CC BY
28
ПРИКЛАДНАЯ ХИМИЯ И ХИМИЧЕСКАЯ ТЕХНОЛОГИЯ
УДК 615:658.012.7(075)
Т. В. Дудник, С. Ю. Гармонов
ОЦЕНКА КАЧЕСТВА КОНЦЕНТРАТА ИЗОСОРБИДА ДИНИТРАТА ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАСТВОРА ДЛЯ ИНФУЗИЙ
Ключевые слова: органические нитраты, изосорбидадинитрат, раствор для инфузий.
Разработана методика определения оценки качества концентрата изосорбидадинитрата для приготовления раствора для инфузий. Проведено количественное определение действующего вещества и родственных примесей методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методом абсорбционной спектрофотометрии в ультрофиолетовой и видимой областях определены нитриты.
Keywords: organic nitrate, isosorbidedinitrate, solution for infusion.
Determination method of evaluation test of isosorbidedinitrate concentrate for solution preparation for infusion was created. Analysis of active ingredient assay and impurities were carried out by HPLC. Nitrites were determined by absorption spectrophotometry in ultraviolet and visible regions.
Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) занимают одно из ведущих мест по смертности и инвалидизации населения. Ишемическая болезнь сердца (ИБС) является одним из наиболее распространенных заболеваний. Ежегодно в России фиксируют около 700 тыс. смертей, вызванных различными формами ИБС. Мировая смертность отИБС составляет около 70%. В развивающихся странах, в том числе в России, люди от ССЗ умирают на 15-25 лет раньше, тенденция к заболеваниям сердечно-сосудистой системы неуклонно возрастает, и смертность от ССЗ в России не имеет отчетливой тенденции к снижению [1].
Поэтому разработка новых лекарственных средств и совершенствование существующих лекарственных форм на основе органических нитратов является весьма актуальной для лечения указанной патологии.
Органические нитраты - группа лекарственных средств, механизм действия которых заключается в довольно быстром расширении венозного и артериального русла. В настоящее время широко используются три органических нитрата: нитроглицерин, изосорбидадинитрат, изосорбид-5-мононитрат. Эффект нитратов заключается в высвобождении оксида азота (NO), последующем расширении венозного русла и снижении преднагрузки на миокард. Проникая в гладкомышечную клетку сосудистой стенки, NO активирует гуанилатциклазу с образованием циклического гуанозинмонофосфата (цГМФ), в результате количество внутриклеточного кальция уменьшается, и гладкая мускулатура расслабляется. NO также стимулирует высвобождение эндотелиального простациклина и угнетает синтез тромбоксана А2, что усиливает вазодилатацию. Оксид азота расширяет коронарные артерии в ишемизированных участках миокарда, усиливает коллатеральный кровоток, расширяет крупные субэпикардиальные артерии, что способствует уменьшению очага ишемии. Следует помнить, что
нитраты способны снижать уровень артериального давления.
Есть данные, что органические нитраты улучшают физиологическую активность эндотелиоцитов, восполняя дефицит оксида азота, оказывают некоторое торможение на процессы атерогенеза, а также обладают антитромботическим действием [2].
Схема механизма действия нитратов представлена на рисунке 1 [3].
Органические нитраты -^шшжшшш-»- ИШ& — —расслабление гладкой мускулатуры сосудов Органические нитраты
Метаболизм в печени|
Шшлашииша
I
ГТФ —► ИШЗ> —► расслабление ншдкаа мускулатуры сосудов
Рис. 1 - Схема механизма действия нитратов
Изосорбидадинитрат является одним из основных антиангинальных средств из группы органических нитратов. Периферический вазодилататор, влияющий преимущественно на венозные сосуды. Помимо непосредственного коронаролитического действия уменьшает работу сердца за счет снижения пред- и постнагрузки, сокращает потребность миокарда в кислороде. Применение изосорбидадинитрата улучшает коронарную перфузию без развития симптома обкрадывания. Оказывает антигипертензивное действие. Применяют также как периферический
вазодилататор при тяжелых формах сердечной недостаточности: вследствие снижения тонуса периферических венозных сосудов уменьшает нагрузку на сердце, давление в сосудах малого круга, одышку, удушье.
Брутто-формула изосорбидадинитрата -ОбИвМгОв, химическая формула - 1,4:3,6-диангидро-Б-глюцитол динитрат [4]. Структурная формула действующего вещества - изосорбидадинитрата представлена на рисунке 2.
О S
о
Рис. 2 - Структурная формула изосорбидадинитрата
Изосорбидадинитрат - белый
кристаллический порошок без запаха, практически нерастворимый в воде, хорошо растворим в ацетоне, спирте, эфире. Точка плавления — 70 °С; log P (октанол-вода) = 1,31; растворимость в воде — 550 мг/л при температуре 25 °С. Молекулярная масса изосорбидадинитрата 236,14.
