CC BY
10
BiCHHK ВДНЗУ «Украгнсъка медична сгпомагпологгчна акадежШ»
тканях пародонта, а именно: дисбалансу NO-эргической системы, активации свободно-радикального окисления, увеличению концентрации МСМ, активации ММП-1 и, впоследствии, интенсификации деструкции коллагеновых и неколлагеновых белков соединительной ткани пародонта, которые позитивно коррегируются мультипробиотиком "Симбитер® ацидофильный ".
Summary
MECHANISMS OF PATHOLOGICAL CHANGES DEVELOPMENT IN PERIODONTIUM TISSUES DURING LONG-TERM OMEPRAZOLE ADMINISTRATION AND ITS CORRECTION Manko A.M.
Key words: periodontium, omeprazole, hypoacidity, hypergastrinemia, "Symbiter® acidophilus". Tabl. 4, bibl. 12.
The purpose of the research was to study the influence of multiprobiotic "Symbiter® acidofylic" on periodontium tissues fin order to correct pathological changes under the long-term omeprazole administration. Experiments were carried out on 41 Wistar male rates, weight 180-250g. Omeprazole ("Sigma", USA) was injected intraperitoneal^ in a dose of 14 mg/kg of body wt, "Symbiter® acidophilus" ("O.D. Prolisok", Ukraine) was administered peros in a dose of 0,14 ml/kg separately or together with omeprazole daily for 28 days. In the homogenate of soft periodontium tissues we determined the activity of NO-synthase, presence of nitrite-anions, collagenolytic activity (MMP-1), oxyproline, mean mass molecules (МММ), oxidative-modified proteins, fucose and glycosaminoglycans (GAG). Long-term omeprazole administration leads to the development of pathological changes in soft periodontium tissues, such as: disbalance of NO-ergic system, activation of free-radical oxidation, increase of mean mass molecule concentration, activation of MMP-1 and, consequently, to intensification of collagen and noncollagen proteins destruction of periodontium connective tissue, that may be positively corrected by multiprobiotic "Symbiter® acidophilus".
УДК [615: 616.155.194]-092.9
0С0БЛИВ0СТ1 ВИКОРИСТАННЯ Б1ЛИХ ЩУР1В ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ В1ДТВ0РЕНН1 КР0В0ВТРАТИ
Мокляк G.В., Олтник Н.О., Важнича О.М., Дев'яткта Т.О, Бобирьов В.М.
Вищий державний навчальний заклад УкраУни «УкраУнська медична стоматолопчна академия», м. Полтава
В експериментах на 53 бших щурах-самцях визначено динамшу основних показнитв еритрону nid час моделювання гострог та хротчног втрати Kpoei. Гостру крововтрату здшенювали шляхом забирания з серця 25% циркулюючог Kpoei. Кров досл{джували через 1 годину та 1, 3 та 5 di6 теля цъого. При eidmeopeHHi хротчног крововтрати кров забирали кожног 5-г доби протя-гом м{сяця. Гематолог{чт досл{дження виконували на 1-у, 15-у й 30-у добу. Визначали загальну кшътстъ еритроцит1в, гемоглобт, гематокрит та стандартт еритроцитарт тдекеи. Показано, що, починаючи з 1-ог години теля гострог втрати Kpoei, в тварин розвиваетъея анем1я. Через 1-3 доби вона мае нормохромний нормоцитарний характер без noMimnozo атзоцитозу. Через 5 дгб теля гострог крововтрати показники «червоног Kpoei» повертаютъея до р{вня контролю. При хротчнш Kpoeoempami теля 3-х вилученъ Kpoei в тварин розвиваетъея анем1я, яка мае гтохромний нормоцитарний характер з iemomHUM атзоцитозом i компенеуетъея в межах одного м1еяця eid пергиог крововтрати.
