CC BY
12УДК 616.314.17-008.1-053.6/.7-037:575.191 DOI http://dx.doi.org/10.5281/zenodo.1307425
'Г. Ф. Белоклицкая, 'К. О. Горголь, 2С. П. Кирьяченко
ОЦЕНКА ПРОГНОСТИЧЕСКОЙ ЗНАЧИМОСТИ ПОЛИМОРФИЗМА I/D ГЕНА АСЕ У ЛИЦ МОЛОДОГО ВОЗРАСТА В ВОЗНИКНОВЕНИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ
ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА
1Национальнaя медицинская академия последипломного образования имени П.Л. Шупика, Киев, Украина; 2 ГУ «Референс--центр по молекулярной диагностике МЗ Украины»
Summary. ^iloklytska G. F., ^orgol K. O., 2Kyriachenko S. P. EVALUATION OF THE PROGNOSTIC SIGNIFICANCE OF I/D POLYMORPHISM OF THE ACE GENE IN YOUNG PEOPLE IN THE ONSET OF PERIODONTAL DISEASE. - 1 Shupyk National Medical Academy of Postgraduate Education, Kyiv, Ukraine; 2State Institution "Reference-centre for molecular diagnostic of Public Health Ministry of Ukraine"; e-mail: [email protected]. The Objective: to determine the prognostic significance of polymorphism of the ACE gene (I/D) in patients of young age (18-25 y.o.) in the onset and development of periodontal disease. Material and methods: Under supervision were 80 patients of a young age (18-25 y. o.). To carry out a molecular genetic study, from the internal surface of the cheek samples of buccal epithelium were extracted with buccal brushes, from which genomic DNA was isolated. The obtained samples were frozen and stored at -20 ° C. DNA for genotyping was extracted using a DNA-sorb-AM nucleic acid extraction kit in accordance with the manufacturer's protocol. Statistical processing of the results was carried out using the Microsoft Office Excel software package, as well as using MedCalc programm. To assess the correspondence of genotype frequencies to the expected values at the Hardy-Weinberg equilibrium and to compare the frequencies of genotypes and alleles between groups of patients and the comparison group, the x2 test was used. To carry out the correlation analysis, the Spearman correlation coefficient was used. Results: As a result of statistical processing of the data obtained, the association of the polymorphic variant D/D of the ACE gene was established (x2 = 10.91, p = 0.001, OR = 11.26 95% CI (2.40-52.75)) with development of CCG and GP , which indicates an 11-fold increase in the risk of developing these diseases compared to a group of individuals with intact periodontium. The protective effect of polymorphic variant I/I on the ACE gene was revealed (x2 = 7.46, p = 0.006, OR = 0.18 95% CI (0.06-0.58)). Bad habit - smoking was significantly more frequent in patients of Group II (p <0.05), both male and female. A statistically significant relationship of mean strength was found in patients of II group with the diagnosed GP between the frequency of the polymorphic variant of ACE gene and the presence of a bad habit - smoking. Conclusions: The possible role of polymorphic variants of ACE gene in the emergence and development of generalized periodontal diseases of the inflammatory (CCG) and inflammatory-dystrophic (GP) nature has been established.
Key words: generalized periodontitis, chronic catarrhal gingivitis, ACE, polymorphism.
Реферат. Белоклицкая Г. Ф., Горголь К. О., Кирьяченко С. П. ОЦЕНКА ПРОГНОСТИЧЕСКОЙ ЗНАЧИМОСТИ ПОЛИМОРФИЗМА I/D ГЕНА АСЕ У ЛИЦ МОЛОДОГО ВОЗРАСТА В ВОЗНИКНОВЕНИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА. Цель - определить прогностическую значимость полиморфизма гена АСЕ (I/D) у пациентов молодого возраста (18-25 лет) в возникновении и развитии заболеваний тканей пародонта. Под наблюдением находились 80 пациентов молодого возраста (18-25 лет). Для проведения молекулярно-генетического исследования с внутренней поверхности щеки с помощью буккальных щеточек были забраны образцы буккального эпителия, из
© Белоклицкая Г. Ф., Горголь К. О., Кирьяченко С. П.
