CC BY
29
21. Mueller H. T., Meador-Woodruff J. H. Expression of the NR3A subunit of the NMDA receptor in human fetal brain. Ann. NY Acad. Sci., 2003, vol. 1003, pp. 448-451.
22. RCSB PDB: Protein Data Bank of The Research Collaboratory for Structural Bioinformatics. Available at: http://www.pdb.org. (accessed 01 June 2013).
23. Trott O., Olson A. J. AutoDock Vina: improving the speed and accuracy of docking with a new scoring function, efficient optimization and multithreading. J. Comp. Chem., 2010, vol. 31, no. 2, pp. 455-461.
24. Wlaz P. Kasperek R., Wlaz A., Szumilo M., Wrobel A., Nowak G., Poleszak E. NMDA and AMPA receptors are involved in the antidepressant-like activity of tianeptine in the forced swim test in mice. Pharmacol. Rep., 2011, vol. 63, no. 6, pp. 1526-1532.
25. Young D. C. Computational Chemistry: A Practical Guide for Applying Techniques to Real-World Problems. New-York, Wiley InterScience, 2001, 408 p.
УДК 616.155.16:576.8.077.3 Медико-биологические науки
© Ю.А. Кривенцев, Р.А. Бисалиева, Д.М. Никулина, 2015
ОЦЕНКА ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ЗНАЧИМОСТИ ТЕСТОВ НА АНТЕНАТАЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫ ГЕМОГЛОБИНОВОГО СПЕКТРА
Кривенцев Юрий Алексеевич, доктор медицинских наук, доцент кафедры биологической химии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-53-20, e-mail: [email protected].
Бисалиева Рината Альбкалиевна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры биологической химии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-53-20, e-mail: [email protected].
Никулина Дина Максимовна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой биологической химии, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-53-20, e-mail: [email protected].
Сконструированы селективные иммунохимические тесты на эмбриональный и фетальный типы гемоглобина, отличающиеся специфичностью и имеющие высокую диагностическую и прогностическую ценность по всем исследованным нозологическим группам. Разработаны оптимальные алгоритмы их количественного анализа. Сформирован и апробирован алгоритм комплексной оценки гемоглобинового спектра, включающего в себя антенатальные типы гемоглобина. Анализ диагностической значимости предлагаемых иммунохимических тестов показал высокие значения их чувствительности (порог составил от 1,73 ± 0,28 до 2,14 ± 0,19 мг/л), точности (± 1,2 %), надежности (r = 0,97) и диагностической эффективности (р < 0,001).
Ключевые слова: гемоглобины, иммунохимия, количественный анализ.
ESTIMATION OF DIAGNOSTIC VALUE OF THE TESTS ON ANTENATAL COMPONENTS OF HEMOGLOBIN SPECTRUM
Kriventsev Yuriy A., Doc. Sci. (Med.) Assotiate Professor, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 52-53-20, e-mail: [email protected].
Bisalieva Rinata A., Cand. Sci. (Med.), Assodate Professor, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 52-53-20, e-mail: [email protected].
Nikulina Dina M., Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel: (8512) 52-53-20, e-mail: [email protected].
Selective immunochemical tests on embryonic and fetal hemoglobin types have been designed, characterized by specificity and having a high diagnostic and prognostic value for all the studied nosological groups. We have developed optimal algorithms for quantitative analysis of fetal and embryonic hemoglobins. We have also formed and successfully tested an integrated assessment algorithm of hemoglobin spectrum, including antenatal types of hemoglobin. The analysis of the diagnostic value of the proposed immunochemical tests showed high values of their sensitivity (threshold value of 1,73 ± 0,28 to 2,14 ± 0,19 mg/l), accuracy (± 1,2 %), reliability (r = 0,97) and diagnostic efficiency (p < 0,001).
Key words: hemoglobins, immunochemistry, quantitative analysis.
