CC BY
16"BicHUK стоматологи", № 2, Т 32 - 2019
Левицкий А. П., Макаренко О. А., Ходаков И. В. - Одесса: КП ОГТ, 2015. - 32 с.
11. Эггум Б. Методы оценки использования белка животными / Б. Эггум. - М.: Колос, 1977. - 189 с.
12. Квертулин. Витамин Р, пребиотик, гепатопротектор / [Левицкий А. П., Макаренко О. А., Селиванская И. А. и др.]. - Одесса: КП ОГТ, 2012. - 20 с.
13. Волик Н. А. Новый адаптоген «Биотрит» в комплексном лечении заболеваний пародонта / Н. А. Волик, Г. Ф. Белоклицкая // Вкник стоматологи. - 2000. - № 5. - С. 28-30.
14. Антивирусные и иммуномодулирующие свойства препарата из проросшего зерна пшеницы / А. П. Левицкий, И. Г. Маник, С. А. Демьяненко [и др.] // Фгготерашя. Часопис. - 2009. - № 3. - С. 43-46.
15. Гепатопротекторные свойства полифенольных веществ экстракта «Дубовый» // А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, И. В. Ходаков [и др.] // Journal of Education, Health and Sport. - 2016. - т. 6, № 11. - С. 537-547.
16. РЦ У 20.4-13903778-032/13:2017 «Рецептура фггогелю «Дубовий» до ТУ У 20.4-13903778-032:2012 «ФггогелЬ>. Висновок Державно! служби з питань безпечност харчових продукта та за-хисту споживачiв № 602-123-20-2/1105 вщ 20.04.2017 р.
17. Применение мукозальных гелей в стоматологии: методические рекомендации / [Левицкий А. П., Макаренко О. А., Селиванская И. А. и др.]. - Одесса: КП ОГТ, 2012. - 20 с.
18. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: методические рекомендации / [Левицкий А. П., Деньга О. В., мО. А. и др.]. - Одесса: КП ОГТ, 2010. - 16 с.
19. Левицкий А. П. Методы экспериментальной стоматологии: учебно-методическое пособие / Левицкий А. П., Макаренко О. А., Демьяненко С. А. - Симферополь: Тарпан, 2018. - 78 с.
20. Ферментативный метод определения дисбиоза полости рта для скрининга про- и пребиотиков: методические рекомендации / [Левицкий А. П., Макаренко О. А., Селиванская И. А. и др.]. - К.: ГФЦ, 2007. - 22 с.
21. Левицкий А. П. Лизоцим вместо антибиотиков / Левицкий А. П. - Одесса: КП ОГТ, 2005. - 74 с.
22. Трухачева Н. В. Математическая статистика в медико-биологических исследованиях с применением пакета Statistica / Трухачева Н. В. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 379 с.
REFERENCES
1. Khajuria A. Lipid peroxidation. Everyman's Sci. 1997; 32(3): 109-113.
2. Nagler L. G., Lankin V. Z., Kazachenko A. I. i dr.. The rate of free radical oxidation of Ci8 diene and triene fatty acids and the effectiveness of their inhibition by p-carotene in aqueous micellar solutions. Biohimija. 2003; 68(2): 243-249.
3. Men'shhikova E.B., Lankin V. Z., Zenkov N. K. i dr.. Okislitel'nyj stress. Prooksidanty i antioksidanty [The oxidative stress. Prooxidants and antioxidants]. Moskva, Slovo, 2006: 556.
4. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A. et al.. The experimental prophylaxis of the peroxide periodontitis by antidysbiotic means. Journal of Education, Health and Sport. 2017; 7(2): 682-693.
5. Plavinskii S. L., Plavinskaia S. I. Increased levels of lipid pe-roxidation products as a risk factor for death in a prospective study. Fiziologija cheloveka. 2002; 28(1): 116-120.
6. Vasyuk V. L. Hepatoprotective action of flavancontent means at hepatopathy, caused by the peroxide sunflower oil. Visnyk mors'koi' medycyny, 2018; 1: 101-104.
7. Bocharov A. V. Antiinflammation and antidsbiotic actions of flavancontent means on rat colon mucosa after received the peroxide sunflower oil. Journal of Education, Health and Sport. 2017; 7(6): 11371144.
8. Bocharov A. V. The influence of flavancontent means on gut mucosa state at rats received peroxide sunflower oil. Journal of Education, Health and Sport. 2018; 8(8): 1200-1205.
9. Markov A. V., Labush Iu. Z., Dvulit I. P. ta in.. Influence of oral applications on the state of the rat month tissues. Visnik stomatologic 2019; 31(1): 14-18.
10. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Khodakov I. V. Metody issledovaniya zhirov i masel [Methods to investigate fats and oils]. Odessa, KP OGT, 2015: 32.
11. Eggum B. Metody otsenki ispol'zovaniya belka zhivotnymi [Methods to evaluate utilization of proteins by animal]. Moskva: Kolos, 1977: 189.
12. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A. i dr.
