CC BY
101
УДК 591.111.1/2
ОЦЕНКА ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ РУССКОГО ОСЕТРА
Представлен анализ гематологических показателей русского осетра яровой и озимой рас. Проведенные исследования показывают, что от функционального состояния производителей в конечном счете зависит результат размножения.
Ключевые слова: гематологические показатели, гемоглобин, гема-токритное число, число эритроцитов, содержание гемоглобина в одном эритроците, цветной показатель крови, скорость оседания эритроцитов в плазме крови, русский осетр, яровая раса, озимая раса, физиологобиохимические показатели.
И.Ю. Киреева И.С.Кононенко
Национальный университет биоресурсов
и природопользования Украины г. Киев, 03041
E-mail: kireevaiu@mail.ru
Введение
Необходимым условием успешного ведения интенсивного рыбоводства и воспроизводства ценных видов рыб является тщательный контроль за физиологическим состоянием объектов выращивания. Кровь как наиболее лабильная ткань быстро реагирует на действие различных факторов и приводит к восстановлению равновесия между организмом и средой. Поэтому для ранней диагностики отклонений в физиологическом состоянии рыб важное значение имеет анализ крови.
Кровь — особая ткань, которая состоит из клеточных элементов и жидкой плазмы. Основной функцией крови является транспорт разнообразных веществ, но в зависимости от характера переносимого вещества его природы, она выполняет и другие функции: дыхательную, трофическую, экскреторную, гомеостатическую, регуляторную, терморегуляторную и защитную [3]. Количество крови в организме рыб в среднем составляет 1-2%. В состав крови входят белки, липиды, углероды, витамины, гормоны, макро- и микроэлементы, а также продукты обмена веществ. Необходимо отметить, что химический состав крови может изменяться под действием стрессовых явлений, которые вызывают накопление в организме карбонатной и молочной кислот, глюкозы, кортикоидных гормонов и адреналина, а также изменение гематологических показателей [2].
Среди гематологических показателей особое внимание уделяется, как правило, количеству гемоглобина, гематокрита, эритроцитов, формуле крови. Кроме того, благодаря правильной и своевременной диагностике морфологических изменений крови, можно выявить возникающий дисбаланс или патологию в организме рыб. Поэтому комплекс гематологических исследований является одним из критериев оценки физиологического состояния производителей, что явилось предметом проведенных исследований.
Материалы и методы исследования
Объект исследования - русский осетр (Ае/репвег ди1с1епз1асШ1). Цель исследования — сравнительный анализ гематологических показателей производителей русского осетра яровых и озимых рас. Робота с производителями осетровых проводилась в период нерестовой кампании на Кизанском осетровом заводе (Астраханская область).
Отбор крови проводили по общепринятым методам: из жаберной артерии голодной рыбы, выдержанной в хорошо аэрированной воде в течение 5-10 минут после отлова. Место пункции дезинфицировали 70° спиртом и высушивали ватным тампоном для удаления слизи. Для взятия крови использовали шприц с инъекционной иглой. Инструменты предварительно дезинфицировали водным раствором антикоагу-
лянтов цитрата натрия. Анализируемая кровь была свежей, жидкой. Во избежание разрушения эритроцитов (гемолиза) кровь отбирали в подготовленные пробирки, сливая осторожно по стенке.