Введение. Анализ научной литературы последних лет свидетельствует о повышении интереса не только к общей фракции гемоглобина, но и к различным генотипам этого хромопротеида, являющихся диагностически значимыми маркерами при патологии красной крови, онкопатологии и гипоксии [5, 9, 17, 18]. Однако применяемые в современной клинико-диагностической практике методы количественной индикации фетального гемоглобина нельзя назвать абсолютно избирательными по этому белку. Метод Зингера, например, регистрирует всю щелочерезистентную фракцию хромопро-теинов, к которой можно отнести и многие другие гемоглобиновые генотипы. Специфичных и адекватных методов выявления эмбрионального гемоглобина до настоящего времени в клинико-лабораторной практике не существует [7, 9, 10, 24]. Поэтому в последнее десятилетие активно проводится работа по моделированию селективных тест-систем на антенатальные типы гемоглобина: эмбриональный (HbE) и фетальный (HbF). Были созданы и успешно апробированы на клиническом материале иммунохимические тесты на HbF и HbE, специфичность и точность которых, безусловно, выше, чем у колориметрических методик [11, 15, 21, 23].
Таким образом, создание иммунохимических моноспецифических тест-систем на антенатальные типы гемоглобина, моделирование оптимальных алгоритмов количественного анализа на каждый из этих белков обусловливает необходимость формирования алгоритма комплексной оценки ге-моглобинового спектра крови.
Цель: оценить диагностическую значимость разработанного комплекса диагностических тестов на антенатальные гемоглобины.
Материалы и методы исследования. Объектом исследования, проведенного в период с 2005 по 2015 гг., стали гемоглобины типов F и E. Биоматериал включал в себя 774 образца.
Применяли методы комбинированной щелочной денатурации (поэтапная обработка гемолизата раствором сульфата аммония 50 % насыщенности и 1,2 М раствором едкого натра с последующей седиментацией при 8 000 g), механически-термического гемолиза, электрофореза в полиакриламид-ном геле, препаративного электрофореза в агаровом геле на 0,1 М цитратном буфере с рН 6,0 (в авторской модификации), ионообменной и гель-проникающей хроматографии [2, 16].
Антисыворотки получали методом иммунизации кроликов породы «шиншилла» дробными дозами чистого антигена с адъювантом Фрейнда по стандартной схеме. При моделировании тест-систем применяли: выделение а-цепей (общих для всех исследуемых типов гемоглобина) пара-хлормеркурибензоатом, истощение антисывороток путем иммуноаффинной хроматографии на Bio Gel P-200 (гель и хроматографическая колонка фирмы «Bio-Rad Laboratories», США), иммуноэлек-трофорез по Грабару и Уильямсу [2].
Для количественной и качественной регистрации белков в биоматериале использовали: унифицированный гемоглобинцианидный метод (по инструкции Департамента государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской техники МЗ РФ от 17.06.2000); определение фетального гемоглобина по методу Бетке [19]; определение общего гемоглобина спектрофотометрически при 280 и 260 нм по Варбургу; иммунодиффузионное титрование по Оухтерлони в модификации Н.И. Храмковой и Г.И. Абелева; радиальную иммунодиффузию по Ман-чини в модификации Фехей и Мак-Келви [20]; ракетный электрофорез в агаровом геле по Лореллу [2].
Оценку диагностической значимости (ДЗ) разработанных тестов в сравнении с референтным диагнозом проводили по стандартной методике [1, 6] на основе данных их широкой клинической апробации. Оценку ДЗ-тестов на антенатальные гемоглобины проводили по двум нозологическим группам: миелопролиферативные заболевания крови (292 пациента) и патология новорожденных, сопровождающаяся хронической гипоксией (236 пациентов). Группу контроля составили 246 человек (табл. 1.)
Таблица 1
Перечень использованного в работе биоматериала_
Материал Число образцов (мужчины/женщины) Место получения биоматериала
Пуповинная кровь новорожденных с гипоксией 236 (120/116) МУЗ «Клинический родильный дом», г. Астрахань
Кровь гематологических больных с миелопролиферативными заболеваниями 292 (137/155) Отделение гематологии ГУЗ АМ ОЦКБ, г. Астрахань
Здоровые доноры (группы контроля) 246 (124/122) Станция переливания крови, г. Астрахань
ВСЕГО 774 (381/393)
Для статистического анализа результатов исследования использовали лицензионный пакет прикладных программ статистического анализа Excel-2003 (Microsoft), Statistica 6.0 (Stat Soft, Inc., США). Для каждой выборки вычисляли средние величины (М), среднее квадратичное отклонение (о), средние ошибки средней арифметической (m). С целью определения значимости различий сопоставляемых величин применяли t-критерий Стьюдента с поправкой Бонферрони и однофакторный дисперсионный анализ с вычислением F-критерия Фишера. Различия считали значимыми при р < 0,05. Для оценки межгрупповой зависимости проводили линейный корреляционный анализ Пирсона (коэффициент корреляции - r). Корреляция считалась высокой при приближении модульной величины r к единице. Статистические взаимосвязи между показателями оценивали применением корреляционного, регрессионного анализа и методов многомерной статистики [4].
