ОЦЕНКА АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТОВ КОРЫ BETULA PENDULA (БЕРЕЗЫ ПОВИСЛОЙ) В ОТНОШЕНИИ УРОПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

DOI: 10.37489/0235-2990-2022-67-3-4-29-35 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Оригинальная статья/Original Article

Оценка антибактериальной активности экстрактов коры Betula pendula (березы повислой) в отношении уропатогенных микроорганизмов

Ю. В. ЧАПУРИН, *М. Д. А. МБАРГА, А. Н. СЕНЯГИН, И. В. ПОДОПРИГОРА, РЕХАЙЛИЯ МАНАР

Российский университет дружбы народов, Москва, Российская Федерация

Evaluation of the Antibacterial Activity of Extracts of Betula Pendula (Silver Birch) Bark Against Uropathogenic Microorganisms

YURI V. CHAPURIN, *MBARGA MANGA JOSEPH ARSEN, ALEXANDER N. SENYAGIN, IRINA V PODOPRIGORA, MANAR REHAILIA

RUDN University, Moscow, Russian Federation

Резюме

Цель: оценить антибактериальную активность водного и спиртового экстрактов коры Betula pendula (березы повислой) в отношении различных микроорганизмов, вызывающих инфекции мочевыводящих путей. Материал и методы. Были протестированы водный и этанольный экстракты биологически активных соединений из коры Betula pendula в отношении десяти клинических уропатогенных штаммов (грамположительные бактерии — Kocuria rhizophila 1542, Staphylococcus simulans 5882, Enterococcus avium 1669, Enterococcus faecalis 5960 и Corynebacterium spp. 1638; грамотрицательные бактерии — Enterococcus cloacae, Morganella morganii 6392, Escherichia coli 1449, Seratia mansescens6441 и Achromobacter xylosoxidans4892). Staphylococcus aureus ATCC 6538 и Escherichia coli ATCC 25922 использовали как референс-стандарты грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Чувствительность опытных штаммов к антибиотику оценивали диско-диффузионным методом Кирби-Бауэра, в то время как антибактериальную активность полученных экстрактов оценивали с использованием метода диффузии в агар. Также определили минимальную подавляющую концентрацию (МПК) и минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) методом серийных разведений.

Результаты. Кора B.pendula содержала 78,85% сухого вещества. Объёмный выход водного (AE) и этанольного экстрактов (EE) составлял 74,66% и 86,66% (об./об.), соответственно, тогда как их массовые выходы составляли 6,59% и 10,65% (мас./мас.). K.rizophilia 1542 и Corynebacterium spp. 1638 были наиболее устойчивыми бактериями с индексом множественной лекарственной устойчивости 0,45. AE и EE были активны в отношении всех тестируемых микроорганизмов. МПК AE варьировала от 8 до 32 мг / мл, тогда как МПК — от 2 до 16 мг / мл. Заключение. Водный экстракт коры Betula pendula проявляет слабую антимикробную активность, тогда как эта-нольный экстракт проявляет более выраженную антимикробную активность, но обладает бактериостатическим действием.

Ключевые слова: Betula pendula; береза повислая; антибактериальное средство; инфекции мочевыводящих путей; растительные антибиотики

Для цитирования: Чапурин Ю. В., Мбарга М.Д.А., СенягинА. Н, Подопригора И. В., Манар Рехайлия. Оценка антибактериальной активности экстрактов коры Betula pendula (березы повислой) в отношении уропатогенных микроорганизмов. Антибиотики ихимиотер. 2022; 67: 3-4: 29-35. doi: 10.37489/0235-2990-2022-67-3-4-29-35.

Abstract

The aim of this work was to evaluate the antibacterial activity of the aqueous and ethanolic extracts of Betula pendula (silver birch) bark against various microorganisms causing urinary tract infections.

Material and methods. Aqueous and ethanol extracts of biologically active compounds from Betula pendula bark were tested against ten clinical uropathogenic strains (gram-positive bacteria—Kocuria rhizophila 1542, Staphylococcus simulans5882, Enterococcus avium 1669, Enterococcus faecalis 5960, and Corynebacterium spp. 1638; gram-negative bacteria — Enterococcus cloacae, Morganella morganii6392, Escherichia coli 1449, Seratia mansescens6441, and Achromobacter xylosoxidans 4892). Staphylococcus aureus ATCC 6538 and Escherichia coli ATCC 25922 were used as reference standards for Gram-positive and Gram-negative microorganisms. The sensitivity of the experimental strains to the antibiotic was evaluated by the Kirby-Bauer disk diffusion method, while the antibacterial activity of the obtained extracts was evaluated using the agar diffusion method. The minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) were also determined via the serial dilution method.

