CC BY
16
УДК 616.314.-615.03-613.2 Ступак Е.П.
ПАРОДОНТОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ АНТИДИСБИОТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИСБИОЗЕ У КРЫС
Высшее государственное учебное заведение Украины "Украинская медицинская стоматологическая академия", г. Полтава
При экспериментальном линкомициновом дисбиозе в десне крыс наблюдается развитие воспаления и дисбиоза, которые можно устранить применением таких препаратов, как "КальЦикор" (экстракт из корней цикория), "Экстравин" (экстракт из виноградной выжимки) или "Биокорн" (экстракт из зерна пшеницы молочной спелости).
Ключевые слова: десна, дисбиоз, воспаление, антидисбиотические препараты.
Статья является фрагментом НДР АМН 087.12: "Розробити способи профтактики та лкування стоматолопчних захворю-вань у хворих на цукровий дiабет 2 типу" (№ Державно!' реестрацп 0112и0о0).
В патогенезе стоматологических заболеваний, в том числе и пародонта, существенное место занимают нарушения со стороны микрофлор полости рта, что характеризуется как дисбиоз (дисбактериоз) [1, 2]. Особенно велико значение дисбиоза в развитии патологических процессов в пародонте при сахарном диабете [3, 4]. В последние годы обращено внимание клиницистов на использование антидисбиотиче-ских препаратов, представленных про-, пре- и синбиотиками, а также иммуностимуляторами [5, 6].
Целью настоящего исследования стало изучение пародонтопротекторного действия разных антидисбиотических средств: кальцикора, экстравина и биокорна. Первый препарат представляет собой комплекс биологически активных веществ (БАВ) из корней цикория (инулин, фруктоолигосахариды, биофлавоноиды, хлоро-геновая и цикориевая кислота, другие БАВ [7]. Второй препарат содержит полифенольные вещества из виноградной выжимки [8], и, наконец, третий препарат ("Биокорн") представляет собой экстрактивные вещества из зерна пшеницы молочной спелости, которое содержит большое количество фруктоолигосахаров [9].
Материалы и методы исследования
В работе были использованы следующие препараты: "КальЦикор" (ТУ У 15.8-13903778039:2007; гигиеническое заключение МЗУ № 05.03.02-06/40697 о 10.08.2007 г., производство НПА "Одесская биотехнология"), "Экстравин" (ТУ У 15.8-347377476-001:2007; гигиеническое заключение МЗУ № 05.03.02-06/40839 о 10.08.2007 г.), "Биокорн" [9, 10].
Экспериментальный дисбиоз вызывали путем введения с питьевой водой линкомицина в дозе 60 мг/кг [11]. Животные с первого дня опыта получали антидисбиотические препараты в дозе 750 мг/кг (кальцикор), 1 мл/кг (экстравин с концентрацией сухих веществ 8,3%) и 5 мл/кг (биокорн с концентрацией сухих веществ 2,6%).
Эксперименты были проведены на 50 белых крысах линии Вистар (самцы, 4 месяца), которых распределили в 5 групп: 1-я - норма (ин-тактные), 2-я, 3-я, 4-я и 5-я получали с питьевой водой, начиная с 12-го дня в течение 5 дней линкомицин в дозе 60 мг/кг. Крысы 3-й группы с первого дня опыта получали с кормом 750 мг/кг живой массы кальцикор, крысы 4-й группы получали с питьевой водой по 1 мл/кг экстравина и крысы 5-группы по 5 мл биокорна. Все антидис-биотические препараты крысы получали 28 дней. На 30-й день крысы умерщвлялись под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг), у них иссекали десну и готовили из нее гомогенат (20 мг/кг 0,05М трис-НС1-буфера рН 7,5).
В гомогенате десны определяли концентрацию малонового диальдеида (МДА) [12], общую протеолитическую активность (ОПА) по расщеплению казеина при рН 7,6 [12], кислую фосфата-зу (КФ) по гидролизур-нитрофенилфосфата при рН 4,8 [12], каталазу [12], уреазу [13] и лизоцим по лизису М. lysodeikticus [13]. По соотношению активности каталазы и концентрации МДА рассчитывали антиоксидантно-прооксидантный индекс АПИ [12]. По соотношению относительных активностей уреазы и лизоцима рассчитывали степень дисбиоза по методике профессора А.П. Левицкого [13].