Kvertulin. Vitamin P, prebiotik, gepatoprotektor ["Querthulin", Vitamin P, prebiotic, hepatoprotector]. Odessa, KP OGT, 2012: 20.
13. Volik N. A., Beloklitskaya G. F. The new adaptogen "Biotrit" in the complex treatment of the periodontal diseases. Visnyk stomatologii. 2000; 5: 28-30.
14. Levitsky A. P., Manik I. G., Demyanenko S. A. [i dr.]. The antiviral and immunemodelling characteristics of the preparation of germinating wheat seads. Fitoterapiia. Chasopis. 2009; 3: 43-46.
15. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Khodakov I. V. et al. Hepatoprotective properties of polyphenols substances of Oak extract. Journal of Education, Health and Sport. 2016; 6(11): 537-547.
16. RC U 20.4-13903778-032/13:2017 "Recipe for Phytogel "Dubovyi" to TU U 20.4-13903778-032: 2012 "Phytogels". Conclusion of the State Service of Ukraine on Food Safety and Consumer Protection No. 602-123-20-2 / 1105 of 20.04.2017.
17. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A. i dr. Primeneniye mukozalnykh geley v stomatologiy: metodicheskie rekomendatsii [The use of mucosal gels in dentistry: method guidelines].Odessa, KP OGT; 2012: 20.
18. Levitsky A. P., Denga O. V., Makarenko O. A. i dr. Biokhimicheskie markery vospaleniya tkaney rotovoy polosti: metodicheskie rekomendatsii [Biochemical markers of inflammation of oral cavity tissue: method guidelines]. Odessa, KP OGT; 2010:16.
19. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Demyanenko S. A. Metody jeksperimental'noj stomatologii: uchebno-metodicheskoe posobie [Methods of experimental dentistry (teaching aid).] Simferopol, Tarpan; 2018:78.
20. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A. [i dr.]. Fermentativnyy metod opredeleniya disbioza polosti rta dlya skrininga pro- i prebiotikov: metodicheskie rekomendatsii [Enzymatic methods for determination of oral dysbiosis for screening pro- and prebiotics: method guidelines]. Kiev, GFC; 2007: 22.
21. Levitsky A. P. Lizotsym vmesto antibiotikov [Lysozyme instead of antibiotics]. Odessa, KP OGT; 2005: 74.
22. Truhacheva N. V. Matematicheskaja statistika v mediko-biologicheskih issledovanijah s primeneniem paketa Statistica [Mathematical Statistics in biomedical research using application package Statistica]. Moskva, GJeOTAR-Media; 2012: 379.
Hagrnm^a 11.04.19
DOI 10.35220/2078-8916-2019-32-2-9-14
УДК 616.314.17-008.1+599.323.4
Д.И. Бороденко, *Ю.Г. Чумакова, д.мед.н.
Государственное учреждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины» *Одесский медицинский институт Международного гуманитарного университета
ОЦЕНКА ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ИНЪЕКЦИОННОЙ ФОРМЫ ПОЛИПЕПТИДОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ НА МОДЕЛИ ПАРОДОНТИТА У КРЫС
Цель работы. Изучение лечебно-профилактических эффектов препарата 40Ш в условиях экспериментального па-родонтита у крыс.
Материалыг и методыь В эксперименте использовано 36 белых крыс линии Вистар стадного разведения, 4-х месячного возраста, обоего пола, массой 350- 450 г., которые были поделены на 3 группы.
© Бороденко Д. И., Чумакова Ю. Г., 2019.
"BicHUK стоматологи", № 2, Т 32 - 2019
Первую группу составили интактные крысы, находящиеся на стандартном рационе вивария. Крысам второй группы моделировали пародонтит путем введения в рацион питания переокисленного подсолнечного масла в течение 2-х месяцев. Крысам третьей (опытной) группы после моделирования пародонтита, через день, вводили по переходной складке в области резцов и моляров верхней и нижней челюстей (3-4 инъекции) препарат 40Ш в дозе 0,3 мл на крысу. С целью изучения способности препарата 40Ш вызывать регенерацию тканей пародонта животные во всех группах были разделены на 2 равные подгруппы (а и б). Крыс подгрупп 1а, 2а и 3а выводили из эксперимента сразу или на следующий день после последнего введения физ. Раствора или препарата 40Ш. Крысам подгрупп 1б, 2б и 3б проводили эвтаназию через 3 недели после последнего введения растворов.
Результаты исследования. В эксперименте, на модели пародонтита у крыс, установлена способность полипептидного препарата 40Ш (вилон) значительно тормозить деструкцию костной ткани альвеолярного отростка (снижение степени атрофии альвеолярного отростка, р<0,02) за счет стимуляции функциональной активности остеобластов (повышение активности ЩФ в альвеолярной кости, р<0,001) и интенсификации процесса ремоделирова-ния кости. Выявлено устойчивое последействие полипептидного препарата, которое заключается в повышении функциональной активности остеобластов на протяжении 3-х недель. Препарат 40Ш оказывает также антиок-сидантное действие на ткани пародонта (снижение уровня МДА в десне и в сыворотке крови, р<0,05). Выводы В эксперименте, на модели пародонтита у крыс, установлены выраженное антиоксидантное действие полипептидного препарата 40Ш на ткани пародонта и способность его усиливать регенерацию костной ткани за счет стимуляции функциональной активности остеобластов и интенсификации процесса ремоделирования кости. Ключевые слова: эксперимент, пародонтит, регенерация костной ткани, крысы.
