CC BY
119
ФАРМАКОЛОГИЯ
УДК 615.07:615.453.6 И. Е. Смехова
ОЦЕНКА ЭКВИВАЛЕНТНОСТИ ТАБЛЕТОК ГЕНЕРИКОВ АЦИКЛОВИРА МЕТОДОМ IN VITRO
Санкт-Петербургская химико-фармацевтическая академия
Успешное решение задач здравоохранения невозможно без наличия на рынке высокоэффективных и безопасных лекарственных средств (ЛС). В настоящее время при фармакотерапии широко используются более дешевые, по сравнению с оригинальными, воспроизведенные ЛС (генерики), доля которых по объему продаж на фармацевтическом рынке России достигает 80 % [1].
Для обеспечения взаимозаменяемости при фармакотерапии генерики должны быть фармацевтически, биологически и терапевтически эквивалентны оригинальному препарату или препарату сравнения [2]. Фармацевтически эквивалентными считаются лекарственные препараты (ЛП), содержащие одинаковое количество одной и той же субстанции в одной и той же лекарственной форме, которая отвечает одинаковым или сопоставимым стандартам качества, и предназначенные для одного пути введения [2]. Одним из тестов, подтверждающих фармацевтическую эквивалентность генериков и, кроме того, позволяющих в определенных условиях предсказать их эффективность in vivo, является тест «Растворение» [3].
Фармацевтически эквивалентные ЛП считаются биоэквивалентными в том случае, если показатели их биодоступности после применения в одинаковой дозе и в одинаковых условиях сходны до такой степени, когда их эффекты являются одинаковыми. Биоэквивалентность определяют методом in vivo (фармакокинетические, фармакодинамические и клинические испытания), в некоторых случаях ее можно определить методом in vitro (по тесту «Растворение»). В основе применения метода in vitro лежат положения биофарма-цевтической классификации лекарственных средств (BCS), предложенной в 1995 г. и основанной на учете растворимости и всасывании лекарственных веществ (ЛВ) в желудочнокишечном тракте (ЖКТ). При выборе для испытания биоэквивалентности метода in vitro следует учитывать: класс ЛВ по BCS, подобие профилей растворения генерика и препарата сравнения в различных средах, вспомогательные вещества (ВВ), использованные в ЛП, а также риск для больных в случае некорректного решения об отказе от испытаний биоэквивалентности in vivo [2].
Герпетические инфекции — одни из наиболее распространенных вирусных инфекций в мире. Внимание, которое проявляют вирусологи и клиницисты в последние 25 лет
© И. Е. Смехова, 2009
к герпесвирусным заболеваниям человека, связано со значительной эпидемиологической ролью и большой социальной значимостью некоторых из них в современном мире. Создание первого эффективного противовирусного препарата ацикловира было отмечено в 1986 г. Нобелевской премией [4].
Препараты ацикловира включены в Перечень жизненно необходимых и важнейших ЛС [5], в список жизненно важных ЛС ВОЗ [6], в «Перечень...» [7]. В настоящее время в России зарегистрировано 67 генериков ацикловира. Однако доказательства их терапевтической эквивалентности отсутствуют [4]. В связи с вышесказанным является актуальным исследование эквивалентности таблеток ацикловира, выпускаемых различными предприятиями.
Цель настоящей работы — установить возможность применения рекомендаций ВОЗ [2] для оценки биоэквивалентности методом in vitro генериков ацикловира, представленных на фармацевтическом рынке Российской Федерации.
Материалы и методы исследования. Объекты исследования: Ацикловир таблетки, 200 мг (далее — таблетки ацикловира) российских производителей (2; 3; 4 и 5), зарегистрированные в РФ; препарат сравнения «Zovirax®» GlaxoSmithKline (производитель 1). Все таблетки соответствовали требованиям действующих нормативных документов (НД) и фармакопейных статей предприятий-изготовителей.
Исследование по тесту «Растворение» проводили, используя прибор «Erweka» DT6 (Германия) аппарат «лопастная мешалка» (ЛМ) (аппарат 2 по американской фармакопее — USP2) при 50 об/мин. Оценку фармацевтической эквивалентности осуществляли по методике препарата сравнения на шести таблетках для каждого ЛП. Пробы объемом 10 мл отбирали через 5, 10, 25, 30, 45 мин после начала испытания и фильтровали через бумажный фильтр типа «белая лента». Отобранный объем восполняли водой.
Определение содержания вещества, перешедшего в среду растворения, проводили методом УФ-спектрофотометрии. Оптическую плотность измеряли в максимуме поглощения при длине волны 255 нм. В качестве раствора сравнения использовали 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной (НС1). Для каждого исследования готовили раствор стандартного образца ацикловира.
В табл. 1 представлены результаты (средние значения) высвобождения ацикловира из таблеток различных производителей, полученные для каждой точки времени отбора проб. Для сравнения значений рассчитывали коэффициент подобия^. Считается, что различие между кривыми растворения отсутствует, если коэффициент подобия принимает значения от 50 до 100 [2, 8].