которых была выделена геномная ДНК. В результате статистической обработки полученных данных была установлена ассоциация полиморфного варианта D/D гена АСЕ с развитием ХКГ и ГП, при этом выявлен протективный эффект полиморфного варианта I/I по гену АСЕ. Выявлена статистически значимая связь средней силы у пациентов 11-ой группы с диагностированным ГП между показателями частоты полиморфного варианта гена АСЕ и наличии вредной привычки - табакокурения. Установлена возможная роль полиморфных вариантов гена АСЕ в возникновении и развитии генерализованных заболеваний пародонта воспалительного (ХКГ) и воспалительно-дистрофического (ГП) характера.
Ключевые слова: генерализованный пародонтит, хронический катаральный гингивит, ACE, полиморфизм.
Реферат. Бшоклицька Г. Ф., Горголь К. О. Юр'яченко С. П. ОЦ1НКА ПРОГНОСТИЧНО1 ЗНАЧИМОСТ1 ПОЛ1МОРФ1ЗМУ I/D ГЕНА АСЕ В ОС1Б МОЛОДОГО В1КУ У ВИНИКНЕНН1 ЗАХВОРЮВАНЬ ТКАНИН ПАРОДОНТА. Мета
- визначити прогностичну значимють полiморфiзму гена АСЕ (I/D) у пащенпв молодого в^ (18-25 рошв) у виникненш та розвитку захворювань тканин пародонта. Щд спостереженням знаходилися 80 пащенпв молодого вшу (18-25 рошв). Для проведення молекулярно-генетичного дослвдження з внутршньо! поверхнi щоки за допомогою буккальних щiточок були забраш зразки буккального епiтелiю, з яких була видiлена геномна ДНК. В результата статистично! обробки отриманих даних була встановлена асощащя полiморфного варiанту D/D гена АСЕ з розвитком ХКГ i ГП, при цьому виявлено протективний ефект полiморфного варiанту I/I по гену АСЕ. Виявлено статистично значущий зв'язок середньо! сили у пацiентiв П-о! групи з дiагностованим ГП мiж показниками частоти полiморфного варiанту гена АСЕ i наявносп шюдливо1 звички -тютюнопалшня. Встановлена можлива роль полiморфних варiантiв гена АСЕ у виникненнi i розвитку генералiзованих захворювань пародонта запального (ХКГ) та запально-дистрофiчного (ГП) характеру.
Kto40bí слова: генералiзований пародонтит, хрошчний катаральний гiнгiвiт, ACE, полiморфiзм.
Актуальность темы. Заболеваемость тканей пародонта у лиц молодого возраста по-прежнему остаётся высокой [1]. Среди возможных факторов риска развития этой патологии
- генетические маркеры [2, 3]. Так, известно, что ген АСЕ кодирует аминокислотную последовательность ангиотензин-превращающего фермента (АПФ), который является важным физиологическим регулятором артериального давления и водно-солевого обмена. АПФ превращает циркулирующий в крови неактивный ангиотензин I в ангиотензин II, обладающий мощным гипертензивным действием за счет влияния на водно-солевой обмен, сердечно-сосудистую и другие системы организма [4].
Исследования последних лет показали, что содержание АПФ в организме человека обусловлено генетически [5]. В 16-м интроне гена выявлен инсерционно-делеционный (I/D) полиморфизм, заключающийся во вставке (инсерции, I) или потере (делеции, D) Alu -повтора, размером в 289 пар нуклеотидов [4]. Делеция Alu-повтора приводит к повышению экспрессии гена ACE и увеличению концентрации АПФ в крови, лимфе и тканях, что является фактором, повышающим риск развития сердечно-сосудистых заболеваний (инфаркта миокарда [6], гипертрофии левого желудочка [7], ишемической болезни сердца [8]), болезни почек [9], атеросклероза [10], болезни Альцгеймера [11]. Показано, что D-аллель связан с риском развития нефропатии у больных сахарным диабетом, а аллель I ассоциирован с повышенной устойчивостью организма к физическим нагрузкам [12]. Кроме того, известно, что ген ренин-ангиотензиновой системы АСЕ биологически и клинически значим в формировании фенотипических особенностей протекания большинства заболеваний перинатального периода [13], однако информация о возможном влиянии полиморфизма гена АСЕ (I/D) на состояние тканей пародонта практически отсутствует.
Поэтому, цель настоящего исследования - определить прогностическую значимость полиморфизма гена АСЕ (I/D) у пациентов молодого возраста (18-25 лет) в возникновении и развитии заболеваний тканей пародонта.
