CC BY
35
тактных особей), миелоцитов 0,Э59±0,05х03/мкл (первоначально 0,596±0,03х103/мкл) и метамиелоцитов 0,363±0,05х103/мкл (исходно 0,630±0,04х103/мкл).
В 3-й опытной серии в качестве радиомиелопротектора был использован оксипиридин, схема вливаний которого полностью соответствовала таковой для мексидола. В крови подопытных животных признаки гипорегенераторной анемии появились на 8-е сутки после облучения - снижение количества гемоглобина от 122,53±2,04 г/л и ретикулоцитов от 0,211±0,06х105/мкл до 0,060±0,002х105/мкл. В последующие недели наблюдения анемия углублялась. На 15-е сутки после радиации появился дефицит эритроцитов (3,71±0,06х106/мкл против 5,13±0,05х106/мкл в начале опыта), ретикулоциты в пробах не обнаруживались. В конце опыта число эритроцитов в крови составило 3,47±0,04х106/мкл, ретикулоцитов 0,035±0,002х105/мкл, концентрация гемоглобина равнялась 81,43±2,02 г/л. В первые 2 недели после облучения была тромбоцитопения до 30,00±2,58х103/мкл, во второй половине опыта - 70,00±2,58х103/мкл. Период глубокой лейкопении (0,70±0,06х103/мкл) продолжался 2 недели, на 22-е сутки эксперимента следовал абортивный подъем показателя до 10,50±0,14х103/мкл, спустя еще неделю - повторное снижение до 3,84±0,07х103/мкл. Динамика отдельных разновидностей лейкоцитов полностью соответствовала схеме «постлучевая цитопения
- транзиторное повышение - повторный спад показателей».
В костном мозге после воздействия ионизирующей радиации на фоне вливаний оксипиридина в первые 2 недели отмечалась миелокариоцитопения до 2000,00±129,09/мкл, затем временное увеличение показателя до 14000,00±129,09/мкл, и в конце опыта вторичное снижение до 90,00±471,40/мкл. Количество мегакариоцитов через 1 неделю после повреждения уменьшилось от 138,59±8,14/мкл до 29,38±0,95/мкл, в конце 2-й и 3-й недели -87,50±2,95/мкл, в конце опыта - 68,75±2,95/мкл. Шло пострадиационное торможение митотической активности, которое сохранялось на протяжении опыта. Послелучевая миелокариоцитопе-ния была настолько глубокой, что оказалось невозможным вывести миелограмму - в мазках отсутствовали клетки. На 22-е сутки, в период абортивного подъема, отмечался дефицит палочкоядерных, сегментоядерных нейтрофилов и эозинофилов. В конце опыта (29-е сутки после облучения) число миелокариоци-тов сократилось до 90,00±471,40/мкл за счет спада численности всех разновидностей миелокариоцитов, но наибольшие потери касались эритрокариоцитов - лейкоэритробластическое соотношение в конце опыта равно 3,01/1,00 (1,64/1,00 в начале опыта).
Сравнительная характеристика радиомиелопротекторной активности изучаемых препаратов приведена в табл. 2.
Мексидол при применении его в указанном режиме, оказывает радиомиелопротекторное действие при экспериментальной острой лучевой болезни у кроликов, проявляющееся в уменьшении глубины и продолжительности постлучевых анемии и лейкопении, защите тромбоцитарного звена клеток крови, устранении пострадиационного блока митозов среди миелокариоцитов костного мозга, защите и стимуляции ростков кроветворения. Производное 3-оксипиридина этилметилгидроксипиридина гемисукци-нат в указанном режиме введения не способствует коррекции пострадиационных нарушений кроветворения и клеточного состава крови в эксперименте у кроликов.
Литература
1. Воронина Т.А. и др. // Мат-лы IX Всерос. нац. конгр. «Человек и лекарство».- М.- 2002.
2. Власов А.П. и др. // Эксперим. и клин. фармакол.- 2003.-№1.- С.40-45.
3. Волчегорский И.А. и др. // Клин. медицина.- 2004.- №11.-С.31-35.
