ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ РОЛЬ ПЕРЕКИСНОГО СТРЕССА В ГЕНЕЗЕ ПРОЛАПСА ТАЗОВЫХ ОРГАНОВ У ЖЕНЩИН Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

г

H

ными протезами // Проблемы стоматологии. 2018, том 14, № 3, стр.49-55 [Sadykova O. M., Zholudev S. E., Elikov A.V Quality of life as an indicator of the effectiveness of minor balneotherapy in patients who use removable prostheses. Problems of dentistry. 2018; 14; 3:49-55. (In Russ.)]

20. Садыкова О.М., Жолудев С.Е., Еликов А.В., Колеватых Е.П., Андреева С.Д. Комплексная оценка эффективности применения минеральной воды "Фатеевская" у пациентов, пользующихся съемными ортопедическими конструкциями // Проблемы стоматологии. -2018, Том 14, № 2, стр. 109-114. [Sadykova O. M., Zholudev S. E., Elikov A.V., kolevatykh E.

P., Andreeva S. D. Comprehensive assessment of the effectiveness of the use of mineral water "Fateevskaya" in patients using removable orthopedic structures. Problems of dentistry. 2018;14;2:109-114. (In Russ.)]

21. Садыкова О.М., Жолудев С.Е., Колева-тых Е.П. Влияние бальнеологических факторов на микробный статус полости рта пациентов, использующих съемные протезы // Уральский медицинский журнал. 2018 № 7(162) С.52-57 [Sadykova O. M., Zholudev S. E., kolevatykh E. P. Influence of balneological factors on the microbial status of the oral cavity of patients using removable prostheses. Ural medical journal 2018;7(162):52-57. (In Russ.)]

УДК 618.14-007.16-06:612.015.11

ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ РОЛЬ ПЕРЕКИСНОГО СТРЕССА В ГЕНЕЗЕ ПРОЛАПСА ТАЗОВЫХ ОРГАНОВ У ЖЕНЩИН

1Гречканев Г.О., 2Котова Т.В., 3Валентинова Н.Н., Мотовилова Т.М., 4Клементе АпумайтаХ.М., 5Никишов Н.Н., 1Гагаева Ю.А., Кеда А.К., Курмангулова И.М., 1Гулян Ж.И., Кокова Р.Р., 1Хасянов И.М.

'ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород, Россия (603005, г. Нижний Новгород, пл. Минина и Пожарского, д.10/1)

2ФГБОУ «Российский государственный социальный университет» Министерства образования и науки РФ, Москва, Россия (129226, г. Москва, ул. Вильгельма Пика, д. 4)

3Медицинский центр «Клиника современных технологий», Москва, Россия (107045, г. Москва, ул. Большой Головин переулок, д.4)

4ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России, Москва, Россия (119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.)

5Медицинский институт ФГАОУ ВО «Балтийский федеральный университет имени Иммануила Канта», Калининград, Россия (236016, г. Калининград, ул. А. Невского, д.14)

Цель исследования: определить состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты у больных с пролапсом тазовых органов.

Обследовано 60 женщин, средний возраст которых составил 46,0±1,5 года. Первую группу составили 30 женщин без соматической или гинекологической патологии, служивших контролем. Во вторую группу вошли 30 пациенток с диагнозом «опущение матки и стенок влагалища I - II степени». У всех пациенток определяли интенсивность липопероксидации методом индуцированной хемилюми-несценции сыворотки крови, проводилось измерение количества первичных (диеновых конъюгатов) и конечных (оснований Шиффа) молекулярных продуктов переокисления, определение активности ферментов супероксиддисмутазы и каталазы в крови.

У больных с опущением матки и стенок влагалища уровень Imax оказался выше, чем у здоровых в 1,75 раза, показатель S - в 1,79 раза, tg 2 альфа - в 1,65 раза (p<0,05 во всех случаях). ДК, как и ОШ во II группе обследованных превысили соответствующие показатели I группы в 2 раза (p<0,05 в обоих слу-чаях).При наличии пролапса у больных активность каталазы оказалась в 1,26 раза, а СОД - в 1,29 раза ниже по сравнению со здоровыми женщинами (p<0,05 в обоих случаях).