© Коллектив авторов, 2022 © Team of Authors, 2022

"Адрес для корреспонденции: ул. Миклухо-Маклая, 6, "Correspondence to: 6 Miklukho-Maklaya st., RUDN Univer-

РУДН, г. Москва, Российская Федерация, 117198. sity, Moscow, 117198 Russian Federation.

E-mail: [email protected] E-mail: [email protected]

Results. The bark of B.pendula contained 78.85% of dry matter. The volume yield of the aqueous (AE) and ethanol extract (EE) was 74.66% and 86.66% (v/v), respectively, while their mass yields were 6.59% and 10.65% (w/w). K.rizophilia 1542 and Corynebacterium spp. 1638 were the most resistant bacteria with a multidrug resistance index of 0.45. AE and EE were active against all microorganisms tested. MIC ofAE ranged from 8 to 32 mg/ml, while MIC of EE ranged from 2 to 16 mg/ml. Conclusion. An aqueous extract of Betula pendula bark exhibits weak antimicrobial activity, while the ethanol extract exhibits a more pronounced antimicrobial activity, but has a bacteriostatic effect.

Keywords: Betula pendula; silver birch; antibacterial agent; urinary tract infections; herbal antibiotics.

For citation: Chapurin Y. V, Mbarga M. J. A., Senyagin A. N, Podoprigora I. V., Manar Rehailia. Evaluation of the antibacterial activity of extracts of Betula pendula (Silver birch) bark against uropathogenic microorganisms. Antibiotiki i Khimioter = Antibiotics and Chemotherapy. 2022; 67: 3-4: 29-35. doi: 10.37489/0235-2990-2022-67-3-4-29-35.

Введение

Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) — широко распространённые инфекции, представляют собой существенную проблему для общественного здравоохранения и являются причиной почти 150 млн случаев заболевания ежегодно во всем мире [1]. ИМП возникают на любом уровне мочевыделительной системы: ИМП чаще возникают у женщин [2]. Обычно возбудители, вызывающие ИМП, легко поддаются антибактериальной терапии [3], однако, к сожалению, антибиотикорезистентность, приобретающая всё более широкое распространение в последние десятилетия, значительно усложнила лечение этих инфекций. В нескольких последних исследованиях сообщалось о значительном повышении устойчивости уропатогенных бактерий к антибиотикам и беспрецедентном количестве бактерий с множественной лекарственной устойчивостью во всем мире [4, 5]. Чтобы скорректировать эту опасную ситуацию, исследовательские группы всего мира постоянно оценивают возможность использования альтернативных веществ, лекарственные растения показывают наиболее убедительные доказательства своей эффективности, учитывая то, что растения многими тысячелетиями использовались для профилактики и лечения заболеваний, включая и лечение ИМП [6]. В этом контексте такие широко распространённые (и поэтому доступные) растения, как Betula pendula, заслуживают пристального исследования на предмет их антибактериальных свойств.

Цель работы — оценка антибактериальных свойств спиртового и водного экстрактов коры B.pendula в отношении некоторых бактерий, ассоциированных с инфекциями мочевыводящих путей.

Материал и методы

Растительный материал. В качестве растительного материала в этом исследовании использовалась внутренняя кора берёзы повислой (Betula pendula), отобранной случайным образом. После сбора образцы были высушены при 37°C до постоянной массы, затем рассчитывали массу сухих образцов; измельчали до частиц менее 1 мм для дальнейшего использования.

Бактериальные штаммы, использованные для теста на антимикробную активность: 5 грамположительных — Ko-curia rhizophila 1542, Staphylococcus simulans 5882, Enterococcus avium 1669, Enterococcus faecalis 5960 и Corynebacterium spp. 1638 и 5 грамотрицательных микроорганизмов — Enterococcus cloacae 6392, Morganella morganii 1543, Escherichia coli, Achromo-bacter xylosoxidans 4892). Staphylococcus aureus ATCC 6538 и Escherichia coli ATCC 25922 использовали как стандартные грам-положительные и грамотрицательные, соответственно. Все штаммы предоставлены кафедрой микробиологии и вирусологии Российского университета дружбы народов.