Материал и методы исследования. Под наблюдением находились 80 пациентов молодого возраста (18-25 лет), среди которых у 22 человек был диагностирован хронический катаральный гингивит (I группа), у 37 человек - генерализованный пародонтит начальной-I степени тяжести (II группа), а у 21 человека - интактный пародонт (III группа). Пародонтальный статус всех обследованных оценивали на основании объективных пародонтальных индексов и клинических симптомов: папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс - PMA, глубина пародонтального кармана (ПК), уровень потери эпителиального прикрепления (ПЭП), степень рецессии десны, патологическая подвижность зубов, выраженность кровоточивости десен, наличие экссудации из ПК. Гигиеническое состояние оценивали по индексу OHI-S. Диагностика заболеваний пародонта произведена в соответствии с классификацией Г.Ф. Белоклицкой [14].
Всем обследованным для получения дополнительной информации о наличии локальных факторов риска было предложено ответить на вопросы в специально разработанной анкете, а также подписать информированное согласие на проведение пародонтологического обследования.
Для проведения молекулярно-генетического исследования с внутренней поверхности щеки с помощью буккальных щеточек были забраны образцы буккального эпителия, из которых была выделена геномная ДНК. Полученные образцы замораживали и хранили при температуре -20°С. ДНК для генотипирования экстрагировали с использованием набора DNA-sorb-AM nucleic acid extraction kit в соответствии с протоколом производителя. Полученный супернатант, содержащий очищенную ДНК, использовали для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР проводилась с использованием реагентов фирмы Metabion (Германия) с соблюдением условий проведения реакции. Температурный режим амплификации обеспечивался амплификатором Perkin Elmer Gene Amp 2007 (США). Состояние амплификационных фрагментов анализировали в 2% агарозном геле (рис. 1).
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 20 M
Рис. 1 Электрофореграмма фрагментов гена АСЕ в 2% агарозном геле
Генотип II- образцы 1, 9,13, 15;
Генотип ID - образцы 2, 3,5,6, 11, 14, 20;
Генотип DD - образцы 4, 7,8, 10, 12,16-18;
М- маркер молекулярной массы
Статистическая обработка полученных результатов проведена с помощью пакета прикладных программ Microsoft Office Excel, а также при помощи программы MedCalc. Для оценки соответствия частот генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди -Вайнберга и сравнения частот генотипов и аллелей между группами больных и сравнения использовали критерий х2 [15]. Для проведения корреляционного анализа использовали коэффициент корреляции Спирмана [16].
Результаты исследования. В результате проведенного анализа анкет-опросников у части (28,75%) обследованных пациентов (возраст - 18-25 лет) была выявлена вредная привычка - табакокурение, которая достоверно чаще встречалась у пациентов II группы (р<0,05) как мужского, так и женского пола (Табл. 1).
Выявленный факт указывает на значение табакокурения в развитии более тяжелой патологии - генерализованного пародонтита (табл. 1).
Результаты молекулярно-генетического обследования 80 пациентов молодого возраста (18-25 лет) позволили выявить распределение частоты полиморфных вариантов гена АСЕ (рис. 2).
Таблица 1
Частота распространения среди обследованных пациентов вредной привычки -
табакокурения
Группы Мужчины Женщины
курят не курят курят не курят
I 14,29% 85,71% 6,67% 93,33%
II 72,73% 27,27% 34,62% 65,38%
III 33,33% 66,67% 13,33% 86,67%
II ID DD
Рис. 2. Распределение частот полиморфных вариантов исследованного гена АСЕ
В результате статистической обработки полученных данных была установлена ассоциация полиморфного варианта D/D гена АСЕ (х2 = 10,91, р = 0,001, OR= 11,26 95% CI (2,40-52,75)) с развитием ХКГ и ГП, что указывает на повышение риска развития этих заболеваний в 11 раз по сравнению с группой лиц с интактным пародонтом. При этом выявлен протективный эффект полиморфного варианта I/I по гену АСЕ (х2 = 7,46, р = 0,006, OR = 0,18 95% CI (0,06-0,58)) (табл. 2).
