CC BY
64
й01: 10.24411/0235-2451-2018-10512 УДК 633.13:632.4
ОЦЕНКА УСТОЙЧИВОСТИ ОВСА К СИБИРСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ КРАСНО-БУРОЙ ПЯТНИСТОСТИ БВ^ЕСИЗЕЕВА АУЕЖЕ
Н.А. НЕШУМАЕВА, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник (e-mail: nneshumaeva@ list.ru)
С.С. ГОЛУБЕВ, младший научный сотрудник
Красноярский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Федеральный исследовательский центр «Красноярский научный центр СО РАН», просп. Свободный, 66, Красноярск, 660041, Российская Федерация
Резюме. Исследования проводили с целью изучения устойчивости образцов овса мировой коллекции ВИР, селекционного материала и регенерантов, созданных в Красноярском научно-исследовательском институте сельского хозяйства, к местной сибирской популяции возбудителя красно-бурой пятнистости Drechslera avenae (Eidam.) Ito et Kuribay. Для выделения фитопатогена использовали листья с симптомами поражения болезнью, собранные на полях института в 2016-2017 гг. Впервые в Красноярском крае выделили в чистую культуру сибирские изоляты возбудителя красно-бурой пятнистости D. avenae: Dr 2.1, Dr 3.2, Dr 3.3, Dr 7.1, Dr 7.3, Dr 7.5. Все изоляты на натуральных питательных средах обладали макро- и микроморфологическими особенностями, характерными для вида D. avenae. Колонии серовато-оливковые, с крупными молочно-белыми выростами до 12 см высотой (иногда отсутствовали); субстратный мицелий темно-оливково-бурый, обратная сторона в середине черная, к краям оливково-зеленоватая до темно-бурой или сероватая под выростами. Изоляты Dr 3.2 и Dr 7.1 выделяли в среду кирпично-красный пигмент. Устойчивость образцов овса к сибирской популяции D. avenae определяли лабораторным методом. Из 140 генотипов овса коллекции ВИР и селекционного материала подразделений института 60 были восприимчивы к возбудителю болезни, 16 обладали высокой восприимчивостью. К устойчивым отнесен 41 образец (2-й тип реакции), 23 - к высокоустойчивым (1-й тип реакции). Лучшими генотипами были сорта Голец, Медведь, Valentin, Крепыш, Пегас, Пируэт, Аркан, Anak, AC Juniper из коллекции ВИР; Л410-09, Д-201, Д-332 - из конкурсного сортоиспытания Красноярского НИИСХ; 8 регенерантов (от сортов Голец - 1, Тюменский голозерный - 1, Тубинский -2, Саян - 2, Казыр - 2) и 3 исходных сорта (Голец, Саян, Тубинский).
Ключевые слова: овес, фитопатогенные грибы, красно-бурая пятнистость овса, устойчивость, Drechslera avenae. Для цитирования: Нешумаева Н.А., Голубев С.С. Оценка устойчивости овса к сибирской популяции возбудителя красно-бурой пятнистости Drechslera avenae // Достижения науки и техники АПК. 2018. Т. 32. № 5. С. 48-51. DOI: 10.24411/0235-2451-2018-10512.
Овес посевной (Avena sativa L.) - одна из наиболее важных зерновых сельскохозяйственных культур на планете, занимающая около 20 млн га пахотных земель. Зерно этой культуры - обязательная составная часть всех видов комбикормов. Высокая усвояемость питательных веществ и витаминов обеспечивает ему особую ценность для диетического и детского питания [1, 2].
Болезни и вредители остаются важнейшими факторами снижения урожая и качества зерна овса. В последние годы, вследствие влияния ряда факторов, фитосанитарная обстановка на полях России осложнилась. Несоблюдение севооборотов, насыщение их зерновыми культурами, поверхностная обработка
почвы, частые весенне-летние засухи способствуют широкому распространению грибных заболеваний. При этом к числу наиболее вредоносных относятся различные виды пятнистостей [3].
Красно-бурая пятнистость распространена повсеместно. Вредоносность болезни проявляется в снижении массы зерен в метелке, сильном поражении зерновок, уменьшении урожая (потери могут достигать 10...20 %). Возбудитель красно-бурой пятнистости - микромицет Drechslera avenae (Eidam.) Ito et Kuribay. (синоним Helmintosporium avenae Eidam.) из класса Deuteromycetes порядка Hypomycetales. Заболевание может проявляться с фазы кущения до созревания, поражая в первую очередь листья, колосковые и цветочные чешуи, иногда зерновки [4, 5, 6].