4. Дюмаев К.М. и др. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологии ЦНС.- М.,- 1996.- С.52.
5. Белоусова А.К. // Эксперим. онкол.- 1996.- Т.18.- С. 197.
6. Гусев Е.И., Скворцова В.И. // Ишемия головного мозга.-М.: Медицина.- 2002.
7. Воронина Т.А., Середенин С.Б. // Эксперим. и клинич. фармакол.- 2002.- №5.- С.4-17.
8. Климов Ю.В. Производные 3-оксиперидина в профилактике нагноений и стимуляции заживлений п/операционных ран в гинекологической практике: Автореф. дис.. .к.м.н .-М., 2000.
9. Булавкин Ю. В. и др. // Рос. онкол. ж.- 2000.
ANTIOXIDANT CORRECTION OF POSTRADIATION DISTURBANCES OF HEMOPOIESIS AND CELL’S COMPOSITION IN RABBITS IN EXPERIMENT
L.V. IONITCHEVA, L.D. SMIRNOV, I.N. KUSTIKOVA, N.Y. MIKULYAK, A.I. ZINOV’EV
Summary
The application of Mexydol affects upon radiomyeloprotective action at experimental acute radiation sickness in rabbits, revealing to decreasing of depth and duration postradiation anemia and leuco-penia, to defense thrombocytic section of bloodscells, to postradiation bloc elimination between myelocariocytes of spinal brain and to stimulation of hemopoiesis.
Key words: postradiation anemia and leucopenia
УДК 615.324:616.153.922:519.22/.25
ОЦЕНКА НАРУШЕНИЙ МЕЖСИСТЕМНОЙ КООПЕРАЦИИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ДИСЛИПИДЕМИИ И СПОСОБЫ ИХ КОРРЕКЦИИ
Т.И. ВИТКИНА*, Ю.К. КАРАМАН*, С.П. КАСЬЯНОВ**, Е.Г. ЛОБАНОВА, Т.П. НОВГОРОДЦЕВА*
Для коррекции дислипидемии использовали липиды гепатопанкреа-са камчатского краба, обладающие липидкорригирующими, антиок-сидантными и противовоспалительными свойствами, снижающие напряженность функционирования систем организма крыс.
Алиментарная дислипидемия (ДЛП) характеризуется комплексом нарушений, включающих в себя помимо повышения уровня липидов, интенсификацию их перекисного окисления (ПОЛ), изменение функционирования иммунной и антиокси-дантной систем (АОС). Данные процессы вызывают отклонения в работе иммунитета, главным образом, за счет патологического изменения состава клеточных мембран иммунокомпетентных клеток (ИКК) [1, 3, 5]. В свою очередь, основные сигнальные молекулы иммунной системы - цитокины - могут индуцировать существенные изменения в липидном метаболизме [3, 6]. Цито-кины усиливают синтез печеночного холестерина путем индукции экспрессии гена ГМГ-КоА-редуктазы и снижения катаболизма холестерина в печени; ингибируют холестерол-7-альфа-гидроксилазу - ключевой энзим в синтезе желчных кислот [6, 10, 14]. ДЛП характеризуется как внутрисистемными нарушениями, так и сбоем коммуникативно-регуляторных механизмов. Коррекция ДЛП должна включать мероприятия, направленные на регуляцию кооперации основных этиозависимых систем.
Для профилактики и лечения ДЛП могут использоваться препараты из морских гидробионтов, содержащие ю-3 полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК). Известно, что ПНЖК ю-3 оказывают модулирующее влияние на структурнофункциональную организацию клеточных мембран, активность мембраносвязанных ферментов и биосинтез эйкозаноидов [1, 4]. Морские гидробионты содержат ряд др. специфических липидных компонентов, имеющих высокую биологическую активность. Одно из таких веществ - алкил-диацилглицериды (АДГ). Анализ литературных источников [2, 12] и собственных данных [7] показал, что АДГ влияют на гемопоэз, обладают антиокси-дантными и иммуномодулирующими свойствами. Необходимы исследования, позволяющие установить характер комплексного воздействия многокомпонентных природных препаратов, как на функционирование отдельных систем, так и на их кооперацию.