Результаты исследования и их обсуждение. Ранее были получены новые данные по физико-химическим свойствам HbF, HbE, HbAi и HbA2 и разработаны оптимальные алгоритмы выделения и очистки по каждому из этих белков [8, 12, 13, 22], что легло в основу представленной работы, в ходе которой были использованы очищенные препараты HbF, HbE, HbA1 и HbA2 для иммунизации кроликов и получения специфических иммунных антисывороток.
Верификацию полученных тест-систем осуществляли путем: специфического окрашивания бензидиновым и гваяколовым методами, иммунохимического анализа с необходимым антигенным материалом иммунодиффузией по Оухтерлони и иммуноэлектрофорезом.
Далее были смоделированы моновалентные специфические иммунохимические тест-системы на:
• HbF, в которой тест-антигеном является гемолизат пуповинной крови в разведении: 1/64-1/256, порог чувствительности тест-системы - 2,25 ± 0,27 мг/л (р < 0,005);
• HbE, где тест-антигеном становится экстракт тканей эмбриона (срок - 6-9 недель) в рабочем разведении 1/8-1/16, порог чувствительности - 4,24 ± 0,21 мг/л, (р < 0,01);
• HbA1, в которой тест-антигеном является гемолизат крови взрослых доноров в разведении: 1/128-1/512, порог чувствительности - 3,23 ± 0,17 мг/л (р < 0,01);
• HbA2, тест-антигеном становится очищенный препарат HbA2 в разведении: 1/32-1/64, порог чувствительности - 4,43 ± 0,18 мг/л (р < 0,01).
Смоделированные иммунохимические тест-системы в дальнейшем использовали для разработки оптимальных способов количественного анализа изучаемых типов гемоглобина.
Для количественной индикации HbF разработали способ ракетного электрофореза в агаровом геле с додецилсульфатом натрия [14]. Корреляционный анализ Пирсона показал высокую прямую зависимость уровня HbF от квадрата диаметра кольца преципитации (r = 0,95; р < 0,001). Преимущества способа: высокая чувствительность (порог чувствительности - 1,73 ± 0,28 мг/л); селективность; точность (максимальная погрешность ± 2 %); экономия времени (9-12 ч); значимость определения, в том числе и при определении малых величин гемоглобина (F = 8,4; р < 0,01).
Разработан и успешно апробирован способ восходящей трехэтапной индикации HbE, включающий в себя: радиальное иммунодиффузионное тестирование в системе с двойным наполнением лунки моновалентной антисывороткой (порог чуствительности - 2,14 ± 0,19 мг/л); классическое радиальное иммунодиффузионное тестирование (порог чувствительности - 4,24 ± 0,22 мг/л) и титрование в тест-системе в кратных разведениях антигена. В каждой последующей фазе тестировали только пробы, положительно прореагировавшие в предыдущей фазе.
Созданы алгоритмы иммунохимической количественной индикации HbA1 и HbA2, основанные на методе РИД по Манчини в модификации Фехей и Мак-Келви. Преимущества предлагаемых способов: чувствительность (порог чувствительности от 2,1 ± 0,32 до 2,9 ± 0,41 мг/л; о = 0,08); специфичность, точность (максимальная погрешность ± 2,8 %); экономия трудозатрат за счет сокращения времени методики (не более 12 ч); значимость определения, в том числе и при определении малых величин гемоглобина (F = 6,9, р < 0,01).
На основе созданных тестовых методик смоделирован алгоритм комплексного количественного клинико-лабораторного анализа гемоглобинового профиля. Последовательность предлагаемой схемы включает в себя: определение общего гемоглобина (Hb) унифицированным гемоглобинциа-нидным методом; определение гемоглобина A2, фетального и эмбрионального гемоглобинов разработанными методами индикации и определение уровня гемоглобина А1 как разности между количеством общего Hb и гемоглобинов A2, F, E.
