CC BY
18
Материалы XVII Всероссийского конгресса с международным участием «Фундаментальные и прикладные аспекты нутрициологии и диетологии. Лечебное, профилактическое и спортивное питание» (Москва, 29-31 октября 2018 г.)
емые при морфологическом исследовании признаков жировой дистрофии печени. В случае высокожирового и высокофруктозного рационов статистически достоверное снижение уровней экспрессии было выявлено для гена FDFT1, кодирующего фермент сквален-синтазу, который осуществляет начальный этап данного метаболического пути и отвечает за регуляцию уровня холестерина в клетках и плазме крови. Добавочная квота холестерина в рационе вызывала изменение уровней экспрессии ряда генов метаболических путей обмена глюкозы и гликогена.
Вывод. Таким образом, результаты полнотранскриптомного профилирования ткани печени самок крыс аутбред-ной линии Wistar показали изменения уровней экспрессии генов основных метаболических путей углеводного и липидного обмена, включая метаболизм глюкозы и гликогена, обмен стероидов, функционирование рибосом, фагосом, протеасом, пероксисом и молекул клеточной адгезии для всех трех несбалансированных типов рационов (высокожировой, высокоуглеводный, рацион с добавкой холестерина). Профили дифференциальной экспрессии генов были в значительной мере специфичными для отдельных экспериментальных рационов, что открывает определенные возможности в использовании данных биомаркеров при выявлении и контроле метаболических нарушений, вызванных различными алиментарными дисбалансами.
Работа проведена за счет средств субсидии на выполнение государственного задания в рамках Программы фундаментальных научных исследований (тема ФАНО России № 0529-2015-0006 «Поиск новых молекулярных маркеров алиментарно-зависимых заболеваний: геномный и постгеномный анализ»).
Трушина Э.Н., Мустафина О.К., Тышко Н.В., Жминченко В.М., Пашорина В.А.
ОЦЕНКА АКТИВНОСТИ АПОПТОЗА ТИМОЦИТОВ КРЫС ЛИНИИ ВИСТАР МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ НА РАЗНЫХ ЭТАПАХ ОНТОГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗВИТИЯ
ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии», Москва
Одним из перспективных направлений медико-биологических исследований при оценке безопасности пищевой продукции может служить определение количественных показателей, характеризующих активность апоптоза клеток в органах-мишенях. Однако остается малоизученным вопрос выбора оптимального срока онтогенетического развития экспериментальных животных для отбора образцов тканейпри проведении исследований.
Цель настоящей работы - оценка изменений активности апоптоза тимоцитов на разных этапах онтогенетического развития крыс.
Материал и методы. Эксперименты выполнены на клинически здоровых крысах линии Вистар, всего для получения материала было использовано 169 самок и 169 самцов. Отбор материала (тимуса) для исследований проводили у самцов и самок на 20-й, 22-й, 35-й, 50-й, 80-й, 110-й и 140-й дни онтогенеза. В течение эксперимента велись наблюдения за поедаемостью корма, массой тела и общим состоянием животных.
Суспензию тимоцитов получали с помощью автоматической системы для механической гомогенизации ткани «BD Medimachine» (Becton Dickenson and Company, США). Однократно отмывали клетки забуференным фосфатами 0,15 М раствором хлорида натрия, рН 7,2-7,4 (PBS) и готовили пробу с концентрацией клеток 1х106/см3. Окрашивание тимоцитов производили набором реактивов Annexin V-FITC/7-AADKit (IMMUNOTECH, Франция) с последующей детекцией на проточном цитофлуориметре FC-500 (Beckman Coulter, США). Результаты представлены в виде процентного соотношения неапоптозных клеток и тимоцитов, находящихся на разных стадиях апоптоза, на 100 тыс. просчитанных объектов в каждом образце.
Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ IBM SPSS Statistics Version 18. Результаты представлены в виде средних величин (М), стандартного отклонения (а) и стандартной ошибки средней величины (m). Оценка достоверности различий средних величин проведена с использованием f-критерия Стьюдента. Уровень значимости считали достоверным при р<0,05.
Результаты. Общее состояние крыс в течение всего эксперимента было удовлетворительным: по внешнему виду, качеству шерстного покрова, поведению и скорости роста самки и самцы всех групп соответствовали показателям, характерным для крыс линии Вистар. Еженедельный прирост массы тела крыс обеих группсоответствовал уровню прироста, свойственному животным данной линии.
Суммарная величина показателей, характеризующих степень апоптозатимоцитов (ранние проапоптотические изменения и поздние варианты клеточной гибели), крыс линии Вистар обоего пола изменялись волнообразно в зависимости от возраста: максимальные значения показателей отмечены на 20-й день онтогенеза (у самцов -6,93±0,89%, у самок - 8,57±0,75%) с последующим постепенным снижением до минимальных величин на 50-й день (у самцов - 1,35±0,08%, у самок - 1,17±0,07%), сравнительно плавным увеличением до умеренно высоких значений на 110-й день (у самцов - 5,02±0,10%, у самок - 5,56±0,43%)и значительным снижением к 140-му дню онтогенеза (у самцов - 0,93±0,05%, у самок - 1,09±0,26%).
Таким образом, при проведении медико-биологических исследований с изучением активности апоптоза клеток тимуса следует учитывать физиологические колебания данного показателя в зависимости от возраста крыс.
46
Вопросы питания. Том 87, № 5, 2018. Приложение