Химические вещества и питательные среды. Диметил-сульфоксид (ДМСО) был приобретён в BDH Laboratories (VWR International Ltd., США), также использовали питательную среду BHIB (HiMedia™ Laboratories Pvt. Ltd., Индия), агар Мюл-лера-Хинтон (MHA HiMedia™ Laboratories Pvt. Ltd., Индия), бульон Sabouraud Dextrose Broth (SDB, HiMedia™ Laboratories Pvt. Ltd., Индия).

Экстракция активных соединений. Для экстракции активных соединений из растений использовали раствор этанола (80%, об./об.) и дистиллированную воду. К 30 г измельчённого растительного материала добавляли 270 мл растворителя, плотно закупоривали и встряхивали на шейкер-инкубаторе (Heidolph Inkubator 1000 в сочетании с Heidolph Unimax 1010, Германия) при температуре 37°C и 300 об/мин в течение 24 ч. Далее смеси подвергали вакуумной фильтрации с использованием фильтровальной бумаги Whatman № 1, после чего концентрировали при 40°C в роторном испарителе (IKA RV8), оборудованном водяной баней IKA HB10 (IKA Werke, Staufen, Германия) и вакуумным насосом IKA. MVP10 (IKA Werke, Штауфен, Германия). Когда объём был достаточно малый, чтобы избежать потерь, предварительно взвешенные экстракты помещали в чашки Петри, затем инкубировали в открытом виде при 40°C до полного испарения жидкости. Окончательно высушенные неочищенные экстракты взвешивали. Объём экстракции и массовый выход определяли по формулам:

ОбЪёМный Объём экстракта после фильтрации (мл)

=-х100

выход (%) Начальный объём растворителя (мл)

Масса извлечённых растительных

Выход =_материалов (г)_х100

массы (%) Масса образца растительного сырья (г)

Приготовление антимикробного раствора. Неочищенный растительный экстракт растворяли в рассчитанном объёме ДМСО (5%, об./об.) для получения растворов в концентрации 128 мг/мл. Экстракты стерилизовали методом микрофильтрации на мембране (размер пор фильтра 0,22 мкм). Полученный раствор использовали для приготовления различных разведений, используемых в опытах.

Приготовление инокулята. Бактерии культивировали в течение 24 ч при 37°C в 10 мл бульона BHI. После инкубации клетки осаждали центрифугированием (7000 g при температуре 4°C, 10 мин), дважды промывали стерильным физиологическим раствором, а затем ресуспендировали в 5 мл стерильного физиологического раствора до достижения концентрации, эк-

Таблица 1. Сухое вещество, содержание воды, объём и масса экстракции коры Betula pendula Table 1. Dry matter, water content, volume, and weight of Betula pendula bark extract

Показатель Водный Этанольный

экстракт экстракт

Сухое вещество, % 78,85

Содержание воды, % 21,15

Объёмный выход, % 74,66 86,66

Массовый выход, % 6,59 10,65

вивалентной 0,5 по стандарту МакФарланда, с использованием денситометра МакФарланда DEN-1 (Грант-био).

Оценка чувствительности тест-бактерий к антибиотикам. Для изучения профиля антибиотикорезистентности каждого штамма бактерий использовали ранее описанный модифицированный диско-диффузный метод Кирби-Бау-эра [7]. Использовали следующие антибиотики: амоксицил-лин — 30 мкг/диск; ампициллин (AMP) — 25 мкг/диск; це-фазолин (CAZ) — 30 мкг/диск; цефазолин/клавулановая кислота (CAC) — 30/10 мкг/диск; цефтриаксон (CTR) — 30 мкг/диск; ципрофлоксацин (CIP) — 30 мкг/диск; фосфо-мицин (FO) — 200 мкг/диск; имипенем (IMP) — 10 мкг/диск; нитрофурантоин (NIT) — 200 мкг/диск; тетрациклин (TE) — 30 мкг/диск и триметоприм (TR) — 30 мкг/диск. Зоны задержки роста были измерены и интерпретированы согласно [8]. Определяли минимальную подавляющую концентрацию (МПК), минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) экстрактов, а также соотношение МБК/МПК.

