и пищевым аллергенам за счет общих для растений антигенных детерминант. Цель настоящего исследования - изучить возможность использования теста аллергической альтерации лейкоцитов (ТААЛ) для диагностики аллергии к латексу. В группу исследования вошли 18 работников здравоохранения, отмечавших возникновение покраснения, зуда и сухости, иногда отечности, кожи рук при использовании резиновых перчаток, и 17 больных с пищевой аллергией. Всем больным проводили скарификационное кожное тестирование с применением латексного и пищевых аллергенов (морковь, картофель, томаты, яблоко, киви, манго, дыни, авокадо, абрикос, банан, персик, производства Stallergenes, France). Положительные кожные пробы к ним разной степени выраженности были выявлены у больных обеих групп. 18 больным с непереносимостью резиновых перчаток проводили аппликационный тест на выявление замедленной гиперчувствительности к химическим составляющим латексных изделий с применением Contact patch test (Stallergenes). Ни у одного больного из этой группы не было обнаружено замедленной гиперчувствительности к химическим добавкам латекса, что исключает наличие контактного дерматита. При постановке ТААЛ 100 мкл исследуемой крови инкубировали в течение 30 минут при 37°С с 10 мкл стандартного раствора аммонизированного латекса фирмы Stallergenes, после чего окрашивали акридиновым оранжевым и подвергали люминесцентной микроскопии с подсчетом числа альтерированных клеток. Показатель альтерации выражали в процентах. К положительным результатам теста относили показатели выше 20%. Контролем служил образец той же крови, инкубированный с изотоническим раствором натрия.

В первой группе больных положительные результаты с аллергеном латекса в ТААЛ и кожном тестировании составили 77,8% и 83,3%, соответственно. При этом в 6 из 7 исследованных в иммуноферментном анализе сыворотках больных обнаружены IgE-AT к латексу.

Поскольку у больных с латексной аллергией при кожном тестировании была выявлена сенсибилизация к широкому спектру овощных и фруктовых аллергенов, обусловленная, как полагают, перекрестной реактивностью, мы попытались выявить у больных с аллергией на пищевые продукты растительного происхождения наличие сенсибилизации к латексу. ТААЛ с латексным аллергеном провели у 17 больных с пищевой аллергией и выявили в 70,5% случаев положительные результаты. При этом положительные кожные пробы на латекс у этих больных были обнаружены в 76,4% случаев. Такой высокий процент сенсибилизации к латексу (при отсутствии клинической симптоматики при контакте с ним) у больных с пищевой аллергией, установленный двумя методами, свидетельствует о возможности развития латексной аллергии у этих больных позднее, особенно если контакты с латексными изделиями будут регулярными и интенсивными.

Таким образом, использованный для диагностики латексной аллергии ТААЛ, отличается высокой специфичностью, быстротой и простотой выполнения.

ХРОНИЧЕСКАЯ РЕЦИДИВИРУЮЩАЯ КРАПИВНИЦА И ИНФЕКЦИЯ HELICOBACTER PYLORI

Димиева Г.М.*, Сибгатуллина Н.А.**, Гервазиева В.Б.*

*НИИВС им И.И. Мечникова, г. Москва,

**Городская больница №7, г. Казань

Введение. Крапивница - одно из наиболее распространенных сегодня полиэтиологических заболеваний, сложность

лечения которого зачастую связана с невозможностью определить его причину. Этиология крапивницы остается неизвестной у 50 - 70% больных. Наиболее изученными являются атопическая и физическая формы крапивницы. В случаях, когда причинный фактор установить не удается, крапивницу относят к идиопатической. В последние годы получены данные о возможной этиологической роли инфекции при крапивнице. Наиболее часто с крапивницей связывают инфекцию Helicobacter pylori (Н.р.), однако патогенетические механизмы развития хронической крапивницы при инфекции Н.р. остаются не известными.

Цель исследования. Оценка распространенности инфекции Н.р. у больных хронической рецидивирующей крапивницей (ХРК) и выявление взаимосвязи между инфекцией и изменениями в lgE системе иммунитета.

Материалы и методы. Нами обследовано 43 больных ХРК в возрасте от 16 до 63 лет и 27 здоровых лиц аналогичных по полу и возрасту. Лица с атопической и физической формами крапивницы не включались в исследование. Н.р. выявляли микроскопически в биоптатах слизистой желудка, полученных при эзофагогастродуоденоскопии (ЭГДС).

Уровень IgG антител (lgG-Ат), специфичных к Н.р., определяли методом ИФА в коммерческих наборах “Immuno-Comb II” производства "Orgenics”, Израиль.

Содержание общего IgE в сыворотках крови определяли методом твердофазного ИФА.

Результаты и обсуждение. Клиническое обследование показало, что длительность заболевания в исследуемой группе составила от 6 месяцев до нескольких лет. У 17 больных крапивницей (39,5%) наблюдались выраженные клинические признаки гастрита или гастродуоденита.

ЭГДС с микроскопией биоптатов подверглись 9 больных из 43 обследованных. У всех девяти при гастроскопии подтвержден диагноз гастрита или дуоденита, при этом в биоптатах выявляли Н.р., обнаружение которого совпадало с наличием IgG к Н.р. в 100% случаев. Оказалось, что инфекция Н.р. выявляется у 69,7% больных крапивницей и только у 25,9% здоровых (р<0,01). Более того, было выявлено, что средний уровень IgG-Ат к Н.р., определяемый у больных крапивницей, вдвое превышал таковой у лиц контрольной группы. Большая часть больных имела значения IgG-Ат равные 120 -160 Ед/мл, а средний уровень IgG-Ат в исследуемой группе составил 101,3 Ед/мл, тогда как среди семи серопозитивных доноров значение, превышающее 100 Ед/мл, зарегистрировано лишь у одного человека, а среднее содержание IgG-Ат было равно 48,5 Ед/мл.

Изучение IgE системы иммунитета показало, что уровень общего IgE превышал возрастную норму у 83,3% больных ХРК серопозитивных к Н.р. и у 61,5% серонегативных пациентов. Несмотря на то, что значительной разницы между этими группами не было выявлено, дальнейший анализ показал, что при высоких значениях IgG-Ат к Н.р. содержание IgE в сыворотке крови выше, чем при низких цифрах IgG-Ат. У больных с IgG-Ат к Н.р. на уровне 80 Ед/мл и выше содержание IgE составило в среднем 284,0±47,23 кЕ/л, что значительно превосходило его количество у больных с уровнем IgG-Ат к Н.р. менее 80 Ед/мл - 110.0±32,46 кЕ/л (р<0,05). Такое различие позволяет сделать предположение об участии IgE опосредованных механизмов в патогенезе крапивницы у этих больных. Возможно, у них наблюдается выработка IgE-Ат к Н.р., с одной стороны, с другой стороны, воспалительная реакция в желудочно-кишечном тракте может облегчать абсорбцию антигенов и так же способствовать синтезу IgE, не исключается также участие других, не известных пока механизмов, приводящих к гиперпродукции IgE у больных ХРК.

Выводы. 1) Распространенность инфекции Н.р. у больных ХРК значительно выше, чем средняя в популяции. 2) Существует прямая связь между уровнем IgG-Ат к Н.р. и степенью гиперпродукции IgE у больных ХРК.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ К НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫМ СОЕДИНЕНИЯМ

Зайцева Н.В., Долгих О.В., Тырыкина Т.Н.

Научно-исследовательский клинический институт детской экопатологии,

Пермь, Россия

Введение. При изучении сенсибилизации вызванной низкомолекулярными соединениями в последние годы широко используются методы иммунодиагностики in vitro. С этой целью рекомендуются клеточные специфические реакции, в основе которых лежит идентификация степени клеточной альтерации при экспозиции аллергена, и серологические - с установлением повышенного титра антигаптенных антител к ведущему аллергену. Установление экозависимости аллергопатологии населения, подвергающегося воздействию химических аллергенов, побуждает искать наиболее чувствительные и специфичные методы.

Цель и задачи исследования. Разработка способа диагностики специфической сенсибилизации к низкомолекулярным соединениям по критерию аллерген-специфичного IgE для установления ответа организма на экспозицию аллергена.

Материалы и методы. Постановка методики и оценка результатов осуществлялась способом, разработанным в лаборатории Пермского научно-исследовательского института детской экопатологии (Патент на изобретение № 2152034 от 27.06.00 “Способ количественного определения аллергенспе-цифичных иммуноглобулинов Е в сыворотке (плазме) крови”). Определение химических соединений в крови проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Основные результаты. Разработан способ количественного определения аллерген-спсцифичных иммуноглобулинов Е в сыворотке (плазме) крови.

Поставленная цель достигается тем, что берут два образца исследуемой пробы, в один из которых вводят материал, содержащий тестируемый аллерген, во-второй - материал без аллергена, а после удаления материала из образцов проводят определение содержания общего иммуноглобулина Е в пробе. О количестве аллерген-специфичных иммуноглобулинов Е судят по разности содержания общего иммуноглобулина Е во втором и первом образцах, причем, в качестве материала используют целлюлозную подложку.

Из научной и патентной литературы нам неизвестны способы определения аллерген-специфичных IgE с использованием указанной выше совокупности признаков.

Благодаря тому, что в качестве материала, содержащего тестируемый аллерген, используют целлюлозную подложку, например, бумажный диск, с прикрепленным к ней тестируемым аллергеном, обеспечивается извлечение из проб связанных аллерген-специфичных IgE, которые в дальнейшем не будут оказывать влияния на установление концентрации оставшегося общего IgE, чем достигается простота и точность способа, а также оригинальность подхода к устранению мешающего влияния аллерген-специфичных IgE. Использование двух образцов исследуемой пробы, в один из которых помещают материал содержащий аллерген, а в другой образец помещают материал без тестируемого аллергена, позволяет осуществлять контроль мешающего влияния на конечный

результат неспецифического IgE с одной стороны, а с другой обеспечивает равнозначные условия в обоих дублированных образцах пробы по отношению к целлюлозной подложке. Оценка корректности полученных результатов проводилась в сравнении с коммерческим набором для определения аллер-ген-специфичных IgE "ULEAST” (Cypress Diagnostics, Бельгия), набором дисков на формальдегид “U83” (Cypress Diagnostics, Бельгия) и набором стандартов “ULREF” (Cypress Diagnostics, Бельгия). Тестирование проб здоровых детей и детей с аллергопатологией позволило выяви ть аллерген-спе-цифичные реагины к формальдегиду с чувствительностью 0,35 МЕ/мл в определяемом диапазоне концентраций 0,7-50 МЕ/ мл при 89,3% корреляции с результатами, полученными при использовании коммерческого набора.