Таким образом, благодаря полученным результатам было выявлено нарушение состояния перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты у больных с пролапсом тазовых органов. Антиоксидантная недостаточность и перекисный стресс являются факторами патогенеза пролапса тазовых органов на системном уровне, что создает патогенетические предпосылки для включения экзогенных антиоксидантов или средств, стимулирующих эндогенную антиоксидантную систему защиты в комплекс лечебно-профилактических мероприятий у данной группы пациенток.

Ключевые слова: пролапс тазовых органов, перекисное окисление липидов, антиоксидантная защита

PATHOGENETIC ROLE OF PEROXIDE STRESS IN THE PELVIC ORGAN PROLAPSE GENESIS IN WOMEN

Grechkanev G.O., 2Kotova T.V., 3Valentinova N.N., 1Motovilova T.M., 3Clemente Apumayta H.M., 4Nikishov N.N., Gagaeva Yu.A., Keda K.A., Kurmangulova I.M., Kokova R.R., Gulian J.I., 1Khasyanov I.M.

г

и

Экспериментальная медицина и клиническая диагностика

'Privolzhskiy Research Medical University, Nizhny Novgorod (603005, Nizhny Novgorod, Russia, Minin&Pozharsky Sq., 10/1)

2Russian State Social University, Moscow, Russia (129226, Moscow, Wilhelm Peak St., 4).

3Medical center «Clinic of Modern Technologies», Moscow, Russia (107045, Moscow, Bolshoy Golovin pereulok

St., 4)

4Federal State Autonomic Educational Institution of Higher Education «Sechenov University», Moscow, Russia (119991, Moscow, Trubetskaya St., 8/2,)

5Medical Institute of State Autonomic Institution Immanuil Kant Baltic Federal University, Moscow, Russia (236016, Kaliningrad, A. Nevskiy St., 14)

The aim of the study was to determine the state of lipid peroxidation and antioxidant defense system in patients with pelvic organ prolapse.

60 women with an average age of 46,0±1,5 years were examined. The first group (group I) consisted of 20 women without somatic or gynecological pathology, who made a control group. The second group included 20 patients with the diagnosis of « prolapse of the uterine and vaginal walls, I -II degree» (group II). In all patients, the intensity of lipoperoxidation was determined by the method of induced chemiluminescence of blood serum, the number of primary (diene conjugates) and final (Schiff bases) molecular products of peroxidation was measured, the activity of superoxide dismutase and catalase enzymes in the blood was measured.

In patients with uterine and vaginal wall prolapse, Imax level was higher than in healthy patients by 1,75 times, S - by 1,79 times, tg 2 a - by 1,65 times (p<0,05 in all cases). The indicators of Diene conjugates, as well as Schiff bases in group II exceeded the corresponding indicators in group I twofold (p<0,05 in both cases). In the presence of prolapse in patients catalase activity was 1,26 times, and superoxide dismutase - 1,29 times lower as compared with women in group I(p<0,05 in both cases).

Thus, the obtained results revealed a violation of lipid peroxidation and antioxidant protection system in patients with pelvic organ prolapse.

Antioxidant insufficiency and peroxide stress are factors of pelvic organ prolapse pathogenesis on the systemic level, which creates pathogenic prerequisites for the inclusion of exogenous antioxidants or agents that stimulate the endogenous antioxidant defense system in the complex of therapeutic and preventive measures for this group of patients.

Key words: pelvic organ prolapse, lipid peroxidation, antioxidant protection

Введение

Процесс физиологического и, особенно, ускоренного(патологического) старения многогранен по своей этиологии, патогенезу и клиническим проявлениям. Появление в медицинской науке нового клеточно-технологического подхода в диагностике и коррекции заболеваний открывает обширные возможности для целенаправленной диагностики и профилактики заболеваний, ассоциированных со старением. В настоящеевремя активно изучаются нарушения клеточной динамики при различных патологических процессах, поэтому приобретают актуальность исследования регуляции процессов, происходящих на субклеточном уровне [1].

