ПАРАМЕТРЫ РЕАКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ В МОНИТОРИНГЕ ВОСПАЛЕНИЯ ПРИ РЕВМАТОИДНОМ АРТРИТЕ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Проблемы здоровья и экологии / Health and Ecology Issues 2022;19(2):41-47

УДК 616.72-002.77-07:616-008.853.4 https://doi.org/10.51523/2708-6011.2022-19-2-05

Параметры реактивности нейтрофилов в мониторинге воспаления при ревматоидном артрите

В. В. Железко, И. А. Новикова

Гомельский государственный медицинский университет, г. Гомель, Беларусь

Резюме

Цель исследования. Оценить возможность использования параметров реактивности нейтрофилов крови для мониторинга воспалительного процесса у пациентов с ревматоидным артритом (РА).

Материалы и методы. У 61 пациента с достоверным диагнозом РА была проведена оценка параметров функциональной активности нейтрофилов (нетотическая активность, поглотительная способность, продукция активных форм кислорода и оксида азота) в динамике воспалительного процесса.

Результаты. У пациентов в период обострения по сравнению с фазой клинического улучшения повышены значения параметров нетоза (NETСП30, NETСТ30, NETСП150, NETСТ150) и кислород-продуцирующей активности (НСТСП) нейтрофилов. С помощью категориального регрессионного анализа определены пороговые значения перечисленных параметров, на основании которых предложена система балльной оценки активности воспаления у пациентов с РА.

Заключение. Параметры оценки функциональной активности нейтрофилов (NETСП30, NETСТ30, NETСП150, NETСТ150 и НСТСП) являются дополнительными лабораторными критериями оценки активности воспаления при РА. Ключевые слова: ревматоидный артрит, активность воспалительного процесса, нейтрофил, функциональные свойства

Вклад авторов. Железко В.В.: концепция и дизайн исследования, сбор материала, создание базы данных и их статистическая обработка, обзор публикаций по теме статьи; Новикова И.А.: редактирование и обсуждение данных, проверка критически важного содержания, утверждение рукописи для публикации. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Источники финансирования. Исследование проведено без спонсорской поддержки. Для цитирования: Железко ВВ, Новикова ИА. Параметры реактивности нейтрофилов в мониторинге воспаления при ревматоидном артрите. Проблемы здоровья и экологии. 2022;19(2):41-47. DOI: https://doi. огд/10.51523/2708-6011.2022-19-2-05

Neutrophil reactivity parameters in monitoring inflammation in rheumatoid arthritis

Veronika V. Zhelezko, Irina A. Novikova

Gomel State Medical University, Gomel, Belarus

Abstract

Objective. To assess the possibility of using blood neutrophil reactivity parameters to monitor the inflammatory process in patients with rheumatoid arthritis (RA).

Materials and methods. The parameters of the functional activity of neutrophils (netosis activity, absorbing capacity, production of active oxygen species and nitric oxide) were assessed in 61 patients with a verified RA diagnosis in the dynamics of inflammatory process.

Results. In the patients, the values of netosis parameters (NETSP30, NETCT30, NETSP150, NETST150) and oxygen-producing activity (NSTSP) are increased during the exacerbation period compared to the clinical improvement phase. The threshold values of the parameters were determined using the categorical regression analysis, on the basis of which an assessment scoring system of the activity of inflammation in patients with RA has been proposed. Conclusion. The parameters for evaluating the functional activity of neutrophils (NETSP30, NETST30, NETSP150, NETST150 and NSTSP) are additional laboratory criteria for assessing the activity of inflammation in Ra. Keywords: rheumatoid arthritis, activity of inflammatory process, neutrophil, functional properties Author contributions. Zhelezko V.V.: research concept and design, collecting material and creating a sample database, statistical data processing, reviewing publications on the topic of the article; Novikova I.A.: editing and discussion of data, checking critical content, approving the manuscript for publication. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest. Funding. The study was conducted without sponsorship.

© Железко В. В., Новикова И. А., 2022

Железко В. В., Новикова И. А. Параметры реактивности нейтрофилов в мониторинге...