Полученные результаты соотносились с проводимым параллельно химико-аналитическим анализом крови на содержание изучаемого химического вещества.

Заключение. Использование предлагаемого способа позволяет проводить оценку специфической сенсибилизации к химическим аллергенам, а изучение в качестве дополнительного критерия показателя экспозиции аллергена (концентрация в крови) увеличивает достоверность полученных результатов.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ У ДЕТЕЙ

Калинина Н.М, Папайи А.В., Пешехонова Ю.В, Галустян А.Н.

Всероссийский Центр экстренной и радиационной медицины МЧС РФ,

Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия, Санкт-Петербург, Россия

На рубеже XXI века резко возросло число детей, больных бронхиальной астмой. Выросла не только заболеваемость бронхиальной астмой у детей, но и “помолодел” возраст детей - диагноз ставится детям первых месяцев жизни.

Цель исследования. Выявить иммунологические особенности течения бронхиальной астмы у детей от года до 6 лет (1-я группа) и старшей возрастной группы - от 7 до 15 лет (2-я группа). Все дети (п= 38) были обследованы в первые дни поступления в стационар, до назначения терапии.

Методы. Кроме клинического анализа крови изучались параметры клеточного пммунитета-СОЗ, CD4, CD8, CD20, CD16, CD25. HLA1I, CD95, исследовались синтез, спонтанная/индуцированная продукция интерлейкинов 4, 6 и фактора некроза опухолей а. Определялся уровень иммуноглобулинов классов IgA, IgM, IgG, IgE в сыворотке крови. Изучались пролиферативная активность Т- и В- лимфоцитов в 72-часовой культуре клеток периферической крови и функции нейтрофильных гранулоцитов - бактерицидиость, адгезия и фагоцитоз. Полученные результаты сравнивались с возрастной нормой. Достоверность различий оценивалась с помощью критерия Манна-Вилкоксона-Уитнм.

Результаты п обсуждение. Более чем у 50% детей в обеих возрастных группах в момент поступления в стационар отмечался лейкоцитоз, относительная лимфопения в младшей возрастной группе встречалась в 47,1%, в старшей - в 76,5%. Свыше 35% пациентов в обеих возрастных группах имели низкую плотность экспрессии мембранных рецепторов, в связи с чем число "нулевых” клеток в периферической крови у этих пациентов превышало 25%. В обеих группах пациентов

отмечалось снижение числа Т-лимфоцитов за счет CD8 клеток, отмечалось увеличение относительного числа клеток с маркером CD 95. Более чем у 50% больных в острый период определялись низкие (псевдонормальные) значения IgE, что по-видимому связано с фиксацией IgE антител на клетках-мишенях шокового органа, параллельно у ряда пациентов отмечалось повышение IgM и снижение IgA. Выявлялось увеличение спонтанной продукции IL-4, IL-6 и TNF-a и снижение индуцированной, в сыворотке крови были повышены IL-4 и TNF-a. Нарушение функции нейтрофилов характеризовалось снижением адгезии клеток - спонтанной и индуцированной.

Заключение. Таким образом, при обострении бронхиальной астмы у детей выявлены изменения параметров иммунитета, не характерные для периода ремиссии.

ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСА У ДЕТЕЙ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

Кирдей JI.E., Кирдей Е.Г.

Иркутский государственный медицинский университет М3 РФ,

Иркутский диагностический центр М3 РФ,

Иркутск, Россия

Атопическая бронхиальная астма (БА) характеризуется выраженными процессами хронического воспаления в бронхолегочной системе и осложнениями инфекционной природы. Поэтому выяснение иммунологических механизмов воспаления при этом заболевании имеет важное теоретическое и практическое значение. В настоящей работе были изучены особенности иммунного статуса у детей различного возраста с БА средне-тяжелого и тяжелого течения. Число лимфоцитов различных популяций и субпопуляций определяли в проточной цитофлюориметрии с помощью двойных антител к CD-анти-генам. Установлено, что у детей с БА в возрасте 1-6 лет в сравнении со здоровыми детьми наблюдается достоверное снижение общего числа лимфоцитов. Аналогичные изменения имеют место и у детей с подростками в возрасте 7-16 лет. Указанное снижение у больных обеих возрастных группах происходит как за счет количества Т-лимфоцитов (CD3+HLADr и CD3+CD56 ), так и за счет числа В- лимфоцитов (CD19+CD2‘). В регуляторных еубпопуляциях Т- лимфоцитов выявляется выраженное снижение числа Т-лимфоцитов с супрессорной и киллерной активностью (CD8+CD4 ) при не измененном количестве Т- хелперов (CD4+CD8~). У больных обеих возрастных группах отмечается также снижение числа NK-клеток (СВ56+СВЗ ). Выявляется угнетение и функциональной активности Т-лимфоцитов в виде снижения числа активированных Т-клсток (HLA-Dr+CD3+). Концентрация сывороточных IgA, IgM, IgG, определявшаяся с помощью лазерной нефелометрии, имеет тенденцию к увеличению, но изменения такого рода статистически не достоверны. При изучении фагоцитарной активности нейтрофилов у больных БА обеих возрастных групп отмечается достоверное снижение числа фагоцитирующих клеток и их поглотительной способности, в то же время показатели активности этих клеток в реакции хемилюминесценции в спонтанном и индуцированном варианте не отличаются от контрольных. В возрастной группе 7-16 лет у больных БА методом лазерной нефелометрии выявляется достоверное снижение содержания СЗ и С4 компонентов комплемента в сыворотке крови. Кроме того, у больных БА в возрасте 7-16 лете помощью ИФА установлено увеличение содержания аутоантител к smRNP в сыворотке крови.

Таким образом, БА средне-тяжелого и тяжелого течения у детей и подростков сопровождается выраженной иммунологической недостаточностью во всех звеньях иммунной системы на фоне гипосупрессии в системе Т-клеточной иммунорегуляции. Выявляются признаки наличия аутоиммунного компонента при БА у детей и подростков старшего возраста. Полученные данные свидетельствуют о том, что развитие хронического воспаления при БА связано с выраженной комбинированной иммунологической недостаточностью. По видимому, развитие такого рода изменений в иммунной системе происходит в результате длительно текущего атопического процесса и функциональных изменений в системе дыхания, а дефектность ее различных звеньев, гипосупрессия и аутоиммунные реакции, в свою очередь, способствуют хронизации воспалительного процесса и возникновению деструктивных изменений в брон-хо-легочной системе. В связи с этим становится очевидной необходимость использования в лечении БА методов комплексной иммунокоррекции, направленной на нормализацию деятельности практически всех звеньев иммунной системы.

НИЗКИЙ УРОВЕНЬ ОБЩЕГО 1дЕ И КОМПЛЕМЕНТАРНОЙ АКТИВНОСТИ СЫВОРОТКИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ИДИОПАТИЧЕСКОЙ КРАПИВНИЦЕЙ

Киселева Н.В., Гавриш Т.В., Никушкипа К.В.

Отделение иммунологии и аллергологии,

Клиники ЧелГМА, г. Челябинск, Россия.

Идиопатичсская крапивница (ПК) относится к тяжелым, мулыифакторным заболеваниям, патогенез и лечение которых остается во многом не изученными. В последние годы ПК стали относить к глобальным заболеваниям, которыми страдают лица наиболее активного трудоспособного возраста практически в любой точке планеты.

Настоящее исследование посвящено изучению уровня общего ^Е и активности комплемента сыворотки крови у 10 больных ПК в возрасте от 27 до 60 лет с длительностью заболевания 3,7±0,96 лет. Из них мужчин было 6, а женщин 4 человека. Из сопутствующей патологии наиболее часто диагностировались: аутоиммунный тиреоидит (АИТ) у 4 человек, декомпснсироианный дисбактериоз па фоне хронической патологии желудочно-кишечного тракта - у 6 пациентов. У больных АИТ выявлялся высокий титр антитирсоидных антител. Патогенетическое лечение этих заболевании приводило к некоторому улучшению состояния, но не излечению. Клинической особенностью ИК является типичные уртикарные высы-

пания нередко сливного, гигантского” характера, усиливающиеся в вечернее и ночное время. Интенсивность кожного зуда у этих больных была чрезвычайно высока. При обращении всем больным была оказана ургентная помощь, включающая парентеральное введение ингибиторов протеаз, глюкокорти-коидных гормонов, антигистаминных препаратов, а также энтеросорбенты с положительным эффектом. Анализ данных иммунологического обследования, включающею определение уровня иммуноглобулинов ^А, ^М, ^С, общего ^Е, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), гемолитической активности по СН50% и компонентов С1, СЗ, С5 комплемента, приведен в таблице.

Как видно из таблицы, у больных ИК выявляется низкий уровень иммуноглобулинов основных классов и общего ^Е, накопление ЦИК, гипокомплементемия, что, возможно, связано с глубокими метаболическими нарушениями и диспротеи-немией, формированием ЦИК-зависимой иммунопатологии.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ПОЛИКОМПОНЕНТНОЙ ВАКЦИНЫ (ВП-4) У БОЛЬНЫХ ТЯЖЕЛОЙ ФОРМОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ

Ковзель Е.Ф.

Институт медицинского образования Новгородского университета,

Великий Новгород, Россия

Тяжелая форма бронхиальной астмы всегда подразумевает наличие у больного той или иной степени вторичной иммунологической недостаточности, которая обусловлена длительной глюкокортикостероидной терапией не редко парентерально или внутрь при обострениях, наличием хронических очагов инфекции, особенностью нейро-гуморального фона, частой антибиотикотерапией и другими факторами. Основной проблемой в лечении этих больных, кроме базовой терапии, является лечение бактериальных осложнений в основном со стороны дыхательных путей, нередко вызванными условно-патогенной флорой с упорным ее течением.

Целью нашего исследования явилось изучение возможности применения поликомпонентной вакцины (ВП-4), как им-муиотропного препарата микробного происхождения у больных тяжелой формой бронхиальной астмы, осложненной вторичной иммунологической недостаточностью.

Нами пролечено 23 больных в возрасте от 45 до 64 лет тяжелой формой бронхиальной астмы смешанной формы с длительностью заболевания более 15 лет. Все больные находились на базовом лечении ингаляционными глюкокортикостероидами (ГКС) с периодическим приемом системных ГКС.

