ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ТЕСТИРОВАНИЯ НА СИФИЛИС В ДОНОРСКОЙ СЛУЖБЕ КЫРГЫЗСКОЙ РЕСПУБЛИКИ Текст научной статьи по специальности «Прочие медицинские науки»

ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ТЕСТИРОВАНИЯ НА СИФИЛИС В ДОНОРСКОЙ СЛУЖБЕ КЫРГЫЗСКОЙ РЕСПУБЛИКИ

О.П. Северина

Научно-производственное объединение «Профилактическая медицина» МЗ КР, Республиканский научно-практический центр контроля качества лабораторной диагностики

инфекционных болезней, г. Бишкек

Кыргыз Республикасынын донор кызматындагы котон жарасынын тестирлоонун

сапатын баалоо

О.П. Северина

Илимий - ондуруштук бирикмеси «Алдын алуучу медицина» Инфекциялык ооруулардын лаборатори-ялык диагностикасынын сапатын контролдоо республикалык илимий -практикалык борбору, Бишкек ш.

Кыскача мазмуну. Илимий иште донордун канын котон жарасына экинчи ирет тестирлоонун сапатын баалоо ыкмасы менен алынган жыйынтыктары келтирилген, Кыргыз Республикасынын донордук кызма-тында скринингде МПР, ПРР, ПГАР жана ИФА ыкмаларына салыштырмалуу баа берилген. Кан кызматынын лабораторияларында котон жарасынын аныктоонун референс-лабораторияларына салыштырмалуу томон денгээли корсотулгон (23,4%), бул корунуш донорлукта МПР реакциясын, ал эми референс-лабораториясын-да ИФА ыкмасы колдонулганы менен негизделет. Котон жарасынын диагностика ыкмалары салыштырмалуу баалоодо ИФА ыкмасынын кабылдагычтыгы (90,5%), андан кийин ПРР ыкмалары (70%), РПГА (56%) жана акыркы орунда МПР корсоттуу. Колдонулган ыкмаларды пайдаланууда спецификасы ИФА- 99%, ПРР-100%, ПГР -100% и МПР -99% тузду.

Estimation of quality of testing for the syphilis in the donor service of the Kyrgyz Republic

O.P. Severina

Abstract. In article results of an assessment of quality of testing of donor blood for syphilis by method of repeated testing are presented, the comparative estimation of methods THIA, RPR, TRHA and ELISA is given at screening in the donor service of Kyrgyzstan. It is shown low level of detecting syphilis (23,4 %) in laboratories of service of blood in relation to the results received in reference-laboratory which has been caused by use in a donor service of method THIA while in reference-laboratory method ELISA was applied. The comparative estimation of methods of diagnostics of a syphilis has shown the greatest sensitivity of method ELISA (90,5%), followed by methods RPR (70%), TRHA (56%) and in the last place were THIA (21,6 %). Specificity of the methods use 99 % for ELISA, 100% for RPR, 100% for TRHA and 99% for THIA - 99%.

В соответствии с международными нормами и стандартами обеспечения безопасности донорской крови, каждая единица крови должна подвергаться исследованию на сифилис [1]. Технологические разработки последних десятилетий существенно повысили потенциал защиты запасов крови от этой инфекции во многих государствах [2,3]. Вместе с тем существует ряд недостатков связанных с лабораторным тестированием на сифилис и обеспечивающих риск заражения гемотрансфузионным путем [3, 4, 5]. Ведущей причиной низкого качества тестирования может стать используемый метод диагностики сифилиса. В этой связи представляло важным изучение качества тестирования на сифилис в лабораториях службы крови Кыргызстана, а также сравнительная оценка серологических методов выявления антител к сифилису (анти- Tr. pallidum), для последующего внедрения наиболее чувствительного и специфичного метода в службу Крови.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

1. Материалы.

Образцы сывороток крови человека. 2546 образцов из г. Бишкек, 500 из г. Ош и 500 из г.

Жалал-Абад.