Д. I. Бороденко, * Ю.Г. Чумакова
Державна установа «1нститут стоматологи та щелепно-лицево! хiрурril Нацюнально! академи медичних наук Укра!ни» *Одеський медичний шститут М1жнародного гуманггарного ун1верситету
ОЦ1НКА Л1КУВАЛЬНО-
проф1лактично1 Д11 ш'екцшно!
ФОРМИ ПОЛ1ПЕПТИД1В В ЕКСПЕРИМЕНТ1 НА МОДЕЛ1 ПАРОДОНТИТУ У ЩУР1В
Мета роботи. Вивчення л^вально-профтактичних ефек-тiв препарату 40Ш в умовах експериментального пародо-нтиту у щурiв.
Матерiали i метода. В експериментi використано 36 быих щурiв лгнп Вiстар стадного розведення, 4-х мiсячного в рiзноl статi, масою 350 - 450 гр., яю було подыено на 3 групи.
Першу групу склали ттактт щури, що знаходяться на стандартному ращот вiварiю. Щурам другог групи моде-лювали пародонтит шляхом введення в рацюн харчування переокисленог соняшниковог олп протягом 2-х мiсяцiв. Щурам третьог (до^дног) групи-тсля моделювання пародон-титу, через день, вводили по перехiднiй складц в областi рiзцiв i молярiв верхньог i нижньог щелеп (3-4 т 'екцп) препарат 40Ш в дозi 0,3 мл на щура. З метою вивчення здат-
Hocmi препарату 40IN викликати регенеращю тканин паро-донту тварини eci групи було роздтено на 2 pieHi тдгрупи (а i б). Щурiв тдгруп 1а, 2а i 3а виводили з експерименту вiдразу або на наступний день тсля останнього введення фiз.розчину препарату 40IN. Щурам тдгруп 1б, 2б i 3б проводили евтаназiю через 3 тижт тсля останнього введення розчитв.
Результаты дослгдження. В експериментi на моделi паро-донтиту у щурiв встановлено здаттсть полтептидного препарату 40IN (выон) значно гальмувати деструкцж тс-тковог тканини альвеолярного вiдростка (зниження ступе-ня атрофп альвеолярного вiдростка, р<0,02) за рахунок стимуляци функцюнально! активностi остеобластiв (тд-вищення активностi ЛФ в альвеолярнт юстщ, р<0,001) та ттенсифжаци процесу ремоделювання юстки. Виявлено стшку тслядт полтептидного препарату, яке полягае в тдвищент функцюнальноi активностi остеобластiв протягом 3-х тижтв. Препарат 40IN мае також антиокси-дантну дiю на тканини пародонту (зниження рiвня МДА в дест i в сироватщ кровi, р<0,05).
Висновки. В експериментi на моделi пародонтиту у щурiв, встановлено виражену антиоксидантну дж полтептидного препарату 40IN на тканини пародонта i його здаттсть тдсилювати регенеращю тстковог тканини за рахунок стимуляци функщональног активностi остеобластiв та ттенсифжаци процесу ремоделювання юстки. Ключовi слова: експеримент, пародонтит, регенеращя ю-стковог тканини, щури.
D. I. Borodenko, *Ju.G. Chumakova
State Establishment «The Institute of Stomatology and Maxillo-Facial Surgery National Academy of Medical Science of Ukraine» *Odessa medical Institute of International humanitarian University
EVALUATION OF THERAPEUTIC AND PREVENTIVE ACTION OF THE INJECTION FORM OF POLYPEPTIDES IN THE EXPERIMENT ON THE MODEL OF PERIODONTITIS IN RATS
ABSTRACT
Purpose of work. Study of therapeutic and prophylactic effects of 40IN in experimental periodontitis in rats. Materials and methods. The experiment used 36 white Wistar rats of herd breeding, 4 months of age, both sexes, weighing 350 - 450 g, which were divided into 3 groups. The first group consisted of intact rats on a standard diet of vivarium. Rats of the second group were simulated periodontitis by introducing peroxidation sunflower oil into the diet for 2 months. Rats of the third (experimental) group after simulation of periodontal disease, the day, was introduced on a transitional fold in the area of the incisors and molars of the upper and lower jaws (3-4 injections) 40IN the drug in a dose of 0.3 ml per rat. In order to study the ability of the drug 40IN to cause regeneration of periodontal tissues, animals in all groups were divided into 2 equal subgroups (a and b). Rats of subgroups 1A, 2A and 3A were removed from the experiment immediately or the day after the last administration of the physical solution or the drug 40IN. Rats of subgroups 1B, 2B and 3b were euthanized 3 weeks after the last administration of solutions. Research result. In the experiment, on the model of periodontitis in rats, the ability of the polypeptide preparation 40IN (Vilon) to significantly inhibit the destruction of bone tissue of the alveolar process (decrease in the degree of atrophy of the alveolar pro-
"BicHUK стоматологи", № 2, Т 32 - 2019
cess, p<0.02) by stimulating the functional activity of osteoblasts (increase in the activity of thyroid in the alveolar bone, p<0.001) and intensification of the process of bone remodeling. A stable aftereffect of the polypeptide preparation was revealed, which consists in increasing the functional activity of osteo-blasts for 3 weeks. The drug 40IN also has an antioxidant effect on periodontal tissue (decrease in MDA levels in the gums and serum, p<0.05).
