CC BY
71www.agroyug.ru
|УДКУ63ШТ575Г619Д
^№ЭКалаШникова,''Л.А^Храбр,ова, ДаврилиневуигсД
1ФЕБНУ{«ВСеродсиискииТнаучнвдисследоватрлАскйиШ ; криеводства^
пастбищная болезнь лошадей: диагностика и лечение
Бабезиозы (пироплазмидозы) непарнокопытных — трансмиссивная природно-очаговая инвазия, этиологическими агентами которой являются простейшие из отряда Piroplasmatidae: Babesia (Piroplasma) caballi и Babesia (Nuttallia, Theileria) equi, паразитирующие в клетках крови [1, 2]
У непарнокопытных в группу пироплазмидозы входят два заболевания: пироплазмоз (бабезиоз) и нут-талиоз (тейляриоз, бабезиоз), возбудители которых отличаются друг от друга генетически и морфологически. Заболевания клинически схожи, но имеют некоторые отличия. Нередко отмечают смешанное проявление инвазии. Пироплазмоз характеризуется резким угнетением, депрессией, выраженной анемией, лихорадкой, желтушностью слизистых оболочек, гемоглобинурией, нарушением функции пищеварительной, дыхательной и сердечнососудистой систем. В теплое время года он обычно проявляется в острой форме и является частой причиной смерти лошадей. При нутталиозе смертность ниже, выделяют острое, подострое и хроническое течение, при этом переболевшие животные часто остаются носителями нутта-лий и способствуют распространению болезни.[1, 3] Пироплазмидозы наносят существенный ущерб коневодству, снижая иммунитет животных, а также их продуктивность и работоспособность на длительный срок. Они приводят к непосредственной гибели заболевших животных, увеличивают затраты на проведение ветеринарно-санитарных и лечебно-профилактических мероприятий. Вспышки пироплазмоза и нутталиоза препятствуют полноценному проведению случной компании: понижают процент зажере-бляемости у кобыл, вызывают аборты у жеребых маток, падеж подсосных жеребят. Одним из характерных общих клинических признаков пироплазмидозов является гемолитическая желтуха, обусловленная ак-
тивным разрушением пораженных бабезиями эритроцитов Появление желтушности слизистых оболочек, в совокупности с повышением общей температуры тела у жеребят и взрослых животных, является предрасполагающим фактором для проведения исследований на бабезиозы непарнокопытных.
Диагностика на наличие в крови лошадей возбудителей пироплазмидозов является обязательной при экспорте-импорте лошадей в Российской Федерации и ряде сопредельных стран. В ветеринарном сертификате для вывоза лошадей на спортивные соревнования ветврач также должен регистрировать благополучие местности по бабезиозам в течение 12 предшествующих месяцев.
Поскольку для пироплазмидозов характерна трансмиссивная передача, распространение болезни напрямую связанно с ареалом жизнедеятельности его специфических переносчиков клещей рода Dermacentor (кожерез), Нуа1отта (стеклоглаз), RhipicephaLus (ве-ероголов) (Рис. 1).
Нужно отметить, что эти членистоногие переносят ряд опасных для человека и других животных болезней (клещевой энцефалит, боррелиоз, анаплазмоз, Омскую геморрагическую лихорадку, туляремию, клещевой североазиатский риккетсиоз и Q-лихорад-ку, пироплазмоз собак и Марсельскую лихорадку). Иксодовые клещи очень устойчивы к неблагоприятным факторам внешней среды. Они способны перезимовывать, переносить затопление мест обитания в течение 12 суток. Самки в голодном состоянии могут жить до 7 лет, они очень плодовиты, откладывают до 5000 яиц. Важной является способность передавать возбудителя пироплазмоза следующим поколениям клеща трансовариально, вследствие этого участки местности, населенные инвазированными клещами, остаются опасными на десятилетия и представляют
ЭФФЕКТИВНОЕ № 5 июнь
животноводство 2019
и
51
Рис. 1. Рис. 2.
Виды клещей семейства Ixodidae: а) Dermacentor. Ь) Hyalomma Клещи в области лба и затылка с) Rhipicephalus лошади
собой очаги болезни. Нутталлии, в отличие от пироплазм, трансовариально не передаются, но способны к трансплпацентарной передаче у восприимчивых животных (от матери к плоду) [4].