Показатели Больные ИК, п=10 Здоровые, п=30 Р

1дА, г/л 1,73±0,14 2,24+0,07 0,02

|дм, г/л 1,13+0,05 1,25±0,03 0,05

№ Г/л 8,82+0,87 12,78+0,55 0,05

Общий 1дЕ, кЕд/мл 10,41+3,72 60,71+9,63 0,05

ЦИК, усл.ед. 96,93±2,25 48,33+2,81 0,05

СН50%, усл.ед. 48,82±8,53 67,22±5,81 0,05

С1, эф. мол. 66,43+9,97 99,84±4,33 0,01

СЗ, эф.мол. 72,71+8,41 87,71 ±3,54 0,05

С5, эф.мол. 75,56±3,48 85,31+3,55 0,01

В анамнезе у данной группы больных наблюдались частые обострения очагов инфекционного процесса в виде слизисто-кожного кандидоза, гнойного бронхита, хронического гайморита, герпетической инфекции. Явления вторичной иммунологической недостаточности также подтверждались данными иммунологических исследований в виде снижения СЭЗ и СЭ4 субпопуляций лимфоцитов, низкими значениями 1«С, снижением показателей фагоцитоза.

Все больные, получавшие курс вакцинации, находились в состоянии относительной ремиссии и получали обычный курс базовой терапии. Введение ВП-4 проводилось по стандартной схеме, указанной в инструкции в условиях стационара.

Результаты лечения оценивались через 6 месяцев и 1 год. Оценку эффективности терапии проводили по частоте обострений, результатам показателей функции внешнего дыхания и дозе базовых ингаляционных ГКС.

Отмечен очень хороший эффект лечения, проявляющийся в снижении частоты обострений по сравнению с предыдущим годом, уменьшении дозы препаратов на 50 и более процентов у 3 больных (13%). У 14 (60,9%) больных отмечен положительный эффект и отсутствие эффекта выявлено у 6 (26,1%) больных. У 4 (17,4%) больных наблюдались тяжелые реакции на введение препарата в виде повышения температуры выше 38°С и у 12 больных повышение температуры до 37°С и 37,5°С.

Таким образом, включение поликомпонентной вакцины -ВП-4 в комплексную базовую терапию больных тяжелой бронхиальной астмой, осложненной вторичной иммунологической недостаточностью, является относительно безопасным, повышает эффективность лечения и уменьшает вероятность возникновения осложнений микробной этиологии.

МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК КРОВИ У БОЛЬНЫХ АТОПИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ

Куртасова Л.М., Савченко А.А., Шакина Н.А.

Красноярская государственная медицинская академия, Институт медицинских проблем Севера СО РАМП, Красноярск, Россия

Наряду с повсеместным ростом аллергических заболеваний, согласно данным ВОЗ, ежегодно увеличивается число больных атопическим дерматитом.

К настоящему времени накоплены убедительные данные о важной роли иммунной системы в развитии кожного процесса и его хронического течения. При этом доказано, что функциональные проявления лимфоцитов происходят только при соответствующем изменении их метаболизма. Таким образом, целью данного исследования явилось изучение активности метаболических ферментов в лимфоцитах крови у больных атопическим дерматитом.

Биолюминесцентным методом исследованы уровни активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови у 42 детей с атопическим дерматитом в возрасте 7-11 лет. Больные дети обследованы в период клинической ремиссии. Котрольную группу составили 25 здоровых детей аналогичного возраста.

Проведенные исследования установили статистически значимое снижение активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фосфатдегидрогеназы, прямой реакции ма-лагдегидрогеназы, НАД-зависимых изоцитрат- и глутаматдегид-рогеназ, мапик-фермента и глутатионредукгазы на фоне достоверного повышения уровней активности обратных реакций лак-татдегидрогеназы и малатдегидрогеназы в лимфоцитах крови у больных атопическим дерматитом по сравнению с показателями

контрольной группы. Выявленные метаболические изменения отражают выраженное снижение интенсивности аэробного дыхания иммунокомпетентных клеток, но при увеличении активности анаэробного окисления глюкозы. Понижения уровня Г6ФДГ (ключевого и инициализирующего фермента пентозофосфатного цикла) определяет снижение наработки интермедиатов для реакций макромолекулярного синтеза. Кроме того, понижение активности г лутатионредуктазы определяет снижение антиоксидантной защиты иммунокомпетентных клеток. В целом, можно заключить, что снижение энергетического потенциала и интенсивности реакций пластического обмена в иммунокомпетентных клетках больных атопическим дерматитом в период клинической ремиссии может привести к понижению пролиферативной активности лимфоцитов. Обнаруженные нарушения метаболического статуса лимфоцитов крови у данной категории больных в период ремиссии являются одной из причин, обусловливающих рецидив заболевания.

Таким образом, нарушение метаболического статуса лимфоцитов крови у больных атопическим дерматитом в период клинической ремиссии свидетельствует о целесообразности выделения в качестве базисной иммунореабилитации препаратов, корригирующих внутриклеточный обмен иммунокомпетентных клеток.

ОБЩНОСТЬ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ МЕХАНИЗМОВ ПАТОГЕНЕЗА РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО ОБСТРУКТИВНОГО БРОНХИТА И БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ

Маршалкина Т.В., Байжанова М. М., Беляев Н.Н.*

Научный центр педиатрии и детской хирургии,

* Институт молекулярной биологии и биохимии, Алматы, Казахстан.

Рецидивирующий обструктивный бронхит (РОБ) наряду с бронхиальной астмой (БА) сопровождается расстройством функции внешнего дыхания легких по обструктивному типу. Клиническая картина БА и РОБ характеризуется большим разнообразием симптомов (кашель, удушье и мокрота), которые в целом отображают картину обструктивного синдрома (ОС). До настоящего времени вопрос о клинико-патогенетической идентичности ОС при РОБ и БА составляет предмет научных дискуссий. Причиной тому служит отсутствие убедительных доказательств наличия при РОБ аллергического воспаления, свойственного БА. Целью настоящего исследования явилось оценка Тй-2 иммунологического механизма при повторных эпизодах бронхиальной обструкции у детей с РОБ и БА.

Нами обследовано 73 ребенка в возрасте от 6-месяцев до 14 лет. Исследовали содержание 1Ь-4 с помощью коммерческой ИФА тест-системы (ТОО “Протеиновый контур”, Санкт-Петербург) и уровень свободно циркулирующего ^Е с помощью ИФА в сыворотке крови. Все больные были разделены на 2 группы: 1) 43 ребенка с верифицированной БА, 2) 20 детей с РОБ. Контрольную фуппу составили дети до двух лет жизни, у которых на фоне ОРВИ впервые имел место ОС. Исследования проводились двукратно: в приступный период (I) и в стадии клинической ремиссии (II).

Полученные нами результаты подтверждают имеющиеся в литературе данные о сдвиге цитокинов при БА в сторону повышения уровня 1Ь-4 (I - 13,03±8,33 нг/мл; II - 5,23±3,06 нг/мл), сопровождающимся повышенной продукцией сывороточного (I - 424,0±74,3 МЕ/мл; II - 407,0±73,0 МЕ/мл). В иммунном ответе при РОБ также доминировал Тх-2 механизм (1Ь-4:1 -1,09±0,42;

II - 0,18±0,03 нг/мл; ^Е: I - 194,5±14,3 МЕ/мл, 11 - 75,8±36,06 МЕ/мл). В тоже время исследования, проведенные у детей контрольной группы, показали, что уровни сывороточных 1Ь-4 и 1°Е не отличались от нормы (1Ь-4:1 - 0,06±0,01 нг/мл, II - 0,08±0,01

нг/мл; ^Е: I - 30,57±3,58 МЕ/мл; II - 23,2±7,3 МЕ/мл). Таким образом, можно заключить, что механизм ОС при РОБ является идентичным таковому при БА. Повторные эпизоды БОС сопровождаются иммунологической перестройкой по Тх-2 типу.

ЗНАЧЕНИЕ 15-ГИДРОКСИЭЙКОЗАТЕТРАЕНОВОЙ КИСЛОТЫ В РАЗВИТИИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ У ДЕТЕЙ

Морозова О.В., Тангиев Т.М., Пампура А.Н., Окунева Т.С., Чсбуркин А.А., Святкина О. Б.

НИИ педиатрии и детской хирургии М3 РФ,

Москва, Россия

Известно, что 15-гидроксиэйкозатетраеновая кислота (15-ГЭТК), являясь основным метаболитом арахидоновой кислоты слизистой дыхательных путей, относится к медиаторам с выраженным провоспалительным действием.

Уровень 15-ГЭТК в лаважной жидкости полости носа у детей (5-14 лет) с аллергическим (п=23) и бактериальным риносинуситом (п=13), атопической бронхиальной астмой (п=11) в стадии обострения и ремиссии и у здоровых (п=6) определяли методом ВЭЖХ.

Обнаружено существенное превышение показателей у больных всех групп относительно таковых у здоровых. Более выраженное увеличение уровня 15-ГЭТК отмечено в группах больных детей в острой стадии заболевания по сравнению с ремиссией, что соответствовало при аллергическом рините 2,23±0,43 и 0,6±0,07 нг/мл (р<0,001); при бактериальном ри-носинусите - 1,41 ±0,09 и 0,76±0,1 нг/мл (р<0,001); при бронхиальной астме - 1,98±0,32 и 1,18±0,15 нг/мл (р<0,05). В стадии ремиссии наиболее высокий уровень 15-ГЭТК обнаружен у детей с бронхиальной астмой по сравнению с данным показателем у больных с аллергическим ринитом (р<0,01). Заслуживает внимания существенное превышение (р<0,05) уровня 15-ГЭТК в группах с аллергической нозологией по сравнению с показателями у больных с бактериальным риносинуситом в стадии обострения.

При индивидуальном анализе показателей в ряду обнаружено, что повышение уровня 15-ГЭТК наиболее характерно для больных с бронхиальной астмой в сочетании с атопическим дерматитом, а также при аллергическом рините, осложненном бактериальной инфекцией.

Результаты свидетельствуют о значительной роли 15-ГЭТК в развитии и поддержании воспаления в дыхательных путях у детей и позволяют предположить, что разработка методов подавления высвобождения 15-ГЭТК из клеток-мишеней может явится основой нового направления терапевтической коррекции аллергических заболеваний дыхательных путей у детей.

ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ АПОПТОЗА ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ АТОПИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

Мустафин И.Г., Бойчук С.В., Фассахов Р.С., Романенко О.М.

Республиканский центр по борьбе и профилактике СПИД, Казанский государственный медицинский Университет, Казанская государственная медицинская Академия.

Целью настоящего исследования явилось изучение механизмов апоптоза лимфоцитов (Лф) периферической крови

24 доноров и 22 больных атопической бронхиальной астмой (АБА) с легкой и средней степенью тяжести заболевания, на момент забора крови не получавших глюкокортикоиды.

Лф выделяли центрифугированием на градиенте плотности Перколла и культивировали в среде ЯРМ1 с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки, Ь-глутамина и антибиотиков. Клетки инкубировали с с дексаметазоном (Дн) (Ю-МО-ЧУ!), ионофором Са2+ А23187 (1-5 цМ), Ш-С1ССР (50-150 цМ) в СО,- инкубаторе в течение 1-6 суток. Апоптоз Лф оценивали методом проточной цитофлуорометрии (РасЗсап) по изменению величины митохондриального потенциала (МП) с помощью флюорохромов СМ-х-Я05 и ОЮС6, экспрессии на наружной мембране Лф молекул фосфатидилсерина (ФС) с помощью флюорохрома МС 540 и упорядоченной фрагментации ДНК, оцениваемой по появлению гиподиплоидного пика с помощью флюорохрома Р1.

Изменение величины МП является самым ранним признаком спонтанного апоптоза и предшествует экспрессии ФС на поверхности Лф и фрагментации ДНК. “Принудительное” снижение МП Лф с помощью СЬССР дозозависимо увеличивало экспрессию ФС на их клеточной поверхности в течение всего периода инкубации. У Лф больных АБА количество гиподип-лоидных клеток с течением времени было ниже, чем у Лф доноров. Различий в динамике изменения МП и экспрессии ФС между двумя исследуемыми группами лиц не выявлено.

Инкубация Лф с Дн и ионофором Са2+ также в первую очередь индуцирует снижение МП. Экспрессия ФС наблюдается на более поздних сроках, находится в обратной зависимости от величины МП Лф и наблюдается только на клетках со сниженным МП. Инкубация Лф больных АБА с Дн и ионофором Са2+ индуцирует более значительное снижение величины МП Лф и приводит к повышенной экспрессии ФС на клеточной поверхности (по сравнению с контролем). Количество гиподиплоид-ных клеток после инкубации Лф с вышеуказанными препаратами также существенно выше среди Лф больных АБА.

Таким образом, Лф больных АБА являются “устойчивыми” к процессу апоптоза, что проявляется в уменьшении количества клеток с признаками фрагментации ДНК. Тем не менее, Лф больных АБА являются более чувствительными к разнообразным индукторам апоптоза, о чем свидетельствует как повышенное количество клеток с фрагментированной ДНК среди Лф больных АБА, так и значительное снижение уровня МП и появление ФС после их инкубации с Дн и ионофором Са2+. Таким образом, апоптоз Лф, индуцированный Дн и ионофором Са2+, является митохондриально-опосредованным, а снижение МП Лф является необходимым условием для экспрессии ФС на клеточной поверхности при спонтанном и индуцированном апоптозе Лф. В то же время “изолированное” снижение МП (с помощью СЬССР) является недостаточным для фрагментации ДНК Лф.

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОТЕРАПИИ У БОЛЬНЫХ РЕСПИРАТОРНОЙ АЛЛЕРГИЕЙ ПЫЛЬЦЕВОЙ ЭТИОЛОГИИ

Незабудкин С.Н., Антонова Т.И., Карташова Н.К.

Аллергологический центр реабилитации детей и подростков Московского района

Цель исследования. Изучение эффективности специфической иммунотерапии (СИТ) у больных с пыльцевой сенсибилизацией.

Материалы и методы. Лечение аллергенами получили 255 больных поллинозом (П) и бронхиальной астмой (БА) пыльцевой этиологии. Для диагностики использовали ИФА

(общий 1цЕ, специфический ^Е), кожные «тарификационные тесты (КСТ), эндоназальные провокационные тесты (ЭПТ). Клиническая оценка эффективности лечения проводилась по общепринятой методике четырехбальной системы оценки.

Результаты и обсуждение. После 1 курса СИТ хороший (3 балл) и отличный эффект (4 балл) были получены у 45,3% больных. После 2 курса эффективность СИТ (3-4 б) повышается до 51%. СИТ у больных И снижала чувствительность слизистой оболочки носа к аллергенам в среднем на 1,8 балла. Высокий тигр ^Е выявлен у 202 человек (в среднем 422.08±39,8 кЕ/л), титр 1цЕ в пределах нормального значения зарегистрирован у 38 детей и у 15 человек - низкий титр ^Е (средняя величина - 11,07±1,6 кЕ/л). Среди больных с высоким реагинообразованисм 139 детей (68,8%) имеют положительные и резко положительные КСТ с пыльцевыми аллергенами, 63 ребенка (31,2%) - слабо положительные и отрицательные КСТ. При нормальном значении ^Е 20 человек (52,6%) выявили положительные и резко положительные КСТ, 18 человек (47,4%) - слабо положительные и отрицательные КСТ. При высоком реагинообразовании 50,6% детей имеют высокий титр специфических ^Е, 34,2% - умеренный титр, 12,3% - низкий. Удельный вес детей с отрицательным титром специфических 1цЕ при высоком уровне реагинообразования не превышает 3%.В исследуемой группе у детей с нормальным титром ^Е у 42,1% регистрируется умеренный титр специфических 1§Е, несколько реже (31,6%) - низкий титр, а в 10% наблюдений антител не выявлено. Среди пациентов с низким реагинообразованием чаще отмечаются низкие или умеренные титры специфических антител (соответственно 40% и 33,3%), высокий титр зарегистрирован в 20% наблюдений.

Заключение. Отмечена эффективность СИТ, которая повышается при более длительном лечении, что подтверждается данными ЭПТ.

АНАЛИЗ МЕХАНИЗМОВ АЛЛЕРГИИ НА ЛЕКАРСТВА-ГАПТЕНЫ

Новиков П.Д., Новиков Д.К., Сергеев Ю.В., Янченко В.В.

Витебский медицинский университет.

Витебск

Институт аллергологии и клинической иммунологии, Москва

Проведена комплексная оценка механизмов аллергии на лекарства путем выявления ее различных типов, зависимых от свободных антител различных изотипов, антител, связанных с лейкоцитами и тромбоцитами, и иммунных Т-клеток. Обследовано 120 больных с лекарст венной аллергией. Реакции анафилактического, ^Е-завпсимого типа, а также иммунокомп-лекспые и цитотоксичсские и ^С-заиисимые реакции выявляли путем определения в сыворотке крови ант ител соответствующего изотипа к препарату методом ИФА и в прямом тесте выброса ионов калия. 1§Е-антигела, связанные с базофила-ми. и ^О-антнтсла, связанные с гранулоцнтамн, определяли в непрямом тесте дегрануляции базофилов и прямых тестах выброса ионов калия, ферментов и реакции метахромазии. Тром-боцит-зависимыс реакции выявляли в тестах агрегации тромбоцитов и выброса ионов калия под влиянием препаратов.

Диагностику Т-клеточных реакций осуществляли в тесте стимуляции препаратом экспрессии молекул активации (С025, НЬА-ОЯ, С071). реакции подавления миграции и/или адгезии лейкоцитов, реакции бластотрансформации лимфоцитов

и по увеличению синтеза IL-2.

Показано, что возникновение лекарственной аллергии -многофакторный процесс, зависящий от совокупности причин. Лекарства-гаптены выступают в роли иммуномодуляторов, изменяющих естественный ход их иммунной элиминации. Усиление или угнетение апоптоза клонов и субпопуляций клеток на фоне инфекции и других видов патологии определяет запуск аллергической реакции на данный гаптен. Выявлены гранулоцит- и тромбоцит-опосредованные антите-ло-зависимые реакции, развивающиеся при взаимодействии гаптена с антителами, связавшимися с этими клетками через Fc-рецепторы.

СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ИММУНОТЕРАПИЯ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Новиков Д.К., Выхристенко J1.P., Новиков П.Д.

Витебский государственный медицинский университет, Витебск, Беларусь

Анализируются эффективность и механизмы действия различных методов и способов специфической аллерговакцинации (САВ) у 186 больных, имевших атопическую бронхиальную астму легкой и средней степени тяжести, а также 60 больных аллергическим ринитом и поллинозом. В сравнимых по клинико-функциональным и аллергологическим показателям, больные получали соответственно пероральную аллерговакцину домашней пыли “Домал”, водно-солевой аллерген домашней пыли, вводимый внутрикожно или подкожно, а также ингаляционно в виде аэрозоля.

Эффективность аллерговакцинации оценивали через 3, 6 и 12 месяцев с помощью клинических индексов, по изменению уровней аллергенспецифических IgE- и lgG-антител, стимуляции 1Ь2-рецепторов Т-клеток аллергенами, специфической гиперреактивности бронхов.

Полученные данные показали, что САВ новой лекарственной формой пероральной аллерговакцины домашней пыли не уступает по эффективности парентеральным методам, а по простоте применения превосходит их.

У больных, получавших пероральную аллерговакцину, отмечалось снижение уровней IgE-антител и увеличение IgG-антител, сравнимое с другими методами аллерговакцинации.

Оценка механизмов действия аллерговакцины показала, что хотя уровни IgE-антител снижались, a IgG - повышались, объяснить только переключением изотипов и увеличением соотношения Thl/Th2 клинический эффект нельзя. На основании исследования абзимной активности иммуноглобулинов установлено ее повышение после иммунотерапии и возможное участие антител-абзимов. Кроме того, необходимость длительных поддерживающих курсов аллерговакцинации указывает на роль изофермент-субстрат-зависимых систем в поддержании толерантности к аллергену.

К ВОПРОСУ О СПЕЦИФИЧЕСКОЙ 1дЕ-ДИАГНОСТИКЕ “IN VITRO' АЛЛЕРГИИ НА УЖАЛЕНИЯ ПЧЕЛЫ МЕДОНОСНОЙ

Орлова И.А., Иванов В.Д.