Summary. In the experiment, on the model of periodontitis in rats, a pronounced antioxidant effect of the polypeptide preparation 40IN on the periodontal tissue and its ability to enhance bone regeneration by stimulating the functional activity of oste-oblasts and intensifying the process of bone remodeling were established.
Key words: experiment, periodontitis, bone tissue regeneration, rats.
Известно, что в разных тканях и органах содержится комплекс регуляторных пептидов, принимающих непосредственное участие в межклеточной регуляции. Учеными Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН были сформулированы теоретические и практические основы биорегулирующей терапии, выделены пептиды из хрящей, семенников, печени, сосудов, мочевого пузыря, щитовидной железы и синтезированы синтетические аналоги низкомолекулярных пептидов, регулирующие функцию мозга, сетчатки, иммунной системы, пролиферацию и дифференцировку полипо-тентных клеток [1-3]. В доклинических исследованиях установлена высокая биологическая активность и безопасность синтезированных пептидов [4, 5]. Получены данные о способности пептида А1а-в1и-А8р увеличивать плотность костной ткани [6].
Среди разработок Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН заслуживает внимания препарат 40Ш (вилон), синтезированный методом целенаправленного конструирования на основе анализа аминокислотного состава тимали-на. Препарат выпускается в инъекционной форме и рекомендуется в качестве стимулятора регенерации тканей при гнойно-воспалительных заболеваниях и послеоперационных осложнениях, трофических нарушениях, заболеваниях кожи и слизистых оболочек, последствиях радиационных, термических и химических поражений, сопровождающихся нарушением ре-паративных процессов [7].
Цель работы. Изучение лечебно-профилактических эффектов препарата 40Ш в условиях экспериментального пародонтита у крыс.
Материалы и методы. В эксперименте использовано 36 белых крыс линии Вистар стадного разведения, 4-х месячного возраста, обоего пола, массой 350- 450 г., которые были поделены на 3 группы.
Первую группу составили интактные крысы (п=10, 5 самцов и 5 самок), находящиеся на стандартном рационе вивария. Крысам второй группы моделировали пародонтит путем введения в рацион питания переокисленного подсолнечного масла в течение 2-х месяцев («перекисная» модель, п=10, 5 самцов и 5 самок) [8]. Крысам третьей (опытной) группы после моделирования пародонтита, через день (в 1, 3, 5, 8 и 10 сутки), вводили по переходной складке в области
резцов и моляров верхней и нижней челюстей (3-4 инъекции) препарат 40Ш в дозе 0,3 мл на крысу (п=16, 8 самцов и 8 самок). Выпускают 40Ш в виде стерильного раствора в ампулах по 1,0 мл с содержанием препарата 100 мкг.
Крысам первой и второй групп аналогично вводили в том же объеме 0,9 % раствор №С1.
С целью изучения способности препарата 40Ш вызывать регенерацию тканей пародонта животные во всех группах были разделены на 2 равные подгруппы (а и б). Крыс подгрупп 1а, 2а и 3 а выводили из эксперимента сразу или на следующий день после последнего введения физ. Раствора или препарата 40Ш. Крысам подгрупп 1б, 2б и 3б проводили эвтаназию через 3 недели после последнего введения растворов.
Животных выводили из эксперимента под тио-пенталовым наркозом (20 мг/кг) путем тотального кровопускания из сердца, производили забор крови, биоптатов десны и выделяли нижние челюсти для дальнейших биохимических исследований.
Биохимическими методами в надосадочной жидкости гомогенатов десны определяли активность эла-стазы [9], каталазы [10] и содержание малонового ди-альдегида (МДА) [11]. В сыворотке крови крыс определяли активность эластазы [9], каталазы [10], содержание МДА [11], а также активность аланинами-нотрансферазы (АлАТ) и аспартат-аминотрансферазы (АСТ) [12]. В гомогенатах альвеолярной кости (75 мг/мл 0,1М цитратного буфера, рН 6,1) определяли активность щелочной (ЩФ) и кислой (КФ) фосфатаз [13] и содержание кальция и неорганического фосфата [14].