Ключов1 слова: крововтрата, бт1 щури, еритроцити, гемоглобЫ,
Зал1зодефщитна анем1я е найбтьш розповсю-дженим анем1чним синдромом [4, 7]. В основ1 м розвитку знаходяться р1зы причини, зокрема го-стр1 та хроычы крововтрати. Гостра крововтрата супроводжуе травми, операцм, пологи й часто потребуе невщкладноТ допомоги [3, 5, 8]. Хрош-чш рецидивуюч1 крововтрати нерщко зустр1ча-ються в кгншчнш практицк Вони супроводжують захворювання шлунково-кишкового тракту, пне-колопчну патолопю, лкування антикоагулянтами та нестерощними протизапальними засобами, донорство [6, 7]. Крововтрата може спричиняти розвиток нормохромноТ анемм', яка надал1 переходить у ппохромну зал1зодефщитну анемш [4]. Це зумовлюе актуальнють розробки нових засо-б1в фармаколопчноТ корекцм постгеморапчноТ анемм.
В експеримент1 гостра крововтрата слугуе за патолопчний фон для первинного доклш1чного
еритроцитарнп ¡ндекси.
дослщження протианем1чних засоб1в [1]. Насту-пним обов'язковим етапом розробки засоб1в фармаколопчноТ корекцм анемм е визначення ефе-ктивносп препарате за умов хрошчноТ' крововтрати в експериментальних тварин [1]. При проведены зазначених дослщжень рекомендовано використовувати крол1в або бтих щур1в, однак ц1 види гризушв мають левы вщмшносп в функцю-нуванш еритрону [2]. Тому являють ¡нтерес осо-бливосп динамка параметр1в периферичноТ ланки еритрону шеля одно- та багаторазового вилучення кров1 в експеримент1 з використанням бтих щур1в.
Мета роботи - вивчити змши ктькюних пара-метр1в еритрону протягом перших 5 д1б пюля го-стро'Г крововтрати та пщ час моделювання хро-жчноТ крововтрати.
Робота була фрагментом планово'!' НДР ВДНЗУ «УкраУнська медична стоматолопчна
академ1я» «Вивчення зв'язку ушкоджень оргашв системи травления i кровопостачання за умов емоцшного стресу та корекци» (№ державноТ реестрацм 0107U001557).
Матср1али та методи дослпджсння
Експерименти виконано на 53 бтих статевоз-ртих щурах-самцях, яких утримували за стан-дартних умов Bieapiio. На проведения дослав було одержано дозвт KoMicii з бюетики ВДНЗУ «Украшська медична стоматолопчна академ1я».
Проведено дв1 cepi'i експериметчв. В першш cepi'i дослав у тварин моделювали гостру кро-вовтрату шляхом забирання з серця 25% цирку-люючоТ кров1 пщ нешгаляцшним кетамшовим наркозом (2 мг/кг) [1]. Через 1 годину та через 1, 3 та 5 д1б пюля цього знову забирали кров, ста-б1л1зували ТТ розчином ЕДТО й дослщжували на геманал1затор1 MS4 (Melet Schloesing Laboratories, Франтя). Контролем слугувала кров ¡нтактних бтих щур1в.
В друпй cepi'i' експерименти виконано на 8 6i-лих щурах-самцях, у яких вщтворювали хрошчну крововтрату шляхом забирання з серця 25% ци-ркулюючоТ кров1 пщ наркозом [1]. Кров забирали кожно'Г 5-Т доби протягом 1-го мюяця. Гематоло-ri4Hi дослщження зразш Kpoei виконували на 1-у, 15-у й 30-у добу. В цш cepi'i' контролем слугу-вали 6mi щури на початку експерименту (вихщ-ний pieeHb).
Стан периферичноТ ланки еритрону оцшювали за результатами автоматичного апаратного ви-значення загальноТ кшькосп еритроцит1в (RBC), гемоглобшу (НЬ), гематокриту (НСТ), середнього об'ему еритроциту (MCV), середньоТ концентра-
Гематологмн1 показ
ци гемоглобшу в еритроцит1 (МСНС), середньо'Г кшькосп гемоглобшу в еритроцит1 (МСН), коеф1-ц1енту вар1ацП' середнього об'ему еритроцит1в (RDW) [4].
Одержаний цифровий матер1ал статистично обробляли за стандартними комп'ютерними про-грамами Microsoft Excel.
