CC BY
56
Патогенетическое обоснование
иммунокорригируюшей терапии
при инфекционном мононуклеозе у детей
В. В. Фомин, Е. Е. Удилова, Я. Б. Бейкин, Ю. Г. Лагерева
Уральская государственная медицинская академия, Институт иммунологии и физиологии УрО РАН, МУ ГКБ № 40
Изучен комплекс иммунологических показателей у 43 детей с тяжелой формой инфекционного мононуклеоза, оценена клинико-иммунологическая эффективность Анаферона детского.
Ключевые слова: инфекционный мононуклеоз, иммунная система, цитокины, Анаферон детский
Заболеваемость инфекционным мононукле-озом за последнее десятилетие возросла более чем в четыре раза. Согласно современным данным, вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) обнаруживается у 90—92% населения Земного шара, 60% заболевших инфекционным мононуклеозом — лица в возрасте от 2 до 20 лет. При этом первичное инфицирование ВЭБ в 90—95% происходит в раннем детском возрасте (до трех лет) [1].
Важной особенностью ВЭБ является избирательное инфицирование В-лифоцитов через специфический рецептор С021. Долгое время В-лимфоциты считались единственной мишенью ВЭБ в организме больного. Однако, позже было установлено, что инфицируются также клетки эпителия носоглотки и нейтрофилы. Возможно инфицирование Т-лимфоцитов, а также дендритных клеток, несущих на поверхности рецептор С021 [2—4].
Иммунные нарушения при инфекционном мононукле-озе носят комплексный характер, они касаются как клеточного, так и гуморального звена иммунитета, влекут за собой утяжеление течения, учащение осложнений заболевания, что отражает суть инфекционного мо-нонуклеоза как болезни иммунной системы [5, 6].
Как для оптимизации терапии, так и для предупреждения формирования в дальнейшем индуцированного иммунодефицитного состояния для лечения инфекционного мононуклеоза мы применяли Анаферон детский (ООО «НПф Материа Медика Холдинг»).
Цель работы — оценка состояния Т-клеточного и фагоцитарного звеньев иммунитета при инфекционном мононуклеозе у детей и эффективности иммунокорри-гирующего препарата Анаферона детского в комплексной терапии инфекционного мононуклеоза.
Материалы и методы исследования
Исследование проводилось на базе боксового отделения МУ ГКБ № 40 города Екатеринбурга. Под наблюдением находились 2 группы детей в возрасте от 3 до 14 лет, больных тяжелой формой инфекционного мононуклеоза. Контрольную группу составили дети, получавшие Ацикловир-Акри (ас1с1оу1г-асг1) , Акрихин, Россия, по схеме: 200 мг 5 раз в день в течение 7 дней (20 человек). Дети основной группы совместно с ацик-ловиром получали Анаферон детский (ООО «НПф Материа Медика Холдинг») по схеме: 1 таблетка 3 раза в день в течение 7 дней (23 человек).
Все пациентам при поступлении в стационар проводилось клинико-лабораторное обследование. Лабораторные методы включали исследование анализа периферической крови, иммунологического статуса и биохимических показателей и проводились в остром пери-
оде болезни (первая неделя от начала заболевания) и в периоде ранней реконвалесценции (2—3 неделя).
Комплекс серологических и иммунологических исследований проводился на базе городского Центра лабораторной диагностики болезней матери и ребенка.
