CC BY
9
нов, В. В. Гацура // Элементы экспериментальной фармако- 8. Blatchford O. A risk score to predict need for theatment for логии. - М., 2000. - С.308-315. upper-gastrointestinal haemorrhage / O.Blatchford, W.R.Murray,
M.Blatchford // Lancet. - 2000. - V.356, № 9238. - Р.1318-1328.
Реферат
ФИБРИНОЛИТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПЛАЗМЫ КРОВИ, МОЧИ И ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ У ГИПЕРТЕНЗИВНЫХ САМОК КРЫС НА ФОНЕ БЕРЕМЕННОСТИ Торяник Э.Л.
Ключевые слова: фибринолитическая активность, плазма крови, SHR-самки крыс, беременность. В работе представлены результаты изучения фибринолитической активности плазмы крови, мочи и внутренних органов у гипертензивных самок крыс на фоне беременности. Установлено, у беременных гипертензивных самок крыс повышается фибринолитическая активность мочи, печени и коркового вещества почек и снижается процесс фибринолиза в мозговом веществе почек. Показатели фибринолитической активности мочи в сосочке почек у гипертензивных самок крыс на фоне беременности не изменяется.
Summary
FIBRINOLYTIC ACTIVITY OF BLOOD PLASMA, URINE AND INTERNAL ORGANS IN HYPERTENSIVE PREGNANCY FEMALE RATS Toryanik E.L.
Key words: fibrinolytic activity, blood plasma, SHR-female rats, pregnancy.
The paper presents the results obtained by studying fibrinolytic activity of blood plasma, urine and internal organs in hypertensive pregnant female rats. It has found out the pregnant hypertensive female rats show increased fibrinolytic activity of urine, liver, and kidney cortex and decreased fibrinolysis in renal medulla. The urine fibrinolytic activity in the renal papilla in hypertensive pregnant female rats does not change.
УДК 615.243.2.57.089.5.00.5 Торятк Е.Л., Березнякова А.1.
ПАТ0ГЕНЕТИЧН1 0С0БЛИВ0СТ1 В0ДН0-ЕЛЕКТР0Л1ТН0Г0 0БМ1НУ У СПОНТАННО Г1ПЕРТЕНЗИВНИХ САМИЦЯХ ЩУР1В
Нацюнальний фармацевтичний ушверситет, м.Харгав
У роботI наведенI результати вивчення патогенетичних особливостей водно-електролгтного обмну у спонтанно гтертензивних самицях щургв. Показано, що основними механгзмами пору-шень водно-електролтного гомеостазу у SHR-самицях щурИв е тдвищення концентрацИ ¡ошв калю, натрю, хлору, креатинну плазми та загального быка. Показники сечовини не змнюються. Механзми б1ох1м1чних порушень електролтного обмну у SHR-самицях щургв можна пояснити ранньою гтеркреатинемгею поряд з мкроальбумнургею, як призводять до порушення функцИ ни-рок при артергальнгй гтертензи. Мехатзми реал1зацп антигтертензивного ефекту еналарилу I г1дрохпорт1азиду базуються на знижент концентрацИ в кров1 БИЯ-самиць щур1в основних електролгтгв I активацИ азотвидтьноЧ функцП нирок.
Ключовi слова: водно-електролсний обмш, ЭНР-самиц щурiв, гщрохлор^азид, еналаприл.
Робота виконана у рамках науково-до^дноТ програми Национального фармацевтичного унверситету "Фармакологч-Н до^дження бiологiчно активних речовин i лiкарських засобiв синтетичного та природного походження, Тх застосування у медичнй практиц" (№ держ. реестр. 0103и00909478).
Вступ
В останн роки дослщниками вирощено спе^а-льн трансгены лЫп щурiв зi спонтанною артерiаль-ною ппертензiею, що е достатньо адекватною модел-лю даного захворювання у людей [12, 13]. З ^ею па-толопею тварини народжуються, що розширило мож-ливють експериментального вивчення як патогенетичних механiзмiв розвитку артерiальноí ппертензп, так i можливост и фармакокорекцп [1, 4].
