CC BY
32
УДК 618.177-089.888.11
DOI 10.21685/2072-3032-2018-1-9
А. В. Лапштаева, О. П. Ерохина
ОЦЕНКА КЛИНИКО-АНАМНЕСТИЧЕСКИХ ДАННЫХ И ПОКАЗАТЕЛЕЙ СИСТЕМЫ ИНТЕРЛЕЙКИНА-1 У ЖЕНЩИН С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМ БЕСПЛОДИЕМ
Аннотация.
Актуальность и цели. Изучены клинико-анамнестические данные и уровень IL-1a, IL-ip, IL-1RA в сыворотке крови у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием, проходящих процедуру экстракорпорального оплодотворения.
Материалы и методы. Было обследовано 60 женщин с трубно-перито-неальным бесплодием, проходящих лечение на базе Мордовского республиканского клинического перинатального центра. Содержание цитокинов определяли методом иммуноферментного анализа с использованием наборов фирмы ООО «Цитокин» (г. Санкт-Петербург, Россия). Статистический анализ выполняли с помощью пакета прикладных программ Stat Soft Statistica 10.0 (США).
Результаты. Статистически значимых различий по клинико-анамнестичес-ким данным между группами с различными исходами лечения методом экстракорпорального оплодотворения не было выявлено. У женщин с наступившей беременностью в результате процедуры экстракорпорального оплодотворения выявлено повышение продукции IL-1a по сравнению с женщинами с ненаступившей беременностью. Различий в содержании IL-1P и IL1ra между группами выявлено не было.
Выводы. Изучение иммунопатогенетических механизмов трубно-перито-неального бесплодия, выявленные особенности продукции цитокинов семейства IL-1 обосновывают необходимость дополнительного изучения цитокино-вого статуса женщин с данной патологией и открывают перспективы для оптимизации подходов к ведению пациенток.
Ключевые слова: трубно-перитонеальное бесплодие, экстракорпоральное оплодотворение, цитокины.
A. V. Lapshtaeva, O. P. Erokhina
EVALUATION OF CLINICAL-ANAMNESTIC DATA AND INDICATORS OF THE INTERLEYKIN-1 SYSTEM IN WOMEN WITH TUBE-PERITONEAL INFERTILITY
Abstract.
Background. The goal of the research is to study clinical and anamnestic data and level of IL-1 a, IL-1P, IL-1RA in the serum of women with tubo-peritoneal infertility undergoing in vitro fertilization.
Materials and methods. 60 women with tube-peritoneal infertility who underwent treatment at the Mordovian Republican Clinical Perinatal Center were examined. The content of cytokines was determined by the method of enzyme immunoassay with the use of kits of OOO "Tsitokin" (St. Petersburg, Russia). Statistical analysis was performed using the Stat Soft Statistica 10.0 software package (USA).
Results. Statistically significant differences in clinical and anamnestic data between groups with different outcomes of IVF have not been revealed. In women with the onset of pregnancy as a result of the procedure of in vitro fertilization, an increase in IL-1 a production was revealed in comparison with women with unsuc-
cessful pregnancy. There were no differences in the content of IL-ip and ILlra between the groups.
Conclusions. The study of immunopathogenetic mechanisms of tubal-peritoneal infertility, the revealed features of the production of IL-1 family cytokines substantiate the need for further study of the cytokine status of women with this pathology and open up prospects for optimizing approaches to managing patients.
Key words: tube-peritoneal infertility, IVF, cytokines.
Введение
Одной из наиболее важных проблем современного здравоохранения является проблема бесплодного брака. Частота бесплодных супружеских пар колеблется от 15 до 25 % и не имеет тенденции к снижению. Бесплодным считается брак, в котором беременность не наступает в течение года регулярной половой жизни без использования методов контрацепции. Причиной бесплодия могут быть нарушения в репродуктивной системе одного или обоих супругов.
На долю женского бесплодия приходится 45 % от общего числа зафиксированных случаев. Почти у половины пациенток, обратившихся за медицинской помощью по поводу бесплодия, выявляется трубно-перитонеальная форма, причинами которой могут быть перенесенные ранее инфекционно-воспалительные заболевания органов малого таза и оперативные вмешательства на органах малого таза и брюшной полости, внутриматочные манипуляции (медицинские аборты, диагностические выскабливания эндометрия, осложнения после использования внутриматочных средств контрацепции) [1].