Результати та обговорення
Показано, що вже протягом 1 години пюля гос-тро'| крововтрати RBC зменшуеться в 1,2 рази (р<0,002), НСТ знижуеться також у 1,2 рази (р<0,001), a pieeHb НЬ падае в 1,3 рази (р<0,001) пор1вняно з таким у ¡нтактних тварин (табл. 1). L|i змши супроводжуються BiporiflHHM зменшенням МСН (р<0,02), МСНС та RDW (р<0,001) (див. табл. 1).
Встановлено, що через 1 добу пюля крововтрати майже вдв1ч1 зменшуеться RBC, НЬ та НСТ (р<0,001) пор1вняно з контролем. Мае м1сце тен-денц1я до зниження МСН. Решта ¡ндекав не за-знае ¡стотних змш.
В TepMiHi 3 доби пюля гостро'Г крововтрати збер1гаються серйозн1 порушення показниш «червоно'|» Kpoei (див. табл. 1). RBC, НСТ та НЬ знижеш вщповщно в 2 рази (р<0,001), 2,1 рази (р<0,001) та 1,9 рази (р<0,001) у пор1внянн1 з контролем. Мае м1сце тенденц1я до пщвищення МСНС. Решта еритроцитарних ¡ндекав не за-знае суттевих змш.
Протягом наступних дыв вщбуваеться норма-л1зац1я порушених гематолопчних параметр1в i через 5 flié RBC, НЬ, НСТ та еритроцитарш ¡нде-кси суттево не вщр1зняються вщ контролю (див. табл. 1).
Таблиця 1
при моделюванш гостроГ крововтрати в бтих uiypie (M ± m)
Групи тварин RBC, 1012/л НСТ НЬ, г/л МСН, пг МСНС, г/дл MCV, мкм3 RDW, %
iHTaKTHi, п=6 6,02±0,15 0,31±0,01 110,3±4,0 18,3±0,5 359±13 51,2±0,7 14,4±0,4
Крововтрата, 1 год, п=5 5,25±0,11* 0,27±0,01* 82,4±4,1* 15,7±0,5* 308,4±2,5* 51,6±1,2 9,1 ±0,1 *
Крововтрата, 24 год, п=11 3,36±0,47* 0,17±0,02* 61,1 ±9,0* 17,0+1,0 357±13 50,3±0,8 14,6±0,5
Крововтрата, 72 год, п=11 3,08±0,17* 0,15±0,01* 58±2,3* 19,2±1,0 401±24 48,4±1,5 12,6±1,1
Крововтрата, 5 д1б, п=12 6,08±0,24 0,32±0,01 110,6±3,5 18,3±0,5 352±8 52,0±0,7 12,5±0,6
ripuMimKa. * - р<0,05 у nopieHBHHi з iнтактними тваринами (контроль).
Таблиця 2
Гематологмн1 показники при моделюванш хрон/чноГкрововтрати в бтих uiypie (M ± m)
Групи тварин RBC, 1012/л НСТ НЬ, г/л МСН, пг МСНС, г/дл MCV, мкм3 RDW, %
Вихщний pieeHb п=8 7,2±0,5 0,38±0,03 141,4±4,3 20,8±2,7 393,1±5,4 53,2±0,8 9,4±0,3
Крововтрата, 15 д1б, п=5 5,9±0,3* 0,36±0,02 124,1 ±5,8* 21,1±0,5 362,4±7,7* 59,9±0,9* 14,8±0,3*
Крововтрата, 30 fli6, п=5 7,4±0,4 0,45±0,02* 139,5±1,5 19,0±0,9 313,5±11,6* 60,6±1,7* 13,0±1,3*
Прим1тка. * - р<0,05 у пор1внянн1 з вих1дним р/внем показнишв Одержан! результати свщчать, що, починаючи з 1-о'|' години пюля втрати % частини циркулюю-чоТ кров1, у тварин розвиваеться анем1я, яка мае нормохромний нормоцитарний характер без ломаного ашзоцитозу, що узгоджуеться з даними лп"ератури [4]. Виразш гематолопчш зрушення спостер1гаються протягом перших 3-х д1б спо-стережень. Це вщповщае фаз1 гщрем1чно'|' ком-пенсацП', коли гематолопчн1 показники знижеш за рахунок надходження в кров тканинноТ рщини
та гемод1люц1'| [4].