2022;19(2):41-47 Проблемы здоровья и экологии / Health and Ecology Issues

For citation: Zhelezko VV, Novikova IA. Neutrophil reactivity parameters in monitoring inflammation in rheumatoid arthritis. Health and Ecology Issues. 2022;19(2):41-47. DOI: https://doi.org/10.51523/2708-6011.2022-19-2-05

Введение

Ревматоидный артрит является хроническим системным аутоиммунным заболеванием с волнообразным течением, характеризующимся сменой периодов обострения и ремиссии, но с неуклонным прогрессированием.

С целью клинической характеристики особенностей течения заболевания используют чаще всего выраженность суставного синдрома (количество болезненных и припухших суставов, утренняя скованность и др.), а среди лабораторных показателей — СОЭ и уровень С-реактивно-го белка. В связи с неоднозначностью изменений вышеуказанных параметров разработанные на их основе индексы активности заболевания (DAS28, SDAI) не имеют высокой клинической информативности и часто приводят к противоречивым результатам исследований [1]. Поэтому поиск современных биомаркеров активности заболевания является актуальной проблемой.

Известно, что одним из ключевых факторов воспалительного процесса являются нейтрофи-лы. Провоспалительные цитокины (ИЛ-1, ИЛ-6 и др.) и ферменты, вырабатываемые при активации нейтрофилов (в частности пептидил-ар-гинин-дезиминаза), запускают и поддерживают воспаление в синовиальной оболочке суставов через цитруллинирование белков. Поэтому появление аутоАТ к цитруллинованным белкам рассматривается как важный критерий диагностики РА. В лабораторной практике в рамках иммуно-граммы принято оценивать такие проявления реактивности нейтрофилов, как способность к поглощению (фагоцитоз) и выработке кислородных радикалов (тест восстановления нитросинего те-тразолия). У пациентов с РА выявлено угнетение способности к фагоцитозу, установлено наличие взаимосвязи между интенсивностью образования активных форм кислорода и активностью заболевания [2, 3]. Современными исследованиями продемонстрировано, что одной из форм проявления реактивности нейтрофилов является образование нейтрофильных внеклеточных ловушек (neutrophil extracellular traps — NETs, нетоз) [4]. Кроме участия в противоинфекцион-ной защите эти структуры способны инициировать аутовоспаление за счет присутствующих на фибриллярных структурах сетей ДНК, гистонов и других компонентов [4]. Выявлена взаимосвязь нетоза с клиническими и лабораторно-иммуно-

логическими особенностями РА [5]. Вышеизложенное позволяет предполагать, что параметры функционального статуса нейтрофилов крови могут рассматриваться в качестве потенциального объективного критерия оценки активности воспалительного процесса у пациентов с РА.

Цель исследования

Оценить возможность использования параметров реактивности нейтрофилов крови для мониторинга активности воспалительного процесса у пациентов с РА.

Материалы и методы

В исследование были включены пациенты (n = 61) с достоверным диагнозом РА (критерии ACR 1987 г. и ACR/EULAR 2010 г.; МКБ-10: М05, М06.0.) [6], проходившие лечение в ревматологическом отделении У «Гомельская областная клиническая больница» (2013-2015 гг.). Клиническая характеристика пациентов представлена в таблице 1.

Пациенты были обследованы и пролечены согласно протоколу, утвержденному приказом Министерства здравоохранения Республики Беларусь № 522 от 10 мая 2012 г. Дополнительно всем пациентам проведена оценка функционального статуса нейтрофилов крови. Материалом для исследования был лейкоконцентрат, полученный из периферической венозной крови, взятой с гепарином (5 мл, 20 ЕД/мл). Оценивались следующие параметры функциональной активности нейтрофилов: нетотическая активность в спонтанном и стимулированном варианте [7] в нашей модификации [5, 8, 9] с оценкой «витального» (при 30-минутном инкубировании) и «суицидального» (при 150-минутном инкубировании)

нетозов ^ЕГ^ ^СТ^ NET0n150 и NETCT150

соответственно); поглотительная способность с определением фагоцитарного индекса (ФИ) и фагоцитарного числа (ФЧ) (Маянский А. Н., 1989); образование активных форм кислорода в спонтанном (НСТСП) и стимулированном (НСТСТ) вариантах НСТ-теста (Baehner R. L., Nathan D. G., 1967); продукция оксида азота спектрофотоме-трическим методом (Crow J. P., 1999) по накоплению 3-нитротирозина в плазме в спонтанной (3-NTOT) и стимулированной (3-NTCT) пробах.

