CC BY
9"BicHUK стоматологи", № 2, 2017
УДК 616.361+576.8+615.24
А. I. Фурдичко1, к. мед. н.,
2
О. А. Макаренко , д. бюл. н.
1Львiвський нащональний медичний ушверситет iм. Данила Галицького 2 Державна установа «1нститут стоматологи та щелепно-лицево! хiрурril Нащонально! академи медичних наук Украши»
ПАРОДОНТОПРОТЕКТОРНА АКТИВН1СТЬ АДАПТОГЕНУ «Б1ОТРИТ» У ЩУР1В З ТОКСИЧНИМ ГЕПАТИТОМ НА ТЛ1 ДИСБ1ОЗУ
У щур1в визначали пародонтопротекторну ефе-ктившсть препарата «Бютрит», що мостить б1офлавоногди з листя пшениц!, в умовах моде-лювання токсичного гепатита на тл1 кишкового дисб1озу. Дисбюз викликали за допомогою л1нко-мщина, гепатит - за допомогою г1дразина. Б1о-трит в доз1 200 мг/кг вводили з гжею протягом 20 дмв. Стан пародонту ощнювали за р1внем в яснах маркер1в запалення (вм1сту малонового д1-альдег1да 7 активност1 проте1наз), дисб1озу (за ствв1дношенням активностей уреази 7 л1зоцима) та антиоксидантного захисту (активность ка-талази, тдекс АП1), а також за р1внем в юстко-вт тканин! пародонта активност1 фосфатаз 7 проте1наз. Встановлено, що моделювання сум1с-ног патологИ гепатита 7 дисб1оза викликае в яснах тдвищення р1вня маркер1в запалення, актив-ност1 уреази 7 зниження р1вня л1зоциму, катала-зи, ¡ндекса АП1. В юстковт тканин! знижуеться активмсть лужног фосфатази на тл1 зростан-ня кислог фосфатази та активност1 проте1наз. Вживання Б1отриту нормал1зуе досл1джем по-казники, що св1дчить про його пародонтопротекторну активмсть.
Ключовi слова: гепатит, дисб1оз, пародонтит, л1зоцим, адаптоген.
А. И. Фурдичко1, О. А. Макаренко2
1 Львовский национальный медицинский университет им. Данилы Галицкого
2Государственное учреждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины»
ПАРОДОНТОПРОТЕКТОРНАЯ АКТИВНОСТЬ АДАПТОГЕНА «БИОТРИТ» У КРЫС С ТОКСИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ НА ФОНЕ ДИСБИОЗА
У крыс определяли пародонтопротекторную эффективность препарата «Биотрит», содержащего биофлавоноиды из листьев пшеницы, в условиях моделирования токсического гепатита на фоне кишечного дисбиоза. Дисбиоз вызывали с помощью линкомицина, гепатит - с помощью гидразина. Биотрит в дозе 200 мг/кг вводили с едой на протяжении 20 дней. Состояние паро-донта оценивали по уровню в десне маркеров воспаления (содержанию малонового диальдеги-да и активности протеиназ), дисбиоза (по соотношению активностей уреазы и лизоцима) и антиоксидантной защиты (активность катала-зы, индекс АПИ), а также по уровню в костной ткани пародонта активности фосфатаз и протеиназ. Установлено, что моделирование соче-танной патологии гепатита и дисбиоза вызывает в десне повышение уровня маркеров воспаления, активности уреазы и снижение уровня ли-зоцима, каталазы и индекса АПИ. В костной ткани снижается активность щелочной фос-фатазы на фоне увеличения кислой фосфатазы и активности протеиназ. Применение Биотри-та нормализует исследованные показатели, что свидетельствует о его пародонтопротектор-ной активности.
Ключевые слова: гепатит, дисбиоз, пародон-тит, лизоцим, адаптоген.
А. I. Furdichko1, O. A. Makarenko2
:Lviv National Medical University named after Danylo Galytskij 2State Etablishment «The Institute of Stomatology and Maxillo-Facial Surgery of the National Academy of Medical Science of Ukraine»
Parodont protective activity of the adaptogen "biotrit" in rats with toxic hepatitis on a dysbiosis background
The aim of this study was to determine the parodont protective effectiveness of the adaptogen "Biotrit" in terms of toxic hepatitis and intestinal dysbiosis modeling.