Через 5 д1б п1сля гостро'Г крововтрати показники «червоно'| Kpoei» б1лих щур1в повертаються до р1вня контролю, що свщчить про компенсацш порушень за рахунок активацП' кютково-мозкового кровотворення [4] й дае пщстави вва-жати, що за умов нашого експерименту фаза Ki-CTK0B0-M03K0B0Ï компенсацИ' гостро'| крововтрати (гостро'| постгемораг1чно'| анемИ) розвиваеться в перюд 3-5 д1б п1сля вилучення кровк
BiCHHK ВДНЗУ «Украгнсъка жедична стожатологЬчна академШ»
При моделюванш в бтих щур1в хрошчноТ кро-вовтрати встановлено, що через 15 д1б експе-рименту в1рогщно знижуеться КВС та НЬ (р<0,05), знижуеться МСНС (р<0,001) та зроста-ють МСУ (р<0,05) та РЮ\Л/ (р<0,001) (табл. 2). На 30-у добу пщ час 7-го вилучення кров1 вщбува-еться спонтанне вщновлення значень КВС та НЬ, яю повертаються до початкового р1вня. При цьому деяю параметрами в1рогщно перевищу-ють вихщний р1вень (НСТ, МСУ, RDW: р<0,05). Водночас МСНС лишаеться нижчим за аналопч-ний показник на початку експерименту (р<0,001) (див. табл. 2). Таю змши еритроцитарних ¡ндек-ав свщчать про зростання середнього об'ему еритроцит1в та збереження ашзоцитозу, що характерно для посилення еритропоезу. Низью значения МСНС, вочевидь, вказують на те, що насичення еритроцит1в гемоглобшом вщстае вщ прол1феративноТ' активносп кюткового мозку.
Одержан! результати свщчать, що вже шсля 3-х вилучень % частини циркулюючоТ кров1 в тва-рин розвиваеться анем1я, яка мае ппохромний нормоцитарний характер з поманим ашзоцито-зом. За даноТ' модел1 експериментальноТ' патоло-г!"Г вона компенсуеться в межах одного мюяця вщ першоТ' крововтрати.
Таким чином, дослщжуючи протианем1чну ак-тивнють фармаколопчних засоб1в на модел1 гос-троТ' крововтрати, найбтьш виразш захисш ефе-кти дослщжуваних речовин можна очкувати через 1-3 доби шсля моделювання патолопчного стану, причому критер1ями ефективного захисту слщ вважати нормал1зацш (або попередження змш) КВС, НЬ, НСТ, МСНС. Водночас, вивчаючи протианем1чну активнють фармаколопчних за-соб1в на модел1 хрон1чно'|' крововтрати, найб1льш виразн1 захисш ефекти дослщжуваних речовин можна очкувати не ран1ш, н1ж через 15 д1б вщ початку моделювання патолопчного стану, причому критер1ями ефективного захисту слщ вважати нормал1зацш (або попередження змш) КВС, НЬ, МСНС, МСУта КР\Л/.
Реферат
ОСОБЕННОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ВОСПРОИЗВЕДЕНИИ КРОВОПОТЕРИ Мокпяк Е.В., Олейник Н.А., Важничая Е.М., Девяткина Т.А, Бобырев В.Н.
Ключевые слова: кровопотеря, белые крысы, эритроциты, гемоглобин, эритроцитарные индексы.
В экспериментах на 53 белых крысах-самцах определена динамика основных показателей эритрона во время моделирования острой и хронической потери крови. Острую кровопотерю осуществляли путем забора из сердца 25% циркулирующей крови. Кровь исследовали через 1 час и 1, 3 и 5 суток после этого. При воспроизведении хронической кровопотери кровь забирали на каждые 5-е сутки в течение месяца. Гематологические исследования выполняли в 1-ые, 15-е и 30-е сутки. Определяли общее число эритроцитов, гемоглобин, гематокрит и стандартные эритроцитарные индексы. Показано, что, начиная с 1-го часа после острой потери крови, у животных развивается анемия. Через 1-3 сутки она имеет нормохромний нормоцитарний характер без заметного анизоцитоза. Через 5 суток после острой кровопотери показатели «красной крови» возвращаются к уровню контроля. При хронической кровопотере после 3-х изъятий крови у животных развивается анемия, которая имеет гипохромний нормоцитарний характер с существенным анизоцитозом и компенсируется в пределах одного месяца от первой кровопотери.