Одним з найважливших бiохiмiчних показнигав, яга характеризуюсь порушення електролсного гомеостазу е змЫи обмЫу юшв К+, Na+ i СГ та стану небт-кових (креатишн, сечовина) азотистих речовин та бт-ка [2, 14]. Креатишн та сечовина е раншми та най-бтьш шформативними маркерами порушення функ-цюнального стану нирок при артерiальнiй ппертензп (АГ), а 1'х рiвень характеризуе стан азотвидтьно'!' фун-кцií нирок [3, 6, 7, 13].
У зв'язку з цим, метою даного дослщження стало
вивчення патогенетичних особливостей артерiально-го тиску у ппертензивних щурiв та перспективи 'х ко-рекцií гiдрохлортiазидом i еналаприлом.
Матерiали i методи дослщження
Дослщи проведенi на 24 спонтанно ппертензивних самицях щурiв (ЭНР) вагою 240-300,0 г (розплщ-ник лабораторних тварин "Бюмодельсервю", м.Ки'в). В перюд аклiматизацií пiсля перевезення з розплщни-ка (2 тижнi) та протягом експерименту щури знаходи-лися у вiварií при 20-250С, вологост не бiльш 50%, природному свсловому режимi "день-нiч", в стандарт-них пластикових кгмтках, на стандартному харчовому рацюш.
Вплив на електролiтний склад кровi та стан ре-новаскулярно! системи препаратiв дослiджували при 7-денному введеннi, визначаючи в кровi концентра^ю iонiв калiю, натрiю та хлору, а також вмют креатинiну, сечовини та рiвень загального бiлка.
Актуальш проблеми сучасно!' медицини
В експериментах використан пiгулки "Ппола-зид", як мiстять 25 мг гiдрoхлoртiaзиду ("Хшо'ш", Уго-рщина, серiя 0627) та тгулки Берлiприл, якi мiстять 5 мг еналаприлу малеата ("БерлЫ Хемi АГ", Нiмеччинa, серiя 71002) [4, 8, 9].
Доза 25 мг/кг гщрохлор^азиду (за дючою суб-станцю) е мiнiмaльнo ефективною дiуретичнoю дозою [4]. Доза еналаприлу 5 мг/кг вщповщае дiaпaзoну до-бових доз для людини з розрахунком кoефiцiентa пе-рерозрахунку на щурiв, а також коливаеться в дiaпa-зон фaрмaкoлoгiчнo його активних доз в експеримент [8, 9, 10]. Препарати вводили 1 раз в день протягом 7 дшв. Контрольна грут нелiкoвaних тварин щоденно внутрiшньoшлункoвo вводили 0,9% розчинг натрю хлориду в е^валентному oб'емi (0,2 мл/200 г). В крoвi визначали вмiст креатишну та сечовини за допомогою тест-нaбoрiв ("Piva-Lachema Diagnostika", Чехiя) та рь вень загального бiлкa за допомогою тест-набору ("Oi-лiсiт-Дiaгнoстикa", Укра'на). Вмют в крoвi кoнцентрaцií ioнiв К+, Na+ i Ci" визначали за допомогою aнaлiзaтoру К/Na/Cl "Easyiyte ("Medica", США) з використанням проточних юнселективних електрoдiв.
Протягом експерименту з тваринами обходили-ся згiднo з МНжнародними принципами Свропейсько''' кoнвенцií про захист хребетних тварин, яких викорис-товують для експериментiв та iнших цтей (Страсбург, 18.03.1986).
Статистичну обробку результат проводили з використанням пакету статистичного aнaлiзу електро-нних таблиць Exell [5]. Розраховували середнi зна-чення показниюв та стандартну помилку (Эх). Вiрoгiд-нiсть рiзниць пoмiж середыми визначали за критерiем t-Стьюдента [11].
