Abstracts Nationwide scientific forum of students 484 with international participation «STUDENT SCIENCE - 2020»
выработку карбапенемаз (ОХА-48, КРС, NDM-1), применялась ПЦР с электрофоретической детекцией.
Результаты: в ходе исследования установлено, что 65,22% (30 шт.) клебсиелл являются продуцентами NDM-1, относящихся к металло-бета-лактамазам класса В, которые обуславливают устойчивость ко всем представителям ß-лактамных антибиотиков, включая карба-пенемы и АМП, защищенные ингибиторами сериновых БЛ (клавуланат, сульбактам, тазо-бактам), кроме монобактамных соединений [2]. В 4,35 % (2шт.) резистентность была детерминирована сериновой ОХА-48 класса D, причем в одном случае наблюдалась её комбинация с NDM-1. У 32,61 % (15 шт.) искомых ß-лактамаз выявить не удалось. Стоит отметить, что КРС, обуславливающая устойчивость к пенициллинам, цефалоспоринам (I-IV поколений), карбапенемам и монобактамам также не была выделена ни у одного из исследуемых штаммов.
Выводы: 1. Среди изученных изолятов было выделено 2 типа ß-лактамаз — ОХА-48 и NDM-1. 2. Преобладающей детерминантой резистентности оказался ген blaNDM-1. 3. Необходим молекулярно-генетический мониторинг за носителями генов устойчивости к карбапенемам, входящих в состав мобильных генетических элементов, поскольку их внехромосо-мное расположение способствует быстрому распространению в многопрофильных стационарах.
Литература
1. Джиоев Ю.П., Злобин В.И., Саловарова В.П., Степаненко Л.А., Рева О.Н., Борисенко А.Ю., Перетолчина Н.П., Букин Ю.С. Анализ проблемы «»супербактерий»» и современные подходы к ее решению // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. 2019. № 4 (31).
2. Егоров А.М., Уляшова М.М., Рубцова М.Ю. Бактериальные ферменты и резистентность к антибиотикам // Acta Naturae (русскоязычная версия). 2018. № 4 (39).
оценка возможности использования наночастиц коллоидного серебра для инактивации Helicobacter pylori
Хасаншина З. Р.
Научный руководитель: д.м.н., доцент Богачева Наталья Викторовна
Кафедра микробиологии
Вятский государственный университет
Контактная информация: Хасаншина Зулейха Рамилевна — студентка 4 курса института биологии и биотехнологии. E-mail: [email protected]
Ключевые слова: Helicobacter pylori; наночастицы коллоидного серебра; хеликобактериоз; методы инактивации.
Актуальность: при производстве иммунобиологических препаратов, например, вакцин, используют различные методы инактивации, среди которых приоритетное место занимают те из них, которые способны подавить рост микроорганизма при этом не нарушить антигенные и им-муногенные свойства препарата. Существует огромное количество методов инактивации микроорганизмов, которые можно разделить на физические [1] и химические методы [2]. Несмотря на это, поиск новых более совершенных и эффективных инактиваторов сохраняет свою актуальность. Одним из перспективных вариантов является метод инактивации микроорганизмов с использованием наночастиц серебра [3].
Цель исследования: оценить инактивирующую способность наночастиц коллоидного серебра в отношении Helicobacter pylori.
Материалы и методы: в работе использовали культуру H.pylori, выращенную на колумбийском агаре с 5% сывороткой крови крупного рогатого скота. Идентификацию H. pylori осуществляли методом микроскопии мазков, окрашенных по Граму, по морфологи-
FORCIPE
VOL. 3 SUPPLEMENT 2020
ISSN 2658-4174
Материалы всероссийского научного форума студентов с международным участием «СТУДЕНЧЕСКАЯ НАУКА - 2020» 485
ческим признакам, биохимическим тестам, а также при помощи иммунохроматографиче-ской тест-системы («РЭД Helicobacter pylori», Россия). Культуру микроорганизма доводили до необходимой концентрации, используя стандарт мутности («МакФарланда», Индия) и 0,9% раствор NaCl с pH 7,4 ± 0,2. Для проведения инактивации применяли препарат на-ночастиц коллоидного серебра, полученный цитратным методом. Воздействие наночасти-цами коллоидного серебра осуществляли в микроаэрофильных условиях при 37 °С в течение 3 часов.
