CC BY
217
УДК 615.454.2:618.1
ОЦЕНКА КАЧЕСТВА РАЗРАБОТАННЫХ СУППОЗИТОРИЕВ С ФЛУКОНАЗОЛОМ
Т.В. АВТИНА) ТА. ПАНКРУШЕВА, М.В. ПОКРОВСКИЙ
i Курский государственный медицинский университет a Белгородский государственный национальный исследовательский университет
e-mail: [email protected]
В статье приведены показатели качества, разработанные для стандартизации и изучения стабильности суппозиториев с флуконазолом.
Ключевые слова: суппозитории, флуконазол, стандартизация, вагинальный кандидоз.
В настоящее время, в связи с увеличением числа факторов риска и широким распространением кандидозной инфекции, появлением новых данных о патогенезе на фоне иммунодефицитных состояний, вопросы профилактики и лечения кандидоза представляют весьма сложную проблему [1]. Кандидоз слизистых оболочек - самый распространенный вид патологии среди кандидозных поражений организма человека. Наиболее частым его проявлением яв-ляется вагинальный, который прочно занимает лидирующую позицию в гинекологии среди специфических инфекций репродуктивных органов, уступая лишь бактериаль-ному вагинозу [2, 3]. В арсенале клиницистов имеется большое количество высокоэффективных средств для системного и местного лечения кандидозного вульвовагинита. Однако, не-смотря на широкое применение системных антимикотических препаратов, сохраняет-ся вероятность развития побочных эффектов [4]. Недостатки системных средств пре-допределяют актуальность поиска и разработки новых лекарственных препаратов ан-тифунгального действия, способных создавать высокие концентрации в месте введения и оказывать выраженный терапевтический эффект при отсутствии системного дейст-вия. Подтвержденная исследователями клиническая эффективность системных препаратов флуконазола в лечении микозов слизистых оболочек различной локализа-ции [5, 6, 7] указывает на перспективность их применения для профилактики и лече-ния кандидозов, а также обусловливает целесообразность разработки препаратов флу-коназола локального действия. Изучение литературы и ассортимента, представленных на фармацевтическом рынке лекарственных препаратов, используемых наружно для лечения интраваги-нальных инфекций, не оставляет сомнения, что одной из перспективных форм явля-ются суппозитории [8]. В результате проведения комплекса экспериментальных исследований (физиче-ских, физико-химических, технологических, биофармацевтических и микробиологиче-ских) нами обоснованы и разработаны составы и технология суппозиториев флукона-зола на липофильной (витепсол Н-15) и гидрофильной (полиэтиленоксидной) основах, предназначенных для местной терапии вагинальных кандидозов слизистых оболочек. Цель исследования - разработать показатели качества суппозиториев с ан-тимикотическим средством - флуконазолом.
Для оценки качества разработанных составов суппозиториев опирались на ОСТ №91500.05.001-00 «Стандарт качества лекарственных средств. Основные положения» и ФС «Суппозитории» ГФ XI изд. [9]. Согласно указанной нормативной документации обязательными показателями качества разрабатываемой лекарственной формы являются такие как: описание; подлинность; средняя масса и отклонение от нее; темпера-тура плавления; время полной деформации или время растворения; количественное определение; микробиологическая чистота; однородность дозирования. Кроме перечисленных, устанавливали соответствие таким требованиям, как «Размер частиц» для исследования суппозиториев с ЛВ, вводимыми по типу суспензии и тест «Растворение», которые предлагаются разработчиками проекта общей фарма-копейной статьи «Суппозитории» для включения в Государственную Фармакопею Рос-сийской Федерации XII изд [10]. Полученные методом выливания суппозитории по внешнему виду одинаковой торпедовидной формы, однородные, белого цвета, с гладкой поверхностью (на про-дольном срезе отсутствуют вкрапления), средней массой 1,5 г, отклонение от средней массы не превышает ± 5%. Температура плавления суппозиториев, изготовленных на основе липофильно-го характера (витепсол Н-15)