В настоящее время все большую популярность набирает такой способ преодоления бесплодия, как экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО). Однако в 2014 г. в Российской Федерации только в 31,5 % случаев протокол ЭКО привел к наступлению беременности и лишь в 22,8 % наблюдений завершился родами [2]. Безрезультативная процедура ЭКО приводит к значительным финансовым затратам, требует последующей медицинской и психологической реабилитации женщины.
Известно, что в процессах повреждения и восстановления брюшины в условиях воспаления наиболее важную роль играют клетки иммунной системы (макрофаги, тучные клетки, натуральные киллеры) и продуцируемые ими цитокины [3-5]. Кроме того, иммунокомпетентные клетки и цитокины играют важную роль в регуляции репродуктивного процесса. Они принимают участие в фолликулогенезе, овуляции, имплантации, децидуализации и пла-центации [6-8]. В связи с этим существует необходимость в изучении имму-нопатогенетических аспектов трубно-перитонеального бесплодия и наступления индуцированной беременности.
Цель исследования - оценить клинико-анамнестические данные и уровень IL-1a, IL-1 в, IL-1RA в сыворотке крови у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием, проходящих процедуру экстракорпорального оплодотворения.
1. Материалы и методы исследования
Было обследовано 60 женщин с трубно-перитонеальным бесплодием, проходящих лечение на базе Мордовского республиканского клинического
перинатального центра в период с января по май 2016 г. Средний возраст составил 31,9 ± 4,0 года. Право на проведение обследования подтверждалось юридически подписанием пациенткой добровольного информированного согласия. Все стадии исследования соответствовали законодательству РФ, международным этическим нормам и одобрены локальным этическим комитетом Мордовского государственного университета им. Н. П. Огарева.
Критериями включения в исследование служили: подписание пациенткой информированного согласия на участие в исследовании, трубно-перитонеальная форма бесплодия, нормальный кариотип обоих супругов, фертильная сперма мужа, перенос эмбрионов только хорошего качества, отсутствие противопоказаний к проведению ЭКО. Критериями исключения из исследования были: другие формы бесплодия, острые генитальные и экстра-генитальные заболевания и хронические в стадии обострения.
Стимуляция суперовуляции всем пациенткам была проведена в рамках «короткого» протокола с применением рекомбинантного фолликулостимули-рующего гормона и антагонистов гонадотропин-релизинг гормона. Диагностика беременности проводилась на основании определения концентрации Р-субъединицы хорионического гонадотропина человека (ХГЧ) в сыворотке через 14 дней после переноса эмбрионов в полость матки и ультразвуковой диагностики на 21 день. В зависимости от эффективности процедуры ЭКО пациентки были разделены на две группы: основная группа (n = 30) -с наступившей беременностью, группа сравнения (n = 30) - женщины, у которых беременность не наступила.
Все женщины были обследованы согласно приказу Минздрава России от 30.08.2012 № 107Н «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказаниях и ограничениях к их применению». Дополнительно определяли содержание цитокинов интерлейкина-1а (IL-1a), интерлейкина-1р (IL-1P) и рецепторного антагониста интерлейкина-1 (IL1ra) методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием наборов фирмы ООО «Цитокин» (г. Санкт-Петербург, Россия) на автоматическом анализаторе «Personal lab» (Италия). Материалом для исследования являлись образцы цельной крови, полученной на 3-4 день менструального цикла.
Статистический анализ выполняли с помощью пакета прикладных программ Stat Soft Statistica 10.0 (США). Нормальность распределения значений в выборках проверяли с помощью графических (частотная диаграмма) и расчетных (критерий Колмогорова - Смирнова) методов. Качественные значения представлены в виде абсолютных величин (n) и процентных долей. Достоверность различий между группами определяли с использованием ^-критерия Вилькоксона - Манна - Уитни. Значимость выявленных различий и взаимосвязей во всех видах анализа была принята при уровне значимости p < 0,05.
2. Результаты и обсуждение
Средний возраст женщин основной группы составил 33,0 ± 3,5 года, группы сравнения - 32,9 ± 4,1 года. При этом раннего репродуктивного возраста были 56,7 % женщин с успешной процедурой ЭКО и 60 % женщин с неэффективной процедурой. Таким образом, группы были сопоставимы по возрасту (р = 0,471).