Для иммунологического исследования использовались наборы моноклональных антител для определе-
Таблица 1. Показатели иммунограммы в норме и в острый период инфекционного мононуклеоза {М ± т)
Показатели иммунограммы Острый период Норма
Лейкоциты 109/л 11,2 ± 0,62* 7,61 ± 0,55
Гранулоциты 109/л 3,6 ± 0,28 3,7 ± 0,44
Лимфоциты 109/л 6,07 ± 0,4* 3,65 ± 0,23
Моноциты 109 /л 1,46 ± 0,12* 0,25 ± 0,04
CD3 109/л 5,09 ± 0,36* 2,41 ± 0,16
CD20 109/л 0,26 ± 0,02 0,61 ± 0,06
CD4 109 /л 1,24 ± 0,11 1,31 ± 0,09
CD8 109 /л 3,43 ± 0,25* 0,8 ± 0,08
CD16 109 /л 0,63 ± 0,07* 0,45 ± 0,04
IgG г/л 12,51 ± 0,79* 8,56 ± 0,6
IgM г/л 2,27 ± 0,18* 1,47 ± 0,14
IgA г/л 2,22 ± 0,17* 0,75 ± 0,12
ЦИК ед. 156,6 ± 12,79* 48,8 ± 6,51
Аф моноцитарного 109 /л 1,22 ± 0,1* 0,21 ± 0,04
Аф нейтрофильного 109 /л 3,26 ± 0,24 3,52 ± 0,43
БА лейкоцитов % 37,89 ± 2,19 33,45 ± 5,92
НСТ спонтанный % 16,39 ± 1,99 18,65 ± 2,76
CD3+/ ИфН-у 109 /л Спонтанная 0,16 ± 0,02* 0,022 ± 0,003
Стимулированная 2,3 ± 0,3* 0,523 ± 0,044
CD3+/ фНО-а 109 /л Спонтанная 0,2 ± 0,02* 0,032 ± 0,004
Стимулированная 1,66 ± 0,23* 0,625 ± 0,049
CD3+/$(2 109 /л Спонтанная 0,14 ± 0,02* 0,028 ± 0,004
Стимулированная 0,72 ± 0,06* 0,477 ± 0,041
CD3+/$(4 109 /л Спонтанная 0,18 ± 0,03* 0,016 ± 0,003
Стимулированная 0,21 ± 0,05* 0,039 ± 0,006
* — р < 0,05 по сравнению с нормой
Таблица 2. Показатели иммунограммы в период ранней ре-конвалесценции при различных вариантах лечения инфекционного мононуклеоза (М + т)
ния количества Т-лимфоцитов (CD3), В-лимфоцитов (CD20), Т-хелперов (CD4), Т-супрессоров (CD8), натуральных киллеров (CD16). Окрашенные флуохромом клетки анализировали на проточном цитометре Facs CAN фирмы «Becton Dickinson» по величине прямого и бокового светорассеяния.
Уровень иммуноглобулинов А, М, G в сыворотке крови определяли методом реальной иммунодиффузии в агаровом геле по G. Mancini (1965).
Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) оценивали антигенспецифическим методом
V. Hashkova (1979), в модификации Ю. А. Гриневич (1981), при помощи осаждения 3% полиэтиленглико-лем (ПЭГ-6000).
Определение внутриклеточной экспрессии цитоки-нов (ИЛ2, ИЛ4, ИфН-у и фНО-а) проводилось методом лазерной проточной цитометрии.
Для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов периферической крови использованы методы, основанные на проточноцитофлюориметриче-ском принципе с использованием цитометра Fasc Can (Becton Dickinson).
функционирование НАДф-оксидазной системы нейтрофилов оценивали при помощи НСТ-теста.
Для выявления специфических антител к вирусу больные были обследованы методом ИфА на тест-системах фирмы «БИО МЕД» (Финляндия).
С целью обнаружения вирусной ДНК проведено исследование крови методом ПЦР.
Обработка полученных данных проведена методом вариационной статистики с вычислением средних величин (М, ошибки средней (т), квадратичного отклонения. Показатель достоверности различий (р) определялся по таблицам Стьюдента-фишера. Различия считались достоверными при р < 0,05. Для проведения корреляционного анализа использован коэффициент корреляции Спирмена.
Статистическая обработка результатов проводилась на персональном компьютере на базе процессора Intel Celeron-1200 с использованием программ Word 2000 и Excel 2000.
Результаты и их обсуждение
В результате проведенного исследования получены следующие данные. Клиническая картина заболевания не отличалась от ранее описанной в литературе: симптомы инфекционного токсикоза отмечались у 80% больных, фебрильная лихорадка — у 88%, увеличение шейных лимфатических узлов — у 99%, затрудненное носовое дыхание — у 85%, гипертрофия миндалин и лакунарная ангина — у 83%, гепатоли-енальный синдром — у 70%, повышение трансаминаз-ной активности — у 76% больных.
В остром периоде болезни наблюдалось повышение числа лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов. Оценка субпопуляционного состава лимфоцитов выявила достоверное увеличение содержания CD3, CD8, CD16-лимфоцитов. Изменения со стороны гуморального звена иммунитета характеризовались повышением уровня IgM, IgG, IgA, ЦИК. фагоцитарная активность лейкоцитов периферической крови характеризовалась увеличением фагоцитарной активности моноцитов и бактерицидной активности, снижением фагоцитарной активности нейтрофилов, НСТ-теста.
При исследовании цитокинового профиля в острый период инфекционного мононуклеоза отмечено статистически значимое увеличение спонтанной и стимулированной экспрессии ИЛ2, ИЛ4, ИфН-у и фНО-а на CD3-лимфоцитах (табл. 1).