Проведен сравнительный анализ соотношения гемоглобинов А1, А2 и F описанными способами, а также параллельно с определением общего гемоглобина гемоглобинцианидным методом у 147 до-
норов с адекватной гендерной выборкой (73 мужчины и 73 женщины) (табл. 2). Установлено, что средние показатели концентрации гемоглобинов А1 А2 и Б, в пересчете на относительные единицы от общего НЬ составляют 94,32; 2,14 и 2,91 %, соответственно. Статистический анализ позволил выявить высокую положительную корреляцию между суммой концентраций НЬА1, НЬА2 и НЬБ (в мг/л), определенных иммунохимически, и концентрацией общего гемоглобина, определенной гемоглобин-цианидным методом (г = 0,97); при этом ошибка метода составляет всего 0,69 % (р < 0,05).
Таблица 2
Значения общего гемоглобина и его изотипов_
Тип НЬ Методика определения Концентрация, г/л о % НЬ
Общий НЬ Унифицированный гемоглобинцианидный 145,82 ± 24,4 15,62 100
п метод
НЬА1 РИД по Манчини 137,51 ± 19,7 13,09 94,3
(п = 147) в модификации Фехей и Мак-Келви
НЬА2 РИД по Манчини 3,073 ± 0,12 0,10 2,1
(п = 147) в модификации Фехей и Мак-Келви
НЬБ Ракетный электрофорез 4,242 ± 0,19 0,16 2,9
(п = 147) в оригинальной модификации
Такой подход позволяет провести комплексный анализ по общему НЬ и важнейшим его генотипам с высокой точностью (максимальная погрешность ±1,2 %); чувствительностью (порог чувствительности - от 1,7 ± 0,29 до 2,13 ± 0,3 мг/л); специфичностью и значимостью (р < 0,001). Кроме того, следует отметить экономию трудозатрат за счет исключения из общей схемы этапа иммунохи-мического определения НЬА1.
На заключительном этапе работы проведена оценка диагностической значимости иммунохими-ческих тестов на гемоглобины Е и Б. По каждому из разработанных алгоритмов рассчитаны показатели диагностической чувствительности (8е), специфичности (8р), диагностической эффективности (БЕ), прогностичности положительного (РУР) и отрицательного (РУК) результатов стандартной методикой [1, 3] по изучаемой нозологии. Анализ ДЗ дал следующие результаты.
1. Миелопролиферативные заболевания. Поскольку иммунохимический тест на фетальный гемоглобин давал количественные результаты, а его оценка носила альтернативный характер, использовали точку разделения, которая в данном случае была равна 651 + 4 х 29,3 = 768,2 мг/л. Результаты референтной оценки иммунохимического теста на фетальный гемоглобин при исследуемой патологии оказались высокими (табл. 3).
Таблица 3
Оценка ДЗ-теста на НЬР при миелопролиферативных заболеваниях_
Исследуемые группы 8е, % 8р, % РУР, % РУ] % БЕ, %
Эритремия 93,4 100 100 92,7 96,64
Сублейкемический миелоз 91,8 89,2 95,93
Хронический миелолейкоз 89,3 85,6 94,8
Острый миелолейкоз 87,3 86,1 93,5
Примечание: Бв - чувствительность, Бр - специфичность, РУР - прогностичность положительного результата, РУЫ- прогностичность отрицательного результата, БЕ - диагностическая эффективность
Как и ожидалось, тест на НЬЕ оказался наиболее чувствительным при выявлении эритремии -67,78 %. Специфичность и прогностичность положительного результата теста по всем нозологическим формам оказались максимальными (100 %).
2. Патология новорожденных. В оценке эффективности способа количественного иммунохи-мического определения НЬБ использовали следующие точки разделения: для детей с тяжелой внутриутробной гипоксией - 1353,1 мг/л (М+4о); для детей с тяжелой внутриутробной гипоксией в сочетании с глубокой недоношенностью - 840,3 мг/л (М-4о) (табл. 4).
Таблица 4
Оценка диагностической эффективности иммунохимических тестов на НЬЕ и НЬР _при патологии новорожденных_
Тест на: 8е, % 8р, % РУР, % РУ] % ДЭ, %
НЬЕ 63,8 100 100 58,7 66,9
НЬБ 87,7-92,5 88,3 82,8 80,2-88,6 89,3
Выводы.
