CC BY
8
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVII, № 2, 2021
(п=27), у которых удалось отследить динамику мутационного клона. Среди 27 пациентов с МПН 16 случаев были эссенциаль-ной тромбоцитемией (ЭТ), 10 случаев - с первичным миелофи-брозом (ПМФ), 1 - с неклассифицированным МПН. Все случаи были проверены на наличие мутаций генов JAK2 (V617F), CALR (экзон 9) и MPL (W515L/K) с помощью аллель-специфической ПЦР или фрагментного анализа. Все пациенты были положительными по CALR (тип 1 или тип 2), при этом JAK2 (V617F) и MPL (W515L/K) мутации отсутствовали на момент диагностики. Соотношение женщины: мужчины - 3,7:1 (22:5; 81%: 19%), средний возраст на момент постановки диагноза составлял 34,6 года (диапазон 18-70 лет). Медиана продолжительности лечения ИФН составила 30,5 мес (диапазон 10-68).
Результаты. Все пациенты в нашем исследовании имели более чем 18% - ный уровень мутантного аллеля CALR исходно (18-62%). На момент второй точки мониторинга (Ме 32 месяца (10-68)) у всех пациентов была констатирована кли-нико-гематологическая ремиссия. Для оценки молекулярного ответа при лечении ИФН использовались следующие значения снижения аллельной нагрузки относительно первой точки измерения (соответствует дебюту заболевания): полный молекулярный ответ - пМо (снижение количества клеток с мутацией CALR на 75% и более относительно количества в дебюте), большой молекулярный ответ - БМО (на 50-75%), частичный молекулярный ответ - ЧМО (менее, чем на 50%), минимальный молекулярный ответ - минМО (менее, чем на
25%). У больных с ЭТ так и ПМФ и 1-ым типом мутации CALR хотя бы минимальный молекулярный ответ был получен у 77 и 33% соответственно. При этом у пациентов с ПМФ аллельная нагрузка в начале заболевания была не более 30%. Только 2 пациента ЭТ и мутацией CALR 2-го типа 2 достигли минимального и частичного молекулярного ответа. Оба имели в начале заболевания начальный уровень аллельной нагрузки не более 45%. У пациентов с ПМФ со вторым типом мутации не было достигнуто никакого молекулярного ответа. У пациента с не-классифицируемым МПН после 30 месяцев лечения доля клеток с мутаций CALR 1-го типа выросла с 33% до 43%.
Выводы. Несмотря на полную гематологическую ремиссию, достигнутую всеми пациентами, включенными в исследование, снижение доли клона с мутацией наблюдалось только в случаях с 1-ым типом мутации CALR. У нескольких пациентов (независимо от типа мутации) отмечено возрастание доли мутированных клеток. Можно предположить, что лечение ИФН затрагивает менее дифференцированные клетки с мутациями CALR, и не затрагивает более дифференцированные, что в сумме не приводит к снижению доли клеток, несущих мутацию. Однако, необходимы дальнейшие исследования на большем количестве пациентов, а также с сортированными клеточными популяциями, чтобы подтвердить эту точку зрения и установить необходимость мониторинга мутаций CALR при терапии МПН.
Г.А. Цаур123, А.М. Попов4, Т.Ю. Вержбицкая12, Л. В. Мовчан5, М.В. Белевцев5, О.В. Алейникова45, Т.О. Ригер12, А.С. Демина12, А.М. Кустанович6, О.Р. Аракаев1,2, Л.И. Савельев1,2,3, Ю.В. Ольшанская4, Ю.В. Румянцева4, А.И. Карачунский4, Л.Г. Фечина1,2
ОЦЕНКА МИНИМАЛЬНОЙ ОСТАТОЧНОЙ БОЛЕЗНИ У ДЕТЕЙ С ОСТРЫМ
ЛИМФОБЛАСТНЫМ ЛЕЙКОЗОМ
1Государственное автономное учреждение здравоохранения Свердловской области «Областная детская клиническая больница», г. Екатеринбург
2 Государственное автономное учреждение здравоохранения Свердловской области «Центр специализированных видов
медицинской помощи «Институт медицинских клеточных технологий», г. Екатеринбург 3Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Уральский
Государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Екатеринбург 4Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
5Государственноеучреждение «Республиканский научно-практический центр детской онкологии, гематологии и
иммунологии», г. Минск, Республика Беларусь 6Институт онкологии Шаретт, Медицинский Центр Хадасса, г. Иерусалим, Израиль
Введение. Минимальная остаточная болезнь (МОБ) - один из краеугольных показателей, определяющих прогноз острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) у детей.
Цель. Оценить роль мОб у детей с ОЛЛ старше 1 года.
Материалы и методы. МОБ методом многоцветной (4-10) проточной цитометрии (МПЦ) определяли у 581 пациента в возрасте от 1 до 18 лет, включенных в исследование ALL-MB 2008.