Изосорбидадинитрат показан к применению при стенокардии (купирование и профилактика приступов), в т.ч. нестабильной, остром инфаркте миокарда, периоде после перенесенного инфаркта миокарда (восстановительное лечение), острой левожелудочковой недостаточности, артериальной гипертензии, застойной сердечной недостаточности, легочной гипертонии, хроническом легочном сердце, профилактике и лечении коронароспазма при проведении коронароангиографии [5].
Целью данной работы является разработка методики определения оценки качества дженерикового лекарственного средства «Изосорбидадинитрат, концентрат для
приготовления раствора для инфузий, 0,1%, 10 мл».
Для производства опытной серии препарата лекарственную субстанцию изосорбидадинитрата (10 мг / 10 мл препарата) и натрия хлорид (85 мг / 10 мл препарата) растворяли в емкости, предварительно заполненной водой для инъекций. После полного растворения, доводили рНраствора 2М раствором натрия гидроксида и 1М хлороводородной кислотой до значения рН равного 7,0.
Оценка качества препарата проводилась по следующим показателям: описание, прозрачность раствора, цветность раствора, рН, родственные примеси (нитриты, изосорбида 5-нитрат, изосорбида 2-нитрат), количественное определение.
рН лекарственного средства измеряли на рН-метре S400 Seven Excellence™ (MettlerToledo).
Родственные примеси (нитриты) определяли методом абсорбционной
спектрофотометрии в ультрофиолетовой и видимой областях на спектрофотометре СФ-2000 при длине волны 524 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя компенсационный раствор. Для приготовления растворов использовали реактивы фирмы SigmaAldrich (США).
Родственные примеси (изосорбида 5-нитрат и изосорбида 2-нитрат) определялись методом жидкостной хроматографии при помощи жидкостного хроматографа модели Waters 2695 с детектором 2487.Использовалась
хроматографическая колонка размером 250х4,6 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным эндкепированным для хроматографии, с размером частиц 5 мкм WatersSymmetryC18. В качестве подвижной фазы применялись Метанол: Вода (30:70). Анализ проводили при длине волны 220 нм; температура колонки - 30°С, скорость подвижной фазы - 1 мл/мин.
Содержание изосорбидадинитрата в препарате определяли также методом жидкостной хроматографии при помощи жидкостного хроматографа моделиWaters 2695 с детектором 2487. Использовалась хроматографическая колонка размером 250х4,6 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным эндкепированным для хроматографии, с размером частиц 5 мкм WatersSymmetry C18. В качестве подвижной фазы использовали Метанол: Вода (45:55). Анализ проводили при длине волны 214 нм; температура колонки - 30°С, скорость подвижной фазы - 1 мл/мин [6].
Для хроматографирования использовали стандартные образцы органических нитратов Европейской фармакопеи. Содержание
действующих веществ в стандартах: изосорбида 5-мононитрата - 88,9%, изосорбида 2-мононитрата -90%, изосорбидадинитрата - 40,8%.
Изосорбидадинитрат, концентрат для приготовления раствора для инфузий, 0,1% -прозрачная, бесцветная жидкость без запаха. Препарат прозрачный и бесцветный по сравнению с водой для иъекцийсрН 6,49.
В результате проведения анализа «Родственные примеси» было установлено, что площади пиков изосорбида 2-нитрата на хроматограммах испытуемых растворов составляют менее 1/5 площади соответствующих пиков на хроматограммах растворов сравнения,
следовательно, согласно методике проведения анализа они не учитываются. В свою очередь, площади пиков изосорбида 5-нитрата на хроматограммах испытуемых растворов составляют менее 1/5 площади соответствующих пиков на хроматограммах растворов сравнения,
следовательно, пики изосорбида 5-нитрата также не учитывают.
Проверка пригодности хроматографической системы соответствует требованиям данной
методики, что приведено в таблице 1. Следовательно, полученные результаты можно считать достоверными.
Таблица 1 - Проверка пригодности хроматографической системы определения родственных примесей
Параметры проверки пригодностихроматографиче ской системы Норм ы Фактическ ие результаты
Коэффициент разделения между пиками изосорбида 5-нитрата и изосорбида 2-нитрата на хроматограмме раствора сравнения (с) не менее 2,4 3,4
Относительное стандартное отклонение для пиков изосорбида 2-нитрата на хроматограмме раствора сравнения (а) не более 2,0% 0,1 %
Относительное стандартное отклонение для пиков изосорбида 5-нитрата на хроматограмме раствора сравнения (b) не более 2,0% 0,2 %
В результате проведения количественного определения было установлено, что содержаниеС6Н8Ы208 (изосорбидадинитрата) в 10 мл препарата составляет 9,94 мг, что соответствует нормам, заявленным в нормативной документации. Проверка пригодности хроматографической системы также соответствует требованиям данной методики, что приведено в таблице 2. Следовательно, полученные результаты являются достоверными.
Таблица 2 - Проверка пригодности хроматографической системы количественного определения изосорбидадинитрата
Параметры проверки пригодности хроматографической системы Нормы Фактические результаты
Эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику изосорбидадинитрата на хроматограмме стандартного раствора не менее 1000 теоретических тарелок 17331 теоретических тарелок
Относительное стандартное отклонение для пика изосорбидадинитрата на хроматограмме стандартного раствора не более 2,0% 0,3%
Результаты оценки качественных показателей изосорбидадинитрата, концентрата для
приготовления раствора для инфузий, 0,1% представлены в таблице 3.