При анализе характера менструальной функции выявлено, что у всех обследованных женщин был регулярный менструальный цикл, без значительных отклонений от нормы. У женщин с эффективной процедурой ЭКО средний возраст менархе составил 13,1 ± 1,2 лет, средняя продолжительность менструального цикла 28,4 ± 1,8, средняя длительность менструации 5,0 ± 0,8 дней, у 73,3 % женщин интенсивность менструации была умеренная, а у 66,7 % -менструация не сопровождалась болезненными ощущениями. В группе женщин с неэффективной процедурой ЭКО выявлено несколько иные показатели: средний возраст менархе составил 13,6 ± 2,0 лет, средняя продолжительность менструального цикла 29,3 ± 1,9, средняя длительность менструации 6,2 ± 0,7 дней, у 66,7 % женщин интенсивность менструации была умеренная, а у 73,3 % - менструация не сопровождалась болезненными ощущениями, однако межгрупповых различий выявлено не было.
Из анамнеза заболевания было выявлено, что продолжительность бесплодия у женщин основной группы в среднем составила 5,4 ± 3,5 года, а у женщин группы сравнения 5,0 ± 3,2 года, без статистически значимых различий (р = 0,139).
Данные о репродуктивной функции обследованных женщин представлены в табл. 1. Первичное бесплодие было диагностировано у 40 % женщин в основной группе и у 46,7 % женщин в группе сравнения. Вторичное бесплодие диагностировано у 60 % женщин в основной группе и у 53,3 % женщин в группе сравнения. Значимых различий в структуре исходов предыдущих беременностей в исследуемых группах выявлено не было ^ = 0,605).
Таблица 1
Характеристика репродуктивной функции обследованных женщин с вторичным бесплодием
Параметр Основная группа (П = 18) Группа сравнения (п = 16)
Роды, п (%) 7 (38,9 %) 6 (37,5 %)
Эктопическая беременность, п (%) 9 (50 %) 8 (50 %)
Медицинский аборт, п (%) 7 (38,9 %) 6 (37,5 %)
Самопроизвольный выкидыш ранних сроков, п (%) 3 (16,7 %) 4 (25 %)
Как видно из данных, приведенных в табл. 2, в структуре перенесенных гинекологических заболеваний у обследованных женщин преобладали хроническое воспаление матки и/или придатков (у 83,3 % женщин). Значимых различий в частоте и структуре ранее перенесенных гинекологических заболеваний в исследуемых группах выявлено не было ^ = 0,381).
Среди перенесенных оперативных вмешательств на органах малого таза у женщин как основной группы, так и группы сравнения преобладали гистероскопия с раздельным диагностическим выскабливанием, зарегистрированные в 58,3 % случаев. Анализ данных между группами позволил установить, что в группе женщин с эффективной процедурой ЭКО в анамнезе преобладали односторонняя тубэктомия и диагностическая лапароскопия, а в группе женщин с неэффективной процедурой - пластические операции на маточных трубах, при этом значимых различий в частоте и структуре перене-
сенных оперативных вмешательствах в исследуемых группах выявлено не было (р = 0,146) (табл. 3).
Таблица 2
Структура гинекологических заболеваний обследованных женщин
Гинекологическая патология Основная группа (п = 30) Группа сравнения (п = 30)
Хроническое воспаление придатков и/или матки, п (%) 24(80 %) 26 (86,7 %)
Неопухолевые заболевания шейки матки, п (%) 10 (33,3 %) 9 (30 %)
Инфекции, передаваемые половым путем, п (%) 7 (23,3 %) 7 (23,3 %)
Спаечный процесс в малом тазу 1-11 степени, п (%) 7 (23,3 %) 8 (26,7 %)
Миома матки малых размеров, п (%) 3 (10 %) 2 (6,7 %)
Таблица 3 Характеристика перенесенных оперативных вмешательств на органах малого таза в исследуемых группах
Оперативные вмешательства Основная группа (п = 30) Группа сравнения (п = 30)
Гистеросопия + раздельное диагностическое выскабливание, п (%) 17 (56,7 %) 18 (60 %)
Односторонняя тубэктомия, п (%) 3 (10 %) 2 (6,7 %)
Двухсторонняя тубэктомия, п (%) 3 (10 %) 3 (10 %)
Пластические операции на маточных трубах, п (%) 1 (3,3 %) 2 (6,7 %)
Консервативная миомэктомия, п (%) 1 (3,3 %) 1 (3,3 %)
Диагностическая лапароскопия, п (%) 2 (6,7 %) 1 (3,3 %)
У наибольшего процента обследованных женщин настоящая попытка ЭКО была вторая - у 46,7 % женщин из основной группы и у 50 % женщин из группы сравнения. У женщин с эффективной процедурой ЭКО у 33,3 % настоящая попытка была первая, у 6,7 % - третья, у 13,3 % - четвертая и более; у женщин с неэффективной процедурой ЭКО у 40 % настоящая попытка была первая, у 6,7 % - третья, у 3,3 % - четвертая и более.