Диагностические наборы. Для проведения иммуноферментного анализа (ИФА) - «ICE* Syphilis» фирмы ABBOTT Murex Biotech Limited, США; «Syphilis Recombinant ELISA Test System» ф. ORTHO-Clinical Diagnostics, Германия; «Рекомби-Бест антипаллидум-суммарные антитела-стрип» и «РекомбиБест антипаллидум IgM-стрип» ф. «Вектор - Бест».

Для реакции микропреципитации (РМП) - «Люис-тест» ф. «Диагностические системы», Россия; «Сифилис - АгКл для РМП» ф. «ЭкоЛаб», Россия.

Для проведения теста быстрого определения реагинов плазмы (РПР-тест) - «Syphilis RPR test» ф. «Human», Германия.

Для проведения реакции пассивной гемагглю-тинации (РПГА) «Syphilis TPHA liquid» ф. «Human», Германия; «ДС - РПГА - Анти - ЛЮИС» ф. «Диагностические системы», Россия.

2. Методы

Лабораторные методы диагностики: Применялись методы РМП, РПР, РПГА, ИФА.

Оценка качества тестирования донорской крови

ежемесячный научно-практическии медицинским журнал

проводилась методом повторного тестирования. Для этого в референс-лаборатории Республиканского научно-практического центра контроля качества лабораторной диагностики инфекционных болезней было проведено тестирование предварительно обследованных образцов донорской крови в лабораториях службы крови г. Бишкек, Ош и Жалал-Абад. На этапе исследования референс-лаборатория не располагала данными о результатах, полученных в службе крови. В последующем, для сравнения полученных результатов с данными центров крови, они были представлены в рефе-ренс-лабораторию.

Сравнительная оценка методов диагностики сифилиса проводилась путем тестирования истинно позитивных и истинно негативных образцов в РМП, РПР, РПГА и ИФА.

статистические методы. Для оценки качества тестирования и методов диагностики сифилиса применялась таблица 4-х полей:

ИП ЛП

W

где: ИП - истинно положительные образцы; ЛП - ложно положительные образцы; ИО - истинно отрицательные образцы; ЛО - ложно отрицательные образцы. Расчет чувствительности и специфичности проводился по следующим формулам: Ч = (А/(А+С)) х 100% С = р/р+В)) х 100%

Положительная (ПЦП) и отрицательная (ПЦО) прогностическая ценность рассчитывались по формулам:

ПЦО = р/р+С)) х 100% ПЦП = (А/(А+В)) х 100% результаты

По сумме результатов, полученных в лабораториях донорской службы г. Бишкек, г. Ош и г. Жалалабад, из 3 546 исследованных на сифилис образцов сывороток методом РМП было установлено наличие анти-Тг.ра1Мит в 40 образцах. При последующем исследовании в референс-лабора-тории антитела к сифилису были обнаружены в 171 образце. При этом совпадение по положительным результатам установлено в 23,4% (40/171) (табл. 1). Совпадения по отрицательным результатам были определены в 99,9% (3374/3375) случаев. Больший процент совпадений положительных результатов отмечался в лаборатории службы крови г. Ош (28%), однако разница была не существенна (Р>0,05) по сравнению с результатами данными по г. Бишкек и г. Жалал-Абад.

Нами было установлено существенное расхождение результатов тестирования позитивных образцов, полученных в лабораториях служб крови с результатами референс-лаборатории, что в первую

очередь мы связываем с применением в службе крови метода РМП, который являлся менее чувствительным по сравнению с ИФА, используемым для оценки качества тестирования в контрольной лаборатории.

Данное обстоятельство побудило нас провести сравнительную оценку серологических методов диагностики сифилитической инфекции для последующего внедрения наиболее чувствительного и специфичного метода в службу крови. Результаты, полученные при постановке различными методами, оценивали по отношению к данным, полученными с помощью экспертной ИФА тест-системы, обладающей 100% чувствительностью и специфичностью. Наиболее значимыми при оценке каждого метода стали показатели прогностической ценности отрицательных (ПЦО) и положительных (ПЦП) образцов, то есть вероятность того, что полученные отрицательные и положительные результаты таковыми и являются.