Известно, что чрезмерное образование свободных радикалов ведет к повреждению разнообразных биомолекул от форменных элементов крови до клеток тканей и органов [2], что может привести к функциональным расстройствам и органическим поражениям. Доказано, что окислительный стресс является патогенетическим фактором более чем 200 разноплановых заболеваний и патологических состояний, среди которых многие связаны со старением: кардимиопатии, атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, болезньАльцгеймераи т.д. [3-6]. Не является исключением и патология женской репродуктивной системы [7-12]. Особуюрольиграетокис-лительныйстрессвпатологическихпроцессах, свя-занныхсостарениеми возрастной утратой органами морфо-функциональных характеристик [13].

Цель работы: определить состояние перекис-ного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной системы защиты (АОСЗ) у больных с пролапсом тазовых органов.

Материал и методы

Было обследовано 60 женщин в возрасте от 42 до 48 лет (средний возраст составил 46,0±1,5 года, которые были разделены на две группы. Первую группу составили 30 женщин без соматической или гинекологической патологии, служивших контролем. Во вторую группу вошли 30 пациенток с диагнозом «опущение матки и стенок влагалища I -II степени».

Помимо общепринятых физикальных, инструментальных и лабораторных исследований проводилось изучение состояния ПОЛ и АОСЗ крови.

Состояние системы «прооксиданты-антиокси-данты» оценивали параллельно по трем направлениям. Метод индуцированной хемилюминесценции сыворотки крови использовали для выявления наличия и интенсивности перекисного стресса по показателям I max в mv/сек, S в mv/сек., tg2a, в работе использовали биохемилюминометр БХЛ-06.

Вторым направлением исследования было измерение количества первичных (диеновых конъюга-тов) и конечных (оснований Шиффа) молекулярных продуктов липопероксидации. Содержание диеновых конъюгатов (ДК) определяли в метанол-гексано-вой липидной фракции (5:1) при длине волны поглощения 233нм. Количество оснований Шиффа (ОШ) анализировали с помощью флуориметра при длине волны возбуждения 365 нм и длине волны эмиссии 420 нм. Содержание общих липидов в сыворотке крови определяли при помощи диагностических наборов "Lachema".

Третьим направлением работы была детализация состояния антиоксидантной системы защиты по уровням активности ферментов каталазы и суперок-сиддисмутазы (СОД) в крови. Активность каталазы

определяли спектрофотометрически, по убыли перекиси водорода в среде, супероксиддисмутазы - в тесте с нитросиним тетразолием, единицы измерения - Ед./гНв в мин.

Статистическая обработка данных клинических и лабораторных исследований проводилась методами вариационной статистики с использованием пакета МЕДСТ, программы Статистика 6,0. Достоверность различия признаков устанавливали с помощью ^критерия Стъюдента, за достоверные признавали различия при р<0,05.

Результаты и их обсуждение

Изучение интенсивности ПОЛ методом индуцированной хемилюминесценции позволило выявить (табл. 1), что биохемилюминометрические показатели, молекулярные продукты перекисного окисления

Таблица 1

Показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты у здоровых женщин (I группа) и больных пролапсом тазовых органов I- II степени (II группа).

липидов и антиоксидантные ферменты отличались в группах наблюдения. У больных с опущением матки и стенок влагалища (I группа) уровень 1тах оказался выше, чем у здоровых в 1,75 раза, показатель S - в 1,79 раза, tg2a - в 1,65 раза (р<0,05 во всех случаях). Таким образом, уже скрининговый метод обнаружения избыточного переокисления выявил неблагополучие у пациенток с минимальными проявлениями пролапса гениталий, что свидетельствует о системном перекисном стрессе [2].

Полученные данные нашли подтверждение при использовании более точного метода детекции пере-кисного стресса - измерения уровней молекулярных продуктов ПОЛ. Так, ДК, как и ОШ во II группе обследованных превысили соответствующие показатели I группы в 2 раза (р<0,05 в обоих случаях).