Характеристика антибактериальной активности экстрактов определялась соотношение МБК/МПК, указывающим на бактерицидное (МБК/МПК<4) или бактериостатиче-ское (МБК/МПК>16) действие в отношении тестируемых штаммов [9].

Результаты и обсуждение

Сухое вещество и выход экстракции. Сухое вещество, содержание воды, массовые выходы и объём водного (AE) и этанольного (EE) экстрактов коры Betula pendula представлены в табл. 1. Кора B.pendula имела содержание сухого вещества 78,85%. Мы получили объёмный выход экстракции 74,66% с дистиллированной водой в качестве растворителя и 86,66% — с этанолом. Разницу в объёмах экстракции можно объяснить потерями в процессе экстракции и разными свойствами растворителей. Как сообщает M. M. J. Arsene и соавт. [10], что фильтрация этанольных экстрактов была быстрее (менее 5 мин для 300 мл) по сравнению с водным экстрактом, который занимал намного больше времени (более 50 мин в среднем для 300 мл) и требовал 6 замен фильтров. Несмотря на фильтрацию, AE все ещё оставался мутным, в то время как EE был полностью прозрачными. Некоторые авторы [10-12] сообщили о аналогичных наблюдениях, в то время как другие [13, 14] пришли к противоположным результатам. Поэтому, как указали M. M. J. Arsene и соавт. [10] в своей недавней работе, эффективность экстракции зависит от нескольких факторов, включая использованный метод, время экстракции, растворители и исполь-

%

л а

В н о в ю в н

а =в в а

V

н =

ю

a

л в в

01 -

о

в в

о &

a

л

5

£2 а в

я «

U S Н ^

в £

н о о 0

о <и ® «

Ё 2

V а

Й а>

в ¡8

« Я

6 ж Л и

f 3

^ СЧ

S

ч -VÖ >а

X

§ g § § э § g § So 3 Q §

о oí со о О oí оо оо о

+1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1

О 5 6 6 2 2 5 2 о о о 4

со 2 2 со со 2 со 2 2 2

00 üO üO go ü0

,—1 од од OJ CD oo oo oo c^

+1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1

со 7 4 7 4 8 7 2 со 2 2 2

2 2 со 2 2 2 2 2 со со со со

г_^ г_^

ES Е^ £ üO CÜ ö

CD 1 CD 4—( 1 1 CD 1 1 о о 1

+1 +1 +1 о +1 +1 +1 +1 +1 +l +1 +1

о со +1 7 5 со со 21 6 6 8

2 1 6 1 2 2 2 1 1 1

So So So So So n So g So

c^ oo oo OJ ы CD OJ

+1 +i +i +i +i +1 н +1 +1 +1

8 1 8 4 1 8 ь 1 oo о

2 oo oo oo oo л oo со

—

—

—

X

So g s? So

oo CD '—( OJ

+1 +1 о +1 6 +1

о О 1

2 oo

с/о

а

ü0 ü0 ts Ü0 ü0

oo oo c^ В Т-Ч

+1 +1 +1 +1 +1 +1 р +1 +1 +1 +1 +1 +1

2 5 7 6 7 5 т 5 7 oo 6 6 о

2 2 2 oo 2 oo о 2 1 2 oo oo 2

So So So So So р So So So So So So

1 LO 1 oí oí oí oí 1

+1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +i

о 9 2 2 о о со со oo со 4

со 1 oo 2 со со oo 2 2 2 2

—

—

С/0

—

—

—

—

и

л

щ

о

S X

В Q

X

л к

о ■-

щ

X

л

н

—

н

й х 1= Е£ S Я я л

н

Й м " I

rt I

X С/3 О . ; Ö ^

0 Я ft .2 &ТЗ

1 s

Рч ü CU й о

я

В

М g

I 1 ä 2

—

н

и

¿fc¡ щ

о

PÍ

tu о й я

•а

tU •Й 1

—

О

Он

Он

£

щ Й

^ CJ

о л и '

—

Н ÓS .S3

73

^

и а Ь

tu N ■ U

Я Л К и

g S ° £ •

Л JS "CT о •

о о

и

о ft

й в

и

и о

щ о § &

¡3 &

V V

S

s cL С и

Он

X X

ш и Е-

и

ff О К Й

и Т

м н

Н

Ё

щ

й

щ

—

Л

Диаметр зоны задержки роста этанолового и водного экстракта коры Betula pendula в отношении уропато-генных бактериях

Growth inhibition zone diameter of the ethanolic and aqueous extracts of Betula pendula bark in relation to uropa-thogenic bacteria

зуемое оборудование. Кроме того, авторы также заметили, что высокие выходы фитоком-понента не обязательно подразумевают выраженную антибактериальную активность, и это было дополнительно оценено в настоящей работе.