1. Сформированы алгоритмы проведения количественного селективного анализа эмбрионального гемоглобина, фетального гемоглобина, гемоглобинов типов А1 и А2 на основе самостоятельно смоделированных специфических иммунохимических тест-систем.
2. Создана новая комплексная схема количественной оценки гемоглобинового спектра по основным типам гемоглобина, отличающаяся специфичностью, высокой чувствительностью, точностью.
3. Анализ диагностической значимости созданных тестов на гемоглобины E и F показал высокие значения их чувствительности, специфичности, диагностической эффективности, прогностично-сти положительного и отрицательного результатов.
Список литературы
1. Власов, В. В. Эффективность диагностических исследований / В. В. Власов - M. : Mедицина, 19SS. -
36 с.
2. Галь, Э. Электрофорез в разделении биохимических макромолекул / Э. Галь, Г. Mедьеши, Л. Верец-ки. - M. : Знание, 19S2. - 446 с.
3. Гаранина, Е. Н. Качество лабораторного анализа. Факторы, критерии и методы оценки / Е. Н. Гаранина. - M. : Лабинформ, 1997. - 1S с.
4. Гланц, С. Mедико-биологическая статистика / С. Гланц; пер. с англ. - M. : Практика, 1999. - 459 с.
5. Даштаянц, Г. А. Клиническая гематология / Г. А. Даштаянц. - Киев : Здоровье, 1973. - 272 с.
6. Делекторская, Л. Н. Оценка диагностической информативности лабораторных тестов : методические рекомендации / Л. Н. Делекторская, Л. M. Пименова, О. Г. Кадашева // Клиническая лабораторная диагностика.
- 1992. - № 1/2. - С. 49-59.
7. Иржак, Л. И. Гемоглобины и их свойства / Л. И. Иржак. - M. : Наука, 19S3. - 15G с.
S. Кривенцев, Ю. А. Гемоглобины человека : иммунобиохимическая характеристика и медико-биологическое значение : автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Ю. А. Кривенцев. - M., 2GG9. - 42 с.
9. Кривенцев, Ю. А. Гетерогенная система гемоглобинов: иммунобиохимическая характеристика и медико-биологическое значение / Ю. А. Кривенцев. - Saarbrucken : Palmarium Academic Publishing, 2G12. - Ш1 с.
1G. Кривенцев, Ю. А. Современный взгляд на гетерогенную систему гемоглобина / Ю. А. Кривенцев, Р. А. Бисалиева, П. А. Иванов // Астраханский медицинский журнал. - 2G12. - Т. 7, № 3. - С. 19-24.
11. Кривенцев, Ю. А. Новый способ клинической оценки гемоглобинового спектра / Ю. А. Кривенцев, Р. А. Бисалиева, Л. M. Ишмамедова, А. И. Носков, M. В. Рамазанов // Сибирский медицинский журнал. - 2G11.
- № 3. - С. 52-54.
12. Кривенцев, Ю. А. Гемоглобиновый профиль при гемобластозах / Ю. А. Кривенцев, Р. А. Бисалиева, С. В. Осыко, M. Ю. Кривенцева, А. И. Носков // Казанская наука. - 2G1G. - № 9. - С. 23-26.
13. Кривенцев, Ю. А. Иммунохимический анализ концентрации фетального гемоглобина в крови новорожденных мальчиков и девочек с внутриутробной гипоксией / Ю. А. Кривенцев, Д. M. Никулина, Р. А. Биса-лиева // Омский научный вестник. - 2GG6. - Т. 46, № 9. - С. 272-274.
14. Кривенцев, Ю. А. Пат. 231G2G4 Рос. Федерация, MПК GG1N33/72 Способ количественного определения фетального гемоглобина человека / Ю. А. Кривенцев, Д. M. Никулина, Р. А. Бисалиева; заявитель и патентообладатель ГБОУ ВПО АтА Mинздрава России. - № 2006107774; заявл. 13.G3.2GG6; опубл. 10.11.2007. Бюл. № 31.
15. Никулина, Д. M. Новый иммунохимический тест для лабораторной оценки состояния эритрона / Д. M. Никулина, Ю. А. Кривенцев, Р. А. Бисалиева, С. В. Лапеко // Клиническая лабораторная диагностика. -2GG9. - № 12. - С. 27-3G.
16. Остерман, Л. А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот / Л. А. Остерман. - M. : Наука, 19S5. -
6S9 с.