Цель работы - изучение нарушений взаимодействия ли-пидтранспортной, антиоксидантной, иммунной систем при формировании алиментарной дислипидемии у крыс и возможность их коррекции липидами из гепатопанкреаса камчатского краба.
Материалы и методы. Исследовалась функциональная активность липидной фракции гепатопанкреаса камчатского краба Paralithodes camtschatica, содержащей 10% алкил-диацилглицеридов, 10% ПНЖК ю3 и комплекс биоантиоксидантов (альфа-токоферол, бета-каротин). Эксперимент выполнен на
ВФ ГУ ДНЦ ФПД СО РАМН НИИ медицинской климатологии и восстановительного лечения, 690105, г. Владивосток, ул. Русская 73-г
ФГУП Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр, 690950, г. Владивосток, ГСП, пер. Шевченко, 4, тел. (4232) 40-08-01
крысах-самцах линии Вистар. Интактная группа (10 особей) содержалась на стандартном рационе, опытные группы 1 и 2 (по 10 особей) 46 суток получали экспериментальный рацион для развития гиперлипидемии [13]. Затем крыс опытной группы 2 переводили на стандартный рацион с ежедневным введением per os липидов гепатопанкреаса камчатского краба в дозе 1,2 мл/кг массы крысы в течение 30 дней. Липидный спектр сыворотки крови исследовали на биохимическом анализаторе FP-901 фирмы «Labsуstems» (Финляндия). Определяли уровень общего холестерина ^XC), триглицеридов (ТГ), холестерин липопротеидов высокой плотности (XC ЛПВП), рассчитывали концентрацию липопротеидов низкой (XC ЛПНП) и очень низкой плотности (XC ЛПОНП), индекс атерогенности (ИА). Антиоксидантную активность (АОА) и содержание гидроперекисей липидов (ГПЛ) изучали в плазме крови, малоновый диальдегид (МДА) в эритроцитах крови [8]. Анализировали устойчивость эритроцитов к перекисному гемолизу (УЭПГ) [8]. Выработку цитокинов (TNF-a и INF-y) иммунокомпетентными клетками определяли с помощью иммуноферментного анализа (Genzyme diagnostics, Cambridge, MA, USA, Duoset system). Статистическую обработку результатов проводили с использованием методов одномерной статистики. Достоверность различий средних определяли по t-критерию Стьюдента. Для анализа межсистемных взаимодействий использовали метод корреляционных плеяд [11]. Использовали стандартные алгоритмы корреляционного анализа, в исследования включены только достоверные коэффициенты r (программный продукт «Statistica 6,1»). Плеяды первого уровня характеризовали пороговыми значениями r - 0,99-0,8; второго уровня - 0,79-0,6; третьего уровня - 0,59-0,5. Определялись следующие показатели: G - мощность плеяды (число признаков), G/k - относительная мощность плеяды (число признаков/общее количество участников), D - крепость плеяды (средняя арифметическая внутриплеядных коэффициентов).
Результаты. Развитие модели алиментарной ДЛП сопровождалось изменениями в показателях липидного обмена (табл).