Результаты: на первом этапе работы провели подготовку культуры H.pylori. Для этого трехсуточную культуру микроорганизма доводили до концентрации 1 х 109кл./мл, после чего получали шесть десятикратных разведений. Далее в шесть пробирок с различными концентрациями H. pylori от 1 х 109кл./мл до 1 х 104кл./мл добавляли препарат наночастиц коллоидного серебра в соотношении 1: 1. В качестве контрольных проб использовали смесь культуры с NaCl в соотношении 1: 1. После трехчасовой инактивации культуры провели высевы из опытных и контрольных проб на колумбийский агар с сывороткой. При концентрации культуры 1 х 109кл./мл как в опытной, так и в контрольной пробе наблюдался рост сплошным газоном. Начиная с концентрации 1 х 108кл./мл было отмечено уменьшение числа колоний
H.pylori в опытных пробах по сравнению с контролями. В последней опытной пробе, где концентрация культуры составила 1 х 104кл./мл, рост не наблюдался. При оценке после инактивации выросших культур было отмечено изменение их биохимической активности из разведений, начиная с 1 х 107кл./мл до 1 х 105кл./мл. Положительная оксидазная и каталаз-ная активность после инактивации изменились, соответственно, на отрицательную и слабоположительную.
Выводы: 1. Показана возможность использования наночастиц серебра для инактивации H. pylori. 2. Установлено, что наночастицы коллоидного серебра проявляют большую инактиви-рующую способность при уменьшении концентрации H.pylori. 3. Для использования наноча-стиц коллоидного серебра с целью получения иммунобиологического препарата на основе H. pylori, целесообразно отработать методику инактивации с учетом концентрации как наноча-стиц, так и культуры, кратности воздействия наночастиц на культуру с целью сохранения антигенных и иммуногенных свойств. Литература
I. S. Gao, G. D. Lewis, M. Ashokkumar, Y. Hemar. Inactivation of microorganisms by low frequency high-power ultrasound: 1. Effect of growth phase and capsule properties of the bacteria // Ultrasonics Sonochemistry. 2014. Vol. 21, I. 1. P. 446-453.
2. Бредихин Д. А., Никонов С. Д., Чередниченко А. Г., Петренко Т. И., Корбут А. И. Фотодинамическая инактивация Mycobacterium tuberculosis метиленовым синим in vitro // туберкулез и болезни легких. 2019. Т. 97, № 7. С. 28-33.
3. M. Selvarani, P. Prema evaluation of antibacterial efficacy of chemically synthesized copper and zerovalent iron nanoparticles // Asian J. Pharm. Clin. Res. 2013. Vol. 6, I. 3. P. 223-227.
ВОЗБУДИТЕЛИ ХРОНИЧЕСКОГО ГНОЙНОГО СРЕДНЕГО ОТИТА
Ходкевич И. С.
Научный руководитель: к.б.н., доцент Сокурова Алла Михайловна Кафедра микробиологии, иммунологии и вирусологии
Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет
Контактная информация: Ходкевич Илья Сергеевич — студент 4 курса педиатрического факультета. E-mail: [email protected]
Ключевыеслова: гнойный среднийотит;возбудителигнойногоотита;бактериологическая диагностика отита; чувствительность к антибиотикам.
Актуальность: наличие хронического гнойного среднего отита у пациентов — фактор риска возникновения рецидивов заболевания, вызванного патогенными и условно патогенными
FORCIPE
ТОМ 3 СПЕЦВЫПУСК 2020
eISSN 2658-4182