Лабораторные и полевой методы позволяют в сжатые сроки определить с высокой степенью достоверности устойчивость большого количества образцов к возбудителю болезни. В результате многочисленных работ, выполненных в рамках Европейского питомника по болезням овса EODN (European oat disease nursery), в том числе в нашей стране в Волго-Вятском, Северо-Западном регионах и др., выявлены наиболее устойчивые к патогену формы [7, 8].
Цель нашего исследования - провести скрининг устойчивости образцов овса из мировой коллекции ВИР и селекционного материала Красноярского НИИСХ к местной сибирской популяции Drechslera avenae.
Условия, материалы и методы. Работу проводили в Красноярском научно-исследовательском институте сельского хозяйства в 2016-2017 гг. Метеоусловия вегетационных периодов лет исследований характеризовались повышенной увлажненностью, что способствовало развитию грибных заболеваний, и существенно не различались между собой по интенсивности выпадения осадков и среднесуточной температуре воздуха (ГТК=1,5).
Материалом для скрининга устойчивости овса к возбудителю красно-бурой пятнистости послужили 140 образцов, из них 67 сортов коллекционного питомника (60 из коллекции ВИР), 28 из питомника конкурсного сортоиспытания отдела селекции, 37 регенерантов (семенное потомство) и их 8 исходных сортов. Регенеранты созданы в каллусной культуре in vitro в селекции на стрессоустойчивость к абиотическим (засуха - имитирована на среде полиэ-тиленгликолем, 16 % вес/объем; засоление - NaCl, 0,63 %) и биотическим факторам (F. sporotrichioides -добавляли в среду в виде культурального фильтрата) в отделе оценки селекционного материала.
Опробовано несколько методов выделения возбудителя [9, 10, 11, 12], среди которых как наиболее результативный был выбран и применен способ изолирования фитопатогена из сухих листьев овса. Для выделения гриба D. avenae в чистую культуру использовали листья растений овса с симптомами поражения, из которых вырезали образцы размером 3x5 мм, таким образом, чтобы захватить край пятна
и небольшой участок здоровой ткани, и помещали на смоченную 1 %-ным водным раствором лактозы фильтровальную бумагу. Через 2...3 дня наблюдений, при выявлении спороношения патогена, споры переносили с помощью иглы на питательную среду [13].
Для культивирования и получения обильного спороношения изолятов О. avenae использовали модифицированную среду Чапека и картофельно-декстрозный агар с добавлением 1 % пептона. Гриб выращивали в чашках Петри при комнатной температуре и естественном освещении. Идентификацию микромицетов осуществляли с помощью определителей [14, 15, 16].
Степень агрессивности изолятов оценивали по влиянию токсичности культуральной жидкости на всхожесть и длину проростков овса пленчатого сорта Казыр и голозерного сорта Голец. Для получения культурального фильтрата блок с культурой изолята помещали на жидкую среду Чапека и выращивали 14 дней при температуре 24 °С. Опыт проводили в трехкратной повторности по 100 зерен в каждой. Контролем служили семена, которые замачивали в воде и стерильной питательной среде. После суточного замачивания семена раскладывали на влажную фильтровальную бумагу, сворачивали ее в рулоны и проращивали в течение 7 дней при комнатной температуре [17].
Определение устойчивости овса к возбудителю красно-бурой пятнистости проводили лабораторным методом. Для этого семена изучаемых образцов проращивали на увлажненных ватных дисках в течение 7 суток под лампами дневного света (двенадцатичасовой фотопериод). Листья проростков разрезали на фрагменты 1,5.2,0 см в длину, помещали на фильтровальную бумагу, смоченную раствором 0,004 % бензимидазола. Для приготовления споровой суспензии гриба использовали смесь 8.10 суточных культур изолятов в водном растворе ТВИН 80
(0,0001 %). Каждый образец (по 3 листовые пластинки) инокулировали суспензией с титром 30000.50000 конидий/мл.