Таким образом, анализ клинико-анамнестических данных между группами с различной эффективностью ЭКО не выявил достоверных различий. Вероятно, возраст, менструальная функция, продолжительность бесплодия, репродуктивная функция, перенесенные гинекологические заболевания и оперативные вмешательства не вносят значимый вклад в исход процедуры ЭКО.
Данные о концентрации 1Ь-1а, 1Ь-1р и 1Ь1га в сыворотке крови обследованных пациенток представлены в табл. 4. У женщин с наступившей беременностью в результате процедуры ЭКО выявлено повышение продукции 1Ь-1а по сравнению с женщинами с ненаступившей беременностью. Различий в содержании 1Ь-1р и ТЬ1га между группами выявлено не было.
Таблица 4
Концентрация цитокинов семейства 1Ь-1 в сыворотке крови обследованных пациенток, Ме ^ 0.25^ 0.75)
Показатель Основная группа (n = 30) Группа сравнения (n = 30) Достоверность различий, р
IL-la 2l,3 (3,9; 36,2) l3,5 (5,0; l6,0) 0,029
IL-lß 8,9 (8,5; ll,4) 8,5 (8,2; ll,6) 0,537
ILlra l42,9 (95,l; l92,8) l35,4 (82,3; l86,0) 0,782
По данным авторов, для успешной имплантации эмбриона в эндометрий необходимо провоспалительное микроокружение, сопровождаемое сдвигом Thl-типа ответа в ТЪ2-тип для модуляции иммунных и эндокринных механизмов [9, 10]. Цитокины семейства IL-la являются ведущими медиаторами воспалительных реакций, способным к индукции их как в тканях, так и на системном уровне. Связываясь со своими специфическими мембранными рецепторами IL-la, IL-lß, IL-1RA способствуют экспрессии интегрированных молекул клетками эндометрия для адгезии бластоцисты. Более того, бла-стоциста сама способна к экспрессии рецепторов IL-la, на стимуляцию которых продуцируется ХГЧ, необходимый для формирования иммунологической толерантности в системе мать-плод [ll].
Заключение
Не выявлено достоверных различий между группами по показателям возраста, менструальной функции, продолжительности бесплодия, репродуктивной функции, перенесенным гинекологическим заболеваниям и оперативным вмешательствам.
У женщин с трубно-перитонеальным бесплодием с благоприятным исходом ЭКО выявлено достоверное повышение уровня IL-la.
Библиографический список
1. Кулаков, В. И. Лечение женского и мужского бесплодия. Вспомогательные репродуктивные технологии / В. И. Кулаков, Б. В. Леонов, Л. Н. Кузьмичев. - М. : МИА, 2005. - 592 с.
2. Корсак, В. С. Регистр центров ВРТ в России. Отчет за 20l4 год / В. С. Корсак, А. А. Смирнова, О. В. Шурыгина // Проблемы репродукции. - 20l6. - Т. 22, № 5. - С. l0-2l.
3. Arung, W. Detry O. Pathophysiology and prevention of postoperative peritoneal adhesions / W. Arung, M. Meurisse // World J Gastroenterol. - 20ll. - № l7 (4l). -Р. 4545-4553.
4. Young, V. J. The role of the peritoneum in the pathogenesis of endometriosis / V. J. Young, J. K. Brown, P. T. Saunders, A. W. Horne // Hum Reprod Update. -20l3. - № l9 (5). - Р. 558-569.
5. Бурлев, В. А. Системные и локальные изменения про- и антиинфламаторной активности у больных с различными стадиями распространения тазовых пери-тонеальных спаек и бесплодием / В. А. Бурлев, Н. А. Ильясова, Е. Д. Дубинская, А. С. Гаспаров // Проблемы репродукции. - 20l4. - № l. - С. l2-l9.
6. Роль некоторых цитокинов в эффективности лечения бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения / Н. О. Мотовилова, И. Ю. Коган, К. А. Сысоев, А. Н. Буйнова, А. Ю. Грязнов, А. А. Тотолян // Медицинская иммунология. -20l2. - Т. l4, № 4-5. - С. 373-382.
7. Сеидова, Л. А. Основы регуляции имплантации (молекулярно-биологические аспекты) / Л. А. Сеидова, К. А. Яворовская // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. - 2010. - Т. 9, № 3. - С. 79-83.