Исследуемый показатель I группа(п=30) II группа (п=30)

!тах, mv/сек 1,12±0,05 1,96±0,03х

S, mv/сек 10,4±0,02 18,7±0,01х

tg 2 альфа. 0,32±0,04 0,53±0,01х

ДК, ед.опт.плотн./мг ОЛ 0,24±0,02 0,49±0,03х

ОШ, усл.ед./мг ОЛ 13,1±0,2 27,0±0,2Х

Каталаза, Ед./г Нв в мин 553,5±10,6 437,0±11,1х

СОД, Ед/г Нв в мин. 657,2±9,0 510,4±12,1х

х - коэффициент достоверности различий по сравнению с первой группой (р<0,05).

Для выяснения условий, способствующих неконтролируемой генерации активных форм кислорода, оценили состояние АОСЗ по двум ее ключевым ферментам. При наличии пролапса у больных активность

каталазы (рис.1) оказалась в 1,26 раза, а СОД (рис.2) - в 1,29 раза ниже по сравнению со здоровыми женщинами (р<0,05 в обоих случаях), что создает условия для развития оксидативного стресса в организме.

200 100 0

■Уровень каталазы в I группе

□Уровень каталазы во II группе

Рис. 1. Активность каталазы(Ед/гНв вмин)у здоровыхженщин (I группа)ипациентокспролапсом тазовых органов начальных стадий (II группа), х -коэффициент достоверности различий

по сравнению сI группой (р<0,05)

1_

J

г

Экспериментальная медицина и клиническая диагностика

700 600 500 400 300 200 100 0

■Уровень СОД в I группе

□Уровень СОД во II группе

Рис. 2. Активностъсупероксиддисмутазы(Ед/гНввмин)уздоровыхженщин(1 группа)и пациенток с пролапсом тазовых органов начальных стадий (II группа) , х -коэффициент достоверности различий по

сравнению сIгруппой (р<0,05)

Полученные нами данные нашли косвенное подтверждение в зарубежной литературе последних лет. Китайские ученые исследовали роль окислительного стресса в метаболизме коллагена в фибробластах крестцово-маточной связки женщин с пролапсом, подвергшихся гистерэктомии [14]. Результаты показали, что уровни экспрессии окислительных биомаркеров 8-гидроксигуанозина (8-OHdG) и 4-ги-дроксиноненала (4-НМЕ) в группе с пролапсом были значительно выше, чем в контрольной группе (женщины без пролапса), что подтверждает ранее полученные данные [15]. В данном исследовании также определяли уровни экспрессии коллагена типа 1, а1 (COL1A1), матриксной металлопротеиназы 2 (ММР2), тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 (Т1МР2) и трансформирующего фактора роста Р1 (TGFpl) с помощью вестерн-блоттинга и анализа количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией. Оказалось, что уровни экспрессии ММР 2 у пациенток с пролапсом оказались выше, а Т1МР 2 и TGF Р1 ниже, чем в контрольной группе. Тем самым авторы выяснили механизм реализации влияния окислительного стресса через усиление экспрессии матриксной ММР-2, как ключевой протеина-зы, ответственной за деградацию коллагена [16].

Таким образом, благодаря полученным нами результатам было выявлено нарушение состояния перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты у больных с пролапсом тазовых органов, что дополняет картину патогенеза данного заболевания и может являться основой для нового направления профилактики и лечения.

Выводы

1. Антиоксидантная недостаточность и перекис-ный стресс являются факторами патогенеза пролапса тазовых органов не только на органном (связочный аппарат), но и на системном уровне;

2. Существуют патогенетические предпосылки для включения экзогенных антиоксидантов или средств, стимулирующих эндогенную антиоксидант-ную систему защиты в комплекс лечебно-профилактических мероприятий у пациенток с пролапсом тазовых органов начальных стадий.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии явного или потенциального конфликта интересов, связанного с публикацией статьи.

Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.