Таблица 3 - Результаты оценки качественных показателей изосорбидадинитрата, концентрата для приготовления раствора для инфузий, 0,1%
Показатели качества Нормы отклонений Полученные результаты
Описание Прозрачная, бесцветная жидкость без запаха Прозрачная, бесцветная жидкость без запаха
Прозрачность раствора Препарат должен быть прозрачным по сравнению с водой для инъекций Р или опалесценция не должна превышать опалесценцию суспензии сравнения I Препарат прозрачный по сравнению с водой для инъекций Р
Цветность раствора Препарат должен быть бесцветным по сравнению с водой для инъекций Р Препарат бесцветный по сравнению с водой для инъекций Р
рН От 3,5 до 7,0 6,49
Родственные примеси: - нитриты не более 1 мкг/мл 0,46
- изосорбида 5-нитрат не более 0,5% отсутствует
- изосорби-да 2-нитрат не более 0,5% отсутствует
Содержание изосорбида динитрата в 10 мл препарата От 9,50 мг до 10,50 мг 9,86
Как видно из результатов, представленных в таблице 3, изосорбиддинитрат, концентрат для приготовления раствора для инфузий, 0,1% по своим качественным показателям удовлетворяет требованиям нормативной документации.
Многочисленные исследования доказывают высокую клиническую эффективность и безопасность назначения внутривенных форм нитратов при остром коронарном синдроме, острой сердечной недостаточности, острой декомпенсации хронической сердечной недостаточности [7].
Инфузия изосорбидадинитрата (ИД) при НС позволяет в той или иной степени избежать неблагоприятных эффектов, наблюдаемых при терапии НГ.
При НС назначение внутривенных нитратов способствует полному купированию болевого
синдрома в максимально ранние сроки, что значительно улучшает клиническое состояние пациента.
Внутривенныеформы нитратов являются единственными антиангинальными препаратами в арсенале специалиста в случае развития ОИМ на фоне потребления кокаина [8].
Внутривенные формы нитратов являются высокоэффективными и безопасными
лекарственными средствами, широко
применяемыми в плановой и неотложной кардиологии. Относительно невысокая стоимость и простота применения делают препараты этой группы еще более привлекательными и выгодными.
Литература
[1] Теслев А.А. Современные подходы в технологии лекарственных препаратов / А.А. Теслев, В.В. Сорокин, И.Е. Каухова, В.А. Вайнштейн // Научные ведомости. Серия Медицина. Фармация. - №11 (154), выпуск 22. -2013. - С. 246-252.
[2] Стуров Н.В. Применение пролонгированных форм нитратов при ишемической болезни сердца / Н.В.Стуров, Г.Н.Кобыляну, Н.С.Манякина // Трудный пациент. - № 6, том 8. -2010. - С. 12-15.
[3] Евдокимова А. Г. Применение нитратов в лечении больных ишемической болезнью сердца / А.Г. Евдокимова, В.В. Евдокимов // Медицинский совет. -№8. - 2014. - С. 12-16.
[4] www.rlsnet.ru - Официальный сайт Группы компаний РЛС ®. Главная энциклопедия лекарств и товаров аптечного ассортимента российского интернета.
[5] Государственный реестр лекарственных средств. Официальное издание: в 2 т.- М.: Медицинский совет, 2009. - Т. 1, ч. 1- 648 с.
[6] Гармонов С.Ю. Фармацевтический анализ лекарственных средств, влияющих на обменные процессы при использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии / С.Ю.Гармонов, И.А.Салахов, Г.Р.Нурисламова, Р.Н.Исмаилова, Э.А.Иртуганова, В.Ф.Сопин // Вестник Казанского технологического университета. - 2010. - № 10. - С. 3034.
[7] Сафиуллина Р.А. Подходы по проведению обзора качества лекарственных средств в соответствии с правилами ОМР / Р.А.Сафиуллина, С.Ю.Гармонов, С.М.Горюнова // Вестник Казанского технологического университета. - 2012. - Т. 15. - № 9. - С. 252-255.
[8] Жиров И.В. Место внутривенных нитратов в современной кардиологии / И.В. Жиров, С.Н. Терещенко // Кардиоваскулярная терапия и профилактика, - 2005; 4(6), ч.1. - С. 97-101.
© Т. В. Дудник - магистрант каф. аналитической химии, сертификации и менеджмента качества КНИТУ,: tanja_dudnik@mail.ru; С. Ю. Гармонов - д.х.н., проф. той же кафедры, serggar@mail.ru.
© T. V. Dudnik - Magistracy student of Analytical Chemistry, Certification and Quality Management Department of KNRTU, tanja_dudnik@mail.ru; S. Yu. Garmonov - doctor of technical Sciences,Professor of Analytical Chemistry, Certification and Quality Management Department of KNRTU, serggar@mail.ru.