Результаты исследования и их обсуждение
Уровни МДА, ОПА и КФ являются биохимическими маркерами воспаления [12]. Результаты их определения в десне крыс с экспериментальным дисбиозом представлены в таблице 1, из которой видно, что при дисбиозе наблюдается четкая тенденция к увеличению уровня этих маркеров воспаления, однако во всех случаях р>0,05. Введение с кормом (кальцикор) или с водой (экстравин, биокорн) антидисбиотических препаратов в течение 28 дней вызывает снижение уровня биохимических маркеров воспаления до нормы.
Актуальт проблеми сучасно! медицини
Таблица 1
Влияние антидисбиотических препаратов на биохимические маркеры воспаления в десне крыс с экспериментальным дисбиозом
№ п/п Группы МДА, ммоль/кг ОПА, нкат/кг КФ, мк-кат/кг
1 Норма (интактные) 15,4±1,8 27,9±6,3 26,0±3,1
2 Экспериментальный дисбиоз (ЭД) 18,5±1,6 р>0,05 37,8±6,6 р>0,05 29,8±6,6 р>0,3
3 ЭД + "Кальцикор" 25,1 ±1,4 р>0,7 р,>0,05 31,1±5,7 р>0,5 р,>0,3 26,5±1,6 р>0,7 р,>0,3
4 ЭД + "Экстравин" 14,2±0,6 р>0,4 р,<0,05 27,9±3,1 р=1 р,>0,3 21,2±1,7 р>0,05 р,<0,05
5 ЭД + "Биокорн" 14,9±0,9 р>0,5 р,<0,05 31,7±5,9 р>0,5 р,>0,3 20,5±0,8 р>0,05 р,<0,05
Примечания: р - показатель достоверности различий с груш В таблице 2 представлены результаты определения активности антиоксидантного фермента каталазы и показателя баланса антиокси-дантных и прооксидантных систем индекса АПИ как соотношения активности каталазы и концентрации МДА [12]. Из этих данных видно, что при
№ 1;р1 - показатель достоверности различий с группой № 2. дисбиозе наблюдается тенденция к снижению активности каталазы и достоверное снижение индекса АПИ. Все испытанные антидисбиотиче-ские препараты достоверно увеличивают активность каталазы и индекса АПИ практически до нормы.
Таблица 2
е антидисбиотических препаратов на активность каталазы и индекс АПИ в десне крыс с экспериментальным дисбиозом
№ п/п Группы Каталаза, мкат/кг АПИ, ед.
1 Норма (интактные) 5,27±0,32 3,22±0,12
2 Экспериментальный дисбиоз (ЭД) 4,75±0,22 р>0,05 2,57±0,14 р<0,01
3 ЭД + "Кальцикор" 5,68±0,27 р>0,05 р,<0,05 3,88±0,30 р>0,6 р,<0,05
4 ЭД + "Экстравин" 5,57±0,32 р>0,3 р,<0,05 3,92±0,15 р=1 р,<0,01
5 ЭД + "Биокорн" 5,49±0,29 р>0,3 р,<0,05 3,68±0,15 р>0,05 р,<0,01
Примечания: р - показатель достоверности различий с группой № 1; р1 - показатель достоверности различий с группой № 2.
В таблице 3 представлены результаты определения активности уреазы (показатель микробной обсемененности) и лизоцима (отражающей состояние неспецифического иммунитета). Из этих данных видно, что при дисбиозе имеет место явная тенденция к увеличению в десне уровня уреазы (а, следовательно, микробной обсемененности), а под влиянием антидисбио-
тических препаратов - снижение активности уреазы, что указывает на снижение уровня микробной обсемененности десны. С лизоцимом все происходит наоборот: при ЭД наблюдается тенденция к снижению его активности, а под влиянием антидисбиотических препаратов -тенденция к увеличению, вплоть до полной нормализации.