Результаты исследования. Установлено, что длительное (в течение 2-х месяцев) моделирование пародонтита с использованием «перекисной» модели вызывает у крыс появление клинических симптомов воспаления и деструкции тканей пародонта, а именно видимую гиперемию, отечность и кровоточивость десны, обнажение шеек и подвижность зубов. При этом происходят значительные метаболические нарушения в тканях пародонта и в организме в целом, о чем свидетельствуют биохимические показатели в десне и сыворотке крови (табл. 1, 2).
Моделирование пародонтита привело к достоверному повышению эластазной активности в десне крыс 2-ой группы по сравнению с интактными животными (в I сроке - с 0,042+0,002 нкат/кг до 0,063+0,004 нкат/кг, р<0,005; во II сроке - с 0,042+0,004 нкат/кг до 0,057+0,004 нкат/кг, р<0,05;) и росту концентрации МДА (в I сроке - с 10,85+1,13 ммоль/кг до 14,23+1,33 ммоль/кг, р=0,089; во II сроке - с 10,38+1,08 ммоль/кг до 14,89+0,93 ммоль/кг, р<0,02), что указывает на наличие хронического воспаления в тканях пародонта и усиление процесса ПОЛ. При этом не выявлено существенных отличий между показателями активности каталазы в десне крыс 1-ой и 2-ой групп (табл. 1).
В сыворотке крови у крыс 2б подгруппы после моделирования пародонтита по сравнению с интакт-ными животными (1б подгруппа) во II сроке наблюдения отмечается тенденция к повышению эластазной активности (р=0,057), достоверный рост уровня МДА
"Вiсник стоматологИ", № 2, Т 32 - 2019
Таблица 1
Влияние препарата 40Ш на биохимические показатели в десне крыс (М±m)
Исследуемые группы Эластаза, нкат/кг МДА, 12А12г/кг Каталаза, мкат/кг
I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б)
1. Интактные крысы + инъекции физ. Р-ра, п = 10 (5+5) 0,042 + 0,002 0,042 + 0,004 10,85 + 1,13 10,38 + 1,08 7,67 + 0,24 6,94 + 0,33
2. Модель пародонтита + инъекции 0,063 + 0,004 0,057 + 0,004 14,23 + 1,33 14,89 + 0,93 7,27 + 0,91 5,83 + 0,67
физ. Р-ра, п = 10 (5+5) Р1-2< 0,005 Р1-2< 0,05 Р1-2 = 0,089 Р1-2< 0,02
3. Модель пародонтита + инъекции 0,059 + 0,004 0,051 + 0,003 13,23 + 0,61 12,04 + 0,70 7,35 + 0,30 7,08 + 0,25
40Ш, п = 16 (8+8) Р1-3< 0,02 Р1-3 = 0,055 Р2-3< 0,05 Р2-3 = 0,064
Таблица 2
Влияние препарата 40Ш на биохимические показатели в сыворотке крови крыс (М±m)
Исследуемые группы Эластаза, мккат/л МДА, 12А12г/л Каталаза, мкат/л АлАТ, АСТ,
I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б)
3. Интактные крысы + инъекции физ. Р-ра, П = 10 (5+5) 227,2+33,7 240,4+27,3 0,71+0,07 0,66+0,02 0,17+0,02 0,23+0,02 0,58+0,05 0,54+0,04 0,78+0,07 0,78+0,0 7
2. Модель пародонтита + инъекции физ. Р-ра, П = 10 (5+5) 302,5+26,6 320,1+23,4 Р1-2 =0,057 0,82+0,04 1,04+0,10 Р = 0,073 Р1-2< 0,01 0,30+0,02 Р1-2< 0,005 0,30+0,02 Р1-2 =0,069 0,53+0,04 0,52+0,06 0,83+0,10 0,90+0,0 6
3. Модель пародонтита + инъекции 40Ш, п = 16 (8+8) 275,8+24,0 307,7+49,3 0,68+0,05 0,69+0,07 Р2-3< 0,05 0,23+0,02 Р1-3 = 0,060 Р2-3< 0,05 0,23+0,03 Р2-3< 0,005 0,49+0,02 0,50+0,04 0,88+0,04 0,80+0,1 3
Таблица 3
Влияние препарата 40Ш на биохимические показатели в гомогенатах кости нижней челюсти крыс (М±m)
Исследуемые группы Щелочная фосфатаза, мккат/кг Кислая фосфатаза, мккат/кг Кальций, 12А12г/кг Фосфор, 12А12г/кг
I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б) I срок (а) II срок (б)
3. Интактные крысы + инъекции физ. Р-ра, П = 10 (5+5) 64,66 + 6,10 66,95 + 8,57 2,45 + 0,30 3,26 + 0,44 2,64 + 0,03 2,62 + 0,06 1,59 + 0,09 1,58 + 0,07
2. Модель пародонтита + инъекции физ. Р-ра, п = 10 (5+5) 36,67 + 1,84 Р1-2< 0,005 43,05 + 6,42 Р1-2 = 0,056 4,51 + 0,71 Р1-2< 0,05 3,28 + 0,16 2,53 + 0,11 2,47 + 0,07 1,42 + 0,02 1,46 + 0,04
3. Модель пародонтита + инъекции 40 Ш, п = 16 (8+8) 73,46 + 2,66 Р2-3< 0,001 81,13 + 4,02 Р2-3< 0,001 4,52 + 0,30 Р1-3< 0,001 4,28 + 0,35 Р2-3 = 0,055 2,56 + 0,08 2,55 + 0,08 1,63 + 0,05 Р2-3< 0,01 1,71 + 0,04 Р2-3< 0,002
"BicHUK стоматологи", № 2, Т 32 - 2019
(с 0,66+0,02 ммоль/л до 1,04+0,10 ммоль/л, р<0,01) и на фоне этого - тенденция к повышению активности каталазы (р=0,069) (табл. 2).