8. Сельков, С. А. Иммунологические механизмы контроля развития плаценты / С. А. Сельков, Д. И. Соколов // Журнал акушерства и женских болезней. - 2010. -Т. LIX, № 1. - С. 6-10.
9. Посисеева, Л. В. Иммунология ранних сроков беременности: подготовка эндометрия к имплантации (обзор литературы) / Л. В. Посисеева, М. С. Тулупова, Е. А. Калинина // Доктор.Ру. - 2013. - № 7-1 (85). - С. 74-78.
10. Сидельникова, В. М. Невынашивание беременности : руководство для практикующих врачей / В. М. Сидельникова. - М. : МИА, 2010. - 536 с.
11. Th1/Th2 Paradigm in Pregnancy: Paradigm Lost? / G. Chaouat, N. Ledee-Bataille, S. Dubanchet, S. Zourbas, О. Sandra // Int Arch Allergy Immunol. - 2004. - Vol. 134, № 2. - Р. 93-119.
References
1. Kulakov V. I., Leonov B. V., Kuz'michev L. N. Lechenie zhenskogo i muzhskogo be-splodiya. Vspomogatel'nye reproduktivnye tekhnologii [Treatment of women and men infertility. Auxiliary reproductive technologies]. Moscow: MIA, 2005, 592 p.
2. Korsak V. S., Smirnova A. A., Shurygina O. V. Problemy reproduktsii [The problems of reproduction]. 2016, vol. 22, no. 5, pp. 10-21.
3. Arung W., Meurisse M. World J Gastroenterol. 2011, no. 17 (41), pp. 4545-4553.
4. Young V. J., Brown J. K., Saunders P. T., Horne A. W. Hum Reprod Update. 2013, no. 19 (5), pp. 558-569.
5. Burlev V. A., Il'yasova N. A., Dubinskaya E. D., Gasparov A. S. Problemy reproduktsii [The problems of reproduction]. 2014, no. 1, pp. 12-19.
6. Motovilova N. O., Kogan I. Yu., Sysoev K. A., Buynova A. N., Gryaznov A. Yu., Totolyan A. A. Meditsinskaya immunologiya [Medical immunology]. 2012, vol. 14, no. 4-5, pp. 373-382.
7. Seidova L. A., Yavorovskaya K. A. Voprosy ginekologii, akusherstva i perinatologii [Problems of gynecology, obstetrics and perinatology]. 2010, vol. 9, no. 3, pp. 79-83.
8. Sel'kov S. A., Sokolov D. I. Zhurnal akusherstva i zhenskikh bolezney [Journal of obstetrics and women diseases]. 2010, vol. LIX, no. 1, pp. 6-10.
9. Posiseeva L. V., Tulupova M. S., Kalinina E. A. Doktor.Ru. 2013, no. 7-1 (85), pp. 74-78.
10. Sidel'nikova V. M. Nevynashivanie beremennosti: rukovodstvo dlya praktikuyushchikh vrachey [Noncarrying of pregnancy: a guide for general practitioner]. Moscow: MIA, 2010, 536 p.
11. Chaouat G., Ledee-Bataille N., Dubanchet S., Zourbas S., Sandra O. Int Arch Allergy Immunol. 2004, vol. 134, no. 2, pp. 93-119.
Лапштаева Анна Васильевна
ассистент, кафедра иммунологии, микробиологии и вирусологии, Национальный исследовательский Мордовский государственный университет имени Н. П. Огарева (Россия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68)
E-mail: av_lapshtaeva@mail.ru
Lapshtaeva Anna Vasil'evna Assistant, sub-department of microbiology and virology, National Research Ogarev Mordovia State University (68 Bolshevistskaya street, Saransk, Russia)
Ерохина Ольга Петровна старший преподаватель, кафедра иммунологии, микробиологии и вирусологии, Национальный исследовательский Мордовский государственный университет имени Н. П. Огарева (Россия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68)
E-mail: grishkinao@mail.ru
УДК 618.177-089.888.11 Лапштаева, А. В.
Оценка клинико-анамнестических данных и показателей системы интерлейкина-1 у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием /
А. В. Лапштаева, О. П. Ерохина // Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. - 2018. - № 1 (45). - С. 87-94. Б01 10.21685/2072-3032-2018-1-9.
Erokhina Ol'ga Petrovna Senior lecturer, sub-department of immunology, microbiology and virology, National Research Ogarev Mordovia State University (68 Bolshevistskaya street, Saransk, Russia)