The materials and methods. In rats dysbiosis was induced using lincomycin and hepatitis - using hy-drazine. Biotrit 200 mg/kg was administered with food for 20 days. The periodontal condition was evaluated by the level of gum inflammation markers (malondialdehyde and proteases activity), dysbiosis (urease activity, lysozyme, dysbiosis degree) and the antioxidant enzyme catalase among with index API. In periodontal bone there were determinedphospha-tase and proteases activities. It was found that the co-simulation of hepatitis and dysbiosis causes an
© Фурдичко А. I., Макаренко О. А., 2017.
"BicnuK стоматологИ", № 2, 2017
increase in the level of gum inflammation markers, urease activity and a reduction of lysozyme, catalase and API. At the same time in bone there is a reduction of the alkaline phosphatase activity on the background of an increase of acid phosphatase and proteinase activities. The Biotrit application has normalized the studied indicators. Hepatitis on the background of dysbiosis causes periodontal development of dysbiosis and inflammatory-degenerative processes.
The results of this study show pronounced parodont protective effect of Biotrit.
Keywords: hepatitis, disbiosis, periodontitis, lyso-zyme, adaptogen.
Значна поширенють захворювань пародонту (майже 80 % дорослого населення) в певнш Mipi зумовлена суттевим зниженням piB^ захисних адаптацшно-компенсаторних систем оргашзму [1]. Центральне мюце в iеpаpхi! адаптацшно-компенсаторних i тpофiчних систем оргашзму займае печшка [2], порушення функцiональних систем яко! призводить до розвитку патолопч-них пpоцесiв в багатьох органах, в тому чи^ i в тканинах ротово! порожнини (гепато-оральний синдром) [3]. В фундаментальному дослщженш, виконаному С. О. Дем'яненко [4], було наголо-шено на дисбютичному механiзмi патогенезу ге-пато-орального синдрому, що зумовлено зниженням piвня антимшробно! функци печiнки [5]. В розвитку дисбюзу суттеву роль вдаграе iмуно-дефiцит, за умов якого змшюеться як кiлькiсний, так i якiсний склад ендогенного мшробюценозу [6]. Показано, що за piзних типiв iмунодефiцитiв розвиваеться дисбiоз в ротовш поpожнинi [7]. Одним iз виpiшальних фактоpiв розвитку орального дисбюзу е значне зниження piвня неспеци-фiчного (вродженого) iмунiтету, природними стимуляторами якого можуть бути бюфлавоно!-ди [8].
Мета дано1 роботи. Визначення пародон-топротекторно! ефективностi бюфлавоно!д-вмiсного препарату «Бютрит» за умов моделю-вання токсичного гепатиту на rai кишкового дисбiозу. «Бютрит» - це комплекс бюлопчно ак-тивних речовин iз паpосткiв (листя) пшенищ. Головною дiючою речовиною Бiотpиту е бюфла-воно!ди. Вiн стимулюе неспецифiчний iмунiтет, володiе антиоксидантною, мембранопротектор-ною, протизапальною i антивipусною активнiстю
[9].
Матер1али i методи досл1дження. Дослщи було проведено на 24 бших щурах лшп Вiстаp (самцi, 2 мюящ, жива маса 92±6г), яких було по-дiлено на 3 piвних групи: 1 -а - контроль (штакт-нi), 2-а - токсичний гепатит на тлi дисбiозу i 3-я -
токсичний гепатит на тлi дисбiозу + введення з кормом з першого дня дослщу Бiотриту в дозi 200 мг/кг.
У щурiв 2-о! i 3-о! групи викликали дисбiоз за допомогою лiнкомiцину шляхом його введення з питною водою в дозi 60 мг/кг на протязi 5 дшв. Експериментальний гепатит вiдтворювали на 20-й день дослав у щурiв 2-о! та 3-о! груп шляхом введення пдразину гiдрохлориду в дозi 100 мг/кг одноразово внутрiшньом'язово [10]. Евтаназда щурiв здiйснювали на 22-й день дос-лiду пiд тюпенталовим наркозом (20 мг/кг) шляхом тотально! кровотечi iз серця. Вцщляли сли-зову оболонку ясен i кiсткову тканину альвеолярного вщростка нижньо! щелепи. В гомогенатi ясен визначали рiвень бiохiмiчних маркерiв за-палення [11]: вмiст малонового дiальдегiду (МДА) i активнiсть протеаз по казе!ну при рН 7,6 (казешолггична активнiсть, КЛА), активнiсть фермента уреази (показник мiкробного обшменш-ня) [12], активнiсть лiзоциму (показник неспе-цифiчного iмунiтету) [13], а також актившсть ан-тиоксидантного ферменту каталази [11]. За сшв-вiдношенням вщносних активностей уреази i ль зоцима розраховували ступiнь дисбiозу за Леви-цьким [12], а за сшввщношенням активностi каталази i вмюту МДА розраховували антиоксида-нтно-прооксидантний iндекс АП1 [11].