17. Тодоров, Й. Клинические лабораторные исследования в педиатрии / Й. Тодоров. - София : Mедицина и физкультура, 196S. - S37 с.
1S. Токарев, Ю. Н. Иммунохимический метод ряда гемоглобинопатий : методические рекомендации / Ю. Н. Токарев, А. Н. Ахундова, А. П. Андреева. - Баку : Новая книжная типография, 19S2. - 9 с.
19. Betke, K. Estimation of small percentages of foetal haemoglobin / K. Betke, H. R. Marti, I. Schlicht // Nature. - 1959. - Vol. Ш, Suppl 24. - Р. 1877-1878. В PubMed есть такой источник:
2G. Fahey, J. L. Quantitative determination of serum immunologlobulins in antibody-agar plates / J. L. Fahey, E. M. McKelvey // J. Immunol. - 1965. - Vol. 94. - Р. S4-9G.
21. Nikulina, D. M. Embryonic and fetal Hemoglobins are not only Indicators of Hypoxia, but also possibly additional Markers in Monitoring Patients with Hemoblastosis / D. M. Nikulina, Y. A. Kriventsev, R. A. Bisalieva, L. V. Zakljakova, N. V. Borisova // Tumor Biology. - 2G1G. - Vol. 31, № 1. - P. 43-44.
22. Nikulina, D. M. Molecular interactions and possible polyfunctionality of serum blood protein which is associated with inflammation, tumors and autoimmune conditions / D. M. Nikulina, T. B. Vorobyeva, Y. A. Kriventsev, A. A. Gavrilenko, R. A. Bisalieva // FEBS Journal, Vol. 281, № 4, Suppl. 1. - 2014. - P. 145-146.
23. Nikulina, D. Diagnostic potential of fetal and embryonic hemoglobins as a markers of hypoxia, fetal development and hemoblastosis / D. Nikulina, O. Dyakova, A. Agapova, T. Panova, Y. Kriventcev, R. Bisalieva, L. Bachmutova, S. Lapeko, L. Ogul, L. Zaklyakova, P. Ivanov // FEBS Journal, - 2013. - Vol. 280, № 3, (Suppl. 1). -P. 283.
24. Singer, K. Studies of abnormal haemoglobins. 1. Their demonstration in sickle cell anemia and other he-matolic disorders by means of alkali denaturation / K. Singer, A. I. Chernofi, L. Singer // Blood. - 1951. - Vol. 6, № 5. - P. 413-428.
References
1. Vlasov V. V. Effektivnost' diagnosticheskikh issledovaniy [The effectiveness of diagnostic tests]. Moscow, Medicine, 1988, 36 p.
2. Gal' E., Med'eshi G., Veretski L. Elektroforez v razdelenii biokhimicheskikh makromolekul [Electrophoresis in separation of biochemical macromolecules]. Moscow, Znanie, 1982, 446 p.
3. Garanina E. N. Kachestvo laboratornogo analiza. Faktory, kriterii i metody otsenki [The quality of the laboratory analysis. Factors, criteria and evaluation methods.]. Moscow, Labinform, 1997, 18 p.
4. Glants S. Mediko-biologicheskaya statistika [Biomedical Statistics]. Moscow, Praktika, 1999, 459 p.
5. Dashtayants G. A. Klinicheskaya gematologiya [Clinical hematology]. Kiev, Zdorov'e, 1973, 272 p.
6. Delektorskaya L. N., Pimenova L. M., Kadasheva O. G. Otsenka diagnosticheskoy informativnosti labora-tornykh testov: metodicheskie rekomendatsii [Evaluation of diagnostic informativity of laboratory tests: guidelines]. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika [Clinical laboratory diagnostics]. Moscow, 1992, no. 1/2, pp. 49-59.
7. Irzhak L. I. Gemoglobiny i ikh svoystva [Hemoglobins and their properties]. Moscow, Nauka, 1983, 150 p.
8. Kriventsev Yu. A. Gemoglobiny cheloveka: immunobiokhimicheskaya kharakteristika i mediko-biologicheskoe znachenie. Avtoreferat dissertatsii doktora meditsinskih nauk [Human hemoglobin: immunobiochemical characteristics and biomedical importance. Abstract of thesis of Doctor of Medical Sciences]. Moscow, 2009, 42 p.