Эффективность применения Анаферона детского оценивалась по регрессу клинических симптомов, таких как продолжительность лихорадки, ангины, лимфаденопатии, гепатоспленомегалии, а так же по
Показатели иммунограммы Основная группа, п = 23 Контрольная группа, п = 20
Лейкоциты 109/л 8,51 ± 0,51 8,66 ± 0,85
Гранулоциты 109/л 2,83 ± 0,2 2,25 ± 0,21
Лимфоциты 109/л 5,02 ± 0,38 5,46 ± 0,58
Моноциты 109/л 0,86 ± 0,09 0,97 ± 0,18
CD3 109/л 4,04 ± 0,35 4,49 ± 0,54
CD20 109/л 0,35 ± 0,08 0,33 ± 0,05
CD4 109/л 1,32 ± 0,11 1,5 ± 0,16
CD8 109/л 2,32 ± 0,27 2,56 ± 0,43
CD16 109/л 0,62 ± 0,08 0,53 ± 0,07
IgG г/л 13,47 ± 0,7* 16,9 ± 1,3
IgM г/л 1,96 ± 0,13 2,23 ± 0,2
IgA г/л 2,3 ± 0,2 1,89 ± 0,28
ЦИК ед. 114,9 ± 9,3* 154 ± 14,9
Аф моноцитарного 109/л 0,7 ± 0,07 0,75 ± 0,15
Аф нейтрофильного 109/л 2,62 ± 0,2 2,09 ± 0,18
БА лейкоцитов % 40,45 ± 1,61 38,96 ± 2,12
HCT спонтанный % 8,57 ± 1,12 9,53 ± 1,28
CD3+/ ИфН-у 109/л Спонтанная 0,19 ± 0,02* 0,12 ± 0,01
Стимулированная 1,81 ± 0,25 2,09 ± 0,27
CD3+/ фНО-а 109/л Спонтанная 0,27 ± 0,02 0,19 ± 0,03
Стимулированная 1,28 ± 0,16 1,75 ± 0,15
CD3+/ ИЛ2 109/л Спонтанная 0,18 ± 0,02* 0,11 ± 0,01
Стимулированная 0,61 ± 0,05* 0,44 ± 0,05
CD3+/$(4 109/л Спонтанная 0,13 ± 0,03 0,14 ± 0,02
Стимулированная 0,23 ± 0,05 0,18 ± 0,03
Индекс поляризации CD3+/ИфH-у - CD3+/$(4 CD3+/$(4 0,6 -0,1
* — р < 0,05 по сравнению с контрольной группой
г
{он аферой^
СЕМЕЙСТВО ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ С ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ
ДЛЯ ВСЕЙ СЕМЬИ
Лнаферон принадлежит к новому классу лекарственных препаратов, созданных на основе сверхмалых доз антител.
Действующее вещество
антитела к гамма-интерферону человека в сверхмалых дозах.
Лнаферон эффективен и безопасен в профилактике и лечении гриппа и других респираторных вирусных
инфекций у взрослых и детей (возраст от 6 месяцев!).
Табпетки гомеопатические
анаферон
детский ща "
Безопасное лечение и эффективная профилакт^ гриппа и простудъг
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ ФИРМА
Штерна Медика Холдинг
Лицензия № 42/224/2002
Россия, 105005, Москва, ул. Бауманская, д. 58/25, корп. 12, стр.2. Телефон: (495) 956-33-07. E-mail: [email protected] www.anaferon.ru, www.materiamedica.ru
Безопасное лечение и эффективная ПРОФИЛАКТИКА гриппА и простуды
анаферон
Анаферон детский — Per. № 000372/01-2001 Анаферон — Per. № 003362/01
Отпускается 6ез
Рецепта ВрАЧА
динамике лабораторных и иммунологических показателей.
Использование Анаферона детского в комплексной терапии инфекционного мононуклеоза привело к сокращению продолжительности основных клинических симптомов: продолжительность лихорадки у детей основной группы составила 2,2 + 0,18 дня, ангины — 2,8 + 0,23 дня. В контрольной группе лихорадка сохранялась 5,1 + 0,15 дней, ангина — 4,1 + 0,16 дня (р < 0,05). Статистически значимого различия в длительности лимфаденопатии и гепатоспленомегалии в группах не выявлено.
В период ранней реконвалесценции в основной и контрольной группах сохранялся умеренный лейкоцитоз, лимфоцитоз, моноцитоз, повышение числа CD3, CD8, CD16 лимфоцитов, IgM, IgG, IgA, ЦИК, фагоцитарной активности моноцитов; отмечалось снижение числа гра-нулоцитов, НСТ-теста, фагоцитарной активности нейтрофилов (табл. 2). Число CD3-лимфоцитов, экспрессирую-щих ИЛ2, ИЛ4, ИфН-у и фНО-а в обеих группах превышало нормальные значения.