Таблица 1
Количество ацикловира, перешедшее в среду растворения из таблеток
Производитель (усл. обозн.) Количество ацикловира (%) при точке времени отбора проб (мин) Значение / (50-100) Подобие
5 10 25 30 45
«Zovirax®» (1) 84,5 і 2,7 93,1 і 1,4 94,6 і 1,6 96,6 і 2,3 97,6 і 0,4 - -
2 33,1 і 2,8 47,1 і 3,1 71,7 і 2,2 83,4 і 2,9 86,6 і 3,2 9 Нет
3 81,1 і 1,4 91,6 і 1,1 95,1 і 0,8 98,4 і 0,2 98,4 і 0,2 96 Да
4 35,0 і 1,2 65,0 і 1,3 71,7 і 0,9 79,7 і 0,7 85,2 і 1,1 11 Нет
5 31,4 і 1,1 44,1 і 1,7 64,6 і 1,7 74,3 і 1,1 82,3 і 0,8 5 Нет
Результаты и их обсуждение. Ацикловир (9-(2-гидрокси) этоксиметилгуанин, или 2-амино-1,9-дегидро-9-(2-гидрокси) этоксиметил-6Н-пурин-6-он) представляет собой белый мелкокристаллический порошок, мало и медленно растворим в воде, в растворах минеральных кислот и в щелочах [9]. При приеме внутрь биодоступность ацикловира составляет 10-30 %, что, как считают, является свойством самого ЛВ, а не средства доставки [10]. Еда не влияет на его абсорбцию. Ацикловир легко проникает в ткани, органы, биологические жидкости. С мочой в неизменном виде выводится большая часть (62-91 %) перорально введенного ацикловира.
В соответствии с BCS ацикловир дозой до 800 мг относится к III классу, т. е. хорошо растворяется в воде и плохо абсорбируется в ЖКТ [6]. Для установления биоэквивалентности методом in vitro таблетки, содержащие ЛВ этого класса, должны относиться к категории «очень быстро растворимые», т. е. за 15 мин из них должно перейти в среду растворения не менее 85 % ЛВ [2].
Для оценки качества таблеток ацикловира американская фармакопея 29 издания (USP 29) [9], а также Нормативный документ препарата сравнения «Zovirax®» рекомендуют проводить тест «Растворение» классически — по одной временной точке (45 мин) на аппарате ЛМ при скорости вращения 50 об/мин. В качестве среды растворения используется 0,1 М раствор НС1 (USP 29) или вода («Zovirax®»). За время испытания в среду растворения (900 мл) должно перейти не менее 75 % («Zovirax®») или 80 % (USP 29) вещества. Ряд авторов считают, что для оценки качества таблеток ацикловира можно также использовать и аппарат 3 USP (Bio-Dis, поршневой цилиндр) [11]. Проведенное ими сравнительное исследование показало полное высвобождение ацикловира из оригинального препарата и пяти генериков в течение 15 мин при испытании на обоих аппаратах (2 и 3 USP).
Высвобождение ацикловира из таблеток мы изучали по методике препарата сравнения. Установлено, что все исследованные таблетки соответствовали требованиям: к 45 мин из них высвобождалось не менее 75 % вещества. Их можно считать фармацевтически эквивалентными по тесту «Растворение». В то же время высвобождение ацикловира проходило с различной скоростью: уже к 5 мин из препарата «Zovirax®» и генерика производителя 3 высвободилось более 80 % вещества, в то время как из остальных — только 30 %. С наименьшей скоростью ацикловир высвобождался из таблеток производителя 5. Профиль растворения генерика производителя 3 подобен профилю растворения «Zovirax®», что подтверждено значениями коэффициентов подобия f2 (см. табл. 1). Таблетки производителя 3 и «Zovirax®» оказались в категории «очень быстро растворимые», поэтому их биоэквивалентность можно установить методом in vitro в соответствии с рекомендациями ВОЗ [2].
В состав таблеток должны входить ВВ, обычно используемые в этой лекарственной форме, хорошо изученные, не влияющие на моторику ЖКТ [2]. Мы проанализировали ВВ, содержащиеся в таблетках ацикловира (200 мг) отечественного (производители 2-15) и зарубежного (производители 1, 16-20) производства, зарегистрированных в РФ (табл. 2).
Установлено, что большинство таблеток содержит 5-6 наименований ВВ. В состав более 85 % генериков входят поливинилпирролидон (ПВП) низкомолекулярный, лактоза, крахмал (картофельный или кукурузный). Крахмала натрия гликолят, входящий в состав таблеток производителей 1, 9, 17 и 19, относится к супердезинтегрантам, которые действуют значительно сильнее и используются в меньших количествах по сравнению с обычными разрыхлителями: крахмалом картофельным, метилцеллюлозой и др. [12], что, по-видимому, и способствовало быстрому растворению таблеток производителя 1 в нашем исследовании.