Таблица 3
Влияние антидисбиотических препаратов на активность уреазы и лизоцима в десне крыс с экспериментальным дисбиозом
№ п/п Группы Уреаза, мк-кат/кг Лизоцим, ед/кг
1 Норма (интактные) 1,68±0,39 370±80
2 Экспериментальный дисбиоз (ЭД) 2,36±0,38 р>0,05 300±60 р>0,3
3 ЭД + "Кальцикор" 0,99±0,38 р>0,05 р,<0,05 330±20 р>0,3 р,>0,3
4 ЭД + "Экстравин" 1,69±0,30 р>0,8 р,>0,05 360±50 р>0,6 р1>0,1
5 ЭД + "Биокорн" 1,75±0,21 р>0,5 р,>0,05 380±40 р>0,6 р,>0,05
Примечания: р - показатель достоверности различий с группой № 1;
р1 - показатель достоверности различий с группой № 2.
Рассчитанные по методу Левицкого показатели степени дисбиоза в десне представлены на рисунке. При экспериментальном дисбиозе этот показатель увеличивается в 1,7 раза (р<0,001), а под воздействием антидисбиотиче-ских препаратов возвращается к норме, причем в большей степени антидисбиотическое действие оказал препарат "КальЦикор", содержащий классические пребиотики инулин и фруктооли-госахариды, а также хлорогеновую и цикорие-вую кислоты. Не исключено, что определенное антидисбиотическое действие оказывает и входящий в состав кальцикора цитрат Са, отсутствующий в экстравине и в биокорне.
Сравнивая эти три препарата по другим биохимическим маркерам, можно видеть, что противовоспалительное действие больше выражено у экстравина (возможно, за счет большего содержания полифенолов), а антимикробные (если судить по активности уреазы) у кальцикора. Биокорн в большей степени стимулирует неспецифический иммунитет, о чем свидетельствует большее увеличение активности лизоцима.
2,4
2,0
и
и
с
и
¿3
1,6
1,2
0,8
0,4
0,0
Н
ЭД ЭД+К ЭД+Э ЭД+Б
Выводы
1. При экспериментальном дисбиозе, вызванном линкомицином, в десне крыс наблюдается развитие воспаления и дисбиоза в сочетании со снижением неспецифического иммунитета и баланса антиоксидантно-прооксидантных систем.
2. Применение антидисбиотических препаратов (кальцикор, экстравин или биокорн) в значительной степени устраняет патологические явления в десне, наблюдаемые при дисбиозе.
Литература
1. Шашмурина В.Р. Характеристика микробиоценоза полости рта пациентов с полным отсутствием зубов в ближайшие сроки после дентальной имплантации / В.Р. Шашмурина, А.И. Воложин,
B.Н. Царев // Российский стоматологический журнал. - 2008. -№ 3. - С. 28-33.
2. Левицький А.П. Обфунтування патогенетичноТ ролi дисбютич-них умов порожнини рота у виникненш пнпвггу в експеримент / А.П. Левицький, М.В. Люшчук, В.М. Зубачик // Експерименталь-на та кшшчна (^зюлопя i бiохiмiя. - 2008. - № 2 (42). - С. 28-36.
3. Ткаченко П.1. Стан iмунологiчноТ' резистентност у хворих на цу-кровий дiабет 2 типу, як потребують хiрургiчноТ' санацп порожнини рота / П.1. Ткаченко, М.П. Митченок // УкраТнський стома-толопчний альманах. - 2009. - № 5. - С. 19-23.
4. Скрипников П.Н. Особенности микробиоценоза слизистой оболочки полости рта у больных сахарным диабетом 2 типа и атеросклерозом, его коррекция антиоксидантами / П.Н. Скрипников, О.Г. Суковач / Вюник проблем бюлоги i медицини. - 2007. -№ 3. - С. 134-137.
5. Бондаренко В.М. Дисбиозы и препараты с пробиотической функцией / В.М.Бондаренко, А.А Воробьев // ЖМЭИ. - 2004. - № 1. - С. 84-92.
6. Левицкий А.П. Пребиотики и проблема дисбактериоза / А.П. Левицкий, Ю.Л. Волянский, К.В. Скидан. - Харьков : ЭДЭНА, 2008. - 100 с.
7. Левицкий А.П. Цикорий в питании и медицине / А.П. Левицкий,
C.В. Гончарук. - Одесса : КП ОГТ, 2010. - 100 с.
8. Патент на корисну модель №42783 УкраТна, МПК (2006) А61К 31/00 А61Р 1/100. СпоЫб лкування дисбактерюзу / Левицький А.П., Селiванська 1.О., Макаренко О.А. та ш.; заявник та патен-товласник Державна установа "1нститут стоматологи АМН Укра-Тни"; заявл. 26.12.2008; опубл. 27.07.2009, Бюл. № 14.