ГНЦРФ - Институт иммунологии М3,

Москва, Россия

Введение. В настоящее время остается актуальной проблема лабораторной IgE-диагностики аллергии к Перепонча-

токрылым. В большинстве случаев, из-за гиперчувствительности больных к яду пчел, IgE - диагностика “in vitro" является единственным способом выявить специфический аллерген и определить стратегию специфической иммунотерапии. Однако, не существует единого мнения относительно состава диагностического аллергена в тест-системах для иммунофермен-тного анализа (ИФА). Следует ли использовать только аллергены из тела насекомых или возможно применение аллергенов из яда пчел.

Цель н задачи исследования. Изучение in vitro интенсивности IgE-ответа у больных атопическими заболеваниями, имевших в анамнезе гиперчувствительность на ужаления пчел.

Материалы и методы. Иммуноферментным методом (по D. Walsh el. al., 1994) были исследованы сыворотки крови 170 лиц, страдающих гиперчувствительностью к различным ин-сектным аллергенам (аллергены яда и тела пчелы, осы, комаров, тараканов, дафнии).

Основные результаты. Специфические IgE-антитела к аллергенам Пчелы медоносной выявлены у 144 пациентов (84,7%). Последующее сравнительное изучение уровней специфических IgE-антител к аллергенам яда и тел пчел позволило установить у 126 из 144 пациентов (87,5%) более высокую интенсивность IgE-ответа на аллергены из яда пчел (Р<0,05).

Заключение. Полученные данные дают основание для постановки вопроса о необходимости включения в тест-системы ИФА аллергенов из яда пчел, наряду с использующимися аллергенами из тела пчел, для специфической диагностики in vitro гиперчувствителыюсти к Перепончатокрылым.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ПРЕПАРАТА КСИДИФОНА В ЛЕЧЕНИИ АТОПИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ У ДЕТЕЙ

Погомин Н. И., Святкина О. Б., Панкова Г. Ф., Чернова О. И., Морозова О В., Окунева Т.С., Каганов С. Ю.

МНИИ педиатрии и детской хирургии М3 РФ, Москва, Россия

Ранее было показано, что атопическая бронхиальная астма у детей характеризуется увеличением количества полине-насьцценных жирных кислот фосфолипидов и текучести мембран, особенно существенным в предприступном периоде. Колебания выше указанных параметров коррелировали с уровнем IgE и супрессорной популяцией Т-лимфоцитов.

Целью нашего исследования была разработка терапии, направленной на коррекцию изменений клеточных мембран и иммунологических параметров, фосфоновым препаратом ксидифон при атопической бронхиальной астме у детей.

При исследовании его действия in vitro (инкубация цельной крови с кендифоном 100 мкг/мл, 40 мин., 31°С) обнаружено снижение текучести цитоплазматических мембран ин-гактных лимфоцитов, измеряемой с использованием пирена, (с 0,67±0,05 до 0,51 ±0,03 уел. ед., р<0,01), что соответствовало нормальным значениям; существенное увеличение количества Т-супрсссоров (с 6,7±0,7 до 9,2±0,9%; р<0,05)и торможение дегрануляции базофилов (с 64,0±1,7 до 10,1±1,1%; р<0,()()1).

Под нашим наблюдением находилось 375 детей в возрасте от 7 месяцев до 3 лет (132 ребенка) и от 3 до 14 лет (243), больных тяжелой (89) и среднетяжслой (286) атопической

бронхиальной астмой, которая у 123 детей сочеталась с пол-линозом. Только ксидифон (30-50 мг/кг) получали 294 (58%) больных, в сочетании с эуфиллином и другими бронхолити-ческими средствами - 213 больных, с кортикостероидными гормонами - 29. Обследование детей проводили до назначения терапии и после 2-4-недельного курса лечения.

Положительный клинический эффект достигнут у большинства (92%) больных: уменьшились проявления бронхиальной обструкции, приступы затрудненного дыхания прекратились, у 27/29 детей удалось отменить кортикостероидную терапию. У всех больных атопической бронхиальной астмой в сочетании с поллинозом применение ксидифона за 4 недели до фиксированных ранее сезонных обострений и весь период пыления позволило предотвратить возникновение приступов бронхиальной астмы и развитие риноконьюнктивального синдрома (88/123 детей) или значительно уменьшить тяжесть клинических проявлений заболевания (у 35/123). Терапия кси-дифоном не сопровождалась побочными явлениями.

Использование ксидифона в течение 3-4 недель приводило к повышению уровня Т-супрессоров (с 11,0±1,9 до 17,5±1,8%; р<0,01), ингибированием трансмембранного перемещения ионов кальция в лимфоциты (с 11,8± 1,9 до 2,14± 1,35%, р<0,01), дегрануляции базофилов (с 67±3,4 до 18,8±2,3%, р<0,001) и высвобождения из лейкоцитов лей-котриенов ЛТС4, ЛТЭ4, ЛТЕ4 и ЛТВ4 под действием специфического аллергена in vitro. Обнаружено существенное снижение (с 0,66±0,08 до 0,5±0,08 уел. ед., р<0,01) текучести мембран лимфоцитов у больных детей, получавших ксидифон. Применение ксидифона в течение 8 недель приводило к существенному снижению ( р<0,01) общего IgE в сыворотке крови.

Результаты клинико-лабораторных наблюдений свидетельствуют о целесообразности применения ксидифона при атопической бронхиальной астме у детей.

ВЛИЯНИЕ МЕТОДОВ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЙ ГЕМОКОРРЕКЦИИ НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ МОНОНУКЛЕАРОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

Потапова С.М., Шкода А.П.*, Царев В.П.*, Ровда И.М.

НИИ гематологии и переливания крови,

* Минский государственный медицинский институт, Минск, Беларусь

Методы экстракорпоральной гемокоррекции (МЭГ) - один из вариантов базисной терапии при тяжелом и среднетяжелом течении бронхиальной астмы (БА), позволяющий избежать назначения или снизить дозы кортикостероидов.

Цель работы - изучить влияние плазмафереза (ПФ) и ультрафиолетового облучения крови (УФОК) на митоген-инду-цированную пролиферативную активность мононуклеаров периферической крови у больных БА. Обследовано 54 больных БА до лечения, после курса лекарственной базисной терапии, ПФ и УФОК. В качестве поликлональных активаторов (ПКА) использовали оптимальную (10 мкг/мл) и субоптималь-ную (0,5 мкг/мл) дозы фитогемагглютинина (ФГА), форбол-мирнстат ацетата (ФМА) и ФМА с аутологичными эритроцитами (аутоЭр).

Установлено, что у больных БА до лечения отмечается повышенная спонтанная пролиферативная активность по сравнению с группой здоровых доноров крови (табл.), которая снижается после УФОК. После проведения курса базисной

ПРОЛИФЕРАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ М0Н0НУЮ1ЕАР0В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ БА ДО И ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ

Группы обследуемых Включение Н-тимидина (имп/мин)

спонт. ФГА 1 мг/мл ФГА 10 мг/мл ФМА 20 нг/мл ФМА+аутоЭр

Контрольная группа п=25 199+26,4 1816+487,1 15450+2241 5008±1188 7231+1555

Б-е БА до лечения п=54 245,7+25,8* 1572+283,5 16662±1874 5055+752,3 6673±878,7

Б-е БА после базисной терапии п=19 256+73,5 1327+381 12062±2322 2683+623,2** 3479+741,7**

Б-е БА после плазмафереза п=15 215,1 ±40,6 704,4+223** 15987+3865 5076±1210 8000+2477

Б-е после БА УФОК п=8 117+13,9** 905±468 14647±2219 3194± 1004 5744+1117

Примечания: * Р<0,05 - достоверность различий по сравнению с группой здоровых лиц; **Р<0,05 - достоверность различий по сравнению с уровнем пролиферативной активности до лечения.

терапии без и с применением МЭГ снижается уровень пролиферативного ответа МПК на субоптималъную дозу ФГА. Особенно заметно выраженое влияние плазмафереза (Р<0,05). Уровень пролиферативного ответа лимфоцитов на оптимальную дозу ФГА имеет тенденцию к снижению после проведения курса базисной терапии. Выражено влияние базисной терапии на пролиферативную активность лимфоцитов при активации через альтернативный путь (ФМА+аутоЭр) (Р<0,05).

Таким образом, МЭГ снижают спонтанную пролиферацию и ингибируют пролиферативный ответ на субоптималь-ные дозы ФГА, в то время как базисная терапия в основном супрсссирует альтернативный путь активации лимфоцитов.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТОВ АТОПИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ У ДЕТЕЙ

Потемкина А.М., Клыкова Т.В.

Казанская Государственная Медицинская Академия дополнительного профессионального образования, Казань, Россия

Введение. Бронхиальная астма остается наиболее распространенным и тяжелым аллергическим заболеванием у детей, при этом на современном этапе преобладающей у них является атопическая форма, которая не является однородной по этиологии и клинике, что требует дифференцированного подхода к диагностике и лечению. Анализ наших многолетних наблюдений показал, что у детей ведущими являются 3 клинико-этиологических варианта АБА: пищевая, бытовая и сочетанная.

Цель работы. Представить клинико-иммунологические особенности выделенных вариантов АБА с оценкой разработанных нами дифференцированных комплексных лечебных программ для каждого из данных вариантов.

Материалы и методы: У 239 детей с АБА в возрасте от О до 15 лет проведено клинико-лабораториое, иммунологическое и комплексное аллергологическое обследование с широким спектром неинфекционных и инфекционных (для исключения данной патологии) аллергенов. Полученные результаты по всем видам обследования сопоставлены с данными пре-

морбидного фона, клиники и эффективностью лечебных программ.