Клещи способны к миграциям, в результате чего они постепенно заселяют новые территории, формируя новые очаги заболеваний [5]. Если раньше считалось, что болезнь встречается преимущественно в южных регионах, то в последние годы, в связи с глобальным потеплением болезнь регистрируют во всех федеральных округах Российской Федерации.
Бабезиозы состоят на контроле международного эпизоотического бюро, на сайте OIE регулярно обновляется карта распространения бабезиозов лошадей (Equine piropLasmosis) по всему миру (http://www.oie. int/). На сайте Россельхознадзора РФ также публикуются сообщения об официально зарегистрированных случаях пироплазмоза лошадей (http://www.fsvps.ru/).
В России заболевание сходное с пироплазмозом впервые описали А. Попов (1892) на Кавказе и В. С. Михайлов (1903) в Смоленской губернии. Раньше инвазию называли — «майская» или «весенняя» болезнь, так как пик заболеваемости приходится на май-июнь [6]. В дальнейшем активность клещей снижается и второй, меньший пик, приходится на конец августа начало сентября. При снижении температуры ниже 5 градусов клещи зарываются в листья, впадают в оцепенение и в таком состоянии перезимовывают. Но известны случаи заболевания «закле-щеванных» лошадей и зимой, при размещении их
в теплых конюшнях. Важно отметить, что нутталиоз энзоотически никогда не наблюдается раньше пироплазмоза, а в большинстве случаев сменяет его. Отмечено, что племенные лошади более восприимчивы, чем рабочие. Местные лошади легче переносят инвазию, чем вновь привезенные, но чаще остаются носителями. Восприимчивый молодняк, выводимый на пастбище, быстро заражается и, переболевая в легкой форме, приобретает нестерильный иммунитет, обусловленный носительством бабезий. В клетках крови таких животных длительное время обнаруживаются мелкие включения, при этом никаких клинических признаков болезни не проявляется. Такое животное является фактором риска, так как вывоз его в благополучный район, при наличии в последнем клещей-переносчиков, может спровоцировать возникновение болезни. Наличие антигенов паразитов при прему-ниции в плазме крови вызывает постоянное антигенное возбуждение в иммунной системе. Носительство может приводить к аутоиммунным анемиям, иммуно-супрессиям, в результате данные паразитозы способствуют более частому возникновению других патологических состояний, и осложняют течение других болезней [6]. Носительство бабезий становится препятствием культурному и спортивному обмену, продаже племенных лошадей в зарубежные страны, так как в большинстве зарубежных стран с 1970 года введены ограничения на ввоз животных паразитоноси-телей, а это, в свою очередь, наносит существенные убытки российскому коневодству.
Microgamont Рис. 3 Цикл развития бабезий
www.agroyug.ru
.ja"5 & * г .v<« i
а) б;
Рис. 4
Мазки крови лошади окрашенных по Романовскому-Гимзе а) Babesia caballi (фото http://www.vetbook.org/wiki/horse/ index.php/Babesia_spp) b) Babesia equi (фото http://www.vetnext.com/search. php?s=aandoening&id=73060442801%20469)
Чаще всего появлению болезней в новых местах способствует временный вывоз здоровых лошадей в неблагополучный район, в связи с различными мероприятиями (соревнования, конные митинги, выставки и т.п.). Для заражения достаточно одного инвази-рованного клеща, самца или самки. Описаны случаи бабезиоза лошадей в свободных от переносчиков регионах (остров Сахалин) [1], при транспортировке туда лошадей, зараженных в пути следования.
Актуальность разработки новых средств диагностики пироплазмидозов лошадей для РФ связана с обеспечением безопасности при импорте племенных и спортивных лошадей из стран, неблагополучных по заболеванию, для минимизации денежных затрат и дополнительных временных потерь при движении конского поголовья.