9. Левицкий А.П. Влияние экстракта из недозрелой пшеницы на степень дисбиоза слизистой оболочки полости рта / А.П. Левицкий, И.А. Селиванская, С.А. Демьяненко, В.Г. Гулавский // Вюник стоматологи. - 2009. - № 1. - С. 2-6.
10. Селиванская И.А. Влияние фитопрепаратов "Экстравин" и "Биокорн" на показатели воспаления и дисбиоза в слизистой тонкой кишки крыс с экспериментальным дисбактериозом / И.А. Селиванская, В.Т. Гулавский, А.П. Левицкий // Вюник стоматологи. - 2010. - № 5. - С. 37-40.
11. Левицкий А.П. Влияние антибиотика линкомицина на слизистую оболочку полости рта крыс / А.П. Левицкий, С.А. Демьяненко // Вюник стоматологи. - 2009. - № 3. - С. 6-10. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: методические рекомендации / [Левицкий А.П., Деньга О.В., Макаренко О.А. и др.]. - Одесса, 2010. - 16 с. Пат. №43140 УкраТна, МПК (2009) G01N 33/48. СпоЫб оцшки ступеня дисбюзу (дисбактерюзу) оргашв i тканин / Левицький А.П., Деньга О.В., Селiванська 1.О. [та ш.]. - № u 20081509; заявл. 26.12.08; опубл. 10.08.09, Бюл. № 15.
12.
13.
Рис. Влияние антидисбиотических препаратов на степень дисбиоза десны крыс при экспериментальном дисбиозе (Н -норма, ЭД - экспериментальный дисбиоз, К - "КальЦикор", Э - "Экстравин", Б - "Биокорн").
Возможно, в будущем целесообразно изучить лечебно-профилактическое действие комбинации антидисбиотических препаратов, рассчитывая на суммацию их эффектов.
Реферат
ПАРОДОНТОПРОТЕКТОРНА Д1Я АНТИДИСБЮТИЧНИХ ПРЕПАРАТ1В ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ ДИСБ1ОЗ1 У ЩУР1В Ступак О.П.
Ключовi слова: ясна, дисбюз, запалення, антидисбютичж препарати.
При експериментальному лшкомщиновому дисбюз1 в яснах щур1в спостер1гаеться розвиток запалення та дисбюзу, як1 можна усунути за допомогою таких препарат1в, як "КальЦикор" (екстракт з корш-ня цикорш), "Екстарвш" (екстракт з виноградних вичавок) або "Бюкорн" (екстракт 1з зерна пшениц! мо-лочно'Г стиглосп).
Актуальт проблеми сучасно!" медицини
Summary
PERIODONTIUM-PROTECTIVE EFFECT OF ANTIDYSBIOTIC DRUGS IN EXPERIMENTAL DYSBIOSIS IN RATS Stupak O.P.
Key words: gum, dysbiosis, inflammation, antidysbiotic drugs.
This paper describes the development of inflammation in rats' gingiva under modeled lincomycin-induced dysbiosis. These inflammatory manifestations may be eradicated by applying medications as "KalCikor" (extract of chicory roots), "Extravin" (extract of grape pomace) "Biocorn" (extract of milky-ripened wheat).
УДК: [611.316 - 092.9:615.243]:615.372 Сухомлин А.А.
ВПЛИВ МУЛЬТИПРОБ1ОТИКА «АП1БАКТ» НА АКТИВН1СТЬ ОРН1ТИНДЕКАРБОКСИЛАЗИ ТА А-АМ1ЛАЗИ В ТКАНИНАХ СЛИННИХ ЗАЛОЗ ЗА УМОВ ППЕРГАСТРИНЕМП
ВДНЗ УкраГни "УкраГнська медична стоматологiчна академiя", м.Полтава
Експерименти виконаш на 49 бших щурах-самцях. За умов тривалого застосування 1нг161тор1в протонног помпи розвиваеться гтоацидитет i, як насл{док, гтергастринем{я. В умовах омепра-зол-тдукованог гтергастринемм виникають патологiчнi змти в тканинах слинних залоз щурiв - дисбаланс регуляторних систем та зниження функцюнальних резервiв тканин слинних залоз. Застосування мультипробiотика «Атбакт» нормалiзуе систему регуляторних полiамiнiв та синтез бшка.