Пациенты были обследованы дважды: на момент поступления в стационар и на момент выписки (по достижении клинического улучшения).

Проблемы здоровья и экологии / Health and Ecology Issues

Группу сравнения составили условно здоровые доноры (71 человек, из них мужчин — 24, женщин — 47, возраст — 37 лет (34; 43)).

Статистическая обработка данных проводилась с использованием пакета прикладных программ «Statistica», 10.0 (StatSoft, USA) и IBM SPSS Statistics 23. Результаты выражали в виде Ме (25 %; 75 %), где Ме — медиана, 25 % — нижний квартиль, 75 % — верхний квартиль. Анализ проводился с использованием непараметрических методов статистической обработки: критерия Манна — Уитни (для

2022;19(2):41-47

2 несвязанных выборок), критерия Вилкоксона (в 2 связанных выборках). Оценка клинической информативности показателей функционального статуса нейтрофилов проводилась с помощью логистической регрессии. При интерпретации значений площади под ROC-кривой (Area Under Curve, AUC) использовали общепризнанную экспертную шкалу [10], где интервал AUC, равный 0,9-1,0, характеризует отличное качество модели; 0,8-0,9 — очень хорошее; 0,7-0,8 — хорошее; 0,6-0,7 — среднее; 0,5-0,6 — неудовлетворительное.

Таблица 1. Клиническая характеристика пациентов с РА, обследованных на момент поступления в стационар

Table 1. Clinical characteristics of the RA patients examined at the time of admission to hospital

Клиническая характеристика пациентов с РА (n = 61) абс. % Количество

Длительность заболевания, годы, Ме ^25„%; Q75%] 7,0 (4,0; 13,0)

Возраст Ме [^5%; 41,2 (36,0; 47,0)

Пол Женский 49 80

Мужской 12 20

I 19 31

Степень активности (DAS28-СОЭ) на момент поступления II 28 46

Параметр III 14 23

I 13 21

Рентгенологическая стадия по Штейнброкеру II 22 36

III 20 33

IV 6 10

1-й 11 18

Функциональный класс 2-й 35 57

3-й 15 25

Результаты и обсуждение

Наблюдение в динамике продемонстрировало, что на момент выписки из стационара отмечалось улучшение клинического состояния пациентов, а именно уменьшение утренней скованности, артралгии и локальных симптомов воспаления и улучшение общего самочувствия. В то же время лабораторные показатели (СОЭ и СРБ) продемонстрировали слабую динамику. На момент поступления в стационар значение СОЭ было повышено только у 45 (74 %) пациентов и составило 24,0 (14,0; 34,0) мм/ч, тогда как у 16 человек (26 %) параметр оставался в пределах референтного диапазона. Примечательно,

что только у 4 пациентов из 45 произошла нормализация параметра СОЭ на момент выписки из стационара. При этом статистически значимых различий в изменении показателя СОЭ в динамике воспаления нами выявлено не было (р > 0,005). Аналогичная ситуация наблюдалась и по значениям СРБ. Данное обстоятельство подтверждает низкую клиническую информативность этих параметров в отношении мониторинга активности воспаления при РА.

Результаты оценки функционального статуса нейтрофилов у наблюдаемых пациентов представлены в таблице 2.

Железко В. В., Новикова И. А. Параметры реактивности нейтрофилов в мониторинге... 2022;19(2):41-47 Проблемы здоровья и экологии / Health and Ecology Issues

Таблица 2. Функциональный статус нейтрофилов у пациентов с РА Table 2. Functional status of neutrophils in the RA patients

Показатель, единицы измерения Доноры (n = 71) Пациенты с РА (n = 61)