Однако на фоне лечения Анафероном детским у детей основной группы в период ранней реконвалес-ценции отмечены достоверно более низкие значения IgG и ЦИК по сравнению с контрольной группой (табл. 2). Со стороны цитокинового профиля в основной группе выявлено перераспределение соотношения экспрессии цитокинов в сторону повышения спонтанной и стимулированной экспрессии ИЛ2, спонтанной экспрессии ИфН-у — основных цитокинов клеточного иммунного ответа (табл. 2). Индекс поляризации иммунного ответа, который определялся по формуле CD3+/ИфН-Y- CD3+/ИЛ4
-CD3+/|/m4- у детей основной группы
имел положительные значения, в контрольной — отрицательные, что свидетельствует о переключении иммунного ответа у детей основной группы с гуморального на клеточно-опосредованный механизм.
Полученные клинические и иммунологические данные позволяют рекомендовать использование Анафе-рона детского в острый период инфекционного моно-нуклеоза.
Выводы
1. В острый период инфекционного мононуклеоза отмечается повышение числа лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов, CD3, CD8, CD16-лимфоцитов, IgM, IgG, IgA, ЦИК, фагоцитарной активности моноцитов и бактерицидной активности; снижение фагоцитарной активности нейтрофилов, НСТ-теста.
2. Цитокиновый профиль в острый период инфекционного мононуклеоза характеризуется увеличением спонтанной и стимулированной экспрессии ИЛ2, ИЛ4, ИфН-у и фНО-а на CD3 лимфоцитах.
3. Использование Анаферона детского способствует переключению иммунного ответа с гуморального на клеточно-опосредованный механизм.
4. Применение Анаферона детского совместно с ацикловиром в острый период инфекционного моно-нуклеоза оказывает положительный клинический эффект, который выражается в сокращении продолжительности лихорадки и ангины.
5. Анаферон детский может быть рекомендован для лечения больных инфекционным мононуклеозом по предлагаемой схеме.
Литература:
1. Prolonged illness after infectious mononucleosis is associated with altered immunity but not with increased viral load /
B. Cameron et al. // Journal of infectious diseases. — 2006. — 193. — № 1. — P. 664—671.
2. Семенов Б. ф. Иммуномодуляция при вирусных инфекциях и вакцинации / Б. ф. Семенов, В. В. Варгин // Итоги науки и техники ВИНИТИ. Сер. Вирусология. — 1989. — Т. 17. — 183 с.
3. Epstein-Barr virus infects and induces apoptosis in human neutrophils / B. Larochelle et al. // Blood. — 1998. — V. 92. — № 1. — P. 291—299.
4. GM CSF enhances EBV-induced synthesis of chemotactie factors in human neutrophills / Ch. Roberge, S. McColl, B. Larochelle, J. Gosselin // J. Immunol. — 1998. — V. 160. — № 5. — P. 2442—2448.
5. Галактионова О. И. Поражение детей вирусом Эпш-тейна-Барр в очагах инфекционного мононуклеоза / О. И. Галактионова, А. П. Помогаева, Л. Н. Уразова // Мат.
I Конгресса педиатров-инфекционистов России. — М., 2002. —
C. 32.
6. Плейфэр Д. Ж. Наглядная иммунология. — М.: Медицина, 1998 — С 58—59
Микроэкология организма человека при себорее и акне
И. В. Полеско, Г. А. Осипов, Т. И. Кабаева
ГОУ ВПО РОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ РОСЗДРАВА,
Научный центр сердечно-сосудистой хирургии им. А. Н. Бакулева РАМН, Москва
Методом газовой хроматографии масс-спектрометрии показано, что у больных себореей и акне на коже и в области волосяных фолликулов обнаруживаются три основные группы микроорганизмов: Propionibacterium acnes и другие акти-нобактерии, Staphylococcus epidermidis и другие кокковые формы, а также Malassezia (P/tyrosporum) и микроскопические грибы . Одновременно в крови (кишечнике) выявляется повышение содержания маркеров клостридий, бацилл, хе-ликобактера, некторых актиномицетов и Eubacterium lentum при дефиците маркеров других (основных) видов Eubacteri-um, лактобацилл и коринебактерий . При анализе состава кожного сала обнаружено относительное снижение концентрации линолевой кислоты и повышение уровня себалеата, нарушение соотношения жирных кислот с низким