Результати та ix обговорення
По завершены 7-денного експерименту в крoвi контрольних нелiкoвaних спонтанно гiпертензивних самиць щурiв кoнцентрaцiя ioнiв кaлiю, натрю i хлору складала вiдпoвiднo 6,82 ммоль/л i 106 ммоль/л (табл. 1), при фiзioлoгiчнiй нoрмi цих показнигав у но-рмотензивних нелУйних самиць щурiв вiдпoвiднo 4,57,4 ммоль/л, 144,0-157,7 ммоль/л i 103-114 ммоль/л [1]. Слщ вiдмiтити, що в пoрiвняннi з нормотензивни-ми лшшними щурами (Wistar) [12] для SHR-щурiв показано незначне, але статистично значуще пщвищен-ня в крoвi рiвня ioнiв нaтрiю й хлору i, навпаки, зни-ження концентрацп ioнiв кaлiю. Тaкi порушення елект-рoлiтнoгo балансу крoвi у спонтанно ппертензивних щурiв зумoвленi патолопчним впливом пiдвищенoгo АТ [12].
Як видно з табл. 2, у цих же контрольних тварин вмют сироваткового креатишну, сечовини та загального бтка складало в середньому вщповщно 81,5 мкмоль/л, 6,8 ммоль/л i 63 г/л при фiзичнiй нoрмi цих показнигав у нормотензивних нелшмних щурiв вiдпoвiднo 62,48-77,44 мкмоль/л, 2,9-10,7 ммоль/л i 69-76 г/л [2]. Таким чином, вмют ттьки одного з показнигав — сечовини — сприяло рiвню норми у нелкованих SHR-самиць щурiв [1]. Пщвищений вмiст креaтинiну на фoнi дегалька зниженого вмiсту загального бтка дозволяло припустити нaявнiсть у SHR-самицях щурiв прогресуючо' нирково'' недостатност [7] як патогенетично взаемопов'язаного компоненту
кардiоренального континуму, який виникае внаслщок системного пiдвищення АТ. Як вщомо, гiперкреатинемiя, поряд з мiкроальбумiнурiею — це раннiй i найбiльш шформативний маркер порушення функцií нирок при артерiальнiй гiпертензií [3]. Змен-шення загальноí кiлькостi бiлка в кровi виникало, як правило, за рахунок зниження галькосл альбумiнiв [2]. Виходячи з цього, можна обгрунтовано припустити, що гiпопротеíнемiя, яка спостер^аеться у нелкованих спонтанно гiпертензивних щурiв, вщбивала зростаючу мiкроальбумiнурiю, що е постшним i патогенетично важливим компонентом нефротичного синдрому [6].
Разом з цим, дат порiвнювальних дослщжень метаболiчного профтю кровi спонтанно ппертензив-них i нормотензивних лiнiйних щурiв досить супереч-ливi [1, 7]. Це пояснюеться значними коливаннями рь вня сироваткового бтку та небiлкових азотвмiсних речовин залежно вщ статi та вку тварин [8].
В групi щурiв, якi отримували еналаприл, в цтому не зареестровано суттево значущих змшювань електролiтного складу кровi по вщношенню К+, №+ i СГ, концентрацп яких пщлягали лише незначним ко-ливанням вiдносно нелiкованого контролю (табл. 1). В то же час, у 4 з 6 щурiв, яга стали чутливими до антиппертензивно!' дií еналаприлу, спостер^алося вiрогiдне пiдвищення (на 16%) концентрацп юшв калiю. Отриманi результати i данi лiтератури про профiль калю в кровi ЭНР-самиць щурiв дае основу припустити, що в реалiзацií антиппертензивно1 активностi еналаприлу певну роль в^грае зниження екскрецií калiю нирками [3, 7, 9, 10].
В цм же грут внутршньошлункове введення еналаприлу не чинило статистично значущого впливу на вмют креатиншу, сечовини та загального бтку, що складало вщповщно 77,8 мкмоль/л, 3,5 ммоль/л i 65,1 г/л (табл. 2). Разом з тим, слщ в^^тити, що спрямо-ванють змш креатишну та загального бтку в кровi ЭИР-самицях щурiв мае позитивний характер внасль док тенденцií до вщновлення даних показникiв до рiв-ня фiзiологiчноí норми у здорових нормотензивних щурiв [1, 12]. Щодо змш рiвня сечовини в кровi, то, як видно з представлених даних (табл. 2), хоча и зниження на 49% не стало статистично вiрогiдним, цю динамiку слщ розглядати як позитивну в плат актива-цп азотвидiльноí функцií нирок.