Вспомогательные вещества, входящие в состав таблеток ацикловира
Ингредиент Наличие или отсутствие в таблетках производителей (усл. обознач.)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Аэросил + + + +
Кальция стеарат + + +
Кислота стеариновая + +
Крахмал - + + + + + + + + + + + - + + - - + - +
Лактоза + + + + + + + - + + + + - + + + - + + -
Магния стеарат + + + + - - + + + + + + + + + + + + + -
МКЦ + - - - - - - - + - - - + - - + + + - -
Натрия крахмала гликолят + + +
Натрия лаурилсульфат - + - +* - - + - - + -* + - - + - - - - -
ПВП + + + + + + + - + + + + + + + + + + + +
Сахар + +
Сахароза - + + + + + +
Силикагель коллоидный + +
Тальк + + -
Всего наименований ВВ 5 6 6 6 5 5 6 3 7 6 6 6 3 5 6 6 5 5 6 3
Примечание. «+» или «-» — наличие или отсутствие ингредиента; «+*» — натрия додецилсульфат. Красители и вода в таблицу не включены.
По данным литературы [10] лактоза не влияет на всасывание ацикловира из таблеток. В то же время натрия лаурилсульфат незначительно повышает его проницаемость через мембраны. В составе таблеток ацикловира производителей, не вошедших в данное исследование, встречаются и другие ВВ, например, целлюлоза, кросповидон, гипромеллоза, макрогол. Однако установлено, что ни эти ВВ, ни перечисленные в табл. 2, кроме натрия лаурилсульфата, не влияют на биодоступность ацикловира из таблеток [10].
Таким образом, в состав таблеток генериков ацикловира входят ВВ, типичные для исследуемой лекарственной формы — таблеток, которые, по данным литературы [10], a priori не должны оказывать влияние на их биодоступность. Поэтому биоэквивалентность таких таблеток можно очевидно оценивать методом in vitro.
Ацикловир относится к ЛП с высоким терапевтическим индексом, при перораль-ном применении он хорошо переносится, его таблетки не назначают по критическим показаниям. Эти положения в соответствии с рекомендациями ВОЗ [2] также дают возможность отказаться от определения биоэквивалентности генериков ацикловира методом in vivo.
На основании полученных результатов можно сделать вывод, что биоэквивалентность генериков таблеток ацикловира (200 мг), представленных на отечественном фармацевтическом рынке, можно устанавливать методом in vitro в соответствии с реко-
мендациями ВОЗ [2]. Научно обоснованное использование этих рекомендаций позволит производителям существенно сократить затраты на доказательство эквивалентности выпускаемых ими лекарственных препаратов.
Литература
1. Лукьянов С. В. Оригинальные и воспроизведенные лекарственные средства: проблема выбора // Зам. главного врача. 2007. № 1. С. 62-67.
2. WHO. 2006. Multisource (Generic) Pharmaceutical Products: Guidelines on Registration Requirements to Establish Interchangeability // Technical Report Series. № 937. Annex 7. URL: http:/ whqlibdoc.who.int/ trsWHO_TRS_937_eng.pdf
3. Багирова В. Л., Взорова Л. Н, Граковская Л. К. и др. Об общей фармакопейной статье «Растворение» // Хим.-фарм. журн. 2001. Т. 35. № 4. С. 39-41.
4. Герасимов В. Б., Журавлёва М. В, Румянцев А. С. Актуальность пострегистрационных исследований воспроизведенных лекарственных препаратов // Ведомости НЦ ЭСМП. 2007. № 1. С. 37-40.
5. Распоряжение Правительства Российской Федерации от 29 марта 2007 г. № 376-р. Перечень жизненно необходимых и важнейших лекарственных средств.
6. WHO. 2006. Proposal to waive in vivo bioequivalence requirements for WHO Model List of Essential Medicines immediate-release, solid oral dosage forms // Technical Report Series. № 937. Annex 8. URL: http:// whqlibdoc.who.int/trsWHO_TRS_937_eng.pdf
7. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 18 сентября 2006 г. № 665. Перечень лекарственных средств, отпускаемых по рецептам врача (фельдшера) при оказании дополнительной бесплатной медицинской помощи отдельным категориям граждан, имеющим право на получение государственной социальной помощи.
8. FDA. 1997. Guidance for Industry: Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms. Rockville, MD: U. S. Department of Health and Human Services. Center for Drug Evaluation and Research. URL: http://www.fda.gov/cder/guidance.pdf
9. The United States Pharmacopoeia. 29th rev. 2006. URL: http: // www.pharmacopeia.cn/usp.asp.
10. Arnal J, Gonzalez-AlvarezI., Bermejo M. e. a. Biowaiver Monographs for Immediate Release Solid Oral Dosage Forms: Aciclovir // J. Pharm. Sci. 2008. URL: www.interscience.wiley.com. DOI 10.1002/jps.21392.
11. Lawrence X. Yu., Jin T Wang, Ajaz S. Hussain. Evaluation of USP Apparatus 3 for Dissolution Testing of Immediate-Release Products // AAPS Pharm. Sci. 2002. 4: Е1. URL: http://www.pharmsci.org
12. Воскобойникова И. В, Авакян С. Б., Сокольская Т. А. и др. Применение супердезинтегрантов в твердых дозированных лекарственных формах // Фармация. 2005. № 2. С. 35-37.
Статья принята к печати 18 июня 2009 г.