Таблица
Показатели системы ПОЛ-АОЗ, липидного обмена и уровень цитокинов крови у экспериментальных животных
Показатели Интактная Опытная Опытная
группа группа 1 группа 2
TNF-a, пг/мл 40±1,5 81,4±5,09*** ***50±2 4**
INF-y, пг/мл 15±0,5 18±0,6** **16±0,4
ОXC, ммоль/л 2,45±0,12 3,43±0,1*** *2,54±0,4
ТГ, ммоль/л 1,66±0,09 2,08±0,09*** **1,8±0,03
XC ЛПВП, ммоль/л 1,42±0,09 1,2±0,05* *1,33±0,03
XC ЛПНП, ммоль/л 0,62±0,05 1,54±0,08*** ***0,77±0,05*
XC ЛПОНП, ммоль/л 0,36±0,04 0,86±0,04*** **0,58±0,02*
ИА 0,73±0,04 1,86±0,07*** ***0,91±0,08
АОА, % 16,8±1,05 24,64±2,2** *19,9±2,8
МДА, мкмоль/гНЪ 4,31 ±0,32 8,28±0,25* ***5,44±0,6**
MДA/AOA 0,26±0,04 0,34±0,02** ***0,27±0,03
ГПЛ, у.е. 0,9±0,23 3,29±0,12*** ***1,23±0,2
УЭПГ, % 25,15±1,91 13,8±2,56** ***38±3,06**
Примечание: * - справа значения достоверны относительно интактной группы; слева - опытной 1 (*) - р<0,05; (**) - р<0,01; (***) - р<0,001
У крыс с ДЛП наблюдалось увеличение уровня ОХС на 40% (р<0,001), ТГ на 25% (р<0,001). Возрастание содержания высокопатогенных липопротеидов (ХС ЛПНП и ХС ЛПОНП) в
1,5 раза (р<0,001) отразилось в повышении индекса атерогенности вдвое (р<0,001) по сравнению с интактной группой. В то же время уровень ХС ЛПВП снизился на 15% (р<0,05). Увеличение в 2,4 раза гидроперекисей липидов (р<0,001) привело к резкому снижению показателя устойчивости эритроцитов к перекисному гемолизу на 45% (р<0,01). Накопление вторичных продуктов ПОЛ в крови животных с ДЛП сопровождалось компенсаторным увеличением АОА на 47%, но индекс МДА/АОА повысился на 31% (р<0,01). У крыс опытной группы 1 шло повышение сывороточного ТОТ-а (в 2 раза) (р<0,001) и на 20% рос уровень ЮТ-у (р<0,01) по сравнению с интактной группой крыс. Анализ х результатов показал, что экспериментальная ДЛП идет с увеличением атерогенных классов липидов, уменьшением ХС ЛПВП, дисбалансом в работе систем ПОЛ и антиоксидантной защиты (АОЗ), интенсификацией выработки цитокинов.
Для анализа межсистемных взаимодействий был использован метод корреляционных плеяд. У интактных животных выделяется одна плеяда первого уровня (О - 4, О/к - 0,3, Э - 0,9). Признаками-индикаторами данной плеяды являются ХС ЛПВП и ГПЛ, отрицательно коррелирующие друг с другом (г = -0,96). В свою очередь ГПЛ образуют положительную связь с ОХС (г = -0,87), а ХС ЛПВП - отрицательную с ЮТ-у (г = -0,86). Во второй плеяде (О - 3, О/к - 0,23, Э - 0,77) признаком индикатором выступают ХС ЛПНП, образующие положительную связь с ИА (г = 0,75) и отрицательную с УЭПГ (г = -0,79). Предиктор третей плеяды (О - 3, О/к - 0,23, Э - 0,74) ТОТ-а отрицательно коррелирует с индексом МДА/АОА (г = -0,74) и МДА (г = -0,73). Четвертая плеяда (О - 2, О/к - 0,15, Э - 0,7), характеризующаяся наименьшей мощностью, включает в себя ТГ и АОА (г = -0,72). Полученные результаты свидетельствуют о том, что у здоровых животных ведущую роль в физиологических процессах играет ХС ЛПВП, обладающие высоким антиатерогенным потенциалом. Данный факт соответствует сведениям, полученным из зарубежных и отечественных литературных источников [5, 13]. Поддержание концентрации антиатерогенных липидов на нормальном уровне снижает возможность накопления гидроперекисей липидов, общего холестерина и ЮТ-у. Фактор некроза опухоли вовлекается в процесс в меньшей степени, его уровень ограничен смещением баланса систем ПОЛ - АОЗ. Содержание липидов низкой плотности регулирует состояние мембран эритроцитов и их устойчивость к ПОЛ [5, 7]. Из описываемых параметров самая слабая связь фиксируется между интегральным показателем антиоксидантной активности и триглицеридами.