Основные результаты. Установлено, что в формировании различных вариантов АБА участвуют как однозначные факторы, так и специфические для каждого из них. Так, при всех трех вариантах определяется высокая частота наследственного предрасположения к аллергии (79-90%) и предшествующие ОРВИ (60-95%). В то же время характерными различиями для каждого из вариантов являются: этиологический спектр аллергенов, возраст начала заболевания и встречаемость в различные возрастные периоды, особенности пре-морбидного фона, клиники, сопутствующих заболеваний, уровень общего IgE и специфических IgE-антител в сыворотке крови. Среди всех вариантов атопической формы пищевая БА выявляется в 21,39% случаев. В ее этиологии ведущее значение имеют пищевые аллергены. Характерными признаками пищевой БА являются: раннее формирование до 3-летне-го возраста, встречаемость до 4-5 лет. Она развивается обычно на фоне атопического дерматита (АД), сочетается с ним, рецидивирующим бронхитом и дисбактериозом кишечника. Течение заболевания в основном средне-тяжелое, приступы астмы возникают ежемесячно и чаще, в любом месте, как правило, в дневное время, имеют затяжное течение, с недостаточной эффективностью бронхоспазмолитиков. В анамнезе выявляется анте- и интранатальная патология, нерациональное питание беременной женщины и ребенка. Основными патогенетическими методами терапии пищевой АБА являются: элиминация из рациона аллергенных продуктов путем подбора индивидуальных элиминационных лечебных диет (Потемкина А.М., 1989), специфическая иммунотерапия (СИТ) пищевыми аллергенами, лечение патологии пищеварительного тракта и рецидивирующего бронхита. Бытовая АБА выявляется у 22,25% больных и в ее этиологии ведущее значение имеют бытовые аллергены, среди которых основным является домашняя пыль. В отличие от пищевой, бытовая астма формируется у детей старше 7 лет и встречается в школьном возрасте, сочетается, как правило, с аллергическим ринитом. Течение ее легкое, с частотой приступов один раз в 3-4 месяца, возникающих только дома, обычно в ночное время, высокая эффективность бронхоспазмолитиков. Важнейшим методом лечения бытовой АБА является СИТ бытовыми аллергенами

и создание пшоаллергенного быта. Третий, сочетанный вариант. является наиболее распространенным (56,36% нсех случаев АБА). Он формируется обычно с 3-4 лет путем наслоения на пищевую БА сенсибилизации бытовыми, эпидермальными и/или пыльцевыми аллергенами, поэтому встречается в дошкольном и школьном возрастах. В этиологии сочетанной БА участвует несколько групп аллергенов, спектр которых увеличивается с продолжительностью заболевания, обуславливая нарастание тяжести его течения. Преморбидные признаки и сопутствующие заболевания аналогичны пищевой БА, с присоединением аллергического ринита. В отличие от пищевой, преобладает тяжелое течение с частотой приступов еженедельно и чаще, возникающих в любом месте, в любое время суток, эффективность бронхоспазмолитиков невысокая. Наряду с элиминацией аллергенных продуктов и разобщением с животными, необходима СИТ бытовыми и/или пыльцевыми аллергенами в сочетании с лечением сопутствующих соматических болезней. При всех вариантах рекомендуются курсы гистаглобулина и мембраностабилизаторов. В зависимости от варианта АБА отмечаются достоверные различия в уровне общего IgE: минимальный при пищевой (209,72±28,20 МЕ/мл), умеренный при бытовой (453,96±69,89 МЕ/мл) и максимальный - при сочетанной (671,35±53,70 МЕ/ мл) АБА.

Заключение. Выявленные клинико-иммунологические особенности вариантов АБА позволяют дифференцированно подходить к вопросам диагностики и лечения данного заболевания, что повышает их эффективность.

ВЫЯВЛЕНИЕ ИНТЕРФЕРОНАу В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ДЕТЕЙ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ (БА)

Просекова Е.В., Гельцер Б.И., Шестовекая Т.Н., Деркач В.В.

Детская городская клиническая больница, Владивостокский государственный медицинский университет,

Владивосток, Россия

Система цитокннов во многом определяет чувствительность организма к аллергенам, развитие и силу аллергической реакции. Интерферону(1ЕЫу) обладает иммунорегулятор-ным, противовирусным и антипролиферативным действиями. В аспекте БА наиболее актуальна способность IFNy вызывать дифференцировку наивных CD4 Т-клеток в ТЫ и ингибировать пролиферацию Th2, а также действие на В-клетки, вызывающее переключение синтеза Ig на изотипы IgG2 и IgG3. Исследование уровня IFNy в сыворотке крови детей с различной тяжестью течения БА, анализ его динамики при базисной и иммунотропной терапии составили цель настоящего исследования.

Под наблюдением находилось 167 детей с БА в возрасте от 3 до 14 лег. Легкое течение болезни диагностировано у 25 детей, средне тяжелое - у 120, тяжелое - у 22 детей. В течение года у детей со среднетяжелым течением БА проводился мониторинг сывороточного IFNy при терапии тайледом (30 детей), фликсотидом (30 детей), сочетании тайледа с бронхому-налом (30 детей) и специфической иммунотерапии (СИТ) виновными аллергенами (30 детей). Определение уровня IFNy в сыворотке крови проводилось иммуноферментным методом с использованием моноклональных антител в сэндвич варианте с помощью набора Genzyme diagnostics (США).

Проведенные исследования отметили, что у детей с БА уровень сывороточного IFNy в несколько раз ниже такового у

здоровых детей (19,97±2,76 pg/ml против 76,55±4,18 pg/ml, р<0,001). При легком течение БА уровень сывороточного IFNy составил 28,75±3,18 pg/ml с небольшими вариациями в зависимости от периода болезни и у 16% содержание IFNy было аналогично таковому у здоровых детей. Самые низкие показатели IFNy зафиксированы у детей с тяжелым течением БА в период ремиссии. Проводимая базисная терапия значительного влияния на синтез IFNy не оказывала. В группе детей, получавших тайлед на протяжении полугода, уровень сывороточного IFNy изменялся незначительно от 21,2±2,87 pg/ml до 27,57±2,31 pg/ml (р>0,05) и на протяжении всего исследуемого периода оставался ниже показателей в контрольной группе. У детей с терапией фликсотидом, также не происходило значимого увеличения сывороточного IFNy и в 30% случаев отмечалось дальнейшее снижение данного показателя. Значимое нарастание содержания IFNy в сыворотке крови отмечено в группе детей с БА при СИТ. В этой группе через три месяца лечения отмечалось повышение сывороточного IFNy с 21,9±3,04 pg/ml до 34,75±2,95 pg/ml (р<0,01) и продолжение терапии сопровождалось нарастанием уровня IFNy (через 6 месяцев - 43,4±2,96 pg/ml (р<0,001). Включение в терапию БА броихомунала определило нормализацию содержания IFNy в сыворотке крови в первый месяц терапии. Уровень IFNy в этой группе возрос с 25,13±2,89 pg/ml до 72,90±3,80 pg/ml (р<0,001), достигая показателей контрольной группы и сохранялся на достигнутых цифрах в последующие полгода.

Проведенные исследования выявили угнетение выработки IFNy у детей с БА, некоррегирующиеся терапией базисными противовоспалительными препаратами. Включение специфической иммунотерапии или бронхомунала активирует синтез IFNy у детей с БА.

КОРРЕЛЯЦИОННАЯ СВЯЗЬ МЕЖДУ НЕКОТОРЫМИ ПОКАЗАТЕЛЯМИ КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА И СОДЕРЖАНИЕМ ИММУНОГЛОБУЛИНА Е

Ракитина E.JL, Щербакова Б.В., Титаренко А.И., Бондарева В.П., Королева Н.И., Крошка М.В.

Краевой клинический диагностический центр, Ставрополь, Россия.

Введение. В последние годы отмечается увеличение частоты, тяжести и течения аллергических заболеваний. Их распространенность зависит от географических, климатических и экологических особенностей региона, социально-бытовых условий, психо-эмоциональной нагрузки населения. При аллергических заболеваниях отмечается значительное повышение IgE, изменение со стороны клеточного звена иммунитета.

Цель исследования. Изучение корреляции между некоторыми показателями клеточного звена иммунитета и содержанием IgE при аллергических заболеваниях.

Материалы и методы. Обследовано 85 больных с аллергопатологией (27 мужчин и 58 женщин) в возрасте от 16 до 65 лет. Пациенты распределены на 5 групп: в 1 -ую группу вошли пациенты с бронхиальной астмой, во 2-ю - с круглогодичным аллергическим ринитом, в 3-ю - с поллинозом, в 4-ю - с атопическим дерматитом. Контрольную 5-ю группу составили относительно здоровые люди. Уровень IgE изучали методом иммунохемилюминисценции на анализаторе “Immulite” американской фиршы DPC. Определение в крови содержания CD3 , CD4 , CD8 и CD 19 клеток проводили на проточном цитометре ’’BRYTE HS” американской фирмы BIO-RAD.

Результаты. Полученные результаты позволили выявить в иммунном статусе больных изменения со стороны клеточ-

ного звена иммунитета. Выявлено достоверное увеличение процентного содержания субпопуляции клеток, экспрессирующих CD3 (79.40±3.5, р<0,05) и CD8* (37,6±2,8, р<0.05), а также CD4 (46,0±3,03. р<0,05) при атопическом дерматите по сравнению с контрольной группой. Отмечается достоверное снижение процентного содержания лимфоцитов с фенотипом CD8 (18.5+2,11, р<0,05) при атопическом дерматите и (20,4±2,19, р<0,05 ) при круглогодичном аллергическом рините. Общин IgE достоверно повышался при бронхиальной астме (443,0±74,2 МЕ/л, р<0,05), круглогодичном аллергическом рините (299,4±53,4 МЕ/л, р<0,05), поллинозе (261,0±40,2 МЕ/л, р<0,05), атопическом дерматите (297,7±61,2 МЕ/л, р<0,05) по сравнению с контрольной группой (50,3±9,2 МЕ/ л). Корреляционный анализ показал, что высокая степень прямой корреляции отмечается между уровнем IgE и содержанием лимфоцитов с фенотипом CD3 (1-+0.81), CD4 (г=+0,95) у пациентов с круглогодичным аллергическим ринитом; CD4 (г=+0.67) у пациентов с поллинозом; CD3 (г=+0,66) у пациентов с атопическим дерматитом. Обратная взаимосвязь выявлена между IgE и CD8 лимфоцитами у пациентов с бронхиальной астмой (г—0,83), поллинозом (г=—0,89), круглогодичным аллергическим ринитом (г=—0,78).

Заключение. Выявленные нзмеиения в иммунном статусе у пациентов с аллергопатологией свидетельствуют о нарушении механизмов регуляции иммунитета при аллергии с вовлечением клеток с фенотипом CD3 , CD4 , CD8 и высокой продукции IgE. Установлена прямая корреляционная взаимосвязь между концентрацией сывороточного IgE и содержанием лимфоцитов с фенотипом CD3 и CD4 у пациентов с поллинозом, атопическим дерматитом и круглогодичным аллергическим ринитом и обратная взаимосвязь с содержанием CD8 лимфоцитов у пациентов с бронхиальной астмой, круглогодичным аллергическим ринитом и поллинозом.

