CC BY
31
2010 г.
ОЦЕНКА ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СТАБИЛЬНОСТИ ВАКЦИННОГО ШТАММА ВИРУСА ПАРОТИТА ЛЕНИНГРАД-3
'Игнатьев Г.М., 2Кулак М.В., 'Гайдерова Л.А., 4Отрашевская Е.В., 2Нетесова Н.А., 'Неверов А.А., 5Отрашевская A.B., 'Юнасова Т.Н.
1 ФГБУ «ГИСК им. Л.А. Тарасевича» Минздравсоцразвития России, г. Москва, Россия;
2 Федеральное Государственное учреждение науки ГНЦ ВБ «Вектор», Кольцово, Россия;
3 FDA, CBER, Betezda, MD, USA;
4 НПО «Микроген», Кольцово, Россия;
5 РНПЦ эпидемиологии и микробиологии, Минск, Республика Беларусь
ВОЗ рекомендует осуществлять контроль производственных штаммов паротитных вакцин, контролируя их генетическую стабильность на всех этапах производства. Ранее было показано, что вакцинный штамм Ле-нинград-3 (Л-3) имеет нуклеотидные отличия от штамма Leningrad-Zagreb (L-Zagreb).
Для изучения стабильности штамма Л-3 были выбраны «горячие области» возможного накопления мутаций, локализованные в С-концевой части гена N и N-концевой части гена F. Дополнительно исследовался ген SH и ген HN. Изучали восемь серий паротитной вакцины российского производства, из посевного вируса № 69, а также паротитный компонент 5 серий вакцины против кори, паротита и краснухи производства Индии.
В результате исследования было показано, что все
серии российской вакцины по изучаемым генам гомологичны между собой и идентичны структуре штамма Л-3, представленной в ОепеВапк, номер АУ508995. Сравнение последовательностей, полученных при изучении вакцины индийского производства, с последовательностью штамма Л-3 продемонстрировало наличие замен в генах F и N.
Для дифференциации вакцинных штаммов Л-3 и L-Zagreb от других штаммов вируса паротита разработан молекулярно-биологический метод ОТ-ПЦР с последующим рестрикционным анализом. Показана 100 % специфичность и воспроизводимость предложенного метода. Данный метод является уникальным при расследовании случаев поствакцинальных осложнений после применения вакцин на основе штаммов Л-3 и L-Zagreb.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ВЫСОКОПРОИЗВОДИТЕЛЬНОГО ПАРАЛЛЕЛЬНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НУКЛЕОТИДНЫХ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ ДЛЯ МОНИТОРИНГА ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СТАБИЛЬНОСТИ ЖИВЫХ ВИРУСНЫХ ВАКЦИН
Неверов A.A., Чумаков K.M.
US Food and Drug Administration, Center for Biologies Evaluation and Research, Laboratory of Method Development HFM-470, 1401 Roekville Pike, Roekville, MD 20852
Высокая генетическая изменчивость РНК-содержащих вирусов обуславливает наличие в их популяциях совокупности близких генетических вариантов, часто описываемых термином квазивид ^иав^ресюз). Данный феномен возникает в результате ограниченной точности вирусных РНК-репликаз и обуславливает ряд свойств, важных для выживания вируса. Так, при ¡п-умо и ¡п-у^го репликации аттенуированных штаммов, используемых для приготовления живой полиомиелитной вакцины, возможно накопление вирулентных вариан-
тов вируса, что приводит к непригодности некоторых серий полиемиелитной вакцины для вакцинации детей. Исходя из этого, для обеспечения безопасности полио-милелитной вакцины необходим строгий контроль ее качества в процессе производства. Помимо традиционных испытаний на животных данная задача также осуществляется путем прямого анализа на наличие ре-вертантов в сериях готовой вакцины. Количественный анализ нейровирулентных мутаций в геноме аттенуированных штаммов вируса полиомиелита является
Н)