Чувствительность клинических штаммов к антибиотикам. В данной работе был использован диско-диффузионный метод Кирби-Бауэра для оценки чувствительности используемых бактериальных штаммов к одиннадцати препаратам. Был рассчитан индекс множественной лекарственной устойчивости (МЛУ/MDR). Результаты оценки чувствительности штаммов к антибиотикам представлены в табл. 2. Как показано в табл. 2, все штаммов бактерий не имели устойчивости к амоксициллину, имипенему и цефтриаксону, в то время как 8/11 были устойчивы к ампициллину, 7/11 — к триметоприму, 7/11 — к тетрациклину, 4/11 — цефазолину/клавулановой кислоте,

фосфомицину и нитрофурантоину, 3/11 — к цеф-тазидиму и 2/12 — к ципрофлоксацину. Оба ре-ференс-штамма бактерий Е.соИ АТСС 25922 и Б.аи-гвия АТСС 6538 были чувствительны ко всем антибиотикам, в то время как клинические штаммы были устойчивы, по крайней мере, к одному из взятых антибиотиков. Среди клинических штаммов множественная лекарственная устойчивость (МЛУ/MDR) колеблется от 0,18 до 0,45. К.пморНШа 1542 и СогупвЬаМвгшт эрр. 1638 были наиболее устойчивыми штаммами с МЛУ 0,45 у каждого. Результаты, полученные с этими клиническими штаммами, аналогичны результатам других исследований [4, 5]. Наиболее выраженная устойчивость наблюдалась к ампициллину, не наблюдалось устойчивости к амоксициллину/клавула-новой кислоте. Как и в наших результатах, в других исследованиях сообщается о низкой устойчивости уропатогенов к имипенему и цефтриаксону [5, 15].

Таблица 3. МПК и МБК водных и этанольных экстрактов коры Betula pendula в отношении тестируемых уро-патогенных бактериях

Table 3. MIC and MBC of Betula pendula bark water and ethanol extracts in relation to the tested uropathogenic

bacteria_

Микроорганизмы Водный экстракт Этанольный экстракт

_МПК, мг/мл МБК, мг/мл МБК/МПК МПК, мг/мл МБК, мг/мл МБК/МПК

Грамположительные

K.rizophilia 1542 16 >64 — 8 >64 —

E.avium 1669 32 >64 — 4 32 8

S.simulans 5882 32 >64 — 8 16 2

Corynebacterium spp. 1638 16 >64 — 8 64 8 ~

E.faecalis 5960 16 64 4 4 32 8

S.aureus ATCC 6538_16_64_4_2_16_8

Грамотрицательные

M.morganii 1543 8 64 8 2 32 16

E.cloacae 6392 32 >64 — 2 32 16

E.coli 1449_16_>64_—_4_>64_—

S.mansescens 6441_32_>64_—_16_>64_—

A.xylosoxidans 4892 32 64 2 8 32 4

E.coli ATCC 25922 8 32 4 4 8 2

Чувствительность всех штаммов к амоксициллину, имипенему и цефтриаксону показывает, что эти три антибиотика эффективны в отношении широкого спектра бактерий, включая клинические штаммы с высокой устойчивостью к другим антибиотикам.

Зона ингибирования экстрактов в отношении тестируемых бактерий. На рисунке представлены диаметры ингибирования AE и EE экстрактов коры Betula pendula в отношении тестируемых микроорганизмах. И AE, и EE были активны в отношении всех протестированных микроорганизмов: диаметры ингибирования составляли 6-11,5 мм для AE и 10,5-16 мм для EE. EE в целом проявляли более выраженную активность, чем AE. Следовательно, это означает, что этанол извлекает больше соединений с антимикробными свойствами по сравнению с дистиллированной водой. Некоторые авторов сообщили, что соединения с антибактериальной активностью, такие как флавоноиды, полифенолы, дубильные вещества и алкалоиды, обычно нерастворимы в воде, но растворимы в этаноле [16, 17]. Другие авторы также указали, что этанол извлекает больше антимикробных соединений из растительных материалов, чем вода [10, 18]. Как сообщается в работах других исследователей, кора B.pendula содержит большое количество флавоноидов, арилбутанои-дов, тритерпенов (бетулин и бетулиновая кислота), диарилгептаноидов, простых фенольных соединений, фенольных кислот, лигнанов и про-цианидинов [19]. Противомикробное действие этого экстракта можно отнести к одному или нескольким фитосоединениям, упомянутым выше, но необходимы дальнейшие исследования для проверки и уточнения этой гипотезы.