Поряд з цим, коливання показника сироватково1 сечовини в широких межах може бути обумовлено високою пластичнютю та варiабельнiстю даного показника, рiвень якого, як вiдомо, динамiчно реагуе навiть на невеликi змши функцiонального стану органiзму [6].
В грут щурiв, якi отримували гщрохлорлазид, внутрiшньошлункове введення препарату в дозi 25,0 мг/кг викликало у вах щурiв, як чутливих, так i резис-тентних до його дп, вiрогiдне зниження концентрацií натрiю i хлору в кровi в порiвняннi з нелiкованим контролем (табл. 1). Виходячи з вщомих даних про меха-нiзм антигiпертензивноí дп гiдрохлортiазиду, його вплив на електролпший склад кровi обгрунтовано можна вважати наслщком пригнiчення реабсорбцп №+ i СГ в початковiй частит дистальних нирок.
Таблиця 1
Вплив еналаприлу (5 мг/кг) та гiдрохлортiазиду (25 мг/кг) на електролiтний склад кровi у спонтанно гпертензивних сами-
цях щур'в при 7-денному внутршньошлунковому ¡х введент (Х ± 8х)
' _____-______Показники Групи п К+, ммоль/л Ыа+, ммоль/л С1 , ммоль/л
Контроль, БИР-самиц щур1в (нелко-ваний контроль) 6 6,82±0,203 141,8±1,38 106,0±1,11
БИР-самиц щур1в + еналаприл Всього - 6 7,71±0,314***** (113%) 136,1±3,25 (96%) 101,6±3,07 (96%)
Чутл.- 4 7,90±0,446* (116%) 134,2±4,35 (95%) 102,4±6,56 (97%)
БИР-самиц щур1в + пдрохлорт1а-зид Всього - 6 6,83±0,172 (105%) 136,2±1,53* (96%) 98,8±1,58* (93%)
Чутл.- 4 6,98±0,344 (102%) 137,0±1,98* (97%) 100,1±2,29* (94%)
Примiтка: п - кльксть тварин, як використовуються при розрахунку середньоГ величини; У дужках — рiвень вдносно нелкованого контролю у %; * — р < 0,05 нелiкованого контролю; ** - р < 0,05 вiдносно групи еналаприлу; *** - р < 0,05 вдносно групи гiдрохлортiазиду
В цих же тварин гщрохлорлазид не викликав вiрогiдних змшювань вмюту креатишну, сечовини та загального бтка в кровi в порiвняннi з нелкованим контролем (табл. 2). Слщ в^^тити, що у щурiв, чут-ливих до антиппертензивноТ дм гщрохлорлазиду, в^^чена тенденция до зростання рiвня креатинiну в кровi до 109% вiдносно нелкованих контрольних тварин. Вiдомо, що гiперкреатинемiя е характерним для лазидних дiуретикiв побiчним нефротоксичним ефек-том, виразнють якого зростае зi збтьшенням дози та тривалостi застосування препарату [8].
В груш БИР-самиць щурiв, якi отримували ена-лаприл, 7-денне лiкування не чинило впливу на вмют iонiв калiю i натрю, але вiрогiдно знижувало рiвень хлору в кровi (табл. 1). Еналаприл-шдуковане змен-шення концентрацiТ С1 можна розглядати як позитив-ний ефект, спрямований на нормалiзацiю електролiтного балансу кровi у спонтанно гiпертензивних щурiв.
У цих же тварин внутршньошлункове введення
еналаприлу викликало тенденцiю до пщвищення в 1,2 рази вмюту креатишну i в 1,3 рази рiвня сечовини та статистично значуще зростання в 1,6 рази гальгасть загального бтка в кровi (табл. 2). Подiбнi ефекти (на-ростання креатиншу, сечовини та гiперпротеТнемiя), яга розцшюються як побiчнi, зумовленi особливостями антиппертензивноТ дм еналаприлу [4, 8, 10]. Вщомо, що антигiпертензивнi засоби, мехашзм дiТ яких пов'язаний з шпбуванням АПФ, викликають зниження продукцп ангiотензину-ll, рiзко зменшують контро-люючу ангiотензином швидкiсть клубочковоТ фiльтрацiТ та внутршньоклубочковий тиск в нирках, ^ як наслiдок, викликають транзиторне пщвищення креатишну i сечовини в кровi [6, 7]. Як видно з табл. 2, в порiвняннi з гщрохлорлазидом, еналаприл не чинив негативного впливу на фтьтрацмну здатнiсть нирок, про що свщчили статистично значущi вiдмiнностi мiж вщповщними дослiдними групами по вщношенню рiвня бiлка i небiлкових азотвмiсних речовин кровi (креатишн, сечовина).