Определение гематологических показателей проводили по общепринятым методам [2, з]: гемоглобин (дыхательный пигмент, содержащийся в эритроцитах) — колориметрическим методом с помощью калибровочного графика; гематокритное число (N1 — отношение объема эритроцитов к общему объему крови, выраженное в л/л) — в специальной микроцентофуге с капиллярными трубками, которые заполняли исследованной кровью и центрифугировали в течении 5 минут при 8000 об./мин., а гематокритную величину определяли с помощью отсчетной шкалы; число эритроцитов, млн./мкл — определяли в камере типа Бюркера с выгравированной на ней сеткой Горяева. Подсчет производили спустя 2 минуты после оседания эритроцитов на дно камеры (объектив — 8?, окуляр — 15?); содержание гемоглобина в одном эритроците (СГЭ — показатель, отражающий абсолютное содержание гемоглобина в одном эритроците, выраженный в пикограммах (пг)) — определяли путем деления концентрации гемоглобина на число эритроцитов в одинаковом объёме крови; цветовой показатель крови (ЦП — параметр исследования красной крови, выражающий относительное содержание гемоглобина в одном эритроците), цветной показатель рассчитывали так: значение гемоглобина в единицах Сали делили на удвоенные первые две цифры показателя количества эритроцитов; скорость оседания эритроцитов (СОЭ) в плазме крови — определяли методом Панченкова (в разведенной цитратом крови за определенный промежуток времени (1 час) и выражали в мм/ч). Значение СОЭ определяли как расстояние от нижней части поверхностного мениска (прозрачная плазма) до верхней части осевших эритроцитов в вертикальном столбце стабилизированной цитратом цельной крови [1, 4].
Допустимые нормы некоторых показателей крови у русского осетра представлены в табл. 1 [3].
Таблица 1
Допустимые нормы некоторых показателей крови русского осетра
Показатель Допустимые нормы
Гемоглобин, г/л 83-92
Содержание эритроцитов, млн./мм3 0.4-0.7
Результаты исследований
Показатели красной крови рыбоводно-продуктивных самцов (отдавших сперму высокого качества) и самок (икра, от которых имела высокий процент оплодотворения — более 85%) русского осетра представлены в табл. 2 и 3.
Таблица 2
Показатели крови самок русского осетра различных биологических групп
Показатели Яровые Озимые
Масса рыб, кг 18.7±3.4 16.9±4.3
59.8±4.6 65.7±5.3
Гемоглобин, г/л 2.4 2.8
0.28±0.01 0.33±0.02*
Гематокрит, л/л 2.0 1.8
0.53±0.02 0.63±0.02***
Количество эритроцитов, 106/мкл 6.5 7.9
СГЭ,пг 122.95±25.7 94.9±24.8
Цветной показатель (ЦП) 3.94±0.24 2.99±0.7
СОЭ, мм/ч 5.6±0.3 1.8 5.5±0.41 1.5
Примечание: над чертой — М±т, под чертой — Су; различия достоверны * — при Р<0.05; *** — при Р < 0.001; аббревиатура: СГЭ — содержание гемоглобина в одном эритроците; СОЭ — скорость оседания эритроцитов.
Таблица 3
Показатели крови самцов русского осетра различных биологических групп
Показатели Яровые Озимые
Масса рыб, кг 11.4 ±3.0 12.9±2.3
73.8±5.6 87.6±4.3
Гемоглобин, г/л 3.4 2.6
0.26±0.01 0.3±0.02*
Гематокрит, л/л 1.8 1.6
0.53±0.02 0.56±0.018
Количество эритроцитов, 106/мкл 6.0 7.9
СГЭ,пг 150.5+21.4 173.0±20.1
Цветной показатель (ЦП) 4.54±0.1 6.52±0.06
4.8±0.3 5.6±0.24*
СОЭ, мм/ч 1.8 1.9
Примечание: над чертой — М±т, под чертой — Су; различия достоверны * — при Р < 0.05; аббревиатура: СГЭ — содержание гемоглобина в одном эритроците; СОЭ — скорость оседания эритроцитов.
Анализ изученных гематологических показателей у самок русского осетра разных рас выявил разницу по первым трем показателям (гемоглобин, гематокрит и количество эритроцитов), которые у яровых форм оказались больше, чем у озимых, в среднем в 1.2 раза. Так, интервал колебания одного из основных показателей крови рыб — гемоглобина — составил 59.8-65.7 г/л, а для гематокрита максимальный показатель не превысил 0,33 л/л. При этом, количество эритроцитов варьировало от 0,53 до
0.63 106/мкл. Что касается значения СГЭ, то оно не опускалось ниже 122.95 пг. Цветной показатель крови у самок яровых рас в среднем составил 3.94, а у озимых самок —
2.99. СОЭ у самок обоих рас находилось примерно на одинаковом уровне и в среднем не превысило 5,7 мм/ч.