МЕТАБОЛИЗМ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ИСТИННОЙ АЛЛЕРГИЕЙ И ПСЕВДОАЛЛЕРГИЕЙ

Смирнова С.В., Савченко А.А.

НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, Красноярск, Россия

Широкое распространение аллергических заболеваний и экономически развитых странах неразрывно связано с концентрацией населения в крупных промышленных центрах, с загрязнением атмосферы, почвы и водоемов многочисленными продуктами и отходами современного производства. С учетом основных патогенетических механизмов выделяют две формы аллергии: истинная аллергия и пссвдоаллергия, но их общим патогенетическим звеном является выброс значительного количества биологически активных веществ. Целью данного исследования является изучение уровней активности НАДФ-зависимых дегидрогеназ и концентрации ключевых интермедиатов в лимфоцитах у больных истинной аллергией и псевдоаллсргпей.

Обследовано 36 больных истинной аллергией и 19 псевдоаллергией в возрасте 22-45 лег. В качестве контроля обследовано 25 здоровых людей того же возрастного диапазона. Больные обследованы в аллергологическом кабинете с использованием дифференциальных критериев диагностики истинной аллергии и псевдоаллергии, а также современных методов специфической аллергологической диагностики. Определение активности дегидрогеназ и концентрации ключевых интермедиатов в лимфоцитах проводили биолюминесцентным методом.

Исследование уровней активности НАДФ-зависимых дегидрогеназ и концентрации ключевых интермедиатов в лимфоцитах крови у больных истинной аллергией и псевдоаллергией позволило установить увеличение интенсивности реакций, определяющих функции пентозофосфатного цикла, гликолиза и цикла трикарбоновых кислот. Однако увеличение активности ферментов, отражающих интенсивность анаэробного и аэробного дыхания иммунокомпстентных клеток, у больных истинной аллергией выше, чем у лиц с псевдоаллергией, что подтверждается повышенной концентрацией пирувата и малата у первых по сравнению со вторыми. Тем не менее установлено, что у больных истинной аллергией и псевдоаллергией в иммунокомпетентных клетках снижается концентрация АТФ. С помощью нейросетевого предиктора установлено, что в обеих группах обследуемых внутриклеточная концентрация АТФ определяется, прежде всего, интенсивностью реакций цикла трикарбоновых кислот. Однако различия в нейропредикторных взаимосвязях состоят в том, что если у больных истинной аллергией уровень АТФ в лимфоцитах крови определяется НАД-зависимыми дегидрогеназами лимонного цикла, то у лиц с псевдоаллергией - вспомогательными и шунтирующими реакциями. Можно предположить, что снижение концентрации макроэргов в лимфоцитах крови больных истинной аллергией и псевдоаллергией определяется недостаточной сбалансированностью энергетических и пластических процессов. В целом можно заключить, что особенности метаболизма иммунокомпетентных клеток определяются дуализмом их активации при истинной аллергии (аллерген и медиаторы аллергии) и монизмом при псевдоаллергии (только медиаторы аллергии).

Работа выполнена при финансовой поддержке Красноярского краевого фонда науки (Грант 9F0111).

К ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ АЛЛЕРГИИ И ПСЕВДОАЛЛЕРГИИ

Смирнова С.В.

Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера СО РАМН,

Красноярск, Россия

Проведение дифференциальной диагностики аллергии и псевдоаллергии имеет важное значение, так как установление нснммунологичсской формы аллергии диктует необходимость всестороннего обследования больного с целью выявления основного заболевания, внеорганным проявлением которого является пссвдоаллергический симптом (синдром), и проведения адекватной терапии. Комплексный учёт специфических аллергологических методов диагностики не всегда позволяют отличить аллергическую реакцию от псевдоаллсрги-ческой. Поэтому чрезвычайно важно введение новых дифференциально-диагностических критериев аллергии и псевдо-аллергии.

Целью настоящего исследования было установить дополнительные дифференциально-диагностические критерии, имеющие научное и прикладное значение. Обследованы 235 больных аллергическими заболеваниями в возрасте от 25 до 60 лет и 67 здоровых доноров. В работе использованы клинические, биохимические, аллергологические и иммунологические методы. Определение общего и специфического igE в сыворотке крови проведено методами Fluoresccnce allergosorbent test и Fluoresccnce allergosorbent test for determination of allergen-specific IgE па аппаратуре 3M Diagnostic Systems (Bio Whittaker, USA). Оценка состояния мембран лимфоцитов осу-

ществлялась с помощью флюоресцентного зонда 3-метоксн-бензантрона методом флуоресцентных зондов Добрецова Г.Е. Концентрацию билирубина в сыворотке крови определяли по методу Иендрашика во время обострения заболевания, в период элиминационпого теста и во время ремиссии. Обработка материала проводилась на ЭВМ типа IBM-PC. В работе использованы общепринятые статистические показатели: среднее арифметическое (М), ошибка среднего (±т) с помощью пакета программ EXCEL.

Нами было показано, что в патогенезе псевдоаллергии патология гепатобилиарной системы играет ведущую роль. В связи с чем разработаны диагностические тесты как для дифференциальной диагностики аллергии и псевдоаллергии, так и диагностики патологии гепатобилиарной системы, которая может протекать скрыто и проявляться лишь упорным псев-доаллергнческнм симптомом (синдромом). В этом плане полезен билирубиновый тест - кинетика концентрации билирубина в сыворотке крови на фоне элиминационпого теста. У всех больных в стадии обострения и ремиссии заболевания концентрация билирубина в периферической крови не отличалась ог нормы. Однако, у больных псевдоаллергией показатели билирубина на фоне элиминационного теста свидетельствуют о нарушении бнлирубин-преобразующей функции печени. Учитывая, что голодание является функциональной нагрузкой для печени, этот метод можно рекомендовать для оценки состояния гепатобилиарной системы по результатам билиру бинового теста.

Изучение состояния мембран лимфоцитов у больных различными патогенетическими формами аллергии показало достоверные различия их физического состояния: повышение текучести (снижение вязкости) мембран при аллергии и снижение текучести (повышение вязкости) при псевдоаллергии, что имеет высокое дифференциально-диагностическое значение.

С учётом вновь выявленных патогенетических механизмов предложены дополнительные дифференциально-диагностические критерии аллергии и псевдоаллергии.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ МЕТОДОМ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА

Фадеева М.М., Бейкнн Я.Б., Сбитнева Н.Н.

Центр лабораторной диагностики болезней матери и ребенка, г. Екатеринбург, Россия

Цель исследования. Применение иммуноферментного анализа (ИФА) для лабораторной диагностики аллергических заболеваний.

Материалы и методы. Методом ИФА в сыворотках крови детей выявляли специфические антитела класса lgE к пищевым, пыльцевым, бытовым и эпидермальным аллергенам (всего 30). Исследования проводили на оборудовании фирм “Organon leknika”. "DRG” с использованием диаг ностических наборов ФГУП "Аллерген” (Ставрополь). Оценку результатов исследований проводили по четырехбальной системе в соответствии с инструкцией, прилагаемой к тест-системе.

Результаты исследований. Всего обследовано 110 детей в возрасте от 7 месяцев до 14 лет с диагнозом бронхиальная астма (60 человек), атопический дерматит (33 человека), нейродермит (10 человек) и детская экзема (7 человек). Результаты исследований показали, что сенсибилизация организма в группе пищевых аллергенов наиболее часто выявлялась на желток и белок куриного яйца (74,2% и 60,8%), в 59,8% случаев у де-

тей была выявлена сенсибилизация к антигенам коровьего молока. По результатам исследований было установлено, что из злаковых аллергенов наиболее выраженная реакция отмечалась на гречневую (79,4%), рисовую (59,8%) и овсяную (38%) крупы. У детей, страдающих бронхиальной астмой и атопическим дерматитом, выявлена повышенная чувствительность к пыльцевым аллергенам, в частности, к полыни (63,4%), пырею (78,2%). У этих детей также был отмечен повышенный уровень сенсибилизации к бытовым и эпидермальным антигенам, таким как шерсть кошки и собаки (54 и 65,9%, соответственно) и клещам домашней пыли Dermatophagoides pteroni.ssimus и farinae (31,0 и 27,8% соответственно).

Таким образом, применение метода ИФА позволило выявить высокий процент аллергизации у детей г.Екатеринбурга.

СОСТОЯНИЕ ОБЩЕГО И МУК03Н0Г0 ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ С НЕАЛЛЕРГИЧЕСКИМ ЭОЗИНОФИЛЬНЫМ РИНИТОМ

Фошина Е.П., Сходова С.А., Краснопрошина Л.И., Слатинова О.В.

Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова, РАМН,

Москва, Россия

Было проведено иммунологическое обследование больных с нсаллергическим эозинофильным ринитом (НЭР). Группу составили 14 пациентов с назальной эозинофилией при отсутствии признаков IgE - зависимой реакции: уровень IgE сыворотки был в пределах возрастной нормы, при кожном тестировании с различными аллергенами получен отрицательный результат. Группу контроля составили здоровые взрослые - 20 человек. Изучали относительное и абсолютное содержание в крови лимфоцитов с маркерами CD3, CD4, CD8, CD72, уровни IgG, IgA, IgM в сыворотке, концентрацию IgG, slgA в назальном секрете (НС), а также фагоцитарную активность нейтрофилов НС в НСТ-тесте.

У больных с НЭР наблюдалась тенденция к повышению индекса CD4/CD8, в основном, за счет повышения числа CD4 лимфоцитов; другие показатели системного иммунитета не отличались от таковых у здоровых доноров. Содержание иммуноглобулинов в НС было снижено: IgG - 142±50 мкг\мл , slgA - 126±55 мкг\мл; у здоровых лиц - 208±24 мкг/мл и 263±33 мкг/мл соответственно. Наблюдалось значительное повышение кислородного метаболизма нейтрофилов НС: содержание формазан-позитивных клеток - 22,0±6,0% ( в норме 10,4±5,0% ), цитологический индекс - 0,32±0,09 у.е. (в норме 0,12±0,06 у.е.).

Таким образом, у больных с НЭР изменения, выявленные в системе мукозного иммунитета, выражаются в снижении продукции секреторных иммуноглобулинов, а также в повышении кислородного потенциала нейтрофилов.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОТЕРАПИИ П0ЛЛИН030В

Фролова С.А.