Диагноз на пироплазмидозы ставят комплексно, на основании эпизоотологических данных, клинической и патологоанатомической картины, а также лабораторных исследований. В России микроскопия мазка остается пока еще преимущественным методом диагностики пироплазмидозов. В мазках цельной крови, окрашенных по Романовскому-Гимза или по Май-Грюнвальда, обнаруживают характерные формы возбудителя [14, 15, 22]. Для PiropLasma caballi такой формой являются парные грушевидные включения, соединенные между собой тонкой перемычкой под острым углом (Рис. 4 a), обычно они больше радиуса эритроцита. При нутталиозе характерными формами являются каплевидные нутталлии расположенные внутри клетки крови в виде мальтийского креста (Рис. 4 b), а также одиночные грушевидные включения. Диагноз по мазку крови ставят, просматривая не менее 100 полей зрения, обнаруживая вышеописанные формы возбудителя. Бабезии определяются как внутри эритроцита, так и отдельно в плазме, а так же внутри макрофагов. При анализе крови выявляют анемию, моноцитоз, тромбоцитопению, повышенную СОЭ и паразитэмию. Однако с помощью микроскопии практически невозможно установить носительство. При носительстве морфология инвазионного агента меняется, характерных форм может совсем не быть, нутталлии и пироплазмы имеют каплевидную, овальную, амебовидную, серповидную, а чаще точечную форму (Рис 5.).
Бабезий необходимо дифференцировать от других включений (тельца Хауэла-Жоли, тельца Гейнца, плохо отмытый краситель и другие артефакты) [8] В России также используют серологические методы обнаружения антигенов бабезий в сыворотке крови. РСК (реакция связывания комплимента) РДСК (реакция длительного связывания комплимента) и РНГЛ (реакция непрямой гемагглютинации) для постановки диагноза [1, 5].
а) б)
Рис. 5.
Мазки цельной крови лошади, окрашенные по Май-Грюнвальда. Картина крови при носительстве: а) одиночная грушевидная форма b) овальные и точечные формы (фото Калашниковой Т. В.)
В мировой практике для диагностики пироплазмидозов применяют иммуноферментный анализ (РИФА), фермент-зависимый иммуносорбционный анализ (ELISA), однако отмечают неудовлетворительную специфичность этих методов из-за перекрестных реакций с другими представителями типа Apicomplexa, что вносит субъективность в окончательные результаты исследования [6].
На сегодняшний день не разработано эффективных вакцин, позволяющих предотвратить распространение данной инвазии, поэтому основными методами борьбы с бабезиозами является их ранняя диагностика. Разработка методов ДНК-диагностики пироплазмидозов лошадей, является одной из актуальных задач современной клинической ветеринарии. Методы ДНК-диагностики заболеваний животных уже широко внедряются в практику ветеринарной медицины [6, 9]. Высока чувствительность реакции при обнаружении паразитемии Babesia equi, при очень низкой инвазированности. Применение ПЦР также высокоэффективно при смешанной инвазии Возможность ПЦР-диагностики в обнаружении ДНК бабезий при хроническом течении и носительстве можно улучшить, проверяя несколько образцов крови от одного подозреваемого животного.
За рубежом успешно ведется разработка наборов для ПЦР-диагностики бабезиозов, в том числе и для одновременного обнаружение двух возбудителей в одной пробе биоматериала. В нашей стране так же проходит апробацию тест система, позволяющей идентифицировать ДНК возбудителей пироплазмоза и нутталиоза (рис 5). Важным преимуществом разрабатываемой системы является ее пригодность для массового скрининга [2, 3,4].
При молекулярных исследованиях для родовых отличий в основном используют локус субъединицы ри-босомального гена 18S РНК, поскольку эта часть гена достаточно устойчива к мутациям [6]. Дальнейшее изучение возбудителей бабезиозов непарнокопытных, несомненно связано с использованием ДНК-методов, что позволит оценить филогенетическое родство между различными видами бабезий, установить полиморфизм babesia caballi и babesia equi, характерный для регионов Российской Федерации. Следует отметить, что определение молекулярно-генетических характеристик бабезий, выделенных при обнаружении болезни в различных регионах РФ, является необходимым аспектом в изучении молекулярной эпизоотологии и эволюции этих простейших.
Лечение пироплазмидозов лошадей основано на применение специфических и симптоматических средств. Необходимо учитывать 3 основных моментах: 1. Борьба с возбудителем и восстановление физиологического состояния крови; 2. Профилактика рас-
ЭФФЕКТИВНОЕ
животноводство
№ 5 июнь 2019
Рис. 6.