Оценка межсистемных взаимодействий показала, что у крыс с ДЛП формируется три плеяды первого уровня. Участниками первой плеяды являются ХС ЛПНП, МДА/АОА, ОХС, АОА, ТОТ-а (О - 5, О/к - 0,38, Э - 0,89). В качестве признака-индикатора выступают ХС ЛПНП, формирующие положительные связи с ОХС (г = 0,88) и МДА/АОА (г = 0,95). АОА положительно связана с ТОТ-а и отрицательно с ОХС (г = -0,84). Следующей по крепости является вторая плеяда (О - 5, О/к - 0,38, Э
- 0,85). Центром данной плеяды выступает ХС ЛПВП, обнаруживающий прямо пропорциональную зависимость с ЮТ-у (г = 0,81) и УЭПГ (г = 0,75) и обратно пропорциональную с ИА (г = -0,84). Положительная связь наблюдается для ИА и МДА (г = 0,77). Третья плеяда состоит из двух участников — ТГ и ХС ЛПОНП (г =
0,92) (О - 2, О/к - 0,15, Э - 0,92). Результаты исследования показали, что при ДЛП на первое место выходит взаимодействие наиболее атерогенного класса липопротеидов - ХС ЛПНП и параметра МДА/АОА, отражающего соотношение процессов ПОЛ-АОЗ. Это объясняется тем, что при ДЛП развивается системный воспалительный процесс с активацией окислительного стресса: увеличивается поступление в печень свободных жирных кислот, происходят реакции их окисления и образуются продукты ПОЛ, вызывающие окисление ХС ЛПНП [3, 7]. Клеточные мембраны изменяют свой липидный состав и становятся более склонными к синтезу свободных радикалов. Свободные радикалы и окисленные ЛПНП запускают реакции ПОЛ и вызывают диф-ференцировку моноцитов в макрофаги, секретирующие цитокины [9, 14]. Провоспалительные цитокины обладают угнетающим действием на активность липопротеинлипазы, что сопровождается замедлением гидролиза ТГ и их усиленной мобилизацией из жировых депо [10]. ТОТ-а и ЮТ-у через индукцию КО-синтазы усиливают продукцию оксида азота, который стимулирует выработку мононуклеарами указанных цитокинов. ЮТ-у воздействует на синтез ключевых белков, вовлеченных в метаболизм ЛПВП -снижается активность лецитин-холестерин-ацетилтрансферазы, печеночной циркулирующей триглицеридлипазы [3, 9, 10, 14]. При ДЛП идет рост силы корреляционных связей между параметрами липидного обмена, системы ПОЛ - АОЗ и иммунитета. Для животных с ДЛП характерно увеличение абсолютной, относительной мощности и крепости плеяд, что говорит об усложнении внутри- и межсистемных взаимодействий. Это обусловлено развитием патологического процесса и компенсаторных реакций.
Курсовое введение препарата из гепатопанкреаса камчатского краба оказало липидкорригирующее воздействие на крыс опытной группы 2 - шло снижение ОХС (р < 0,05), ТГ, ХС ЛПОНП (р < 0,01), ХС ЛПНП (р < 0,001). Уменьшение атероген-ных классов липидов и увеличение ХС ЛПВП (р < 0,05) привело к снижению ИА (р<0,001) (табл. 1). Исследуемый препарат позволил стабилизировать мембраны эритроцитов, что проявилось
в увеличении показателя УЭПГ в 1,5 раза по сравнению с интактной группой. Количество первичных (ГПЛ) и вторичных (МДА) продуктов ПОЛ снижалось (р<0,001), приближаясь к показателям интактной группы. На фоне падения количества продуктов пе-роксидации шла нормализация АОА (р<0,05). Эти данные говорят о мембраностабилизирующем, антиоксидантном эффекте липидной композиции. Противовоспалительные свойства липидов камчатского краба проявились в снижении выработки цитокинов: TNF-a на 40% (р < 0,001) и INF-y на 11% (р < 0,01).
