CC BY
17
DOI 10.31588/2413-4201-1883-239-3-177-180
УДК 619:615.322
ОЦЕНКА РЕПРОДУКТИВНОЙ БЕЗОПАСНОСТИ СРЕДСТВА ИЗ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
Муравьева К.В. - аспирант
ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: средство из растительного сырья, белые крысы, беременность, плоды, эмбриотоксическое действие, тератогенное действие, постнатальное развитие
Keywords: herbal medicine, white rats, pregnancy, fetus, embryotoxic effect, teratogenic effect, postnatal development
Лекарственные средства, используемые животным в период беременности, могут привести к стойким морфологическим изменениям всего организма или отдельных органов формирующегося плода. В зависимости от периода воздействия тератогенных факторов различают: эмбрио-патии - пороки развития, возникшие от момента оплодотворения до начала формирования органов, и фетопатии - аномалии, возникшие в последующий период. Поэтому изучение репродуктивной токсичности фармакологических веществ является важной составляющей доклинических токсикологических исследований. Ранее нами были проведены доклинические исследования по определению общетоксических свойств и класса опасности средства, полученного из растительного сырья [2]. Средство было рассмотрено под лабораторным шифром «КВ» и по результатам исследований отнесено к 4 классу токсичности - вещества малоопасные.
Целью настоящих исследований являлось изучение эмбриотоксических и те-ратогенныых свойств средства под лабораторным шифром «КВ».
Для достижения цели была поставлена задача - дать оценку влияния средства «КВ» на эмбриогенез, антенатальное формирование плода и постнатальное развитие потомства белых крыс.
Материал и методы исследований. Разработанное средство после оценки фармакологических и токсикологических характеристик планируется использовать в животноводстве для повышения сохранности и продуктивности сельскохозяйст-
венной птицы. Исследования по влиянию средства под лабораторным шифром «КВ» на репродуктивные показатели были проведены на 24 белых крысах - самках четырехмесячного возраста с исходной массой тела 180-220 грамм. Для случки самок были подобраны 8 самцов белых крыс того же возраста с исходной массой 220-270 г. из расчета по одному самцу на три самки. Все животные были здоровыми, имели среднюю упитанность, хорошее развитие и крепкую конституцию. До проведения случки крыс выдерживали на карантине в течение 14 суток. Всего было сформировано две группы животных, одна контрольная и одна опытная, которых содержали в 4 клетках по 6 самок в каждой. В день случки самок подсаживали к самцам по три особи на одного самца в течение двух эстральных циклов. Первым днем беременности считали день обнаружения сперматозоидов из содержимого влагалища. Средство «КВ» вводили внутрь самкам опытной группы один раз в сутки в утренние часы на протяжении 19 дней с помощью зонда в дозе 2,5 мл/кг массы тела. На 20 день беременности часть самок подвергали эвтаназии под эфирным наркозом, после чего их вскрывали, извлекали плоды вместе с маткой и размещали в чашки Петри, промывали теплым раствором Рингера. При резекции рогов матки для установления возможного эмбриоток-сического действия учитывали такие показатели как: число живых и мертвых плодов, число желтых тел на одну самку, число мест имплантации, количество плодов на самку, пред - и постимплантационную
смертность, общую эмбриональную смертность [3, 4, 5]. После извлечения плодов из матки определяли массу плаценты, массу плода, диаметр плаценты, аногенитальный и краниокаудальный размеры, диаметр плаценты, возможные пороки развития, включая костную систему.
Другую часть самок белых крыс оставляли до родов. Принимали во внимание продолжительность беременности, число крысят в помете, краниокаудальный размер, массу тела сразу после рождения и в динамике в течение 28 суток, сроки отлипания ушной раковины, опушения, прорезывания резцов, открывания глаз и постна-тальную смертность [3, 4, 5]. Исследования проводили в соответствии с Международными рекомендациями Европейской конвенции «О защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных или иных научных целей» [1].
Результаты исследований. Исследованиями установлено, что ежедневное пероральное введение беременным самкам средства «КВ» в течение 19 суток не отразилось на поведенческих реакциях подопытных животных, крысы хорошо
Рисунок 1 - Желтые тела на поверхности яичника
При оценке параметров плацент и зародышей самок белых крыс установлено, что плоды мужского пола, как в контрольной, так и в опытной группе превосходили своих сородичей женского пола по массе тела у первых - на 8,5 %, а у вторых - на 6,2 % соответственно. Краниокаудальный размеры у самцов в обоих случаях оказался выше в контроле на 8,6 и у опытных
переносили исследуемое средство. Анализ экспериментального материала показал, что все самки, как в контрольной, так и в опытной группе были с живыми плодами, крыс с мертвыми плодами не выявлено.
При внешнем осмотре видимых аномалий не установлено. Число живых плодов на каждую самку составило в среднем по контрольной группе 9,17±0,18, в опытной - 9,67±0,54, что статистически не различимо. Количество яйцеклеток, поступивших в полость матки, оказалось в контроле 11,83±0,52, такое же количество оказалось и у особей опытной группы (11,33±0,78) (рисунок 1). По показателям предимплантационной гибели значимой разницы между группами не установлено, показатель смертности составил по контрольной группе 14,25±5,1 и опытной 13,62±3,96% соответственно (р>0,05). Показатели постимплантационной смертности эмбрионов между группами были также не достоверно различимыми. Общая эмбриональная смертность по контрольной группе составила 23,65±5,18 % и в опытной - 19,85±5,84 %, что также было достоверно не различимыми.