МПК и МБК. В табл. 3 представлены МПК, МБК и соотношение МБК/МПК двух наших экстрактов. EE показали лучшую антибактериальную активность. МПК для EE варьировала

от 2 до 16 мг/мл, а для АЕ — от 8 до 32 мг/мл. Почти все МБК АЕ были >64 мг/мл, в то время как МБК ЕЕ были успешно определены. При использовании дистиллированной воды в качестве растворителя наиболее выраженная антибактериальная активность наблюдалась в отношении А^.ху1^о&ох\^^ап& 4892, Е.соИ АТСС 25922, Е^авсаШ 5960, М.тог^апи 1543 и Б.аигвш АТСС 6538. Хотя МПК и МБК АЕ были высокими, было обнаружено, что у этих же бактерий АЕ показывает бактерицидное действие в отношении Е^авсаШ 5960, А.ху1о&охШат4892, Б.аигвш АТСС 6538 и Е.соИ АТСС 25922, поскольку соотношение МБК/МПК для этих бактерий составляло <4. Действительно, А. Н. Мопёа и соавт. [9] сообщили, что соотношение МБК/МПК>16 означает, что антибактериальная эффективность тестируемого агента считается бактериостатической, тогда как МБК/МПК<4 указывает на бактерицидную активность. Точно так же МПК для ЕЕ были относительно низким, а МБК для этого экстракта были ниже, чем для АЕ. Однако антибактериальная активность ЕЕ была бактериостатической (МБК/МПК>16) против большинства бактерий, за исключением Б.ятиШт 5882, АхуЪзохМат4892 и Е.соИ АТСС 25922. Это различие в активности ЕЕ между грамположитель-ными и грамотрицательными микроорганизмами может объясняться структурой клеточной стенки грамотрицательных бактерий, которая отличается от структуры грамположительных бактерий тонким слоем пептидогликана, наличием наружной мембраны и лёгкостью обмена на плазматической мембране [10]. Согласно классификации V. Кие1е [20], различные экстракты, протестированные в этом исследовании, можно было рассматривать как демонстрирующие слабую антибактериальную активности независимо от экстракционного растворителя и тестируемого штамма, поскольку они имели значение МПК выше 0,625 мг/мл. Для уточнения результа-

тов и более полного описания состава экстрактов необходимы дальнейшие исследования по оценке антибактериальной активности экстрактов коры B.pendula с другими растворителями, такими как ацетон, метанол и хлороформ, а также для оценки их синергизма с антибиотиками.

Заключение

В представленном исследовании мы оценили антибактериальные свойства водных и спиртовых экстрактов коры Betula pendula на десяти клинических изолятах бактерий, ассоциированных с заболеваниями мочеполового тракта и двух референс-штаммах бактерий. В ходе исследования было обнаружено, что водный экстракт коры проявляет слабую антимикробную активность,

Литература/References

1. Motse D.F.K., Ngaba G.H, Foko L.P.K., Ebongue C.O., Adiogo D.D. Etiologic profile and sensitivity pattern of germs responsible for urinary tract infection among under-five children in Douala, Cameroon: a Hospital Based Study. Avicenna J Clin Microbiol Infect. 2019; 6 (2): 49-56. doi: 10.34172/ajcmi.2019.10.

2. Walsh C., Collyns T. The pathophysiology of urinary tract infections. Surgery (Oxf), 2020; 38 (4): 191-196. doi: 10.1016/j.mpsur.2017.03.007.

3. Abou HeidarN.F., Degheili J.A., Yacoubian A.A., Khauli R.B. Management of urinary tract infection in women: a practical approach for everyday practice. Urol Ann. 2019; 11 (4): 339. doi: 10.4103/UA.UA_104_19.