В гомогенатi юстки альвеолярного вiдростка визначали активнiсть лужно! (ЛФ) i кисло! (КФ) фосфатаз [14] та за !х сшввщношенням (ЛФ/КФ) мiнералiзуючий iндекс (М1). Визначали також в гомогенат кiсток актившсть протеолггичних фе-рментiв: КЛА i еластази [14].
Статистичну обробку результат здiйснюва-ли загальноприйнятими методами.
Результати до^дження та 1х об^ворен-ня. В таблищ 1 представлен результати визначення в яснах рiвня маркерiв запалення. З цих даних видно, що у щурiв з гепатитом значно шд-вищився рiвень маркерiв запалення, який повшс-тю нормалiзувався у щурiв, що отримували Бют-рит.
В таблищ 2 показано, як змшюеться актившсть уреази i лiзоциму в яснах щурiв з гепатитом та тих, як отримували Бютрит. Як видно з цих даних, гепатит достовiрно пiдвищуе в яснах актившсть уреази, що свщчить про зростання мь кробного обшменшня. Бiотрит нормалiзуе цей показник. На вщмшу вiд уреази, активнiсть лiзо-циму в яснах щурiв з гепатитом знижуеться в 7,5 разiв, Бiотрит пiдвищуе !! в 4 рази, однак не доводить до норми. Розрахована за цими показни-ками стушнь дисбюзу в яснах щурiв з гепатитом збшьшуеться в 10 разiв, а Бютрит !! знижуе в 5 разiв (рис. 1).
"Вiсник стоматологи", № 2, 2017
Таблиця 1
Вплив Бютриту на рiвень маркер1в запалення в яснах щурiв з гепатитом
на тш дисбiозу (М±т, п=8)
№ п/п Група Вмст малонового дiальдегiду, ммоль/кг Казешолггична активнiсть, нкат/кг
1 Контроль 13,3±0,7 35,1±3,4
2 Гепатит на тлi дисбюзу 24,4±1,8 р<0,01 48,8±3,6 p<0,05
3 Гепатит на тлi дисбюзу + Бютрит 13,3±0,2 p=2,0 p1<0,01 37,8±4,0 p>0,5 0,1>p1>0,05
Прим i тка : р - вiрогiднi розбiжностi показникш по вщношенню до групи 1; р1 - вiрогiднi розбiжностi показникiв по вщношенню до групи 2.
Таблиця 2
Вплив Бютриту на актившсть уреази i лiзоциму в яснах щурiв з гепатитом
на хш дисбiозу (М±т, п=8)
№ г Актившсть уреази, Актившсть лiзоциму,
п/п рупа мк-кат/кг од/кг
1 Контроль 1,73±0,13 372±57
2 Гепатит на тлi дисбiозу 2,32±0,14 50±19
p<0,05 p<0,001
3 Гепатит на тлi дисбюзу + Бютрит 1,95±0,28 209±51
p>0,3 p<0,05
p1>0,05 p1<0,05
Примiтка : див. табл. 1.
12
10
?у
со о
ю о
к «
л к
'Е
о
**
*
8
6
4
2
0
1
2
3
Рис. 1. Вплив Бютриту на стушнь дисбюзу в яснах щурш з гепатитом на тлi дисбюзу (1 - контроль, 2 - гепатит + дисбiоз (Г + Д), 3 - Г + Д + Бютрит) * - р < 0,05 в поршнянт з гр.1; ** - р < 0,05 в поршнянт з гр. 2.
В таблиц 3 представлено результаты визна-чення в яснах щур1в з гепатитом активносп ката-лази та ¿ндексу АП1. Як видно з цих даних, у щу-р1в з гепатитом достов1рно знижуеться актившсть каталази (на 10%) { бшьше шж у 2 рази ш-
декс АП1, що свщчить про дисбаланс в систем! про- 1 антиоксиданпв в яснах щур1в з гепатитом. Введення Бютриту повшстю вщновлюе 1 актившсть каталази, { ¿ндекс АП1.
В таблиц! 4 представлено дан! визначення
"Вiсник стоматологИ", № 2, 2017
активносп фосфатаз в юстковш тканиш пародо-нту щурiв з гепатитом. Видно, що у таких щурiв достовiрно знижуеться активнiсть ЛФ i достовiр-но збiльшуeться активнiсть КФ, що дае зниження iндексу М1 в 1,9 рази. Введення бютриту норма-лiзуе цi показники, що свщчить про здатнiсть б> отриту стимулювати процеси мшератзацл в юс-
тковш тканиш пародонту.
