CC BY
34
Gorshkov A.S1., Kosykh A.A1., Utemov S.V2., Marchenkov A.A1.
1Kirov State Medical Academy, Kirov, 2Kirov Scientist Research Institute of Hematology and Blood Transfusion, Kirov.
THE ESTIMATION OF COMPARATIVE INFLUENCE OF HUMAN CHORIONIC GONADOTROPIN ON HEP-2 AND RD CELLS
We investigated comparative influence of human chorionic gonadotropin on Hep-2 and RD cells. It is shown, that hormone action on these cells differs, but as a whole it can be described as oppressing.
Key words: human chorionic gonadotropin, apoptosis, mitotic index, Нер-2 cells, RD cells.
Горшков А.С1., Косых А.А1., Утемов С.В2., Марченков А.А1.
ГБОУ ВПО Кировская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития, кафедра биологии, г. Киров,
2ФГБУН Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА России, г.Киров.
ОЦЕНКА СРАВНИТЕЛЬНОГО ВЛИЯНИЯ ХОРИОНИЧЕСКОГО ГОНАДОТРОПИНА НА КЛЕТКИ НЕР-2 И RD
Нами проведено исследование сравнительного влияния хорионического гонадотропина на опухолевые линии Нер-2 и RD. Показано, что действие гормона на данные клетки имеет свои отличия, но в целом его можно описать как угнетающее.
Ключевые слова: хорионический гонадотропин, апоптоз, митотический индекс, клетки Нер-2, клетки RD.
Онкогенез - одна из неразрешенных проблем современной медицины. В настоящее время проводится поиск веществ, способных подавлять пролиферацию опухолевых клеток, стимулировать апоптоз. Известно, что хорионический гонадотропин человека (ХГч) способен подавлять некоторые опухолевые клетки in vivo и клеточные линии in vitro, такие как клетки лимфосаркомы Плисса, карциномы молочной железы MCF-7, лейкозных клеток HL-60 [i,2,4,5]. На сегодняшний день неизвестно, корректно ли экстраполировать полученные данные на другие типы опухолевых клеток.
В работе использовали 2 опухолевые клеточные линии: карциномы человека Нер-2 и эмбриональной рабдомиосаркомы человека RD. ХГч тестировали в концентрациях i, 2 и 4 МЕ/мл культуральной среды. Для исследования влияния ХГч на указанные клеточные линии использовали апоптозный тест и определение митотического индекса (МИ) [3]. Статистическая обработка дан-
ных проведена с использованием пакета «Statistica 6.1», достоверность различий в группах оценивали по критерию Манна-Уитни.
МИ интактных клеток Нер-2 составил 3б,оо±2,48%о. В концентрации 1 МЕ/мл ХГч снижает МИ клеток Нер-2 на 22,5% (р=о,оі6). Повышение концентрации ХГч в среде до 2 МЕ/мл приводит к снижению МИ на 22,2% (р=о,о27), а до 4 МЕ/мл - на 36,5% от значений МИ клеток Нер-2 контрольной серии (р=о,ооі). Митотический индекс интактных клеток ЯБ составил
37,22±і,42%. Внесение в культуральную среду хорионического гонадотропина также привело к достоверному снижению митотической активности клеток ЯБ соответственно на 12,87%, (р=о,о2б) 16,37%, (р=о,оо6) и 18,91%. (р=о,ооі) Таким образом, ХГч проявляет антипролиферативное действие и в отношении карциномы Нер-2, и в отношении саркомы ЯБ, но больший эффект наблюдается в отношении клеток Нер-2. Результаты апоптозного теста представлены в табл.1
Таблица і
Соотношение апоптозных клеток культивируемых линий при воздействии ХГч
Серия эксперимента Культура Нер-2 Культура RD
Апоптозные клетки р * Апоптозные клетки р *
Контроль 6,іо±і,з6% - 4,і6±і,68 -
ХГч і МЕ/мл 10,49±2,02% 00 4 ,0 0, 6,37±і,39 0,354
ХГч 2 МЕ/мл 17,67±1,44% 0,000 7,і9±і,58 0,233
ХГч 4 МЕ/мл 7,72±і,99% 0,365 4,і3±і,07 0,75і
П р и м е ч а н и е: * - достоверность рассчитана по критерию Манна-Уитни при сравнении с кон-
трольной серией
На основании полученных данных можно сделать вывод, что ХГч оказывает на клетки Нер-2 не только антипролиферативный, но и проап-оптотический эффект. В отношении клеток ЯБ наблюдается только тенденция к повышению доли апоптозных клеток в пробах, но данные изменения статистически не достоверны.
Таким образом, влияние ХГч на опухолевые клетки различного генеза имеет свои особенности. На некоторые клетки, например Нер-2, его противоопухолевый эффект достаточно выражен, а в отношении других, например ЯБ, он мало эффективен. Возможно, эти различия связаны с их происхождением и наличием мембранных рецепторов или строением самих мембран.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Солопаева И. М. Хорионический гонадотропин в онтогенезе и онкогенезе (по материалам двух
научных открытий и одной гипотезы). Н.Новгород: Растр-НН, 2007. 282с. ил.42
2. Филатова Е.Н. Влияние хорионического гонадотропина на пролиферацию и апоптоз клеток у крыс-носителей лимфосаркомы Плисса: Автореф. дисс. ... канд. биол. наук. Н.Новгород. 2010. 23 с.
3. Apoptosis methods and protocols// Methods in molecular biology. [edited by Hugh J. M. Brady] Humana Press Inc., Totowa, NJ. 2004. Р.282.
4. Enhancement of radiosensitivity of the MCF-7 breast cancer cell line with human chorionic gonadotropin /Pond-Tor S., Rhodes R.G., Dahlberg P.E., Leith J.T., McMichael J., Dahlberg A.E.// Breast Cancer Res. Treat. 2002 Vol. 72(1) Р. 45-51
5. Human Chorionic Gonadotropin decreases prolif-
eration and invention of breast cancer MCF-7 cells by inhibiting NF-kB and AP-1 activation / Rao Ch.V.,
Li X., Manna S.K.,. Lei Z.M, Aggarwal B.B. //J. Biol. Chem. 2004. Vol.279(24). pp. 25503-25510