9. Kriventsev Yu. A. Geterogennaya sistema gemoglobinov: immunobiokhimicheskaya kharakteristika i medi-ko-biologicheskoe znachenie [Heterogeneous hemoglobin system: immunobiochemical characteristics and biomedical importance]. Saarbrucken, Palmarium Academic Publishing, 2012, 101 p.
10. Kriventsev Yu. A., Bisalieva R. A., Ivanov P. A. Sovremennyy vzglyad na geterogennuyu sistemu gemoglobina [The modern view on heterogeneous systems of hemoglobin]. Astrakhanskiy meditsinskiy zhurnal [Astrakhan Medical Journal], 2012, vol. 7, no. 3, pp. 19-24.
11. Kriventsev Yu. A., Bisalieva R. A., Ishmamedova L. M., Noskov A. I., Ramazanov M. V. Novyy sposob klinicheskoy otsenki gemoglobinovogo spektra [A new way of clinical assessment of hemoglobin spectrum]. Sibirskiy meditsinskiy zhurnal [Siberian Medical Journal], 2011, no. 3, pp. 52-54.
12. Kriventsev Yu. A., Bisalieva R. A., Osyko S. V., Kriventseva M. Yu., Noskov A. I. Gemoglobinovyy profil' pri gemoblastozakh [Hemoglobin profile at hemoblastosis]. Kazanskaya nauka [Kazan science], 2010, no. 9, pp. 23-26.
13. Kriventsev Yu.A., Nikulina D. M., Bisalieva R. A. Immunokhimicheskiy analiz kontsentratsii fetal'nogo gemoglobina v krovi novorozhdennykh mal'chikov i devochek s vnutriutrobnoy gipoksiey [Immunochemical analysis of the concentration of fetal hemoglobin in the blood of newborn boys and girls with intrauterine hypoxia]. Omskiy nauchnyy vestnik [Omsk Scientific Bulletin], Omsk, 2006. vol. 46, no. 9, pp. 272-274.
14. Kriventsev Yu. A., Nikulina D. M., Bisalieva R. A. Sposob kolichestvennogo opredeleniya fetal'nogo gemoglobina cheloveka [A method of quantitative determination of human fetal hemoglobin]. RF Patent, no. 2310204, 2006.
15. Nikulina D. M., Kriventsev Yu. A., Bisalieva R. A., Lapeko S. V. Novyy immunokhimicheskiy test dlya la-boratornoy otsenki sostoyaniya eritrona [A new immunochemical test for laboratory assessment of erythron] Klinicheskaya laboratornaya diagnostika [Clinical Laboratory diagnostics], 2009, no. 12, pp. 27-30.
16. Osterman L. A. Khromatografiya belkov i nukleinovykh kislot [Chromatography of proteins and nucleic acids]. Moscow, Nauka [Science], 1985, 689 p.
17. Todorov Y. Klinicheskie laboratornye issledovaniya v pediatrii [Clinical laboratory studies in pediatrics]. Sophia, Meditsina i fizkul'tura [Health and Physical Education], 1968, 837 p.
18. Tokarev Yu. N., Akhundova A. N., Andreeva A. P. Immunokhimicheskiy metod ryada gemoglobinopatiy: Metodicheskie rekomendatsii [Immunochemical method of hemoglobinopathy number: Method. recommendations]. Baku, Novaya knizhnaya tipografiya, 1982, 9 p.
19. Betke K., Marti H. R., Schlicht I. Estimation of small percentages of foetal haemoglobin. Nature, 1959, vol. 184, Suppl. 24, pp. 1877-1878.
20. Fahey J. L., McKelvey E. M. Quantitative determination of serum immunologlobulins in antibody-agar plates. J. Immunol., 1965, vol. 94, pp. 84-90.
21. Nikulina D. M., Krivencev Ju. A., Bisalieva R. A., Zakljakova L. V., Borisova N. V. Embryonic and fetal Hemoglobins are not only Indicators of Hypoxia, but also possibly additional Markers in Monitoring Patients with He-moblastosis. Tumor Biology, 2010, vol. 31, no. 1, pp. 43-44.
22. Nikulina D. M., Vorobyeva T. B., Krivencev Ju. A., Gavrilenko A. A., Bisalieva R. A. Molecular interactions and possible polyfunctionality of serum blood protein which is associated with inflammation, tumors and autoimmune conditions. FEBS Journal, vol. 281, no. 4, Suppl. 1, 2014, pp. 145-146.