Таблица 2
Распределение частот полиморфных вариантов по гену ACE у пациентов с диагностированными заболеваниями тканей пародонта и в группе лиц с интактным
пародонтом
Полиморфный вариант Результаты статистического анализа
х2 OR 95% CI р
I/I 7,46 0,18 0,06-0,58 0,006
I/D 0,73 0,56 0,21-1,55 0,394
D/D 10,91 11,26 2,40-52,75 0,001
I 17,14 0,20 0,10-0,43 0,001
D 4,94 2,32-10,51
Дальнейший анализ полученных данных в зависимости от состояния тканей пародонта, позволил выявить достоверные различия в частотах исследуемых полиморфных вариантов. При сравнении данных, полученных у пациентов с диагностированным ГП и в группе лиц с интактным пародонтом была установлена повышенная частота полиморфного варианта D/D (х2 = 8,42, р = 0,004, OR = 10,03 95% CI (2,04-49,33)) с протективным действием полиморфного варианта I/I (х2 = 4,82, р = 0,029, OR = 0,26 95% CI (0,08-0,88)), тогда как статистически значимой разницы по частоте полиморфного варианта I/D по гену АСЕ определено не было (х2 = 0,75, р = 0,388, OR = 0,53 95% CI (0,18-1,58)).
При сравнении данных, полученных у пациентов с диагностированным ХКГ и в группе лиц с интактным пародонтом была установлена повышенная частота полиморфного варианта D/D (х2 = 9,54, р = 0,002, OR = 13,72 95% CI (2,54-74,13)) с протективным действием полиморфного варианта I/I (х2 = 6,82, р = 0,009, OR = 0,06 95% CI (0,01 -0,56)). Статистической разницы по частоте распределения полиморфного варианта I/D в исследуемых группах обнаружено не было (х2 = 0,19, р = 0,661, OR = 1,59 95% CI (0,47 -5,39)).
Таким образом, установлено значение частоты полиморфного варианта D/D в возникновении и развитии воспалительно-дистрофических заболеваний пародонта, наряду с протективным эффектом полиморфного варианта I/I.
В результате проведенного корреляционного анализа частоты полиморфного варианта гена АСЕ в зависимости от распространенности в разных группах (I-III) обследованных лиц молодого возраста (18-25 лет) вредной привычки - табакокурения, установлена статистически значимая связь средней силы (r=0,422; p=0,0093) только у пациентов II-ой группы с диагностированным ГП, тогда как у пациентов I-ой группы (ХКГ) и III-ей группы (интактный пародонт) статистически значимой связи выявлено не было (r=-0,0433; p=0,8484; r=0,366; p=0,1025, соответственно). При этом, вредная привычка -табакокурение достоверно чаще встречалась у пациентов II группы (р<0,05) как мужского, так и женского пола. Выявленный факт указывает на значение табакокурения в развитии генерализованного пародонтита (табл. 1).
Следовательно, наличие вредной привычки - табакокурение относится к факторам риска возникновения и развития воспалительно-дистрофических заболеваний пародонта.
Выводы. 1. У лиц молодого возраста (18-25 лет) в возникновении и развитии генерализованных заболеваний пародонта воспалительного (ХКГ) и воспалительно-дистрофического (ГП) характера установлена роль полиморфных вариантов гена АСЕ.
2. У пациентов молодого возраста (18-25 лет) с развитием ХКГ и ГП выявлена ассоциация полиморфного варианта D/D гена АСЕ (х2 = 10,91, р = 0,001, OR= 11,26 95% CI (2,40-52,75)), что указывает на повышение риска развития этих заболеваний в 11 раз по сравнению с группой лиц с интактным пародонтом.
3. У пациентов молодого возраста (18-25 лет) установлен протективный эффект полиморфного варианта I/I по гену АСЕ (х2 = 7,46, р = 0,006, OR = 0,18 95% CI (0,06-0,58) к развитию ХКГ и ГП.
4. У пациентов молодого возраста (18-25 лет) с диагностированным генерализованным пародонтитом установлена повышенная частота полиморфного варианта D/D по гену ACE (х2 = 8,42, р = 0,004, OR = 10,03 95% CI (2,04-49,33) по сравнению с группой лиц с интактным пародонтом.
5. У пациентов молодого возраста (18-25 лет) с интактным пародонтом установлено протективное действие полиморфного варианта I/I (х2 = 4,82, р = 0,029, OR = 0,26 95% CI (0,08-0,88) к развитию ГП.
6. У пациентов молодого возраста (18-25 лет) с диагностированным ХКГ выявлена повышенная частота полиморфного варианта D/D по гену ACE (х2 = 9,54, р = 0,002, OR = 13,72 95% CI (2,54-74,13) по сравнению с группой лиц с интакным пародонтом.
7. У пациентов молодого возраста (18-25 лет) с интактным пародонтом установлен протективный эффект полиморфного варианта I/I к возникновению хронического катарального гингивита (х2 = 6,82, р = 0,009, OR = 0,06 95% CI (0,01-0,56).