Литература/References

1. Щербаков Д.Л., Мещанинов В.Н. Перекис-ный метаболизм клеток и субклеточных структур при стрессе в условиях старения и его коррекция. // Здоровье, демография, экология финно-угорских народов. 2017. №3. С.77-80. [Shcherbakov D.L., Meshchaninov V.N. Peroxide metabolism of cells and subcellular structures under stress in aging conditions and its correction. Zdorov'e, demografiya, ekologiya finno-ugorskikh narodov. 2017;3:77-80.( In Russ.)]

2. Меньщикова Е.Б., Зенков Н.К., Ланкин В.З., Бондарь И.А., Труфакин В.А. Окислительный стресс: Патологические состояния и заболевания. АРТА: Новосибирск, 2008. 284с. [Men'shchikova E.B., Zenkov N.K., Lankin V.Z., Bondar' I.A., TrufakinV.A. Okislitel'nyi stress:Patologicheskie sostoyaniya i zabolevaniya. ARTA: Novosibirsk; 2008. 284p. (In Russ.)]

3. Созарукова М.М., Полимова A.M., Проскур-нина Е.В., Владимиров ЮА. Изменения в кинетике хемилюминесценции плазмы как мера системного окислительного стресса в организме человека //Биофизика. 2016. 61(2). С.337-344. [Sozarukova M.M., Polimova A.M., Proskurnina E.V, Vladimirov Yu.A. Changes in plasma chemiluminescence kinetics as a measure of systemic oxidative stress in the human body. Biofizika. 2016. 61(2):337-344. (In Russ.)]

4. Kattoor A.J., Pothineni N.V.K., Palagiri D., Mehta J.L. Oxidative Stress in Atherosclerosis. Curr. Atheroscler Rep. 2017;19(11):42. doi: 10.1007/s11883-017-0678-6.

5. Chen Z., Zhong C. Oxidative stress in Alzheimer's disease. Neurosci Bull. 2014; 2:271-81. doi: 10.1007/s12264-013-1423-y.

6. Takahashi K., Okumura H., Guo R., Naruse K. Effect of Oxidative Stress on Cardiovascular System in Response to Gravity. Int J Mol Sci. 2017;18(7). 1426. doi: 10.3390/ijms18071426.

L

7. Кузнецова И.В. Роль окислительного стресса и антиоксидантной защиты в репродукции человека //Акушерство и гинекология. 2016. 3. С.116-121. [Kuznetsova I.V. Role of oxidative stress and antioxidant protection in human reproduction. Akusherstvo I ginekologiya. 2016. 3. 116-121. (In Russ.)]

8. Гречканев Г.О., Мотовилова Т.М., Гарев-ская Ю.А. Антиоксидантная терапия - важнейший компонент патогенетического лечения воспалительных заболеваний // Врач. 2015. № 3. С. 54-58. [Grechkanev G.O., Motovilova T.M., Garevskaya Yu.A. Antioksidantnaya terapiya - vazhnejshij component patogeneticheskogo lecheniya vospalitel'nykh zabolevanij. Vrach. 2015. 3:54-8. (In Russ.)]

9. Лысенко М.А., Дубинина В.Г. Уровни некоторых сывороточных неферментных антиок-сидантов у пациенток с эпителиальными циста-деномами яичников // Health of woman. 2016. №4 (110). С. 121-123. doi 10.15574/HW.2016.110.121 [Lysenko M.A., Dubinina V.G. Urovni nekotorykh syvorotochnykh nefermentnykh antioksidantov u patsientok s ehpitelial'nymi tsistadenomami yaichnikov. Health of woman. 2016;4(110):121-123. doi 10.15574/ HW.2016.110.12].

10. Лысенко М.А., Дубинина В.Г., Носенко Е.Н. Окислительная дизрегуляция у женщин репродуктивного возраста с эпителиальными цистаденомами яичников //Современные проблемы науки и образования. 2016. 2. С. 77. [LysenkoM.A., DubininaV.G., NosenkoE.N. Oxidative dysregulation in women of reproductive age with ovarian epithelial cystadenomas. Sovremennyeproblemy nauki i obrazovaniya. 2016.2:77. (In Russ.)]