Введение полипептидного препарата 40Ш способствовало нормализации некоторых биохимических показателей в десне и сыворотке крови крыс. Так, во II сроке у крыс 3б подгруппы отмечено достоверное снижение уровня МДА (с 14,89+0,93 ммоль/кг до 12,04+0,70 ммоль/кг, р<0,05) и тенденция к повышению активности каталазы (р=0,064) в десне по сравнению с показателями у крыс 2б подгруппы (модель пародонтита), что указывает на антиоксидантное действие препарата 40Ш (табл. 1).
Аналогичные изменения отмечены и в сыворотке крови крыс во II сроке после введения препарата 40Ш (3б подгруппа). По сравнению с крысами 2б подгруппы (модель пародонтита) наблюдается достоверное снижение уровня МДА (с 1,04+0,10 ммоль/л до 0,69+0,07 ммоль/л, р<0,05), то есть проявляются анти-оксидантные свойства полипептидного препарата (табл. 2).
При этом не происходит существенного влияния препарата 40Ш на показатели активности эластазы в десне и сыворотке крови крыс в оба срока наблюдения, на основании чего можно судить об отсутствии у препарата выраженных противовоспалительных свойств (табл. 1, 2).
Установлено также, что под действием полипептидного препарата 40Ш не происходит изменения активности ферментов АлАТ и АСТ, характеризующих функцию печени, на основании чего можно говорить об отсутствии токсического воздействия препарата на организм (табл. 2).
Наиболее интересные данные получены при анализе влияния препарата 40Ш на костную ткань нижней челюсти крыс (табл. 3).
Установлено, что длительное моделирование па-родонтита вызывает у крыс замедление темпа формирования кости, о чем свидетельствует достоверное снижение активности костной ЩФ - биохимического маркера активности остеобластов (с 64,66+6,10 мккат/кг в 1а подгруппе до 36,67+1,84 мккат/кг в 2а подгруппе, р<0,005). При этом усиливается остеокла-стическая резорбция костной ткани, что подтверждается достоверным повышением активности КФ - маркера остеокластов (с 2,45+0,30 мккат/кг в 1а подгруппе до 4,51+0,71 мккат/кг в 2а подгруппе, р<0,05). Содержание минеральных компонентов (кальция и фосфора) в костной ткани челюстей на «перекисной» модели пародонтита не изменилось (табл. 3). Введение препарата 40Ш крысам с экспериментальным пародонтитом привело к активации процесса ре-моделирования кости, о чем свидетельствует достоверное повышение активности ЩФ в оба срока наблюдения (с 36,67+1,84 мккат/кг в 2а подгруппе до 73,46+2,66 мккат/кг в 3а подгруппе, р<0,001, и с 43,05+6,42 мккат/кг в 2б подгруппе до 81,13+4,02 мккат/кг в 3б подгруппе, р<0,001). Необходимо отметить стойкое последействие полипептидного препарата, которое заключается в повышении функциональной активности остеобластов на протяжении 3-х недель после последнего введения 40!М При этом под-
держивается высокая активность остеокластов (по активности КФ), что является необходимым условием процесса ремоделирования кости и реализуется через систему регуляторных белков RANKL-RANK-OPG [15]. Значительное повышение активности ЩФ в костной ткани, по-видимому, обуславливает достоверное увеличение концентрации фосфора в кости в оба срока наблюдения (3а и 3б подгруппы) (табл. 3).
Выводы. Таким образом, в эксперименте, на модели пародонтита у крыс, установлены выраженное антиоксидантное действие полипептидного препарата 40IN на ткани пародонта и способность его усиливать регенерацию костной ткани за счет стимуляции функциональной активности остеобластов и интенсификации процесса ремоделирования кости.
Список литературы
1. Морозов В. Г. Выделение из костного мозга, лимфоцитов и тимуса полипептидов, регулирующих процессы межклеточной кооперации в системе иммунитета / В. Г. Морозов, В. Х. Ха-винсон // Докл. АН СССР. - 1981. - Т. 261, № 1. - С. 235-239.
2. Морозов В. Г. Пептидные биорегуляторы: (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения) / В. Г. Морозов, В. Х. Хавинсон. - СПб.: Наука, 1996. - 74 с.
3. Хавинсон В. Х. Пептидная регуляция старения / Хавинсон В. Х. - СПб.: Наука, 2009. - 54 с.