Электрофореграмма продуктов амплификации на наличие ДНК Babesia caballi и Babesia equi 1. — Смешанная инвазия 2. — Babesia equi
3. — Babesia caballi 4. — положительный контроль Babesia caballi 5. — положительный контроль Babesia equi, 6,7. — отрицательные контроли (фото Кузнецовой М. М.)
стройств сердечно-сосудистой системы, путем регулирования ее деятельности; 3. Профилактика расстройств желудочно-кишечного тракта и устранение функциональной недостаточности.
Больным лошадям назначают диету, из рациона исключают концентраты, скармливают легкопереваримые корма (хорошее луговое сено, зеленую траву), корм давать небольшими порциями как можно чаще. Поить больную лошадь необходимо свежей доброкачественной водой на месте, поднося ее через каждые 1-2 часа т.к. при пироплазмозе у лошади повышенная жажда.
В последние годы ветеринарные специалисты в своей практике чаще используют наиболее эффективные препараты — ази-дин (беренил) и диамидин (имидокарб), который при двукратном введении оказывает стерилизующее действие. Азидин и беренил применяют внутримышечно в виде 7%-го раствора в дозе 5мл на каждые 100кг живой массы животного (3,5мг/кг). Ди-амедин с лечебной целью применяют внутримышечно в виде 10%-го раствора в дозе 2 мг/кг живой массы, а для стерилизации организма лошади от пироплазма в дозе 4мг/кг живой массы дважды с интервалом в 24часа.
Применяют специфическую химиотерапию: гемоспоридин подкожно в дозе 0,0002 г/кг в 2%-ном разведении на дистиллированной воде. Перед введением гемоспоридина лучше вводить кофеин в обычно принятой дозировке. Можно применять внутривенно трипафлавин или флавакридин в дозе 0,003-0,004 г/кг в 1%-ном разведении на изотоническом растворе натрия хлорида. Из симптоматических средств рекомендуют сердечные (кофеин, камфарное масло) и слабительные. При атонии кишечника внутривенно вводят 10%ный раствор поваренной соли (химически чистой) в дозе 200-250 мл, а внутрь отвар льняного семени или овсяный. для лечения заболевших жеребят применять имизол в дозе 2 мл/10 кг массы тела, внутримышечно с бициллином~3 в дозе 600 тыс ЕД/100 кг массы тела, внутримышечно или с сульфапиридазин натрием в дозе 50 мг/кг живо» массы, внутрь, особенно при осложнении пироплазми-дозов бронхопневмонией.
ЛИТЕРАТУРА
1. Заблоцкий В. Т., Пироплазмидозы лошадей/ Ветеринария 2008 — № 8-с. 17-21.
2. Морфология, биология и лабораторная диагностика возбудителей прото-зойных заболеваний животных /учебно-методическое пособие / С. Н. Лу-цук, А. А. Водянов, В. П. Толоконников и др. Ставропольский государственный аграрный университет. — Ставрополь: АГРУС, 2009. — 60 с.
3. Пироплазмидозы лошадей, Луцук С. Н., Пономарева М. Е./ Ставрополь, ГАУ, 2003, — 156с.: илл.Содержание, кормление и болезни лошадей: Учебное пособие/ Под общ. Ред. А. А. Стекольникова. — СПб.: Изд. «Лань», 2007. — 624 с.: ил.
4. Стайков В. В. /Бабезиоз// Ветеринария сельскохозяйственных животных, 2007-№ 7. — с. 23-25.
5. Терлецкий А. Ахмерова Л., Галиева Э. и др./Биология паразитирования и методы цитологической диагностики представителей рода Babesia в крови животных и человека / Ветеринария сельскохозяйственных животных, 2009 — № 9 с. 41-43.
6. Ruegg, S. R., Heinzmann D., Barbour, A. D. 2008. Estimation of the transmissions dynamics of Theileria equi and Babesia caballi in horses. Parasitology 135, 555-565.
ООО «БиоМедВеКервж» +71+«) 220 82 46 v www.bmvi.ru v _
e mail. bmvs.iibmirj.ru