В таблиц 5 показано, що гепатит суттево збшьшуе активнiсть протеаз в юстковш тканиш, що свщчить про розвиток в нш запально-дистрофiчних процешв. Введення Бiотриту нор-малiзуе рiвень протеолiзу, що вказуе на остеоп-ротекторну дiю Бiотриту.
Таблиця 3
Вплив Бштриту на активнiсть каталази i iндекс АП1 в яснах щурiв з гепатитом
на тш дисбiозу (M±m, п=8)
№ п/п Група Актившсть каталази, мкат/кг 1ндекс АП1
1 Контроль 10,2±0,3 7,7±0,4
2 Гепатит на тл1 дисбюзу 9,2±0,1 р<0,01 3,7±0,3 р<0,01
3 Гепатит на тл1 дисбюзу + Бютрит 10,8±0,2 р>0,05 р1<0,01 8,1±0,6 р>0,3 Р1<0,01
Примiтка : див. табл. 1.
Таблиця 4
Вплив Бштриту на актившсть фосфатаз та шдекс М1 в юстковш тканинi пародонту щурiв з гепатитом на тш дисбiозу (M±m, п=8)
№ п/п Група Актившсть лужно! фосфатази, мк-кат/кг Актившсть кисло! фосфатази, мк-кат/кг 1ндекс М1
1 Контроль 203,0±17,3 21,6±2,5 9,4±0,8
2 Гепатит на тл1 дисбь озу 147,9±14,3 р<0,05 29,3±0,7 р<0,01 5,0±0,5 р<0,01
3 Гепатит на тл1 дисбь озу + Бютрит 198,8±12,6 р>0,5 р1<0,05 20,3±1,4 р>0,3 р1<0,01 9,8±0,9 р>0,5 р1< 0,01
Примiтка : див. табл. 1.
Таблиця 5
Вплив Бштриту на актившсть протеаз в юстковш тканиш пародонту щурiв з гепатитом на тлi дисбшзу (M±m, п=8)
№ п/п Група Казешолггична актившсть, нкат/кг Актившсть еластази, мк-кат/кг
1 Контроль 13,6±1,0 5,3±0,9
2 Гепатит на тл1 дисбюзу 19,7±1,5 р<0,05 10,2±0,9 р<0,01
3 Гепатит на тл1 дисбюзу + Бютрит 13,7±1,4 р>0,8 р1<0,05 6,7±0,7 р>0,2 р1<0,05
Примiтка : див. табл. 1.
Таким чином, нами шдтверджено залежшсть стану тканин ротово! порожнини i зубо-щелепно! системи вiд стану печшки (гепато-оральний синдром). Пiдтверджено також положення про веду-чий фактор патогенезу цього синдрому - дисбю-
тичний [4]. На цш пiдставi застосування бiотриту як iмуностимулятора i антидисбiотичного засобу цiлком обгрунтовано.
Вважаемо, що Бiотрит, який мае дозвш МОЗ Укра!ни на застосування, може знайти свое при-
"BicHUK стоматологи", № 2, 2017
значення для профшактики пародонтиту у хво-рих на гепатит з дисбюзом.
Висновки. 1. Гепатит на rai дисбiозу викли-кае в пародонт розвиток дисбiозу i запально-дистрофiчних процесiв.
2. Адаптоген Бютрит виявляе пародонтопро-текторну властивiсть.
Список лтератури
1. Гончарук С. В. Взаимосвязь воспалительных заболеваний пародонта и соматической патологии / С.
B. Гончарук, К. Н. Косенко, С. Ф. Гончарук // Современная стоматология. - 2011. - № 1. - С. 37-40.
2. Гарбузенко Д. В. Механизмы компенсации структуры и функции печени при её повреждении и их практическое значение / Д. В. Гарбузенко // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, ко-лопроктологии. - 2008. - №6. - С. 14-21.
3. Левицкий А. П. Гепато-оральный синдром / А. П. Левицкий, С. А. Демьяненко. - Симферополь: Тарпан, 2012. - 140 с.
4. Дем'яненко С. О. Патогенетичш принципи профшактики i лшування стоматит при гепатобша-рнш патологи: автореф. на здобуття наук. ступеня д-ра мед. наук / С. О. Дем'яненко. - Одеса, 2012. - 35 с.
5. Левицкий А. П. Антимикробная функция печени / А. П. Левицкий, С. А. Демьяненко, Ю. В. Цисе-льский - Одесса: КП ОГТ, 2011. - 141 с.