Тип реакции образцов определяли визуально на 6.7 сутки после заражения по шкале: 1 - точечные некрозы без хлорозов (высокая устойчивость); 2 - мелкие некротические пятна без хлороза или со слабым хлорозом (устойчивость); 3 - некротические пятна крупные, сливающиеся (восприимчивость); 4 - некроз и хлороз занимают весь отрезок листа (высокая восприимчивость).
Результаты и обсуждение. С целью обнаружения возбудителя красно-бурой пятнистости D. avenae проанализировали 30 образцов овса, собранных на полях Красноярского НИИСХ. Патоген D. avenae достаточно сложно выделить из пораженного материала ввиду его требовательности к условиям роста в первые несколько суток. Представители этого рода почти всегда ведут паразитический образ жизни. В культуре на средах обычно аспорогенны или образуют малое количество конидий (а при пересевах часто становятся полностью мицелиальными и белыми). В результате исследований из листьев, пораженных возбудителем, выделили 6 изолятов D. avenae: Dr 2.1, Dr 3.2, Dr 3.3, Dr 7.1, Dr 7.3, Dr 7.5.
Все они на натуральных питательных средах обладали макро- и микроморфологическими особенностями, характерными для вида Drechslera avenae (Eidam.) Ito et Kuribay. Колонии серовато-оливковые, с крупными молочно-белыми выростами до 1.2 см высотой (иногда отсутствовали); субстратный мицелий темно-оливково-бурый, обратная сторона в середине черная, к краям оливково-зеленоватая до темно-бурой или сероватая под выростами. Изоляты Dr 3.2 и Dr 7.1 выделяли в среду кирпично-красный пигмент.
В результате оценки уровня агрессивности патогена на сортах Казыр и Голец не выявлено полного
Таблица 1. Резистентность к возбудителю красно-бурой пятнистости регенерантов овса, созданных в культуре in vitro в процессе селекции на стрессоустойчивость к абиотическим факторам
Код регенеранта (условие создания) Исходная форма Тип реакции
Голец - исходный сорт 1
92 (соль) Голец 2
14 (засуха) Голец 2
18 (соль) Голец 2
Казыр - исходный сорт 3
89 (соль) Казыр 3
88 (засуха) Казыр 1
87 (засуха) Казыр 1
Саян - исходный сорт 1
20 (соль) Саян 1
16 (соль) Саян 1
4.15.6 (соль) Саян 2
93 (засуха) Саян 2
Сельма - исходный сорт 3
104 (нейтральный) Сельма 2
Тубинский - исходный сорт 1
3.16.6.2а (соль) Тубинский 1
101 (соль) Тубинский 1
3.6.4.8 (соль) Тубинский 2
Тюменский голозерный - исходный сорт 3
1.20.6.3 (нейтральный) Тюменский голозерный 1
1.2354 (нейтральный) Тюменский голозерный 2
95 (засуха) Тюменский голозерный 3
1.20.Б.2а (соль) Тюменский голозерный 3
1.22.5.3в (соль) Тюменский голозерный 3
3 (соль) Тюменский голозерный 3
Талисман - исходный сорт 4
102 (нейтральный) Талисман 4
ингибирования прорастания семян овса после воздействия культуральных фильтратов ни одного из 6-и выделенных изолятов D. avenae. Количество не проросших зерен обоих сортов во всех вариантах изменялось от 22 до 36 % и достоверно не различалось с соответствующими контролями. Также культуральные фильтраты исследуемых изолятов D. avenae не повлияли на рост и развитие проростков. Полученные данные могут свидетельствовать как о невысокой агрессивности изолятов, так и о необходимости более тщательного подбора условий культивирования токсигенного микромицета. По данным А. Берестец-кого, на образование фитотоксинов в искусственных условиях могут влиять самые разные, иногда трудно предсказуемые факторы: состав питательной среды и ее кислотность, сроки и условия культивирования микроорганизма [18]. В любом случае, необходимы дальнейшие исследования в этом направлении.
Споровую суспензию смеси 6 местных изолятов D. avenae, использовали для проведения скрининга овса по резистентности к красно-бурой пятнистости. В коллекцию источников устойчивости к региональным популяциям возбудителя отнесли образцы с 1-ым типом реакции (высокая устойчивость).