4. Mbarga M.M.J., Andreevna S.L., Viktorovna P.I. Evaluation of apparent microflora and study of antibiotic resistance of coliforms isolated from the shells of poultry eggs in Moscow-Russia. J Adv Microbiol. 2020; 20 (4): 70-77. doi: 10.9734/jamb/2020/v20i430242.

5. Суадкиа С., Подопригора И. В., ЯшинаН. В., СарухановаЛ. Е., Кравцов Э. Г. Антибиотикорезистентные уропатогенные Escherichia coli, выделенные от детей с врождёнными аномалиями развития моче-выделительной системы 7-8 (23-26). doi: 10.37489/0235-2990-202065-7-8-23-26. [Suadkia S., Podoprigora I.V., Yashina N.V., Sarukhanova L.E., Kravtsov E.G. Antibiotic-resistant uropathogenic Escherichia coli isolated from children with birth defects of the urinary system. Antibiotiki i Khimioter = Antibiotics and Chemotherapy. 2020; 65 (7-8): 23-26. doi: 10.37489/0235-2990-2020-65-7-8-23-26. (in Russian)

6. WojniczD., KucharskaA.Z., Sokol-L^towskaA., KiciaM., Tichaczek-Goska D. Medicinal plants extracts affect virulence factors expression and biofilm formation by the uropathogenic Escherichia coli. Urol Res. 2012; 40 (6): 683-97. doi: 10.1007/s00240-012-0499-6.

7. Manga M.J.A., Viktorovna HI., Grigorievna V.E., Davares A.K., Sergeevna D.M. et al. Prolonged exposure to antimicrobials induces changes in susceptibility to antibiotics, biofilm formation and pathogenicity in Staphylococcus aureus. Journal of Pharmaceutical Research International, 2021; 33 (34B): 140-151. doi: 10.9734/jpri/2021/v33i34B31856.

8. CLSI: Clinical & Laboratory Standards Institute. Control methods. Biological and micro-biological factors: Determination of the sensitivity of microorganisms to antibacterial drugs. Federal Center for Sanitary and Epidemiological Surveillance of Ministry of Health of Russia; 2019.

9. MondalA.H., YadavD., Mitra S., Mukhopadhyay K. Biosynthesis of silver nanoparticles using culture supernatant of shewanella sp. Ary1 and their antibacterial activity. International Journal of Nanomedicine, 2020; 15: 8295. doi: 10.2147/IJN.S274535.

10. Arsene M.M.J., PodoprigoraI.V., DavaresA.K.L., Razan M., Das M. S., Se-nyagin A. N. Antibacterial activity of grapefruit peel extracts and green-

тогда как этаноловый экстракт проявляет более выраженную антибактериальную активность, но в целом обладает бактериостатическим действием. Необходимы дальнейшие исследования для оценки антибактериальной активности исследуемого растительного материала с другими растворителями, другими методами экстракции, а также провести тесты для оценки экстрактов на наличие синергии с антибиотиками.

Дополнительная информация

Подтверждение. Работа поддержана Программой стратегического академического лидерства РУДН.

Конфликт интерес. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

synthesized silver nanoparticles, Veterinary World. 2021; 14 (5): 1330-1341. doi: 10.14202/vetworld.2021.1330-1341.

11. Ezemokwe G.C., Aguiyi J.C., Chollom F.P. The antibacterial activity of aqueous and ethanolic leaf extracts of Balanites aegyptiaca (L.) Del plant on some selected clinical human pathogens. J. Adv. Microbiol. 2020; 20(10): 51-66. doi:10.9734/jamb/2020/v20i1030290.

12. Ibrahim M.A., Emlee A.M. Anti-fungal study on aqueous and ethanolic leaves extracts of Piper sarmentosum. Matrix Sci. Pharm. 2020; 4 (1): 13. doi: 10.4103/MTSP.MTSP_3_20.

13. Noshad M. Evaluation of the effect of aqueous and ethanolic extraction methods on extraction yield, phenolic compounds, and antioxidant and antimicrobial activity of Stachys schtschegleevii extract. Food Sci Tech-nol. 2020; 17 (100): 117-125.

14. Gonfa T., Teketle S., Kiros T. Effect of extraction solvent on qualitative and quantitative analysis of major phyto-constituents and in-vitro anti-oxidant activity evaluation of Cadaba rotundifolia Forssk leaf extracts. Cogent Food Agric. 2020; 6 (1): 1853867. doi: 10.1080/23311932. 2020.1853867.