8. У пациентов молодого возраста (18-25 лет) с диагностированным ГП установлена статистически значимая связь средней силы (r=0,422; p=0,0093) с наличием вредной привычки - табакокурение, что позволяет ее считать одним из факторов риска развития воспалительно-дистрофических заболеваний пародонта.
Литература:
1. Борисенко А. В. Состояние стоматологического статуса у лиц молодого
возраста в зависимости от наличия заболеваний пародонта / А. В. Борисенко, И. А. Воловик // Современная стоматология. - 2016. - № 1. - С. 28-34.
2. Арутюнов С. Д. Генетические факторы предрасположенности к пародонтиту / С. Д. Арутюнов, А. Н. Петрин, Л. В. Акуленко, С. А. Боринская // Стоматолог. - М., - 2009. - № 4. - С. 32-37.
3. Laine M. L. Gene polymorphisms in chronic periodontitis / M. L. Laine, B. G. Loos, W. Crielaard // International journal of dentistry. - 2010. - P. 1-22.
4. Sayed-Tabatabaei F. A. ACE polymorphisms / F. A. Sayed-Tabatabaei, В. А. Oostra, А. Isaacs, С. М. van Duijn, J. C. Witteman // Circ Res. - 2006. - Vol. 98, № 9. - P. 11231133.
5. Ройтберг Г. Е. Влияние полиморфизма гена ангиотензинпревращающего фермента на формирование синдрома инсулинорезистентности / Г. Е. Ройтберг, Ж. В. Дорош, Е. В. Аксенов, Т. И. Ушакова // Клиницист. - 2013. - № 2. - С. 14-17.
6. Sydorchuk L. P. The Lipid Profile among Patients with Myocardial Infarction Depending on Allelic State of the Genes ACE (I / D) and ENOS (T894G) / L. P. Sydorchuk, J. V. Ursuliak // European Journal of Medicine. - 2014. - Vol. 6, № 4. - Р. 260-268.
7. Роль полиморфных вариантов гена ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ) в формировании различных типов ремоделирования миокарда у больных хронической сердечной недостаточночтью / А. Э. Пушкарева, Р. И. Хусаинова, Р. Р. Валиев, [и др.] // Медицинская генетика. - 2016. - № 6. - С. 11-18.
8. I/D полиморфизм гена ангиотензинпревращающего фермента у больных ИБС разного пола и возраста / Т. Ю. Реброва, Э. Ф. Муслимова, Н. В. Панова [и др.] // Российский кардиологический журнал. - 2014. - №. 10 (114). - С. 77-81.
9. Семак А. Н. Вклад полиморфных форм гена ACE в генез рака почки / А. Н. Семак, Е. В. Снытков, Е. Г. Смирнова, С. Б. Мельнов // Сахаровские чтения 2017 года : экологические проблемы XXI века : материалы 17-й международной научной конференции, 18-19 мая 2017 г., г. Минск, Республика Беларусь : в 2 ч. под ред. д-ра ф.-м. н., проф. С. А. Маскевича, д-ра с.-х. н., проф. С. С. Позняка. - Минск : ИВЦ Минфина, 2017. - Ч. 1. - С. 215-216.
10. Renin-angiotensin-aldosterone polymorphisms and coronary artery disease: detection of gene-gene and gene-environment interactions / En-Zhi Jia, Zhen-Xia Xu, Chang-Yan Guo et al. // Cell Physiology and Biochemistry. - 2012. - Vol. 29. - P. 443-452.
11. Мовсесян А. Профилактика возрастзависимых заболеваний. Факторы, снижающие риск возникновения: рака, болезней Альцгеймера, Паркинсона, возрастных нарушений зрения, сердечно-сосудистой, опорно-двигательной системы... / А. Мовсесян // Москва: Центрполиграф, 2018. - 471 с.
12. Роль полиморфизма I/D гена ACE в развитии фибрилляции предсердий / А. В. Кускаева, С. Ю. Никулина, А. А. Чернова, Н. В. Аксютина [и др.] // Кардиология. - 2018. - № 58 (2). - С. 5-9.
13. Коробка О. В. Вплив гешв ренш-ангютензиново! системи на розвиток асфжсп та и переб^ у доношених новонароджених / Вютник проблем бюлогп i медицини. -2016. - Випуск 1, Том 1 (126). - С. 179-184.