Анализ межсистемных взаимодействий выявил, что в опытной группе 2 формируются две плеяды. В плеяде 1-го уровня (G - 3, G/k - 0,23, D - 0,81) предиктором выступает параметр ГПЛ, который образует положительную корреляцию с ТГ (r=0,8) и отрицательную с XC ЛПОНП (r=-0,82). Центральный участник второй плеяды (G - 4, G/k - 0,3, D - 0,74) INF-y образует положительную корреляционную связь с XC ЛПНП (r=0,76), МДА/АОА (r=0,73), МДА (r=0,72). Мощность и крепость плеяд в опытной группе 2 уменьшается, появляется большее число степеней свободы системы, более диффузный характер связей. Это говорит о положительном воздействии препарата, снижающем напряженность функционирования основных гомеостатических систем.
Установлено эффективное действие липидов гепатопан-креаса камчатского краба на внутри- и межсистемную кооперацию липидтранспортной, иммунной и антиоксидативной систем при алиментарной ДЛП у крыс. Мембранотропные свойства изучаемой липидной композиции обусловлены способностью компонентов добавки включаться в клеточные мембраны, влияя на чувствительность клеток к действию лигандов (гормоны, Ig Е, цитокины), модулировать текучесть липидов в бислое, приводя к качественным и количественным модификациям спектра мессенджеров [1, 2, 4]. Противовоспалительную активность липидов краба можно объяснить способностью ПНЖК ю-3 ингибировать синтез простагландинов и лейкотриенов, что ведет к снижению образования цитокинов мононуклеарами [1, 9]. Липидкорриги-рующее влияние добавки обусловлено способностью ПНЖК ускорять метаболизм атерогенных липидов, ингибировать синтез холестерина и антиоксидантными, иммунотропными свойствами АДГ [1, 4, 7, 12]. Это исследование позволяет рассматривать липиды гепатопанкреса камчатского краба как потенциальный объект для лечения и профилактики алиментарной ДЛП.
Выводы. Метод корреляционных плеяд позволил установить, что при ДЛП наблюдается усложнение внутри- и межсис-темных взаимодействий и нарушение кооперации между параметрами липидного обмена, иммунитета и системы ПОЛ - АОЗ. Липиды гепатопанкреаса краба обладают гиполипидемическим, антиоксидантным и противовоспалительным эффектом, обусловленным суммарным биологическим действием АДГ и ПНЖК ю3. Комплексное воздействие липидов камчатского краба позволяет снизить напряженность функционирования липидтранспортной, ПОЛ-АОС и иммунной систем организма крыс при ДЛП.
Литература
1. ГаврисюкВ.К. // Укр. пульмон. ж.- 2001.- № 3.- С. 5-10.
2. Гаджиева З.М. и др. // Вопр. питания.- 2002.- №6.- С. 35.
3. Доценко Э.А. и др // Иммунопатол., аллергол., инфек-тол.- 2001.- №3.- С. 6-15.
4. Ипатова О. и др // Биомед. химия.- 2004.- № 1.- С. 25.
5. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов, липопротеидов и его нарушения. - СПб: Питер Ком.- 1995.
6. Насонов Е.А. и др // Кардиол.- 1999.- № 3 (39).- С. 26-28.
7. Новгородцева Т.П. и др // Эксп. и клин. фармакол.-2005.- Т.68, № 2.- С. 55-58.
8. Новгородцева Т.П. и др Руководство по методам исследования параметров системы «перекисное окисление липидов -антиоксидантная защита» в биологических жидкостях.- Владивосток: Дальневост. ун-т.- 2003.- 80 с.
9. ПасечникА.В. // Вестник РУДН.- Сер. Медицина.- 2003.-№ 5(24).- С. 113-114.
10. Суркина И.Д. и др. // Кардиол.- 1999.-№4.- С. 59-62.
11. Терентьев П.В., Ростова Н.С. Практикум по биометрии.- Изд-во ЛГУ.- Л., 1977.