обострение клиническое улучшение

^СП» % 2,5 (2,0; 3,0) 9,0 (7,0; 11,0)*/** 7,0 (5,0; 9,0)*

N^™ % 4,0 (3,0; 5,0) 12,0 (10,0; 16,0)*/** 9,0 (6,0; 15,0)*

N^m^ % 5,0 (3,0; 7,0) 11,0 (11,0; 14,0)*/** 9,0 (7,0; 12,0)*

^СТ^ % 6,0 (5,0; 9,0) 15,0 (13,0; 19,0)*/** 12,0 (9,0; 17,0)*

НСТст % 11,5 (9,0; 15,0) 18,0 (14,0; 20,0)*/** 12,0 (9,0; 19,0)

НСТст, % 52,0 (46,0; 58,0) 42,0 (35,0; 52,0)* 41,0 (37,0; 50,0)*

3-NT^ (мМ/л)-1 13,7 (11,5; 16,2) 18,9 (16,5; 27,2)* 18,0 (13,3; 31,4)*

3-NTCT (мМ/л)-1 22,4 (20,1; 25,7) 18,0 (11,6; 23,7)* 15,4 (10,7; 23,1)*

ФИ, % 71,5 (67,0; 75,5) 59,0 (52,0; 63,0)*/** 60,0 (56,0; 66,0)*

ФЧ, ед. 7,0 (7,0; 8,0) 6,0 (5,0; 7,0)*/** 7,0 (5,0; 8,0)*

* Различия значимы относительно группы здоровых лиц (р < 0,050; и-критерий Манна — Уитни);

** Различия значимы в сравнении с группой пациентов в состоянии улучшения клинического статуса (р < 0,05; W-критерий Вилкоксона)

Примечание. Данные представлены в виде Ме (25 %; 75 %)

Из данных таблицы 2 видно, что у пациентов с РА изменения параметров функциональной активности нейтрофилов носили комплексный характер. Вне зависимости от активности воспалительного процесса у пациентов отмечались активация нетотических свойств

(РМЕТСПЗО < 0,°001; PNETCT30 < W001 РМЕТСП150 < 0,°001; PNETCT150 < 0,0001 с°°тветственн°

по сравнению с группой здоровых лиц), угнетение стимулированной кислород-продуцирующей активности (рНСТСТ < 0,0001), активация спонтанного NO-образования (p3_NTCn < 0,0001), снижение поглотительной способности нейтрофилов (рфИ < 0,0001). В то же время при обострении патологического процесса уровень нетоза был

значимо выше С\ЕТСП30 = 0,001; PNETCT30 = ^^ PNETCn150 = 0,02 PNETCT150 = 0,007), а ФагоМитоза —

значимо ниже (рФИ = 0,045) в сравнении с аналогичным показателем в период клинического улучшения. Дополнительно отмечалась интенсификация процессов спонтанного АФК-образова-ния (р = 0,017) — в 1,5 раза.

Учитывая выявленные различия в параметрах функциональной активности нейтрофилов в зависимости от выраженности воспаления, мы оценили возможность их использования для объективизации оценки активности воспалительного процесса. Для достижения данной цели мы использовали метод логистической регрессии, позволяющий рассчитать вероятность наступления события в зависимости от значений

независимых переменных — предикторов [11]. В качестве независимых переменных выступали параметры функциональной активности нейтрофилов, которые были значимо изменены в сравнении «обострение / клиническое улучшение» (NET ; NET ; NET ; NET ; ФИ и НСТ )

V СП30' СТ30' СП150' СТ150' СП''

а ожидаемого события — определение активности воспалительного процесса при РА. Значения параметров логистической регрессии представлены в таблице 3.

Из данных таблицы 3 видно, что диагностическая значимость исследуемых показателей в отношении активности воспалительного процесса при РА была приблизительно одинаковой. Высокая прогностическая значимость характерна для большинства из параметров, что следует из значений площади под кривой (AUC). Параметр ФИ мы удалили из дальнейшего включения в модельную систему оценки состояния РА, так как значение площади под кривой для нее близко к бесполезному классификатору (АиСфИ = 0,58).

Таким образом, наиболее значимыми параметрами для определения активности воспалительного процесса при РА оказались NETcr]30

NETCT30, NETcm50, NETCT150 и НСТСП.

На следующем этапе нашего исследования мы оценили значимость и важность каждого из предлагаемых параметров с помощью категориальной регрессии с оптимальным шкалированием. Результаты приведены в таблице 4.