Результаты сравнительной оценки диагностической эффективности и их ценности различных методов выявления anti-Tr. pallidum представлены в таблице 2 и демонстрирует их неодинаковый потенциал.

Наибольшую чувствительность, то есть способность выявлять истинно положительные образцы, продемонстрировал метод ИФА с применением тест-систем для выявления суммарных антител российского производства. Вместе с тем он оказался менее чувствительным в сравнении с экспертной ИФА-тест-системой (90,5%). Выявление антител класса IgM методом ИФА оказалось малоинформативным, что показывает нецелесообразность использования этого маркера при скрининге донорской крови. Чувствительность РПР-теста была несколько ниже по сравнению с ИФА и составила 70%. Метод РПГА оказался на третьем месте по чувствительности - 56%, наименьшая выявляющая способность была у РМП - 21,6%. Специфичность, то есть способность выявлять истинно отрицательные образцы, всех оцениваемых методов была примерно одинаковой.

Результаты, полученные нами при оценке прогностической ценности отрицательных результатов (ПЦО) подтвердили, что наибольшей вероятностью получения истинно отрицательных результатов обладал метод ИФА для выявления суммарных антител. То есть при применении этого метода достигался наименьший риск пропуска положительных на антитела к сифилису образцов донорской крови. Полученные нами результаты, позволили сделать вывод о неравнозначном качестве выявления позитивных образцов при использовании различных методов серодиагностики сифилиса с наилучшими показателями метода ИФА.

заключение

Таким образом, полученные результаты указывают на недостаточность использования метода РМП, поскольку он не позволяет обеспечить

^ш

Таблица 1

совпадение результаты тестирования образцов донорской крови на антитела к Tr. Pallidum в лабораториях служб Крови по отношению к результатам референс-лаборатории

Цент крови Выявленные положительные образцы % совпадения Выявленные отрицательные образцы % совпадения

РНПЦККЛДИБ Центры крови РНПЦККЛДИБ Центры крови

Г. Бишкек 116 25 21,6% 2430 2430 100%

Г. Ош 36 11 28% 464 463 99,7%

Г. Жалал-Абад 19 4 20,1% 481 481 100%

ВСЕГО 171 40 23,4% 3375 3374 99,97%

Таблица 2

сравнительные результаты методов диагностики сифилиса по отношению к экспертной тест-системе

ифа.

Параметры диагностическом эффективности Методы

ИФА-суммарные скрининговая ИФА-IgM РМП РПР РПГА

% % % % %

Чувствительность 90,5% (105/116) 1,7% (2/116) 21,6% (25/116) 70% (81/116) 56% (65/116)

Специфичность 99% (89/90) 98,9% (89/90) 99% (89/90) 100% (90/90) 100% (90/90)

ПЦП 100% 50% 100% 100% 100%

ПЦО 90% 43% 49,4% 72% 79%

в максимально высокой степени безопасность реципиентов крови от заражения сифилисом. Высокие показатели выявления истиннопози-тивных и истиннонегативных образцов методом ИФА позволили нам рекомендовать данный метод для внедрения в лаборатории службы Крови Кыргызстана

Описок литературы

1. В.Е. Колупаев, И.А. Арефьева Обеспечение качества ск-рининговой диагностики //Научно-практический журнал

«Клинико-лабораторный консилиум». - 2009. - № 1 (26).

- С.17-26.

2. Служба в системах Здравоохранения стран Центральной Азии: Оценка угрозы распространения ВИЧ/СПИД и иных инфекционных заболеваний. Доклад Международного Банка Реорганизации и Развития. - Всемирный Банк, Май-2008. - 59 с.

3. Improving Blood Safety Worldwide: Editorial //Lancet.

- 2007. - Vol.270, N4. -P.361.

4. Безопасность крови и донорство //Информационный бюллетень ВОЗ. - 2007. - № 279.