Данные показателей крови у самцов озимых производителей, свидетельствуют более высокие — в среднем в 1.2 раза. Так, интервал изменения количества гемоглобина составил 73.8-87.6 г/л. Показатель гематокрита не опускался ниже 0,26 г/л. Среднее число эритроцитов составило 0.56 106/мкл. Содержание гемоглобина в эритроците было достаточно высоким — 173.0 пг, а цветной показатель не превысил 6.52. Скорость оседания эритроцитов изменялась в диапазоне от 4.8 до 5.6 мм/ч.
Необходимо обратить внимание, что показатели гемоглобина у производителей обоих полов озимой и яровой расы оказались ниже нормативных показателей (табл.1), что свидетельствует о наличии анемии, которая вполне объяснима искусственными условиями содержания озимой группы, большой физической нагрузкой (миграция) и стрессом у яровой группы осетровых, то есть факторами среды.
При анализе изученных гематологических показателей у производителей, как самок, так и самцов обоих рас, выявлено, что значения гематокрита, количества эритроцитов, цветного показателя и скорости оседания эритроцитов находились приблизительно на одинаковом уровне. Незначительные отличия отмечены для показателя содержания гемоглобина, которое варьировало в диапазоне от 66.8 г/л до 76.7 г/л. Наибольшие отличия выявлены в содержании гемоглобина в эритроцитах, которое у озимых особей составило 47.7 пг, что на 54 % меньше, чем у яровых.
Выводы
Полученные данные свидетельствуют о более высоких значениях основных гематологических показателей у озимых производителей, что можно связать с их лучшей адаптацией к искусственным условиям содержания. Сроки пребывания озимых особей на заводе в среднем на 8 месяцев больше, чем у яровых, многие из которых находятся на заводе в пределах 10-14 дней, что слишком мало для нормальной адаптации к новым условиям. Следует указать и на фактор стресса, который возникает у яро-
вых производителей при их отлове, транспортировке, выгрузке и пересадке в преднерестовые водоемы. После такого стресса восстановление физиологического состояния яровых производителей должно длиться не меньше месяца, а в заводских условиях, когда необходимо проводить нерестовую кампанию, требования рыбоводного процесса не позволяют им восстанавливаться столь длительное время. Кроме того, необходимо учитывать и «физиологическую усталость» производителей яровой расы после миграции в реки, в период которых они не питаются. Таким образом, производители яровых рас испытывают массивную физическую и стрессовую нагрузки, в результате которых их физиологическое состояние значительно меняется, что закономерно отражается на гематологических показателях.
Список литературы
1. Білько Н.М. Методи експериментальної гематології. — К.: Києво-Могилянська Академія, 2006. - 80 с.
2. Біохімія гідробіонтів: практикум для вузів П-ІУ рівнів акредитації / Л.П. Вогнівенко, М.Ю. Євтушенко, М.В. Шевряков, М.В. Архангельська, С.І. Пентилюк - Херсон: Олді-плюс, 2009. - 536 с.
3. Дехтяров П.А. Фізіологія риб: підручник / П.А. Дехтяров, М.Ю. Євтушенко,
І.М. Шерман. - К.: Аграрна освіта, 2008. - 341 с.
4. Иванова Н.Т. Атлас клеток крови рыб. - М., 1983.
ESTIMATION OF PHYSIOLOGICAL STATE OF RUSSIAN MADE STURGEON
I.Yu. Kireeva I.S. Kononenko
National University of Life and Environmental Sciences of Ukraine
Kiev, 03041, Ukraine E-mail: kireevaiu@mail.ru
Analysis of hematological indicators of Russian sturgeon of summer and winter-annual races is presented. The carried out researches show, that the result of reproduction finally depends on a functional state of sires.
Key words: hematological indices, hemoglobin, hematocrit, erythrocyte count, hemoglobin content in a single erythrocyte, color index, blood, erythrocyte sedimentation rate in plasma, Russian sturgeon, spring race, winter race, physiological and biochemical parameters.