Ростовский государственный медицинский университет, Ростов-на-Дону, Россия

Наиболее обоснованным методом профилактики и лечения больных поллинозом является специфическая иммунотерапия (СИТ) (Гущин И.С., 1997 г.). Однако, предполагается,

что стойкое снижение числа циркулирующих CD3 , CD4 и особенно эффективности регуляторной функции супрессорных клеток (CD8+) ограничивает возможность СИТ (Земсков

В.М., Караулов А.В., Земсков А.М., 1995 г.). В связи с этим целью работы явилось изучение возможности повышения эффективности СИТ поллинозов, проводимой на фоне системной энзимотсрапии препаратом вобэнзим (10 чел.) и при стимуляции иммуноактпвных точек инфракрасным светодиодом на аппарате "Хеллер” (15 чел.). Контрольная группа больных (15 чел.) получала только СИТ. Возраст больных составил от 28 до 43 лет. Все больные ранее при обострении получали антигистаминные препараты, симптоматическую терапию. Предсезонные курсы специфической гипосенсибилизации не проводились.

Диагноз поллиноза у всех больных подтвержден аллергологическими кожными скарификационными пробами с пыльцевыми аллергенами. СИТ выполняли в период ремиссии поллиноза классическим подкожным инъекционным методом. В состав смесей входило не менее 3 и не более 5 аллергенов.

Всем больным проводилось аллергологическое обследование - постановка кожных и провокационных назальных проб, а также определение параметров иммунного статуса в непрямом иммунофлюоресцснтном тестс методом проточной цитофлюорнметрии; уровня общего IgE методом ИФА; постановка РБТЛ с использованием поликлональных (фитоге-магглютинин - ФГА) и специфических (аллерген) митогенов. Оценку эффективности СИТ проводили по 4-х балльной системе.

В процессе СИТ в 1-й группе отмечены незначительные местные реакции, системных реакций не отмечено ни в одном случае. Количество CD3 лимфоцитов увеличилось на 19,1%, CD4 на 7,2%, CD8 лимфоцитов на 5,3%. Уровень общего IgE снизился в 4.3 раза, функциональная активность Т-лимфоцитов на ФГА возросла на 47%, в то время как пролиферация на специфический мптоген снизилась на 11%. Назальный титр снизился на 40%, внутрикожный- на 13%. Клиническая эффективность СИТ составила 3,1 ±0,23 балла.

Во второй группе - при введении максимальных доз аллергенов - отмечены умеренные местные реакции, у 3 больных - системные в виде аллергического ринита и конъюнктивита. Увеличилось количество CD3 , CD4 и CD8 лимфоцитов (на 17,2%, 7,4% и 3,5% соответственно). Уровень общего IgE снизился в 1,9 раза. Функциональная активность Т-лим-фоцитов в РБТЛ на ФГА увеличилась на 38% при снижении пролиферации на аллерген на 14,3%. Назальный титр снизился на 29%, а внутрикожный - па 15%. Эффективность СИТ составила 2,8±0,12 балла.

В контрольной группе отмечались у всех больных выраженные местные реакции при введении максимальных доз аллергена, системные реакции в виде аллергического ринита у 7 чел.. Содержание CD3 , CD4 , CD8 лимфоцитов увеличилось на 6,8%, 3,4% и 2,1% соответственно. Уровень общего IgE снизился незначительно. Функциональная активность Т-лимфоцитов в РБТЛ на ФГА увеличилась на 19,5%, так и не достигнув нормальных значений. Специфическая реакция лимфоцитов на аллерген снизилась на 7%. Назальный титр снизился на 26%, а внутрикожный - на 13%. Клиническая эффективность СИТ - 2,4±0,1 балла.

Полученные данные показывают, что в процессе СИТ на фоне иммуномодуляторов происходит более полное восстановление баланса количественных соотношений субпопуляций Т-лимфоцитов; более значимое снижение общего IgE и специфической реакции лимфоцитов на аллерген, а также титра назальных и внутрикожных проб. Кроме того, наращивание лечебных доз аллергена на фоне иммуномодуляции

проходило быстрее, по сравнению с контрольной группой и при меньшем количестве побочных реакций, при этом отмечается повышение эффективности СИТ.

НЕЙРОПЕПТИДЗАВИСИМАЯ РЕГУЛЯЦИЯ СИНТЕЗА 1дЕ ПРИ АТОПИИ

Ханферян Р.А., Котова Н.В.

Кубанская государственная медицинская академия, Краснодар, Россия

Ряд экспериментальных доказательств наличия взаиморе-гуляции между иммунной и нервной системами человека в норме и при патологическом процессе обусловил пристальный интерес исследователей к изучению роли холинэргичес-кой и опиатэргической систем в патогенезе аллергии, в частности, аллергии немедленного типа - атопии.

В представленной работе показаны результаты количественного определения содержания ^Е в 9-ти суточных супернатантах культур мононуклеарных клеток периферической крови (МПК). Для выявления закономерностей участия холинэргической и опиатэргической систем в регуляции синтеза ^Е в норме и при атопии осуществлялась блокада М,-М,- М3- ацетилхолиновых, ц- и 8- опиоидных рецепторов, в качестве специфических агонистов этих рецепторов использовались пилокарпин (М), морфин и даларгин (|1- и 8-).

Показано, что холинэргическая регуляция как спонтанного, так и Кон А- индуцированного синтеза ^Е МПК и здоровых, и больных проявляется в дозонезависимой супрессии синтеза, значительно более выраженной у больных атопией (р<0,001), причем основная принадлежит М,- ацетилхолино-вым рецепторам.

Иейропептидзависимый механизм регуляции синтеза ^Е у здоровых доноров проявляется выраженной дозозависимой стимуляцией синтеза агонистами опиоидных рецепторов (с 0,4 до 0,78 нг/мл). У больных атопией, напротив, обнаруживается выраженная супрессия синтеза ^Е (с 0,6 до 0,26 нг/ мл) под действием нейропептидов. Математический анализ результатов проведенных исследований подтвердил, что обнаруженные изменения уровня ^Е на всех этапах не являются случайными (Р(. > Е) и высоконадежны (р < 0,001).

Таким образом, установлена разнонаправленность действия холинэргического и нейропептидзависимого механизмов регуляции в норме и однонаправленность этих механизмов при атопии. Выявленный синергизм фрагментов единой системы нейрорегуляции синтеза ^Е у больных атопией свидетельствует о возможной компенсаторной роли опиатэргической системы при развитии аллергических реакций немедленного типа.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФЕРМЕНТАТИВНО ДЕГРАДИРОВАННЫХ АЛЛЕРГЕНОВ ДЛЯ ИНДУКЦИИ АНЕРГИИ Т-КЛЕТОК

Шевченко М.А., Вискова Н.Ю, Свирщевская Е.В.

Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН,

Москва, Россия

Введение. Обычно для индукции анергии Т клеток используются синтетические или рекомбинантные пептиды, представляющие доминантные Т-клеточные эпитопы аллергенов. Учитывая огромное количество аллергенов и возможность связывания Т-клеточных эпитопов с разными аллелями мо-

лекул МНС II класса в полиморфной популяции, определение пептидов становится очень длительным процессом.

Цель и задачи исследования. Ферментативная деградация аллергена позволяет в той или иной степени разрушить В-клеточные эпитопы, сохранив при этом линейные Т-эпито-пы, не способные связываться с IgE, но способные подавлять специфические Т клетки.

Материалы и методы. Для получения пула полипептидов аллергена, содержащего в основном Т-эпитопы и значительно меньшее количество В-эпитопов, мы обработали модельный аллерген овальбумин (OVA) различными протеаза-ми: трипсином, хемотрипсином и дуоденазой. Качественно степень деградации аллергена оценивали при помощи не градиентного электрофореза в полиакриламидном геле. Для тестирования В-клсточного (и частично Т-клеточного) ответа использовали нммунофсрментый анализ против IgG. Т-кле-точный ответ, вызванный иммунизацией мышей in vivo, оце-неннвали по продукции IL-2.

Основные результаты. Подобрав оптимальные концентрации ферментов и время инкубирования, мы показали снижение связывания антител с гидролизованным OVA на 60-80%. В то время как Т-клеточный ответ оставался постоянным.

Заключение. По результатам экспериментов, можно сделать вывод о том, что Т-клеточные эпитопы при ферментативной деградации аллергена преимущественно сохраняются.

ВЛИЯНИЕ GM-CSF (ЛЕЙКОМАКСА) НА КОЛОНИЕ-И КЛАСТЕР00БРА30ВАНИЕ КОСТНО-МОЗГОВЫХ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ ИЗ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ (КОЕ-ГМ) ГРАНУЛОЦИТАРНО-МАКРОФАГАЛЬНОГО РЯДА КРОВЕТВОРЕНИЯ IN VITRO БОЛЬНЫХ АТОПИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ В ФАЗЕ ОБОСТРЕНИЯ

Яровинский Б.Г., Зурочка А.В., Биргер О.В., Егоров В.А., Владыкина О.В., Скороходов А.Н., Фридлиб А.В., Квятковская С.В.

Уральская Государственная Медицинская Академия дополнительного образования,

Челябинск, Россия

Оценка колоние - и кластерообразования клеток-предше-ственников КОЕ - ГМ ростка кроветворения периферической крови в планшетах in vitro больных атопическим дерматитом (АД) в фазе обострения выявила 2-3 кратное снижение этих показателей. Мы исследовали влияние лейкомакса (SANDOZ) в концентрации 1,0 х 105 мг/мл и пептидного фрагмента наружной цепи ГМ-КСФ (1500 Д) в концентрациях 1,0 - 3,0 х 10й мг/мл, полученного синтетическим путем, на колониеоб-разование КОЕ - ГМ в традиционной ГМ - агаровой культуре. Пептид и лейкомакс значительно увеличивали образование кластеров и колоний в агаровой культуре КОЕ - ГМ периферической крови доноров in vitro, в то время как спонтанное колониеобразование было незначительным. В последующем нами было изучено влияние лейкомакса и пептида в вышеуказанных концентрациях у доноров и больных АД в. фазе обострения в 12 дневной безагаровой культуре КОЕ - ГМ, образование кластеров и колоний in vitro не увеличивалось. Эти данные свидетельствует о грубых системных нарушениях гранулоцитарно-макрофагального звена кроветворения у таких больных, что, по-видимому, является одним из ведущих факторов формирования атопического синдрома.

Майоров В.А.,