4. Кузник Б. И. Цитомедины и их роль в регуляции физиологических функций / Б. И. Кузник // Успехи современ. Биологии. -1995. - Т. 115, № 3. - С. 353-367.
5. Хавинсон В. Х. Тканеспецифическое действие пептидов / В. Х. Хавинсон // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины - 2001. - Т. 132, № 8. - С. 228-229.
6. Изучение влияния пептидных регуляторов на структурно-функциональное состояние костной ткани крыс при старении / В. В. Поворознюк, В. Х. Хавинсон, А. В. Макогончук [и др.] // Успехи геронтологии. - 2007. - Т. 20., № 2. - С. 134-137.
7. Боярова С. К. Применение пептидного биорегулятора вилона для лечения пародонтита у больных старческого и пожилого возраста / С. К. Боярова // Дантист. - 2004. - № 10. - С. 5 -6.
8. Сукманский О. И. Экспериментальная модель генерализованного пародонтита / О. И. Сукманский, О. А. Макаренко // Вк-ник стоматологи. - 2006. - № 2. - С. 2-3.
9. Visser L. The use of p-nitrophenyl-N-tert-butyl-oxycarbonyl-a-alaninate as substrate for elastase / L. Visser, E. R. Blaut // Biochem. Biophys. Acta. - 1972. - Vol. 268, N. 1. - P. 275-280.
10. Метод определения активности каталазы / М. А. Коро-люк, Л. И. Иванова, Н. Т. Майорова, В. Е. Токарев // Лабораторное дело. - 1988. - № 1. - С. 16-18.
11. Стальная И. Д. Метод определения малонового диальде-гида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная, Т. Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии / [Под ред. В.Н. Ореховича]. - М.: Медицина. - 1977. - С. 66-68.
12. Горячковский А. М. Клиническая биохимия / Горячков-ский А. М. - Одесса: «Астропринт», 1998. - С. 245-247.
13. Левицкий А. П. Сравнительная оценка трех методов определения активности фосфатаз слюны / А. П. Левицкий, А. И. Марченко, Т. Л. Рыбак // Лабор. Дело. - 1973. - № 10. - С. 624-625.
14. Камышников В. С. Справочник по клинико-биохимической и лабораторной диагностике / Камышников В. С. -М., 2004. - 834 с.
15. Control of osteoclastogenesis and bone resorption by members of the TNF family of receptors and ligands / M.C. Horowitz, Y. Xi, K. Wilson, M.A. Kacena // Cytokine Growth Factor Rev. - 2001. - N. 12. - P. 9-18.
REFERENCES
1. Morozov V. G., Havinson V. H. Isolation of polypeptides from bone marrow, lymphocytes and thymus, regulating the processes of intercellular cooperation in the immune system. Dokl. AN SSSR. 1981; 261,1:235-239.
2. Morozov V. G., Havinson V. H. Peptidnye bioreguljatory: (25-letnij opyt jeksperimental'nogo I klinicheskogo izuchenija). [Peptide bioregulators: (25 years of experimental and clinical experience).] SPb.:
"BicHUK стоматологи", № 2, Т 32 - 2019
Nauka; 1996:74.
3. Havinson V. H. Peptidnaja reguljacija starenija [Peptide regulation of aging]. SPb.: Nauka; 2009:54.
4. Kuznik B. I. Cytomedins and their role in the regulation of physiological functions^ Uspehi sovremennoj biologii. 1995;115,3:353-367.
5. Havinson V. H. Tissue-specific action of peptides. Bjulleten' jeksperimental'noj biologii Imediciny. 2001;132,8:228-229.
6. Povoroznjuk V. V., Havinson V. H., Makogonchuk A. V. I dr. Study of the effect of peptide regulators on the structural and functional state of rat bone tissue during aging. Uspehi gerontologii. 2007;20,2:134-137.
7. Bojarova S. K. The use of a peptide bioregulator vilona for the treatment of periodontitis in elderly patients. Dantist. 2004; 10:5-6.
8. Sukmanskij O. I., Makarenko O. A. Experimental model of generalized periodontitis. Visnik stomatologic 2006;2:2-3.
9. Visser L., Blaut E. R. The use of p-nitrophenyl-N-tert-butyl-oxycarbonyl-a-alaninate as substrate for elastase. Biochem. Biophys. Acta. 1972;268, 1:275-280.
10. Koroljuk M. A., Ivanova L. I., Majorova N. T., Tokarev V. E. Method for determining catalase activity. Laboratornoe delo. 1988;1:16-18.
11. Stal'naja I. D., Garishvili T. G. Metod opredelenija malonovogo dial 'degida s pomoshh ju tiobarbiturovoj kisloty. Sovremennye metody v biohimii [Method of determination of malonic dialdehyde using thiobarbituric acid. Modern methods in biochemistry] [Under the editorship. V.N. Orehovicha]. Moskva.: Medicina; 1977:66-68.