Из 67 сортов овса коллекционного питомника отдела селекции Красноярского НИИСХ 9 обладали высокой устойчивостью - Голец (Красноярский НИИСХ), Медведь (НИИСХ Северо-Востока), Valentin (Словакия), Крепыш (Беларусь), Пегас (Алтайский НИИСХОЗ), Пируэт (Ульяновск), Аркан (Украина), Anak (Швеция), AC Juniper (США); 17 были устойчивы; 29 - восприимчивы; 12 образцов характеризовались высокой восприимчивостью к D. avenae.
Из 28 сортообразцов конкурсного сортоиспытания овса красноярской селекции высокоустойчивыми и устойчивыми к красно-бурой пятнистости были более половины генотипов. Три номера (Л410-09, Д-201 и Д-332) имели 1-й тип реакции; 10 номеров - 2-ой тип; 13 - 3-й тип, 2 - 4-й тип реакции.
При оценке на устойчивость к возбудителю красно-бурой пятнистости 8-и исходных сортов ре-
генерантов овса выявили, что 3 из них (Голец, Саян и Тубинский) обладали высокой устойчивостью; 4 оказались восприимчивыми к фитопатогену (Казыр, Сельма, Тюменский голозерный, Золотой початок), 1 - высоковосприимчивым (сорт Талисман).
Изучение резистентности 21 образца семенного потомства регенерантов, созданных in vitro в процессе селекции на стрессоустойчивость к абиотическим факторам (табл. 1) показало, что 7 из них высокоустойчивы (1.20.6.3, 3.16.6.2а, 16, 20, 87, 88, 101), 14 - устойчивы, 14 - восприимчивы, 1 - высоковосприимчивый. Причем устойчивость регенерантов, как совпадает, так и отличается от исходного сорта и в лучшую, и в худшую сторону. Например, при типе реакции 3 (восприимчивость) у сорта Казыр, у его регенеранта 88, полученного в условиях индуцированной засухи, тип реакции равен 1 (высокая устойчивость), а у регенеранта 89, созданного в условиях засоления, одинаков с родительской формой (тип реакции 3). Регенеранты высокоустойчивого сорта Голец (тип реакции 1) показали 2 тип реакции. Резистентность регенерантов восприимчивого исходного сорта Тюменский голозерный (тип реакции 3) варьировала от 1 до 3.
Также проводили оценку на устойчивость к D. avenae регенерантов овса, полученных на средах, где в качестве стрессового биотического фактора использовали культуральный фильтрат F. sporotrichioides (метаболиты возбудителя фузариоза). Среди них только один регенерант 9.8 от сорта Голец оказался высокоустойчивым к возбудителю красно-бурой пятнистости. Остальные образцы в этой серии были или устойчивыми - 6 генотипов, или восприимчивыми -9 генотипов (табл. 2). Устойчивость исходных сортов и их регенерантов также отличалась и в отрицательную (сорта Саян, Сельма и их регенеранты), и в положительную сторону (сорт Талисман и его регенерант).
Таким образом, ни один из стрессовых факторов (засуха, засоление, метаболиты F. sporotrichioides), использованных при создании регенерантов, не влиял на уровень их поражения возбудителем красно-бурой
Таблица 2. Устойчивость регенерантов овса, полученных на среде с культуральными фильтратами, к возбудителю красно-бурой пятнистости D. avenae
Код регенеранта (условия получения) Исходная форма Тип реакции
Голец - исходный сорт 1
9.8 (нейтральный) Голец 1
2.3 (КФ Fusarium 20 %) Голец 2
2.7 (КФ Fusarium 40 %) Голец 3
Золотой початок - исходный сорт 3
6.9 (КФ Fusarium 20 %) Золотой початок 3
1.7 (КФ Fusarium 40 %) Золотой початок 3
4.8 (нейтральный) Золотой початок 3
6.9 (КФ Fusarium 20 %) Золотой початок 3
Казыр - исходный сорт 3
6.2 (КФ Fusarium 20 %) Казыр 3
3.8 (КФ Fusarium 20 %) Казыр 3
Саян - исходный сорт 1
3.4 (КФ Fusarium 20 %) Саян 2
Сельма - исходный сорт 3
3.9 (КФ Fusarium 20 %) Сельма 2
4.9 (нейтральный) Сельма 3
Талисман - исходный сорт 4
1.8 (КФ Fusarium 20 %) Талисман 3
Тубинский - исходный сорт 1
3.7.22 (нейтральный) Тубинский 2
2.9 (КФ Fusarium 40 %) Тубинский 2
Тюменский голозерный - исходный сорт 3
5.8 (КФ Fusarium 20 %) Тюменский голозерный 2
пятнистости, однако отбор in vitro способствовал выделению регенерантов с повышенной, по сравнению с исходным сортом, резистентностью, в том числе высокоустойчивых генотипов.