12. Erdlenbruch B.et al.// Exp. Brain Res.- 2000.- №3.- P. 417.
13. Cole T.G. et al.//J. of Lipid Researc.-1984.-Vol.25.-Р. 593.
14. Wigg A.J. et al. // Gut.- 2001.- Vol. 48.- P. 206-211.
ESTIMATION OF THE INTERSYSTEM COOPERATION DISTURBANCES IN EXPERIMENTAL DYSLIPIDEMIA AND WAYS OF ITS CORRECTION
T.I. VITKINA, J.K. KARAMAN, S.P. KASYANOV, E.G. LOBANOVA, T.P. NOVGORODTSEVA
Summary
It is established, that at dyslipidemia complication inside both intersystem interactions and infringement of cooperation between lipids, immune and antioxidant systems is observed. For correction used the lipids from the King crab liver. The lipid fraction contented 10% of 1-0-alkyl-diacylglycerides, 10% of ©3 polyunsaturated fatty acids, and a bio-antioxidant complex. Results of research have shown, that lipids from the King crab liver possess lipidcorrect, antioxidant and anti-inflammatory effects, it are decrease the intensity of functioning of the investigated ethyo-dependent systems of rats.
Key words: dyslipidemia, lipids of the liver King crab.
УДК 616-006;616.831-005
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ИМ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА ЧЕЛОВЕКА (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)
Р.У. ГИНИАТУЛЛИН*, С.Т. ИСМАГИЛОВА*, Д.В. ЕРЕМЕЕВ**,
Л.В. АСТАХОВА*
В связи с развитием экспериментальной терапии злокачественных новообразований активизируются работы по получению моделей опухолей человека, перевиваемых на животных, но многие вопросы этой проблемы остаются до конца не выясненными. Это касается, в частности, морфологии опухолей, трансплантированных из головного мозга человека в мозг животных.
Цель работы - воспроизведение на крысах злокачественных глиальных опухолей головного мозга путем трансплантации их от человека, изучение их морфологических особенностей.
Материалы и методы исследования. Нами проведен эксперимент на 344 беспородных половозрелых разнополых крысах массой тела 150-200г. Всем животным проводилась трансплантация в их головной мозг злокачественных опухолей взятых от человека. При этом 231 животному проведена трансплантация глиобластом (Ш-1У степени злокачественности) от 27 больных, 113 крысам - анапластической (злокачественной) астроцитомы от 16 больных. Диагноз опухоли, удаленной у больных, подтверждался гистологически. Ткань опухоли пересаживалась животным не позднее 1 часа после оперативного удаления. Для подавления иммунитета у животных нами использовалось внутримышечное введение преднизолона по 3,0 мг в течение 10 дней с момента трансплантации опухолей. Гомогенат опухолевой ткани, предназначенный для трансплантации, готовился в стерильной стеклянной колбе. Разобщение клеток производилось механически. Для определения степени разобщения клеток в гомогенате брались мазки. Объем вводимого гомогената составлял 1 мм3.
Оперативное вмешательство проводилось под внутрибрю-шинным введением раствора кетамина в дозе 0,2-0,4 мл. После наступления стадии наркоза крысу фиксировали держателями за конечности к горизонтально установленной конструкции- «столу» стереотаксического аппарата. Кожные покровы головы обрабатывали 70% этиловым спиртом. Затем производили разрез мягких тканей головы в проекции сагиттального шва в промежутке между лобно-теменным и теменно-затылочным швами длиной до 1,5-2 см. Мягкие ткани разводили, брали на держалки, которые фиксировались к «столу» стереотаксического аппарата. Кость скелетировали. Затем зубным буром наносили в левой теменной области трепанационное отверстие до 3 мм в диаметре до твердой мозговой оболочки. Отверстие расширяли до 7 мм в диаметре зажимом типа «москит». Твердую мозговую оболочку вскрывали крестообразно. К направителю стереотаксического аппарата фрагментами тонкой силиконовой трубки подвижно
Челябинский государственный институт лазерной хирургии г. Челябинск, проспект Победы, 287, тел. (351) 741 -23-68, e mail: [email protected] МУЗ ГКБ №3, г. Челябинск