Таблиця 2
Вмiст креатинiну сечовини та загального блку в кровi к спонтанно гпертензивних зурв при 7-денному внутршньошлунко-
вому введенн препарат'в (X ± 8х)
Показники Групи п Креатиын, мкмоль/л Сечовина, мкмоль/л Загальний б1лок, г/л
Контроль, БИР-самиц щур1в (нель кований контроль) 6 81,5±3,41 6,8±1,49 63,0±3,19
БИР-самиц щур1в + еналаприл Всього - 6 77,8±2,03** (95%) 3,5±0,63** (51%) 65,1±4,02 (103%)
Чутл.- 4 77,8±2,27** (95%) 3,8±0,752 (56%) 67,5±5,85 (107%)
БИР-самиц щур1в + г1дрохлорт1а-зид Всього - 6 77,8±8,87 (95%) 4,8±1,50 (71%) 62,7±2,62*** (100%)
Чутл.- 4 88,9±8,49 (109%) 7,0±2,50 (103%) 65,7±2,62*** (104%)
Примiтка: 1. п - ктьмсть тварин, як використовуються при розрахунку середньоГ величини; 2. У дужках — рiвень вiдносно нелкованого контролю у %; * — р < 0,05 нелiкованого контролю; ** - р < 0,05 вiдносно групи еналаприлу; *** - р < 0,05 вдносно групи гiдрохлортiазиду
Висновки
1. У спонтанно ппертензивних самиць щурiв розвиваються порушення водно-електролсного го-меостазу, що вiдбуваються в пщвищенш концентрацií iонiв калiю, натрю, хлору, креатинiну плазми та загального бтка. Показники сечовини у SHR-самиць щу-рiв не змЫюються.
2. Механiзм бiохiмiчних порушень електрол^но-го обмiну у SHR-самицях щурiв можна пояснити ран-ньою гiперкреатинемieю поряд з мiкроальбумiнурieю, якi призводять до порушення функцп нирок при арте-рiальнiй гiпертензií.
3. Мехашзми реалiзацií антигiпертензивного ефекту еналарилу i гiдрохлортiазиду базуються на зниженнi концентраци в кровi SHR-самиць щурiв ос-новних електролiтiв i активацií азотвидтьно!' функцií нирок.
В подальшому передбачаеться вивчення меха-нiзмiв дií гiпотензивних та дiуретичних засобiв при ва-птност у SHR-самиць щурiв.
Лiтература
1. Коваленко В.М. Експериментальне вивчення токсичноТ дм потенцiйних лiкарських засобiв. Методичн рекомендацií / В.М. Коваленко, А.В. Стефанов, Ю.М. Максимов, 1.М. Трахте-нберг ; В кн. : ДоклУчы дослiдження лiкарських засобiв. Ред. О.В.Стефанов. - К : МОЗ Украши, Державний фармаколопч-ний центр, 2001. - С.74-97.
2. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической диагностике / В.С. Камышников. - Минск : Беларусь, 2002. - Т.1. - 494 с.
3. Кобалова Ж.Д. Артериальная гипертония: ключи к диагностике и лечению / Ж.Д.Кобалова, Ю.В.Котовская. - М., 2007. -432 с.
Реферат
ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ВОДНО-ЭЛЕКТРОЛИТНОГО ОБМЕНА У СПОНТАННО ГИПЕРТЕНЗИВНЫХ САМОК КРЫС Торяник Э.Л., Березнякова А.И.