23. Nikulina D., Dyakova O., Agapova A., Panova T., Krivencev Ju., Bisalieva R, Bachmutova L., Lapeko S., Ogul L., Zaklyakova L., Ivanov P. Diagnostic potential of fetal and embryonic hemoglobins as a markers of hypoxia, fetal development and hemoblastosis. FEBS Journal, 2013, vol. 280, no. 3, Suppl. 1, pp. 283.
24. Singer K., Chernofi A. I., Singer L. Studies of abnormal haemoglobins. 1. Their demonstration in sickle cell anemia and other hematolic disorders by means of alkali denaturation. Blood, 1951, vol. 6, no. 5, pp. 413-428.
УДК 616.127-006 Клиническая медицина
© А.Г. Кузьмин, 2015
ДЕЗАДАПТИВНОЕ РЕМОДЕЛИРОВАНИЕ СЕРДЦА ПОСЛЕ Q-ОБРАЗУЮЩЕГО ИНФАРКТА МИОКАРДА
Кузьмин Александр Геннадьевич, кандидат медицинских наук, соискатель кафедры пропедевтики внутренних болезней, ГБОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 672090, г. Чита, ул. Горького, д. 39-а, тел.: (3022) 23-94-12, e-mail: [email protected].
Ремоделирование сердца после Q-образующего инфаркта миокарда характеризуется повышенным риском фатальных аритмий и прогрессированием хронической сердечной недостаточности. Установлено, что у пациентов с хронической сердечной недостаточностью III функционального класса формируется дезадаптивное ремоделирование сердца, включающее в себя комплекс бивентрикулярных морфофункциональных маркеров.
Ключевые слова: хроническая сердечная недостаточность, ремоделирование.
MALADAPTIVE CARDIAC REMODELING AFTER Q-MYOCARDIAL INFARCTION
Kuzmin Aleksandr G., Cand. Sci. (Med.), candidate for a degree, Chita State Medical Academy, 39-a Gor'kogo St., Chita, 672090, Russia, tel : (3022) 23-94-12, e-mail: [email protected].
Cardiac remodeling after Q-myocardial infarction is characterized by an increased risk of fatal arrhythmias and progression of heart failure. It is found that patients with chronic heart failure of the III functional class develop maladaptive cardiac remodeling including a complex of biventricular morfofunctional markers.
Key words: chronic heart failure, remodeling.
Введение. Гибель значительной части работоспособного миокарда индуцирует развитие структурной перестройки сердца, которая реализуется на фоне негативных влияний нейроэндокринной, симпатоадреналовой систем, активации системы провоспалительных цитокинов, нарушений внутри-сердечной и центральной гемодинамики, как правило, имеет непрерывно прогрессирующее во времени течение и тесно связана с ухудшением качества жизни. Итогом структурного преобразования сердца вследствие Q-образующего инфаркта миокарда левого желудочка (Q-ИМлж) служат необратимые морфофункциональные преобразования сердца, тесно связанные с прогрессированием клинических проявлений хронической сердечной недостаточности (ХСН), которая, по данным Фремингем-ского исследования [27], развивается в течение 5 лет у 14 % пациентов. Одной из причин формирования ХСН является дезадаптивное ремоделирование, характеризующееся дилатацией, деконфигураци-ей левого желудочка (ЛЖ), его систолической и диастолической дисфункцией [26]. Поэтому изучение дополнительных маркеров бивентрикулярного дезадаптивного ремоделирования сердца у пациентов с исходным поражением ЛЖ вследствие Q-ИМлж является актуальным.
Цель: выявить морфофункциональные маркеры дезадаптивной модели сердца после Q-ИМлж.
Материалы и методы исследования. Обследовано 253 пациента (204 мужчины, 49 женщин), средний возраст которых составил 60 ± 8,7 лет, перенесших Q-ИМлж различной локализации, давностью 3-4 года с клиническими проявлениями ХСН ПБ стадии, II и III функционального класса (ФК) по классификации NYHA (II ФК - 118 пациентов, III ФК - 135 больных).
Исследование выполнялось в течение 12 месяцев в соответствии со стандартами Good Clinical Practice и принципами Хельсинской декларации. Протокол исследования одобрен локальным этиче-