12. Gorjachkovskij A. M. Klinicheskaja biohimija [Clinical biochemistry]. Odessa: «Astroprint»; 1998:245-247.
13. Levickij A. P., Marchenko A. I., Rybak T. L. Comparative evaluation of three methods for determining the activity of saliva phos-phatases. Laboratornoe delo. 1973;10:624-625.
14. Kamyshnikov V. S. Spravochnik po kliniko-biohimicheskoj I laboratornoj diagnostike [Guide to clinical,biochemical and laboratory diagnostics] Moskva;2004:834.
15. Horowitz M.C., Xi Y., Wilson K., Kacena M.A. Control of osteoclastogenesis and bone resorption by members of the TNF family of receptors and ligands. Cytokine Growth Factor Rev. 2001; 12:9-18.
noTCynraa05.04.19
DOI 10.35220/2078-8916-2019-32-2-14-18 УДК 577.15:616.36:616.078
1С. С. Дешна, к. бюл н., 2О. €. Успенський, 31. О. Сел1ванська, к. тех. Н., 3Л. М. Хромагта, к. бюл. н.
1 Державна установа <^i3HKO-xiMi4HHÜ шститут iM. О. В. Богатського НАН Украши» (м. Одеса) 2Харшвський нацюнальний медичний ун1верситет Державна установа «1нститут стоматологи та щелепно-лицево! хiрурril Нацюнально! академп медичних наук Украши»
ПРОФ1ЛАКТИЧНА Д1Я НА ЯСНА ЩУР1В Ф1ТОГЕЛЮ «Л1ЗОЦИМ-ФОРТЕ» В УМОВАХ 1НДОМЕТАЦИНОВО1 ШТОКСИКАЦП
Оральт аплтацй фiтогелiв з eMicmoM лiзоциму, кверцетину або лiзоциму+кверцетину («Лiзоцим-форте») попереджа-ють розвиток запально-дистрофiчних i дисбютичних про-цеав в яснах щурiв, яю отримували тдометацин. Патоло-гiчний стан ясен оцтювали за характером змт активностi ферментiв еластази, каталази, уреази, лiзоцима i вмiсту МДА. Найбыьш ефективним пародонтопротекторним за-
собом виявився лiзоцим-форте.
Ключовi слова: ясна, тдометацин, лiзоцим, кверцетин, фi-тогель, запалення, дисбiозу, антиоксиданти.
1С.. С. Декина, 2О. Е. Успенский, 3И. А. Селиванская, 3Л. Н. Хромагина
'Государственное учреждение «Физико-химический институт им. О. В. Богатского НАН Украины», Одесса 2Харьковский национальный медицинский
университет Государственное учреждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины»
ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ НА ДЕСНУ КРЫС ФИТОГЕЛЯ «ЛИЗОЦИМ-ФОРТЕ»
ПРИ ИНДОМЕТАЦИНОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
Оральные аппликации фитогелей, содержащих лизоцим, кверцетин или лизоцим+кверцетин («Лизоцим-форте»), предупреждают развитие воспалительно-дистрофических и дисбиотических процессов в десне крыс, получавших ин-дометацин. Патологическое состояние десны оценивали по характеру изменений активности ферментов эластазы, каталазы, уреазы, лизоцима и содержания МДА. Наиболее эффективным пародонтопротекторным средством оказался лизоцим-форте.
Ключевые слова: десна, индометацин, лизоцим, кверцетин, фитогель, воспаление, дисбиоз, антиоксиданты.
1S. S. Dekina, 2O. E. Uspenskiy, 3I. A. Selivanskaya, 3L. N. Khromagina
1 State Establishment «The Physico-Chemical Institute named after O.V.Bogatskij of the NAS of Ukraine», Odessa
2Kharkiv national medical university 3 State Establishment «The Institute of Stomatology and Maxillo-Facial Surgery National Academy of Medical Science of Ukraine»
PREVENTIVE EFFECT ON THE GINGIVA OF RATS PHYTOGEL "LYSOZYME-FORTE" WITH INDOMETHACIN INTOXICATION
ABSTRACT
The aim: To determine the possibility of preventing pathological changes in the gums of rats with indomethacin intoxication using phytogel containing lysozyme and quercetin. The materials and methods: Four phytogels were used: the 1st did not contain lysozyme and quercetin, the 2nd contained lysozyme, the 3rd contained quercetin, and the 4th contained lysozyme and quercetin (Lysozyme-Forte). Experiments were carried out on 5 groups of rats: 1st - intact (control), 2nd - received "empty" gel, 3rd - received gel with lysozyme, 4th - gel with quercetin and 5th - gel with lysozyme and quercetin. Gels were applied in the form of applications to the mucous membrane of the gums and cheeks in a dose of 0.5 ml per rat daily for 3 days. Indomethacin was administered in the / gastrointestinal dose of 10 mg/kg once on the 3rd day of the experiment to rats of the 2nd, 3rd, 4th and 5th groups. Euthanasia was carried out on the 4th day of the experiment. In the homogenate of the
© Декта С. С., Еспенський О. С., Сел1ванська I. О., Хромагта Л. М., 2019.