Ключевые слова: водно-электролитный обмен, SHR-самки крыс, гидрохлортиазид, эналаприл. В работе представлены результаты изучения патогенетических особенностей водно-электролитного обмена у спонтанно гипертензивных самок крыс. Показано, что основными механизмами нарушения водно-электролитного гомеостаза у SHR-самок крыс является повышение концентрации ионов калия, натрия, хлора, креатинина плазмы и общего белка. Показатели мочевины не изменяются. Механизмы биохимических нарушений электролитного обмена у SHR-самок крыс можно объяснить ранней гиперкреатинемией вместе с микроальбуминурией, которые приводят к нарушению функции почек при артериальной гипертензии. Механизмы реализации антигипертензив-ного эффекта эналаприла и гидрохлортиазида базируются на снижении концентрации в крови SHR-самок крыс основных электролитов и активации азотвыделительной функции почек.
Summary
PATHOGENIC FEATURES OF WATER-ELECTROLYTIC METABOLISM IN SPONTANEOUSLY HYPERTENSIVE FEMALE RATS Toryanik E.L., Bereznyakova A.I.
Key words: water-electrolyte metabolism, SHR-female rats, hydrochlorothiazide, enalapril.
This paper presents the findings obtained by studying pathogenetic features of water-electrolyte metabolism in spontaneously hypertensive female rats. It was shown the primary mechanisms of water-electrolyte homeostasis impairment in SHR-female rats consisted in increasing the concentration of potassium ions, sodium, chloride, creatinine and plasma total protein. Urea indices did not change. Mechanisms of biochemical impairments of electrolyte metabolism in SHR-female rats can be explained by early hyperpotassemia with microalbuminuria, which lead to renal dysfunction under arterial hypertension. Mechanisms for implementation of antihypertensive effect of enalapril and hydrochlorothiazide is based on reducing concentration of electrolytes in the blood of SHR-female rats and activation of renal nitrogen excretory function.
4. Компедиум 2005 — лекарственные препараты / под ред. В.Н.Коваленко, А.П.Викторова. - К. : МОРИОН, 2005. - 1920 с.
5. Лапач С.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Exel / С.Н.Лапач, А.В.Чубенко, П.Н.Бабич. - К. : «МОРИОН», 2000. - 320 с.
6. Мальцев В.И. Гомеостаз натрия и калия в организме, его нарушения / В.И.Мальцев, В.К.Казимирко // Здоров'я Украши. -
2004. - № 4. - С.27.
7. Марчук Е.Ю. Современные представления об использовании ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента для лечения артериальной гипертензии / Е.Ю. Марчук, И.В. Воеводина // РМЖ. - 2005. - Т.13.
8. Машковский М.Д. Лекарственные средства, 15-е изд., пере-раб. испр. и доп. / Машковский М.Д. - М. : ООО «Издательство Новая волна», 2010. - 1200 с.
9. Метелица В.И. Справочник по клинической фармакологии сердечно-сосудистых лекарственных средств. - 2-е изд. / В.И. Метелица. - М. : Издательство БИНОМ. - СПб. Невский диа-лет, 2002. - 926 с.
10. Рациональная фармакотерапия сердечно-сосудистых заболеваний / Под ред. Е.И.Чазова, Ю.Н.Беленкова. - М. : Литера,
2005. - 810 с.
11. Сернов Л.Н. Элементы экспериментальной фармакологи / Л.Н. Сернов, В.В. Гацура. - М., 2000. - С.318-320.
12. Чекман 1.С. Спонтанна артерiальна гiпертензiя у щурiв: пато-генетичн мехаызми розвитку / I.С.Чекман, Я.М.Корнйова, Р.С. Довгань // Лки. - 2007. - № 1-2. - С.10-15.
13. Fukuda S. Age-related in blood pressure, hemato; ogical values, concentrations of serum biochemical constituentes and weights of organs in the SHR/Izm and WKY/Izm / S.Fukuda, S.Tsuchikura, H.Iida // Exp. Anim. - 2004. - V.53, №1. - P.67-72.
14. Yang H.Y. Soyabean protein hydrolysate the development of hypertension in spontaneously hypertensive rats / H.Y.Yang, S.H.Yang, S.I. Chen [et al.] // British Journal of Nutrition. - 2004. -№92. - P.507-512.