11. Гречканев Г.О., Мотовилова Т.М., Никишов Н.Н., Ходосова Т.Г., Клементе Апумайта Х.М., Жу-рина И.Е., Гагаева Ю.А., Вотинцева В.О., Хамидова А.Р. Роль перекисного стресса в патогенезе хронического эндометрита и возможности его коррекции

// Медицинский альманах. 2018. №1(52). С.133-137. [Grechkanev G.O., MotovilovaT.M., Nikishov N.N., Khodosova T.G., Klemente Apumaita Kh.M., Zhurina I.E., Gagaeva Yu.A., Votintseva V.O., Khamidova A.R. Role of peroxide stress in the pathogenesis of chronic endometritis and the possibility of its correction. Meditsinskii al'manakh. 2018;1(52):133-7. (In Russ.)]

12. Никишов Н.Н., Клементе А.Х.М., Жури-на И.Ю., Гагаева Ю.А., Хамидова А.Р. Нарушения в балансе перекисного окисления липидов и антирадикальной системы защиты у больных с труб-но-перитонеальным бесплодием // Биорадикалы и антиоксиданты. 2017. №4(4). С.47-50. [Nikishov N.N., Klemente A.Kh.M., Zhurina I.Yu., Gagaeva Yu.A., Khamidova A.R. Violations in the balance of lipid peroxidation and antiradical protection system in patients with tubal-peritoneal infertility. Bioradikaly i antioksidanty. 2017; 4 (4):47-50. (In Russ.)]

13. Cabello-Verrugio C., Simon F., Trollet C., Santibañez J.F. Oxidative Stress in Disease and Aging: Mechanisms and Therapies. Oxid Med Cell Longev. 2017:4310469. doi: 10.1155/2017/

14. Liu C., Yang Q., Fang G., Li B.S., Wu D.B., Guo W.J., Hong S.S., Hong L. Collagen metabolic disorder induced by oxidative stress in human uterosacral ligament derived fibroblasts: A possible pathophysiological mechanism in pelvic organ prolapse. Mol Med Rep. 2016;13(4):2999-3008. doi: 10.3892/mmr.2016.4919.

15. Ewies A., Elshafie M.. High isoprostane level in cardinal ligament-derived fibroblasts and urine sample of women with uterine prolapse. BJOG. 2009;116:126-7. doi: 10.1111/j.1471-0528.2008.02012.x.author reply 127-128.

16. Hinz B. The extracellular matrix and transforming growth factor-beta1: Tale of a strained relationship. Matrix Biol. 2015;47:54-65. doi: 10.1016/j. matbio.2015.05.006.

УДК 616-091.0

ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНОМ И ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНОМ СЕПСИСЕ

Чирский В.С., Андреева Е.А., Юзвинкевич А.К., Гайворонский И.В.

ФГБОУ ВО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» Министерства обороны Российской Федерации, Санкт-Петербург, Россия (194044, г. Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, 6), e-mail:

Цель: выявление морфологических особенностей поражения органов в зависимости от этиологии сепсиса. Был проведен анализ 93 случаев летальных исходов в клиниках Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова за период с 2007 по 2018 г. с клиническим диагнозом сепсис. Прижизненное микробиологическое исследование крови было выполнено в 26 случаях, посмертно проводились посевы крови - в 27 и кусочков органов - в 47 наблюдениях. Наряду с оценкой данных микробиологического исследования проводился анализ наличия и выраженности гнойного метастазирования, частоты встречаемости и распространенности признаков повреждения сосудов микроциркуляторного русла. Согласно результатам микробиологического исследования, все наблюдения были разделены на две основные группы: грамположительный и грамотрицательный сепсис. Выявлено, что морфологическая картина при грамположительном и гра-мотрицательном сепсисе различна, что связано с особенностями ответа на антигены бактерий. Для сепсиса, вызванного грамотрицательными бактериями присуще минимально выраженное гнойное метастази-рование (единичные мини-очаги) вплоть до отсутствия, в то время как для грамположительного сепсиса характерно наличие метастатических гнойных очагов в виде абсцессов.

Ключевые слова: сепсис, инфекция, микроциркуляция, эндотелий, бактерии, метастазирование, микроорганизм, тромбоз.