Выводы. Таким образом, в результате исследований были впервые в Красноярском крае выделены в чистую культуру сибирские изоляты возбудителя красно-бурой пятнистости D. avenae: Dr 2.1, Dr 3.2, Dr 3.3, Dr 7.1, Dr 7.3, Dr 7.5. Все они на натуральных питательных средах обладали макро- и микроморфологическими особенностями, характерными для вида D. avenae.
В результате скрининга резистентности 140 изученных образцов овса к D. avenae установлено,
что 60 генотипов были восприимчивы к возбудителю болезни, 16 обладали высокой восприимчивостью, 41 - устойчивый (2-й тип реакции). К высокоустойчивым (1-й тип реакции) отнесены 23 образца. Это сорта Голец, Медведь, Valentin, Крепыш, Пегас, Пируэт, Аркан, Anak, AC Juniper из коллекции ВИР; генотипы Л410-09, Д-201 и Д-332 из конкурсного сортоиспытания овса Красноярского НИИСХ; 8 регенерантов (от сортов Голец - 1, Тюменский голозерный - 1, Тубинский - 2, Саян - 2, Казыр - 2) и 3 исходных сорта (Голец, Саян, Тубинский). Перечисленные образцы рекомендованы к дальнейшему использованию в селекционных программах.
Литература.
1. Лоскутов И.Г. Овес (Avena L.). Распространение, систематика, эволюция и селекционная ценность. СПб: ГНЦ РФ ВИР, 2007. 336 с.
2. Поплавская Н.Г. Инфицированность зерновок овса грибами рода Fusarium в Республике Белоруссия // Проблемы микологии и фитопатологии в XXI веке: материалы международной научной конференции, посвященной 150-летию со дня рождения члена-корреспондента АН СССР, профессора Артура Артуровича Ячевского. СПб.: ООО «Копи-Р Групп», 2013. С. 215-217.
3. Лоскутов И.Г. Видовое разнообразие и селекционный потенциал рода Avena L.: дис. ...д-ра биол. наук. Санкт-Петербург. 2003. 502 с.
4. Фитосанитарная экспертиза зерновых культур. (Болезни растений): рекомендации /под ред. чл.-корр. Россельхозака-демии проф. С.С. Санина. М.: ФГНУ«Росинформагротех», 2002. 140 с.
5. Пересыпкин В.Ф. Атлас болезней полевых культур. Киев: Урожай, 1987. 256 с.
6. Никитина Е.В., Полозова Н.Л. Диагностика грибных пятнистостей зерновых культур в интенсивном земледелии: методические указания. Л.: ВИЗР, 1990. 74 с.
7. Петрова О.С., Афанасенко О.С. Методические рекомендации по диагностике и методам оценки устойчивости овса к возбудителям пятнистости листьев. СПб.: ВИЗР, 2003. 28 с.
8. Genetic basis of oat resistance to fungal diseases / J. Sebesta, H.W. Roderick, S. Stojanovic et al. // Plant Protection Science. 2000. Vol. 36. No 1. Pp. 23-38.
9. Петрова О.С., Афанасенко О.С. Методы определения вирулентности гриба Drechslera avenae и устойчивости сортов овса к красно-бурой пятнистости листьев // Вестник защиты растений. 2003. № 1. С. 63-66.
10. Armona Marcelo A., Zweegman Juan, Reis Erlei M. Detection and transmission of Drechslera avenae from oat seed// Fitopatol. bras. 2004. Vol. 29. No. 3. Pp. 319-321.
11. Nadia C. Langaro, Erlei M. Reis, Elmar L. Floss. Detection of Drechslera avenae in oat seeds // Fitopatol. bras. 2001. Vol. 26. No.4. Pp.745-748.