15. Shrestha U.T., Shrestha S., Adhikari N. et al. Plasmid profiling and occurrence of P-lactamase enzymes in multidrug-resistant uropathogenic Escherichia coli in Kathmandu, Nepal. Infect Drug Resist. 2020; 13: 1905-1917. doi:10.2147/IDR.S250591.

16. Onivogui G., Letsididi R., Diaby M., WangL., SongY. Influence of extraction solvents on antioxidant and antimicrobial activities of the pulp and seed of Anisophyllea laurina R. Br. ex Sabine fruits. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2015; 6(1): 20-25. doi:10.1016/j.apjtb.2015.09.023.

17. Al Farraj D.A., Abdel Gawwad M.R., Mehmood A, Alsalme A., Darwish N.M., Al-Zaqri N., Warad I. In-vitro antimicrobial activities of organic solvent extracts obtained from Dipcadi viride (L.) Moench. Journal of King Saud University — Science. 2020; 32 (2020): 1965-1968. doi: 10.1016/j.jksus.2020.01.007.

18. Evbuomwan L., Chukwuka E.P., Obazenu E.I., Ilevbare L. Antibacterial activity of vernonia amygdalina leaf extracts against multidrug resistant bacterial isolates. J Appl Sci Environ Manage. 2018; 22 (1): 17-21. doi: 10.4314/jasem.v22i1.4.

19. Navid M.H., Laszczyk-Lauer M.N., ReichlingJ., Schnitzler P. Pentacyclic triterpenes in birch bark extract inhibit early step of herpes simplex virus type 1 replication, Phytomedicine. 2014; 21 (11): 1273-1280. doi: 10.1016/j.phymed.2014.06.007.

20. Kuete V. Potential of Cameroonian plants and derived products against microbial infections: a review. Planta Med. 2010; 76: 1479-1491. doi: 10.1055/s-0030-1250027.

Информация об авторах

Чапурин Юрий Вадимович — студент, кафедра микробиологии им. В. С. Киктенко, Медицинский институт, Российский университет дружбы народов, Москва, Российская Федерация. ORCID: 0000-0002-3871-9200 Мбарга Манга Джозеф Арсен — аспирант, лаборант, кафедра микробиологии им. В. С. Киктенко, Медицинский институт, Российский университет дружбы народов,

About the authors

Yuri V. Chapurin — student, Department of Microbiology named after V S. Kiktenko, Peoples' Friendship University of Russia (RUDN University), Moscow, Russian Federation. ORCID: 0000-0002-3871-9200

Mbarga Manga Joseph Arsen — postgraduate student, laboratory assistant, Department of Microbiology named after V S. Kiktenko, Peoples' Friendship University of Russia (RUDN

Москва, Российская Федерация. ORCID: 0000-0001-96269247. Scopus ID: 57222221732

Сенягин Александр Николаевич — аспирант, ассистент, кафедра микробиологии им. В.С. Киктенко, Медицинский институт, Российский университет дружбы народов, Москва, Российская Федерация. ORCID: 0000-00024981-0149. Scopus ID : 57217030559

Подопригора Ирина Викторовна — к. м. н., заведующий кафедрой, кафедра микробиологии им. В. С. Киктенко, Медицинский институт, Российский университет дружбы народов, Москва, Российская Федерация. ORCID: 0000-0003-4099-2967. Scopus ID: 57205375027

Рехайлия Манар — аспирант, кафедра агробиотехноло-гии, Аграрно-технологический институт, Российский университет дружбы народов, Москва, Российская Федерация. ORCID : 0000-0002-9468-6589

University), Moscow, Russian Federation. ORCID: 0000-00019626-9247. Scopus ID: 57222221732

Alexander N. Senyagin — postgraduate Student, assistant, Department of Microbiology named after V S. Kiktenko, Peoples' Friendship University of Russia (RUDN University), Moscow, Russian Federation. ORCID: 0000-0002-4981-0149. Scopus ID: 57217030559

Irina V. Podoprigora — Ph. D. in medicine, Peoples' Friendship University of Russia (RUDN University), Moscow, Russian Federation. ORCID: 0000-0003-4099-2967. Scopus ID: 57205375027

Manar Rehailia — postgraduate student, Department of Agro-biotechnology, Peoples' Friendship University of Russia (RUDN University), Moscow, Russian Federation. ORCID: 0000-0002-9468-6589