Результаты. Среди 581 пациента с ОЛЛ старше 1 года отсутствие клинико-гематологической ремиссии (КГР) (>5% бла-стов по данным цитологического исследования) на 36-й день было выявлено у 17. Из этого числа у 7 пациентов количество бластов по данным МПЦ было <5%. В этой группе было зафиксировано 2 рецидива (29%). В группе, в которой >5% бластов было выявлено обоими методами (n=10) зарегистрировано 5 рецидивов (50%). В группе, в которой по данным цитологии было менее 5% бластов, а по данным МПЦ>5% (n=3) все пациенты рецидивировали (100%). Таким образом, была сформирована группа с отсутствием КГР и/или величиной МОБ >5% (n=20, 3,44%) с величиной БСВ 38,4%, что было достоверно ниже, чем у пациентов, у которых выявлено менее 5% бластов двумя методами (p<0,0001). Большая часть неудач терапии на 36-й день была выявлена у пациентов с наличием BCR-ABL1-подобного ОЛЛ и делециями IKZF1. Далее мы разделили всех пациентов по величине МОБ на следующие подгруппы менее
0,01%, 0,01%-менее 0,1%, 0,1%-менее 1,0%, 1,0%-менее 10,0%, более 10,0%. При сравнении величины МОБ у пациентов разных генетических подгрупп выявлено, что сходные профили МОБ выявлены у пациентов с высокой гиперплоидией (n=80) и транслокацией t(12;21)/ETV6-RUNX1 (n=115). Эти две группы достоверно отличались от пациентов с транслокацией t(9;22)/ BCR-ABL1 (n=15) и перестройками 11q23/KMT2A (MLL) (n=8) (p<0,001 в обоих случаях). На следующем этапе мы провели RoC-анализ для выявления величины МОБ на 36-й день терапии, которая наиболее эффективно разделяет пациентов с разными исходами терапии, и сравнили эту величину с традиционными пороговыми порогами (ПУ) МОБ, кратными 10 (0,01%, 0,1%). Для пациентов с высокой гиперплоидией и транслокацией t(12;21)/ETV6-RUNX1 эти величины совпали и составили 0,03%. В этой объединенной группе низкого цитогенетическо-го (ЦГ) риска доля пациентов с рецидивами у пациентов с МОБ ниже ПУ составила 2,5%, а >ПУ - 20,0%. Это деление было более эффективным, чем традиционные ПУ (0,01%, 0,1%). В группе высокого ЦГ риска, которая была образована при слиянии пациентов с транслокацией t(9;22)/BCR-ABL1 и перестройками 11q23/KMT2A ПУ рассчитанный методом ROC анализа, составил 0,3%. Ни один из 11 пациентов из этой группы с МОБ ниже ПУ не рецидивировал. Доля рецидивов при МОБ >ПУ составила 75,0%. Также как и для пациентов низкого ЦГ риска было более эффективным, чем традиционные уровни ПУ Для группы дру-
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ
гие В-линейные ОЛЛ, объединившей всех оставшихся пациентов, рассчитанный ПУ составил 0,04%. Однако доля рецидивов при этом ПУ и ПУ=0,1% была практически идентичной. Рассчитанные ПУ эффективно делили пациентов с разными исходами терапии в каждой из вышеуказанных ЦГ подгрупп (р <0,001 для каждого сравнения из трех).
Выводы. При комбинированном использовании данных
МОБ и цитологии на 36-й день лечения по протоколу ALL-MB 2009 позволило выделить пациентов с неблагоприятным прогнозом. Дифференциальный подход к выбору ПУ в зависимости от ЦГ подгруппы на 36-й день лечения по протоколу ALL-MB 2009 позволяет более эффективно делить пациентов с благоприятными и неблагоприятными исходами терапии, чем применение традиционных ПУ
Н.Ю. Цветков, Е.В. Морозова, О.С. Епифановская, Е.В. Бабенко, Е.А. Измайлова, А.И. Шакирова, И.М. Бархатов, М.В. Барабанщикова, К.В. Лепик, Е.А. Бакин, Ю.Ю. Власова, А.Г. Смирнова, И.С. Моисеев
ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МУТАЦИОННОГО СТАТУСА У ПАЦИЕНТОВ С МИЕЛОДИСПЛАСТИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ ВЫСОКОГО РИСКА
«Научно-исследовательский институт детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой»
Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика. И.П. Павлова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г.Санкт-Петербург Введение. Определение прогноза имеет решающее значение для принятия решения о терапевтической тактике у пациентов с миелодиспластическим синдромом (МДС).
Цель. Оценка возможности использования данных молекулярной генетики для определения подгрупп пациентов с МДС с различным клиническим течением.