12. Yamaguchi K., Maiko M. A simple selective medium for the primary isolation of Bipolaris, Drechslera and Exserohilum species // BullteinMinamikyushuUniversity. 2010.40A. Pp. 50-58. [Электронныйресурс]. URL: http://www.nankyudai.ac.jp/library/pdf/40A055-058.pdf (дата обращения 8.05.2017).
13. Изучение генетических ресурсов зерновых культур по устойчивости к вредным организмам: методическое пособие / под ред. Радченко Е.Е. М.: Россельхозакадемия, 2008. 432 c.
14. Литвинов М.А. Определитель микроскопических почвенных грибов. Л.: «Наука», 1967. 303 с.
15. Watanabe T. Pictorial Atlas of Soil and Seed Fungi: Morphologies of Cultured Fungi and Key to Species Second Edition. Boca Raton: CRC Press, 2002. 486 p.
16. Хасанов Б.А. Определитель грибов-возбудителей «гельминтоспориозов» растений из родов Bipolaris, Drechslera и Exserohilum. Ташкент: Фан, 1992. 244 с.
17. Методы экспериментальной фитопатологии/под ред. В.И. Билай. Справочник. Киев: Наукова думка, 1982. 550 с.
18. Берестецкий А.О. Фитотоксины грибов: от фундаментальных исследований - к практическому использованию (Обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. 2008. Т. 44. № 5. С. 501-514.
EVALUATION OF OAT RESISTANCE TO SIBERIAN POPULATION OF A PATHOGENIC AGENT OF LEAF STRIPE DRECHSLERA AVENAE
N.A. Neshumaeva, S.S. Golubev
Krasnoyarsk Agricultural Research Institute, Federal Research Center "Krasnoyarsk Scientific Center of the SB of the RAS", prosp. Svobodnyi, 66, Krasnoyarsk, 660041, Russian Federation
Abstract. The aim of the research was to study the resistance of oat samples from the world collection of VIR, the breeding material and regenerants, developed in Krasnoyarsk Research Agricultural Institute to the local Siberian population of Drechslera avenae (Eidam.) Ito et Kuribay, the agent of leaf stripe of oat. The leaves with symptoms of morbid affection were collected in the fields of the Institute in 2016-2017 to isolate the phytopathogen. For the first time in Krasnoyarsk Krai, Siberian isolates of the agent of leaf stripe of oats were obtained: Dr 2.1, Dr 3.2, Dr 3.3, Dr 7.1, Dr 7.3, Dr 7.5. All isolates had macro- and micromorphological features characteristic for the species D. avenae on natural nutrition medium. Colonies are greyish-olive, with large milky-white outgrowths up to 1-2 cm in height (sometimes absent); the substrate mycelium is dark olive-brown, the reverse side is black in the middle, olive-green to the edges to dark-brown or grayish under the outgrowths. The isolates Dr 3.2 and Dr 7.1 release a brick-red pigment into the medium. Determination of the resistance of oat samples to the Siberian population of D. avenae was carried out by a laboratory method. Among 140 genotypes of oat from the VIR collection and the breeding materials of the institute's subdivisions, 60 samples were susceptible to the causative agent of the disease, and 16 samples were highly susceptible. Forty-one samples were determined as stable (the 2nd type of reaction) and 23 samples - as highly stable (the first type of reaction). So, the best genotypes were varieties Golets, Medved, Valentin, Krepysh, Pegas, Piruet, Arkan, Anak, AC Juniper from the collection of VIR; genotypes L410-09, D-201, D-332 from the competitive variety test of Krasnoyarsk Agricultural Research Institute; 8 regenerants (one from Golets variety, one from Tyumenskiy Golozernyy, two from Tubinskiy, two from Sayan, two from Kazyr) and 3 initial varieties (Golets, Sayan, Tubinskiy).
Keywords: oat; pathogenic fungi; leaf stripe of oat; resistance; Drechslera avenae.
Author Detalis: N.A. Neshumaeva, Cand. Sc. (Biol.), leading research fellow (e-mail: [email protected]); S.S. Golubev, junior research fellow.
For citation: Neshumaeva N.A., Golubev S.S. Evaluation of Oat Resistance to Siberian Population of a Pathogenic Agent of Leaf Stripe Drechslera avenae. Dostizheniya nauki i tekhnikiAPK. 2018. Vol. 32. No. 5. Pp. 48-51 (in Russ.). DOI: 10.24411/0235-2451-2018-10512.