14. Белоклицкая Г. Ф. Современный взгляд на классификации болезней пародонта / Г. Ф. Белоклицкая // Современная стоматология. - 2007. - № 3. - С. 59-64.
15. Аульченко Ю. Закон Харди-Вайнберга / Ю. Аульченко // Генетика популяций. - 2012. - 30 с.
16. Кобзарь А. И. Прикладная математическая статистика. — М.: Физматлит, 2006. — 626-628 с.
References:
1. Borisenko A. V., Volovik I. A. Dental status in young people, depending on the presence of periodontal disease./ Sovremennaya stomatologiya. 2016;1:28-34.
2. Arutyunov S. D., Petrin A. N., Akulenko L. V, S. A. Genetic factors of predisposition to periodontitis. Stomatolog. M., 2009;4:32-37.
3. Laine M. L., Loos B. G., Crielaard W. Gene polymorphisms in chronic periodontitis. International journal of dentistry. 2010:1-22.
4. Sayed-Tabatabaei F. A., Oostra V A., Isaacs A., S. M. van Duijn, Witteman J. C. ACE polymorphisms. Circ Res. 2006;9(98):1123-1133.
5. Roytberg G. E., Dorosh Zh. V, Aksenov E. V, Ushakova T. I. Influence of angiotensin-
converting enzyme gene polymorphism on the formation of insulin resistance syndrome./ Klinitsist.2013;2:14-17.
6. Sydorchuk L. P., Ursuliak J. V The Lipid Profile among Patients with Myocardial Infarction Depending on Allelic State of the Genes ACE (I / D) and ENOS (T894G). European Journal of Medicine. 2014; 4(6):260-268.
7. Pushkareva A. E., Husainova R. I., Valiev R. R., Arutyunov G. P., Husnutdinova E. K. The role of polymorphic variants of the gene of the angiotensin converting enzyme (ACE) in the formation of various types of myocardial remodeling in patients with chronic cardiac insufficiency. Meditsinskaya genetika. 2016; 6:11-18.
8. Rebrova T. Yu., Muslimova E. F., Panova N. V., Serebryakova V N. i dr I/D polymorphism of the angiotensin-converting enzyme gene in patients with CHD of different sex and age. Rossiyskiy kardiologicheskiy zhurnal. 2014;10(114):77-81.
9. Semak A. N., Snyitkov E. V, Smirnova E. G., Melnov S. B. The contribution of polymorphic forms of the ACE gene to the genesis of kidney cancer. Saharovskie chteniya 2017 goda : ekologicheskie problemyi XXI veka : materialyi 17-y mezhdunarodnoy nauchnoy konferentsii, 18-19 maya 2017 g., g. Minsk, Respublika Belarus : v 2 ch. pod red. d-ra f.-m. n., prof. S. A. Maskevicha, d-ra s.-h. n., prof. S. S. Poznyaka. Minsk : IVTs Minfina, 2017:- Ch. 1:215-216.
10. En-Zhi Jia, Zhen-Xia Xu, Chang-Yan Guo et al. Renin-angiotensin-aldosterone polymorphisms and coronary artery disease: detection of gene-gene and gene-environment interactions. Cell Physiology and Biochemistry. 2012; 29:443-452.
11. Movsesyan A. Prevention of age-related diseases. Factors that reduce the risk of cancer, Alzheimer's, Parkinson's, age-related visual impairments, cardiovascular, musculoskeletal system. Moskva: Tsentrpoligraf; 2018:471.
12. Kuskaeva A. V., Nikulina S. Yu., Chernova A. A., Aksyutina N. V. i dr. The role of I/D polymorphism in the ACE gene in the development of atrial fibrillation. Kardiologiya. 2018;58(2):5-9.
13. Korobka O. V Influence of the renin-angiotensin system genes on the development of asphyxia and its progress in termed newborns. Vistnikproblem blologiyi i meditsini. 2016; Vipusk 1, Tom 1 (126):179-184.
14. Beloklitskaya G. F. Modern view on the classification of periodontal diseases. Sovremennaya stomatologiya. 2007;3:59-64.
15. Aulchenko Yu. Hardy-Weinberg law. Genetika populyatsiy; 2012:30.
16. Kobzar A. I. Applied Mathematical Statistics. M.: Fizmatlit; 2006:626-628.
Робота надшшла в редакщю 15.05.2018 року.
Рекомендована до друку на заадант редакцшно! колегй тсля рецензування
