CC BY
22
Электронный научно-образовательный вестник "Здоровье и образование в XXI веке" №9, 2007г. (Т. 9)
ОЦЕНКА КОМПЛЕМЕНТФИКСИРУЮЩЕЙ ФУНКЦИИ IGG ПРИ НЕОПЛАСТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССАХ
Князева О.А.
Башкирский государственный медицинский университет, кафедра биологической и биоорганической химии, г. Уфа
Одной из важнейших эффекторных функций иммуноглобулинов G (IgG) - ключевых макромолекул специфического (адаптивного) иммунитета, является связывание комплемента. Система комплемента, в последнее время рассматриваемая как важнейший регулятор адаптивного иммунитета, играет также ведущую роль в механизмах иммунологической толерантности и патогенезе различных заболеваний. В начале классического пути активации комплемента происходит присоединение к комплексу антиген-IgG субкомпонента первого фактора комплемента C1q. Исследование особенностей данного взаимодействия при неопластических процессах может открыть путь к пониманию причин ускользания опухоли из-под иммунологического контроля и новым терапевтическим подходам.
Нами было показано, что при хроническом лимфолейкозе (ХЛЛ), ходжкинских (ХЛ), неходжкинских лимфомах (НХЛ), раке молочной железы (РМЖ) происходит ослабление силы связывания между IgG и C1q, выражающееся в увеличении константы диссоциации (Kd). Наиболее слабым взаимодействием с C1q обладали IgG больных ХЛЛ, для которых Kd составила (13,16 ± 3,29)10-7 М. IgG больных ХЛ имели Kd, равную (6,68±1,22)10-7М, НХЛ - (5,76±1,25)10-7М, РМЖ - (3,88±0,7)10-7М. При этом для здоровых доноров, принятых за контроль, Kd была достоверно ниже и составляла (1,91±0,42)10-7 М: в сравнении с ХЛЛ и ХЛ - p < 0,01; НХЛ - p < 0,02, РМЖ - p < 0,05.
Для выяснения причины снижения комплементфиксирующей функции IgG при неопластических процессах, было проведено исследование аффинности полученных нами с помощью гибридомной технологии, специфических моноклональных антител (МКА) к различным антигенным детерминантам IgG в норме и при ХЛЛ. В результате было обнаружено, что при ХЛЛ происходит снижение аффинности МКА к антигенным детерминтам, расположенным лишь в области Fc фрагмента IgG (примерно на 30%).
Основываясь на полученных данных, была выдвинута гипотеза о стерическом экранировании центра связывания IgG с C1q метаболитами, образующимися вследствие усиленного распада опухолевых масс. В своих дальнейших рассуждениях мы исходили из того, что при связывании с IgG двух лигандов: метаболита L и C1q, наряду с комплексами IgG-C1q образуются IgG-L-C1q и IgG-L-C1q2. Kd данных комплексов будут изменяться под влиянием стохастических факторов (чем больше лигандов связывается с IgG, тем больше диссоциация образовавшегося комплекса), т.е. их Kd должны располагаться в следующем порядке: Kd (IgG-L-C1q2) > Kd (IgG-L-C1q) > Kd (IgG-C1q). При этом количество C1q в комплексах должно уменьшаться таким образом: IgG-L-C1q2 > IgG-L-C1q > IgG-C1q.
Для проверки нашей гипотезы, необходимо было оценить количество C1q, связывающегося с IgG в норме и при патологии. Определение реакции связывания комплемента в присутствии IgG больных ХЛЛ и здоровых доноров показало, что фиксация комплемента IgG больных ХЛЛ в 20% растворе сахарозы происходит на 20-40% сильнее, чем IgG здоровых лиц. Наряду с этим, в ИФА с помощью МКА было показано, что IgG при ХЛЛ связывают C1q в 22,25 - 22,75 больше чем в контроле.
Рост неопластических клеток всегда сопровождается усиленным их распадом. Т.к. одним из основных компонентов клеточных мембран является фосфатидилхолин, который наряду с другими лигандами может связываться с Fc-фрагментом IgG, мы определили Kd комплекса C1q-IgG здорового донора, до и после его взаимодействия с фосфатидилхолином. В результате получилось, что лигандирование IgG фосфатидилхолином вызывает увеличение Kd примерно в 10 раз: с 1,6 10-6 М до 16,8 10-6 М. Кроме того, было показано, что происходит снижение аффинности МКА (примерно на 30%) к антигенным детерминтам в области Fc-фрагмента IgG, связанного с фосфатидилхолином. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что снижение комплементфиксирующей функции IgG при неопластических процессах происходит за счет его лигандирования продуктами деструкции опухолевых клеток, в частности, фосфатидилхолином.
Материалы VIII Международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке: Концепции болезней цивилизации»
Стр. [346]