Проблемы здоровья и экологии / Health and Ecology Issues 2022;19(2):41-47

Таблица 3. Значения параметров логистической регрессии Table 3. Values of the logistic regression parameters

Параметр, ед. измерения AUC ДИ -95 % ДИ +95 % p-value Чувствительность Специфичность

NETOT30 0,70 0,61 0,80 0,00003 92,0 % 46,0 %

NETCT30 0,72 0,62 0,82 0,0031 92,0 % 51,0 %

NETcrn50 0,74 0,64 0,84 < 0,001 77,0 % 67,0 %

NETCT150 0,71 0,61 0,81 0,00026 97,0 % 42,0 %

ФИ 0,58 0,48 0,69 0,00003 36,0 % 82,0 %

НСТСП 0,70 0,59 0,79 0,0005 87,0 % 58,0 %

Таблица 4. Результаты категориального регрессионного анализа и шкала баллов для определения активности воспалительного процесса при РА

Table 4. Results of categorical regression analysis and scaled scores for determining the activity of inflammatory process in RA

Параметр, ед. измерения Пороговое значение Результаты категориальной регрессии

бета-коэффициент значимость важность балл

^СП^ % 6,5 0,182 0,021 0,15 15

NETCT^ % 8,5 0,195 0,008 0,18 18

^СП^ % 10,5 0,215 0,001 0,18 18

NETCT1OT % 10,5 0,237 0,000... 0,21 21

НСТСП % 13,5 0,312 0,000... 0,28 28

Для каждого из показателей были определены пороговые значения (cut-off, оптимальный баланс специфичности и чувствительности), коэффициент важности и баллы (как абсолютное значение соответствующего коэффициента важности на 100 с округлением до целого числа). Для интерпретации полученных результатов исследования использовали следующий алгоритм. Значениям параметра, равным или выше порогового, присваивались указанные в таблице 4 баллы, а при значениях, ниже порогового, присваивалось значение 0, далее результаты суммировались (сумма баллов — СБРА). Выбор порогового значения для СБРА проводили с помощью бинарной логистической регрессии и построения ROC-кривых (рисунок 1).

На рисунке 1 видно, что предлагаемая модель обладает высокой прогностической способностью в определении активности воспалительного процесса при РА (значение AUC = 0,921).

Оптимальный порог отсечения СБРА составил 69,5: значение СБРА < 69,5 у пациента свидетельствует об отсутствии активного воспалитель-

ного процесса, значение СБРА > 69,5 указывает на наличие воспаления (чувствительность — 78,2 %, специфичность — 91,8 %).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что параметры оценки функциональной активности нейтрофилов могут служить дополнительными лабораторными критериями определения активности воспалительного процесса при РА.

Заключение

У пациентов с РА на фоне клинического улучшения сохранялась активность воспалительного процесса по лабораторным признакам. Это проявлялось в активации нетотиче-

ских св°йств (РМЕТСП30 < 0,°001; PNETCT30 < 0,0001

РмЕТСП150 < 0,°001; PNETCT150 < 0,0001 соответственно), угнетении стимулированного кислород-образования (рНСТСТ < 0,0001), активации спонтанного NO-образования (p3_NTCn < 0,0001), снижении поглотительной способности НГ (рфИ < 0,0001). Выявлены значимые различия по показателям 1^ЕТ-образования ^Т^ ^СП^

Железко В. В., Новикова И. А. Параметры реактивности нейтрофилов в мониторинге ...

2022;19(2):41-47

Проблемы здоровья и экологии / Health and Ecology Issues

NETCT150), ФИ и НСТСП у пациентов в период обострения и в фазе клинического улучшения.

Параметры нетотической активности нейтрофилов и теста оценки спонтанной АФК-про-дуцирующей способности (NETcr]30; NETCT30;

150; NETCT150 и НСТСП соответственно) могут

быть использованы в качестве дополнительных информативных лабораторных критериев определения активности воспалительного процесса при РА.