Рисунок 2 - Определение краниокаудального размера
аналогов на 5,4 %, при р>0,05 (рисунок 2). По диаметру плацент между группами различия не выявлены. Плаценты по массе, что в контроле, что в опыте были также равнозначными и статистически не различимыми. Учёт числа и характера аномалий плодов при использовании средства под лабораторным шифром «КВ» показал, что количество плодов в гнезде самок обеих
групп было равнозначным, просматриваемых визуально внешних аномалий не обнаружено. При вскрытии брюшной полости плодов в 2-х случаях в контроле и в 3-х в опыте отмечены кровоизлияния в брюшную полость, что составило к общему их числу 7,1 % у первых и 10,7 % у вторых. Наравне с этим надо отметить такие отклонения, как полнокровие сосудов тела в 2-х случаях в контроле и в 3-х в опыте. Наличие крови выявлено и в предсердиях плодов по три случая (10,7 %) в каждой группе, что позволяет нам их также отнести к числу живых. Также установлена такая аномалия, как отёк почек по одному случаю в обеих группах, что составляет 3,7 %. Других дефектов при осмотре не обнаружено. При изучении костной системы плодов белых крыс на фоне использования разработанного нами средства в герминальный, эмбриональный и фетальный периоды отклонений от нормы
При оценке некоторых физиологических показателей новорожденных крысят установлено, что отлипание ушной раковины у них происходило со вторых по четвертые сутки жизни. С 4-ых по 7-е сутки у них появлялся первичный волосяной покров, крысята начинали обрастать шерстью. Прорезывание резцов отмечали также в одинаковые после рождения сроки, что в среднем длилось около 8 суток. Ме-
по всем изучаемым параметрам не установлено. Для изучения постнатального развития потомства белых крыс, полученных при использовании растительного средства «КВ», были оставлены 50 % беременных самок.
Исследованиями установлено, что беременность у самок обеих групп проходила без видимых отклонений. За двое -трое суток до окота самки формировали гнездо из подстилки. Продолжительность беременности в контроле составила 22,67±0,23 и в опыте 22,5±0,24, не имея достоверных различий по срокам вынашивания плодов. Количество новорожденных крысят в помете у самок обеих групп оказалось также на одинаковом уровне при р>0,05. Длина туловища и масса тела крысят, как в контроле, так и в опыте оказались идентичными и соответствовала физиологическим значениям, указанным в литературе [4].
жду 12-18 сутками наблюдали открывание глаз. При изучении динамики роста между группами по росто-весовым показателям разница не установлена.
Молодняк обеих групп имел одинаковые параметры развития (рисунок 3). Постнатальная смертность по группам составила в контроле 0,27±0,19 % и в опыте 0,11±0,07, что не имело достоверных различий.
М 45
а
40
с
с 35
а 30
25
т 20
е 15
л 10
а 5
, 0
контрольная м опытная
5,3 5,4
10,3 9,8
16 16,5
26 26,1
39,339,6
1 7 14 21 28
Рисунок 3 - Динамика массы тела крысят, сутки
г
Заключение. Таким образом, на основании проведенных исследований можно заключить, что внутрижелудочное введение самкам белых крыс с 1 -го по 19-е сутки беременности средства «КВ» в дозе 2,5 мл/кг массы тела не оказывает эмбрио-токсического действия и не вызывает видимых аномалий плодов в пренатальном и постнатальном периоде развития.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Европейская конвенция «О защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» (ETS N 123) от 18 марта 1986 г. - режим доступа: https:// www.lawmix. ru/abro/11036
2. Муравьева, К.В. Изучение острой токсичности средства из растительных компонентов на белых крысах / К.В. Муравьева, Д.П. Хадеев, Ф.А. Медетханов //
Ученые записки КГАВМ. - 2017. - Т. 231(Ш). - С. 97 - 99.
3. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н.Миронова.- М.: Гриф и К, 2012. - Ч.1. - 944 с.
4. Трахтенберг, И.М. Проблемы нормы в токсикологии (современные представления и методические подходы, основные параметры и константы) / И.М. Трахтенберг, Р.Е. Сова, В.О. Шефтель, Ф.А. Оникиенко // Под общей редакцией И.М. Трахтенберга // М.: Медицина, 1991. - 204с.
5. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией Р.У. Хабриева // «Издательство «Медицина», 2005. - 832с.
ОЦЕНКА РЕПРОДУКТИВНОЙ БЕЗОПАСНОСТИ СРЕДСТВА ИЗ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
Муравьева К.В.
Резюме
В данной статье приводятся результаты по изучению влияния средства из растительного сырья на антенатальное и постнатальное развитие потомства белых крыс. Исследованиями установлено отсутствие эмбиотоксических и тератогенных свойств у рассматриваемого средства. Показано, что интрагастральное его введение один раз в сутки на протяжении 19 суток в дозе 2,5 мл/кг массы тела не приводит к морфологическим изменениям всего организма или отдельных органов формирующегося плода, включая костную систему. При оценке развития новорожденных крысят отклонений по изучаемым показателям не установлено.
EVALUATION OF REPRODUCTIVE SAFETY OF HERBAL PRODUCTS
Muravyeva KV.
Summary
This article presents the results of the study of the effect of funds from plant materials on antenatal and postnatal development of offspring of white rats. Studies have established the absence of embryotoxic and teratogenic properties of the drug in question. It is shown that its intragastric administration once a day for 19 days at a dose of 2.5 ml/kg of body weight does not lead to morphological changes in the entire body or individual organs of the emerging fetus, including the bone system. In assessing the development of newborn rats deviations on the studied indicators is not established.