6. Bengmark S. Gut microbiota, immune development and function / S. Bengmark // Pharmacol Res. -2013. - V. 69, № 1 - P. 87-113.
7. Левицкий А. П. Актуальные проблемы дисби-оза полости рта / А. П. Левицкий // Дентальные технологии. - 2012. - № 1-2 (48-49). - С. 6-9.
8. Andersen O. M. Flavonoids: Chemistry, Biochemistry and Applications / O. M. Andersen, K. R. Markham. - New York: CRC Press, 2005. - 1256 p.
9. Демьяненко С. А. Мукопротекторные и гепа-топротекторные свойства проростков пшеницы / С. А. Демьяненко // Вюник стоматологи. - 2008. - № 5-6. - С. 10-14.
10. Стефанов О. В. (ред.). Доклш1чш дослвджен-ня лкарськнх засобiв / О. В. Стефанов - Ки!в: ДФЦ, 2001. - С. 334-351.
11. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: методические рекомендации / А. П. Левицкий, О. В. Деньга, О. А. Макаренко [и др.]. -Одесса: КП ОГТ, 2010. - 16 с.
12. Ферментативный метод определения дис-биоза полости рта для скрининга про- и пребиотиков: методические рекомендации / [А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, И. А. Селиванская и др.]. - Киев: ГФЦ МОЗ Украины, 2007. - 26 с.
13. Левицкий А. П. Лизоцим вместо антибиотиков / Левицкий А. П.- Одесса: КП ОГТ, 2005. - 74 с.
14. Ферментативний метод оцшки стану шстко-во! тканини / [А. П. Левицький, О. А. Макаренко, I. В. Ходаков и др.] // Одеський мед. журн. - 2006. - № 3. -
C. 17-21.
REFERENCES
1. Goncharuk S. V., Kosenko k. N., Goncharuk S.
F. The relationship of inflammatory periodontal diseases and somatic pathology. Sovremennaya stomatologiya. 2011; 1: 37-40/
2. Garbuzenko D. V. Mechanisms of compensation structure and function of the liver in its damaged and their practical significance. Rossiyskiy zhurnal gastroenterologii, gepatologii, koloproktologii. 2008; 6: 14-21.
3. Levitsky A. P., Dem'yanenko S. A. Gepato-oralnyi sindrom [Hepato-oral syndrome]. Simferopol, Tarpan, 2012: 140.
4. Dem'yanenko S. O. Patogenetichni printsipy profilaktiki i likuvannya stomatytiv pri gepatobiliarniy patologii [Pathogenetic principles of prevention and treatment of stomatitis in hepatobiliary pathology]. Abstract of dissertation for doctor of medical sciences. Odesa, 2012: 35.
5. Levitsky A. P., Dem'yanenko S. A., Tsiselskiy Yu. V. Antimikrobnaya funktsiya pecheni [Antimicrobial liver function]. Odessa, KP OGT, 2011: 141.
6. Bengmark S. Gut microbiota, immune development and function. Pharmacol Res. 2013; 69 (1): 87-113.
7. Levitsky A. P. Actual problems of dysbiosis oral. Dentalnye tekhnologii. 2012; 1-2 (48-49): 6-9.
8. Andersen O. M., Markham K. R. Flavonoids: chemistry, biochemistry and applications. New York, CRC Press, 2005: 1256.
9. Dem'yanenko S. A. Mukoprotektornye and hepatoprotective properties of wheat germ. Visnyk stomatologii. 2008; 5-6: 10-14.
10. Stefanov O. V. Doklinichni doslidzhennya likarskykh zasobiv [Preclinical studies of drugs]. Kiev, GFC, 2001: 334-351.
11. Levitsky A. P., Denga O. V., Makarenko O. A. [i dr.]. Biokhimicheskie markery vospaleniya tkaney rotovoy polosti: metodicheskie rekomendatsii [Biochemical markers of inflammation of oral cavity tissue: method guidelines]. Odessa, KP OGT, 2010: 16.
12. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A. [i dr.]. Fermentativnyy metod opredeleniya disbioza polosti rta dlya skrininga pro- i prebiotikov: metodicheskie rekomendatsii [Enzymatic methods for determination of oral dysbiosis for screening pro- and prebiotics: method guidelines]. Kiev, GFC, 2007: 22.
13. Levitsky A. P. Lizotsym vmesto antibiotikov [Lysozyme instead of antibiotics]. Odessa, KP OGT, 2005:74.
14. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Khodakov I.
V. [i dr.]. The enzymatic method of the estimation of the state of osseous tissue. Odeskiy medychnyy zhurnal. 2006; 3:17-21.
Haginm^a 11.05.17