Методом категориальной регрессии с оптимальным шкалированием определены по-

роговые значения показателей ^ЕТСП30 > 6,5,

1^ТСТ30 > 8,5 1^ТСП150 > 10,5, >^Тст150 >10,5 и

НСТСП > 13,5) и их значимость в баллах (15, 18, 18, 21 и 28 соответственно). Общая оценка активности воспаления формировалась исходя из подсчета суммы баллов по каждому из пациентов. При сумме баллов СБРА < 69,5 у пациента констатировалось отсутствие активного воспаления, а при значениях СБРА > 69,5 — активный воспалительный процесс. Чувствительность предлагаемой модели составила 78,2 %, специфичность — 91,8 %.

Рисунок 1. ROC-кривая модели балльной оценки для РА. AUC, порог, чувствительность и специфичность определены по методу Йодена Figure 1. ROC-curve of the scoring assessment model for RA AUC, threshold, sensitivity and specificity are determined according to Yoden's method

Список литературы

1. Насонов ЕЛ, Олюнин ЮА, Лила АМ. Ревматоидный артрит: проблемы ремиссии и резистентности к терапии. Научно-практическая ревматология. 2018;56(3):263-271.

2. Herlitz-Cifuentes H, Vejar C, Flores A, Jara P, Bustos P, et al. Plasma from Patients with Rheumatoid Arthritis Reduces Nitric Oxide Synthesis and Induces Reactive Oxygen Species in A Cell-Based Biosensor. Biosensors (Basel). 2019 Feb 27;9(1):32. DOI: https://doi.org/10.3390/bios9010032

3. Arleevskaya MI, Gabdoulkhakova AG, Filina JV, Zabotin AI, Tsibulkin AP. Mononuclear Phagocytes in Rheumatoid Arthritis Patients and their Relatives - Family Similarity. Open Rheumatol J. 2011;5:36-44.

DOI: https://doi.org/10.2174/1874312901105010036

4. Kaplan MJ. Role of neutrophils in systemic autoimmune diseases. Arthritis Res Ther. 2013 Oct 2;15(5):219.

DOI: https://doi.org/10.1186/ar4325

5. Железко ВВ, Новикова ИА. Функциональные свойства нейтрофилов крови у пациентов с ревматоидным артритом. Проблемы здоровья и экологии. 2015;(3):50-54.

DOI: https://doi.org/10.51523/2708-6011.2015-12-3-11

6. Aletaha D, Neogi T, Silman AJ, Funovits J, Felson DT, et

al. 2010 rheumatoid arthritis classification criteria: an American College of Rheumatology/European League Against Rheumatism collaborative initiative. Ann Rheum Dis. 2010 Sep;69(9):1580-1588.

DOI: https://doi.org/10.1136/ard.2010.138461

7. Долгушин ИИ, Шишкова ЮС, Савочкина АЮ. Технологии определения и роль нейтрофильных внеклеточных ловушек в антимикробной защите. Вестник РАМН. 2010;(4):26-30.

8. Новикова ИА, Железко ВВ. Метод диагностики нарушений фагоцитарного звена иммунитета по оценке потенциальной бактерицидной активности нейтрофилов: инст-рукция по применению: утв. 18.06.2015, № 106-1014; М-во здравоохранения Республики Беларусь, Учреждение образования «Гомельский государственный медицинский университет». Гомель; 2015. 16 с.

9. Гусакова НВ, Гомоляко АВ, Железко ВВ. Уровень нетоза в зависимости от способа выделения нейтрофилов. Вестник Смоленской государственной медицинской академии. 2019;18(2):30-34.

10. Metz CE. Basic principles of ROC analysis. Seminars in Nuclear Medicine. 1978;8(4):283-298.

DOI: https://doi.org/10.1016/S0001-2998(78)80014-2

11. Ковалев АА, Кузнецов БК, Ядченко АА, Игнатен-ко ВА. Оценка качества бинарного классификатора в научных исследованиях. Проблемы здоровья и экологии. 2020;(4):105-113.

DOI: https://doi.org/10.51523/2708-6011.2020-17-4-15

Проблемы здоровья и экологии / Health and Ecology Issues 2022;19(2):41-47

References

1. Nasonov EL, Olyunin YuA, Lila AM. Rheumatoid arthritis: the problems of remission and therapy resistance. Nauchno-Prakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2018;56(3):363-271. (In Russ.).