Материалы и методы. У 56 пациентов проспективно выполнялось прямое секвенирование по Сэнгеру геномной ДНК костного мозга на момент постановки диагноза. Исследовались гены БР3В1, DNMT3A, FLT3, SRSF2, ТР53, RUNX1, ASXL1. Исследовалось влияние на 2-летние значения общей и безрецидивной выживаемости, кумулятивные частоты рецидива и летальности, связанной с лечением в зависимости от таких факторов, как возраст, пол, тип МДС, группа риска, уровни бластов, тромбоцитов, гемоглобина, нейтрофилов, ферритина в дебюте заболевания, наличие зависимости от гемотрансфузий, терапия ги-пометилирующими препаратами в анамнезе, факт выполнения алло-ТГСК. Работа поддержана грантом Российского научного фонда №17-75-20145-П.
Результаты. Точечные мутации в генах SF3B1, DNMT3A, FLT3, GATA2, SRSF2, ТР53 (п=33) чаще встречались у пациентов старшей возрастной группы: медиана возраста 43 года (21 - 59) у пациентов без мутаций против 53 года (36 - 60) у пациентов с мутациями (р=0,02). Аналогичная картина наблюдалась для мутаций генов TP53 и SF3B1 в отдельности: медиана возраста 46 лет (21 - 59) у пациентов без мутаций TP53 против 57 лет (51 - 60) у пациентов с мутациями TP53 (р=0,02); медиана возраста 45 лет (21 - 60) у пациентов без мутаций SF3B1 против 55,5 лет (47 - 58) у пациентов с мутациями SF3B1 (р=0,04). 2-летняя частота рецидивов у пациентов с мутациями гена
TP53 была значимо выше: 75% (п=4, 95% ДИ: 12,8 - 96,1) против 17,4% (п=29, 95% ДИ: 5 - 36,2) у пациентов без мутаций гена TP53 (р=0,009). Количество мутированных генов значимо влияло на 2-летнюю общую и безрецидивную выживаемость: 75,8% (п=11, 95% ДИ: 50,8 - 98,7, медиана не достигнута) и 65,5% (п=11, 95% ДИ: 23,6 - 88,3, медиана не достигнута), соответственно, для пациентов без мутаций; 60% (п=5, 95% ДИ: 12,6 - 88,2, медиана не достигнута) и 60% (п=5, 95% ДИ: 12,6 - 88,2, медиана не достигнута), соответственно, для пациентов с 1 мутацией; 0% (п=3, медиана 7,5 месяцев) и 0% (п=3, медиана 6,4 месяца), соответственно, для пациентов с 2 мутациями (р=0,0009 и р=0,001, соответственно). Наличие мутаций в гене RUNX1 значимо влияло на 2-летнюю общую и безрецидивную выживаемость: 72,2% (п=16, 95% ДИ: 40,8 - 88,9, медиана не достигнута) и 65,6% (п=16, 95% ДИ: 34,9 - 84,5, медиана не достигнута), соответственно, для пациентов без мутаций гена RUNX1; 0% (п=3, медиана 14,4 месяца) и 0% (п=3, медиана 12,4 месяца), соответственно, для пациентов с мутацией гена RUNX1 (р=0,004 и р=0,009, соответственно). Количество мутированных генов значимо влияло на 2-летнюю частоту рецидивов: 25,4% (п=11, 95% ДИ: 3,2 - 58) для пациентов без мутаций; 20% (п=5, 95% ДИ: 0,8 - 58,2) для пациентов с 1 мутацией; 100% (п=3) для пациентов с 2 мутациями (р=0,001).
Выводы. Описанные предварительные результаты подчеркивают важность использования новых методов для прогноза у пациентов с МДС. Необходимы дальнейшие исследования.
Л.А. Цветкова, О.В. Паина, П.В. Кожокарь, А.С. Фролова, Ж.З. Рахманова, К.А. Екушов, Н.В. Субора, М.Ю. Аверьянова, П.В. Шевелева, М.А. Эстрина, Е.В. Бабенко, А.Д. Кулагин, Е.В. Семенова, Л.С. Зубаровская
ИНФУЗИИ ДОНОРСКИХ ЛИМФОЦИТОВ В ТЕРАПИИ МИНИМАЛЬНОЙ ОСТАТОЧНОЙ БОЛЕЗНИ ПОСЛЕ АЛЛО-ТГСК У ДЕТЕЙ С ОСТРЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ
«Научно-исследовательский институт детской онкологии, гематологии и трансплантологии имени Р.М. Горбачевой», Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Санкт-Петербург
Введение. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК)-один из наиболее эффективных методов лечения у пациентов с онкогематологическими заболеваниями. Однако, несмотря на значимые успехи в использовании данного метода терапии, рецидивы заболевания после алло-ТГСК остаются главной причиной летальности пациентов, а дальнейшие лечебные опции крайне ограничены. Для выявления пациентов, имеющих высокий риск посттрансплан-
тационного рецидива, требующих профилактики и превентивной терапии, используют определение минимальной остаточной болезни (МОБ). Одним из способов терапии МОБ после алло-ТГСК является иммуноадоптивная терапия инфузиями донорскими лимфоцитами (ИДЛ), механизм действия которых основан на способности индуцировать реакцию «трансплантат против лейкоза» (ТПЛ).
Цель. Оценка эффективности и безопасности ИДЛ в те-