находится в пределах от (34,5-35,5)°С, а время полной деформации - в интервале 12,5-13,5 мин. Значения данных показателей качества суп-позиториев не превышают нормативного: по температуре плавления - (37,0±1,0)°С и времени полной деформации (не более 15 мин.). Суппозитории на гидрофильной ПЭО-основе растворяются в течение 9-11 мин, что соответствует требованиям НД. В литературе описаны разнообразные методы количественного определения флуконазола. В нормативной документации на субстанцию предложен метод неводно-го титрования [ФСП 42-10217-05]. Широко используют метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, с помощью которого определяют флуконазол в фарма-цевтических препаратах и билогических жидкостях [ФСП 42-7685-07]. При нормиро-вании показателя «однородность дозирования» в капсулах применяют метод спектро-фотометрии в ультрафиолетовой области [ФСП 427685-07]. Каждая из указанных ме-тодик имеет свои положительные и отрицательные стороны. Как одна из доступных и простых в исполнении, для количественного определения флуконазола в суппозиториях, нами была использована и модифицирована в экспериментальных исследованиях УФ-спектрофотометрия. Для анализа отбирали точную навеску из измельченной суппозиторной массы двадцати суппозиториев. Учитывая свойства растворимости флуконазола (легко рас-творим в метаноле, умеренно растворим в этаноле 96%, растворим в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной, мало растворим в воде), его извлекали из суппозитори-ев, используя в качестве экстрагента 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной. Ана-лиз проводили по собственному поглощению в диапазоне длин волн 200^400 нм в кювете с толщиной слоя 1 см на спектрофотометре фирмы Shimadzu UV-1700. В ука-занном диапазоне наблюдали выраженный максимум при длине волны 261 нм, кото-рая была выбрана в качестве аналитической для количественного определения флуко-назола. Спектрофотометрическое определение проводили с использованием раствора стандартного образца (СО) флуконазола (Eur Ph CRS). Проведенный количественный анализ флуконазола методом УФ-спектрофото-метрии позволил определить, что его содержание в лекарственной форме, приготов-ленной на основах витепсол Н-15 и ПЭО находится в пределах от 0,142 г до 0,158 г и укладывается в допустимые нормы отклонений. Для идентификации флуконазола в суппозиториях были изучены УФ-спектры поглощения извлечений из лекарственной формы в 0,1М растворе кислоты хлористо-водородной в области от 200 до 400 нм. Они имеют полосу поглощения с максимумом при (2б1±1) нм. Характер полученных спектральных кривых и максимум поглощения идентичны раствору СО флуконазола (Eur Ph CRS).
Кроме того, была проведена идентификация антимикотического средства мето-дом ТСХ восходящим способом в тонком слое сорбента в экспериментально подобранной системе растворителей - этилацетат:изопропиловый спирт:раствор аммиака концентрированный (8:7:3) по величине Rf. Зоны адсорбции флуконазола визуализировали в УФ свете, наблюдая на хроматограмме пятно фиолетового цвета. В процессе определения действующего вещества в суппозиториях, приготовленных на двух основах, на хроматограммах не наблюдали посторонних пятен и шлейфов у пятна. Rf испытуемого раствора соответствует значению Rf раствора стандартного образца вещества-свидетеля флуконазола (Eur Ph CRS), что подтверждает его подлинность. Как известно, биофармацевтическая доступность лекарственной субстанции из лекарственной формы, в том числе суппозиториев, во многом определяется размером ее частиц. Разработанные составы и технология суппозиториев позволили существенно изменить фракционный состав частиц субстанции флуконазола, в сравнении с исход-ным. Их размер не превышает 30 мкм, что вполне соответствует требованиям, предъ-являемым к данной лекарственной форме. Достигнутая степень дисперсности положительно сказалась на таких показате-лях как «Однородность дозирования» и «Растворение». Для количественной оценки активной субстанции в лекарственной форме при определении этих показателей так же использован метод спектрофотометрии в УФ-области. Для проведения анализа по показателю «Однородность дозирования» отбирали по десять единиц испытуемых суппозиториев и из каждой готовили исследуемый рас-твор. Результаты анализа суппозиториев находятся в пределах допустимых отклоне-ний. Это в очередной раз доказывает, что разработанная технология