2. Herlitz-Cifuentes H, Vejar C, Flores A, Jara P, Bustos P, et al. Plasma from Patients with Rheumatoid Arthritis Reduces Nitric Oxide Synthesis and Induces Reactive Oxygen Species in A Cell-Based Biosensor. Biosensors (Basel). 2019 Feb 27;9(1):32. DOI: https://doi.org/10.3390/bios9010032

3. Arleevskaya MI, Gabdoulkhakova AG, Filina JV, Zabotin AI, Tsibulkin AP. Mononuclear Phagocytes in Rheumatoid Arthritis Patients and their Relatives - Family Similarity. Open Rheumatol J. 2011;5:36-44.

DOI: https://doi.org/10.2174/1874312901105010036

4. Kaplan MJ. Role of neutrophils in systemic autoimmune diseases. Arthritis Res Ther. 2013 Oct 2;15(5):219.

DOI: https://doi.org/10.1186/ar4325

5. Zhelezko VV, Novikova IA. The functional properties of neutrophils in patients with rheumatoid arthritis. Health and Ecology Issues. 2015;(3):50-54. (in Russ.).

DOI: https://doi.org/10.51523/2708-6011.2015-12-3-11

6. Aletaha D, Neogi T, Silman AJ, Funovits J, Felson DT, et al. 2010 rheumatoid arthritis classification criteria: an American College of Rheumatology/European League Against

Rheumatism collaborative initiative. Ann Rheum Dis. 2010 Sep;69(9):1580-1588.

DOI: https://doi.org/10.1136/ard.2010.138461

7. Dolgushin II, Shishkova YS, Savochkina AU. Detection technologies and the role of neutrophil extracellular traps in antimicrobial protection. Bulletin of RAMN. 2010;(4):26-30. (in Russ.).

8. Novikova IA, Zhelezko VV. Method for diagnosing disorders of the phagocytic link of immunity by assessing the potential bactericidal activity of neutrophils: instructions for use: approved. 06.18.2015, No. 106-1014; Ministry of Health of the Republic of Belarus, Gomel State Medical University. Gomel; 2015. 16 p. (in Russ.).

9. Gusakova NV, Gomolyako AV, Zhelezko VV. Netosis level depending on the neutrophils isolation method. Vestnik of Smolensk State Medical Academy. 2019;18(2):30-34. (in Russ.).

10. Metz CE. Basic principles of ROC analysis. Seminars in Nuclear Medicine. 1978;8(4):283-298.

DOI: https://doi.org/10.1016/S0001-2998(78)80014-2

Kovalev AA, Kuznetsov BK, Yadchenko AA, Ignatenko VA. Assessment of the quality of a binary classifier in research. Health and Ecology Issues. 2020;(4):105-113. (in Russ.). DOI: https://doi.org/10.51523/2708-6011.2020-17-4-15

Информация об авторах / Information about the authors

Железко Вероника Владимировна, ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики, аллергологии и иммунологии, УО «Гомельский государственный медицинский университет», Гомель, Беларусь

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9440-2646 e-mail: [email protected]

Новикова Ирина Александровна, д.м.н., профессор, заведующий кафедрой клинической лабораторной диагностики, аллергологии и иммунологии, УО «Гомельский государственный медицинский университет», Гомель, Беларусь ORCID: https://orcid.org/0000-0003-2250-8318 e-mail: [email protected]

Veronika V. Zhelezko, Assistant Lecturer at the Department of Clinical Laboratory Diagnostics, Allergology and Immunology, Gomel State Medical University.

ORCID: https://orcid.org/0000-0002-9440-2646 e-mail: [email protected]

Irina A. Novikova, DMedSc, Professor, Head of the Department of Clinical Laboratory Diagnostics, Allergology and Immunology, Gomel State Medical University.

ORCID: https://orcid.org/0000-0003-2250-8318 e-mail: [email protected]

Автор, ответственный за переписку / Corresponding author

Железко Вероника Владимировна Veronika V. Zhelezko

e-mail: [email protected] e-mail: [email protected]

Поступила в редакцию / Received 17.02.2022 Поступила после рецензирования/Accepted 21.03.2022 Принята к публикации /Revised 21.06.2022