Ключов1 слова: слинн залози, омепразол, ппергастринем1я, пол1ам1ни, «Ап1бакт».
Планова НДР: «Роль бюрегулятор1в у механ1зм1 розвитку патолопчних змш оргажв системи травлення», № 0109U007982.
На тепершнш час захворювання шлунково-кишкового тракту займають трете мiсце в зага-льнiй структурi захворюваностi i Тх розповсю-дженiсть постiйно зростае. Для лкування кисло-тозалежних захворювань шлунково-кишкового тракту (ШКТ) широко застосовуються антациднi засоби, серед яких провщну роль вiдiграють шп-бiтори протонноТ помпи (1ПП). Довготривале застосування 1ПП мае негативн наслiдки, зокрема, розвиток гiпергастринемiТ [12]. Загальновщомо, що за умов трофiчноТ та мiтогенноТ дiТ гастрину е ризик розвитку онколопчних захворювань ШКТ [6, 7]. Мехаызм розвитку ппергастринемп, перш за все, полягае в довготривалому застосуванн 1ПП, якi шляхом пригшчення Н+/К+-АТФази при-зводять до ппоацидитету, що стимулюе G-кл^ини антрального вiддiлу шлунку секретувати гастрин.
Як вiдомо, гiпоациднiсть шлункового вмюту призводить до розвитку дисбiозу ШКТ [10]. У зв'язку з цим, згщно з Маастрихтським консенсусом, в комплексному лкуваны кислотозалежних хвороб оргашв травноТ системи застосовуються пробютики [8]. Застосування пробiотикiв не тть-ки корегуе порушення мiкроекологiТ ШКТ, але i позитивно впливае на активнють iмунноТ та ен-докринноТ систем. На сьогоднiшнiй день юнуе велика кiлькiсть пробiотичних лактомiсних пре-паратiв, що використовуються для профтактики та корекцiТ дисбiозiв ШКТ. Мультипробютик «Ашбакт» - це унiкальна компози^я симбiозу пробiотичних бактерiй i екстракту прополюу. Одна доза препарату (10 см3) мютить не менше 101 живих клiтин пробiотичних бактерш i 1,5 або 2,5% екстракту прополюу. Пробютична ефекти-внiсть мiкрофлори мультипробiотика зростае при додаваннi екстракту прополюу i рацiонально доповнюеться його лкувально-профтактичними
властивостями. До складу прополюу входять ро-слиннi смоли (в середньому 55%); бальзами, як мютять у виглядi складних сумiшей ефiрнi масла, дубильнi речовини, ароматичн альдегiди, фенолокислоти; вiск; квiтковий пилок (5-11%); мехаычы домiшки. В ньому великий набiр мше-ральних елеменпв, мiстяться вiтамiни та iншi речовини. ФлавоноТ'ди, що входять до складу прополюу володшть вираженими протизапаль-ними та антисептичними властивостями [10].
Мета
Обфунтування експериментальноТ корекци патологiчних змш в тканинах слинних залоз за умов омепразолчндукованоТ ппергастринемп мультипробютиком «Ашбакт».
Матерiали та методи
Експерименти виконаш на 49 бiлих щурах-самцях вагою 180-250г з дотриманням рекомен-дацiй щодо проведення медико-бiологiчних до-слiджень, згiдно з бвропейською конвен^ею. Тварини були подiленi на окремi групи, яким щоденно протягом 28 дiб вводили омепразол (14 мг/кг маси тта внутрiшньоочеревно) та «Ашбакт» (0,14 мл/кг маси тта перорально) окремо та в поеднанш. По завершенню експерименту щурам вранц натщесерце проводили евтаназш пiд уретановим наркозом (50 мг/кг маси тта вну-тршньоочеревно) шляхом кровопускання та збирали кров для визначення вмюту гастрину рад^мунолопчним методом за допомогою ана-лiтичного набору "MP Biomedicals, LLC" (USA). Нами встановлено, що вмют гастрину в плазмi кровi щурiв контрольно' групи на 28 день склав 59,0±35,5 пг/мл, порiвняно з дослiдними твари-нами, яким вводили протягом 28 дiб омепразол - 170,7±90,7 пг/мл (р<0,05). Таким чином, трива-