позволяет достичь точности дозирования флуконазола при изготовлении суппозиторной массы. Суппозитории оценивали по тесту «Растворение» в приборе «вращающаяся корзинка» с использованием тестера для определения растворимости Erweka серии DT 606, позволяющего одновременно испытывать 6 образцов. При скорости вращения корзинки 100 об/мин. в 0,1М растворе кислоты хлористоводородной (объем среды 1000 мл) и продолжительности эксперимента 30 мин. в акцепторной среде содержание флуконазола достигает установленного нами критерия оценки качества данной лекар-ственной формы - не менее 80% (Q). При разработке новых лекарственных препаратов чрезвычайно важную роль играет обеспечение их микробиологической стабильности, отсутствие которой может привести к разрушению действующего вещества, снижению его активности, возмож-ному повышению токсичности, изменению технологических и органолептических свойств лекарственной формы. Известно, что суппозитории относятся к лекарственным средствам нестерили-зуемым в процессе производства, и могут быть контаминированы микроорганизмами. В связи с этим, приготовленные суппозитории оценивали по показателю «Микробио-логическая чистота». Анализ проводили в соответствии с требованиями ГФ XII изд (ОФС 42-0067-07) методом мембранной фильтрации, включающим в себя количест-венное определение грибов и бактерий, а так же наличие грамотрицательных и грам-положительных микроорганизмов. При изучении суппозиториев по данному показа-телю не выявили роста микроорганизмов. Это означает, что свежеприготовленные и хранившиеся в течение 24 мес. суппозитории на основе витепсол Н-15 и ПЭО, содер-жащие флуконазол и ПАВ (бензалкония хлорид и твин-80), соответствуют требовани-ям ГФ XII изд. по показателю «Микробиологическая чистота». Наличие биоцидного действия суппозиториев в отношении специфичного тест-штамма Candida albicans АТСС 885-653, а также грамотрицательных (Escherichia coli АТСС 25922, Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027.) и грамположительных (Bacillus subti-lis АТСС 6633, Bacillus cereus АТСС 10702 и Staphylococcus aureus АТСС 6538 - Р) бакте-рий оценивали методом диффузии в агар. Полученные результаты свидетельствуют о наличии биоцидного действия разработанных суппозиториев в отношении изучаемых тест-штаммов микроорганизмов. Таким образом, при разработке показателей качества суппозиториев и их оцен-ке ориентировались на современные требования, предъявляемые к лекарственной форме. Проведенный анализ суппозиториев, изготовленных на основах витепсол Н-15 и ПЭО, выявил их соответствие по всем анализируемым показателям.
Литература
1. Кисина, В.И. Оптимизация подходов к лечению кандидоза вульвы и влагалища / В.И. Кисина // Клиническая дерматология и венерология. - 2010. - № 2. - С. 96-103.
2. Мирзабалаева, А.К. Кандидоз гениталий и бактериальный вагиноз в практике акуше-ра-гинеколога / А.К. Мирзабалаева, Ю.В. Долго-Сабурова // Проблемы медицинской миколо-гии. - 2004. - Т. 6. - № 3. - С. 18-24.
3. Хмельницкий, О.К. О кандидозе слизистых оболочек / О.К. Хмельницкий // Архив патологии. - 2000. - № 6. - С. 3-10.
4. Просовецкая, А.Л. Новые аспекты в лечении кандидозного вульвовагинита / А.Л. Просвецкая // Вестник дерматологии и венерологии. - 2006. - № 6. - С. 31-33.
5. Кунельская, В.Я. Опыт применения микофлюкана (флуконазола) при лечении фа-рингомикоза / В.Я. Кунельская // Лечащий врач. - 2005. - № 1. - С. 74-76.
6. Рецидивирующий урогенитальный кандидоз: лечение с использованием флуконазола / Е.В. Соколовский, А.М. Савичева, З.М. Мартикайнен [и др.] // Журнал акушерства и женских болезней. - 2008. - № 1. - С. 4146.
7. Дмитриева, Л.А. Использование препарата микомакс при лептоорихиозе и кандидозе полости рта / Л.А. Дмитриева, В.Н. Царев // Стоматология. - 2003. - № 3. - С. 63-64.
8. Глембоцкая, Г.Т. Востребованность нового лекарственного препарата в форме ваги-нальных суппозиториев. Биофармацевтические исследования суппозиториев для лечения ва-гинального кандидоза / Т.Г. Глембоцкая, И.В. Филатова, О.В. Козуб // Фармация. - 2010. - № 2. - С. 31-33.
9. Государственная фармакопея СССР: 11-е изд. / МЗ СССР. - М. : Медицина, 1990. - Вып. 2. - 400 с.
10. Митькина, Л.И. Проект общей фармакопейной статьи «Суппозитории» / Л.И. Мить-кина, Р.А. Лавренчук, В.Л. Багирова // Тез. докл. XVII Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство» (12-16 апр. 2010 г., Москва). - М., 2010. - С. 532.
DEVELOPMENT OF INDICATORS OF QUALITY SUPPOSITORIES WITH
FLUCONAZOLE
T.V. AVTINAi TA PANKRUSHEVAl M.V. POKROVSKY2 1 The mdkcators of quatty Moped for
Kursk State Medical University a Belgorod National standardization and studymg of stability suppositones Research University e-mail: with fluconazole are given in the article. Key words:
[email protected] suppositories, fluconazole, standardization, va-ginal
candidiasis.