Вочевидь, при проведены такого роду експе-римент1в доцтьним е поглиблення порушень у систем! еритрону лабораторних тварин за допо-могою додаткового введения хелатор1в зал1за, зокрема десфералу, що становитиме напрям наших наступних дослщжень.
Висновки
1. Вщтворення гостроТ крововтрати шляхом вилучення в бтих щур1в 25% об'ему циркулюючоТ кров1 характеризуеться розвитком нормох-ромноТ' нормоцитарноТ' анеми протягом перших 3-х д1б i нормал1зац1ею Bcix гематолопчних пока-зниш через 5 д1б експерименту.
2. Моделювання хрошчноТ крововтрати в бтих щур1в шляхом вилучення 25% об'ему циркулюючоТ' кров1 кожноТ' 5-Т доби протягом мюяця вщзна-чаеться розвитком ппохромноТ' нормоцитарноТ анеми з ашзоцитозом шсля 3-х вилучень кров1 з подальшою нормал1зац1ею головних показниш «червоноТ кров1» наприкшц1 термшу спостере-жень.
Л1тсратура
1. Стефанова О.В. floicniHiMHi дослщження лкарських 3aco6iB : ме-тодичж рекомендацм / О.В. Стефанова. - К., 2001. - С.284-288.
2. Западнюк И.П. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в експерименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария, В.В. Западнюк. - К. : Вища школа, 1983. -383 с.
3. Мороз В.В. Острая кровопотеря: взгляд на проблему / В.В. Мороз, Д.А. Остапченко, Г.Н. Мещеряков [и др.] // Анестезиология и реаниматология. - 2002. - №6. - С.4-9.
4. Погорелов В.М. Лабораторно-клиническая диагностика анемий / В.М.Погорелов, Г.И. Козинец, Л.Г. Ковалева. - М. : МИА, 2004. -173 с.
5. Усенко Л.В. Интенсивная терапия при кровопотере / Л.В. Усе-нко, Г.А. Шифрин. - Днепропетровск : Новая идеология, 2007. -243 с.
6. Sobieraj-Teague М. The risk of iatrogenic bleeding in acute coronary syndromes and long term mortality / M. Sobieraj-Teague, A.S. Gallus, J.W. Eikelboom // Curr. Opin. Cardiol. - 2008. - №4. -P.327-334.
7. Lieu P.T. The roles of iron in health and disease / P.T. Lieu, M. Heiskala, P.A. Peterson [et al.] // Mol. Aspects Med. - 2001. - V. 22.-P.1-87.
8. Tinmouth A.T. Blood conversation strategies to reduce the need for red blood cell transfusion in critically ill patients / A.T.Tinmouth, L.A.Mclntyre, R.A.Fowler // CMAJ. - 2008. - V. 178, №1,- P.49-57.
Summary
CHARACTERISTICS OF APPLICATION OF WHITE RATS UNDER THE MODELED BLOOD LOSS Moklyak E.V., Oleynik N.A., Vazhnichaya Ye.M., Devyatkina T.A, Bobyrev V.N. Key words: blood loss, white rats, red blood cells, hemoglobin, erythrocyte indexes.
In experiments on 53 white male rats there has been determined the dynamics of the basic parameters of erythron under the modelling of acute and chronic blood loss. Acute blood loss was carried out by extraction from the heart of 25 % of circulating blood. Blood was investigated in 1 hour and in 1, 3 and 5 days after that. While designing chronic blood loss the blood was taken each 5th day during a month. Hematologic researches were carried out in 1st, 15th and 30th day. There has been determined the total erythrocyte count, hemoglobin, hematocrit and standard erythrocytes indices. It has been shown that since the 1st hour after the acute blood loss designed anemia develops in animals. In 1-3 day it has normochromic, normocytic character without appreciable anisocytosis. In 5 day since acute blood loss the parameters of "red blood" come back to the control level. Under chronic blood loss after 3 blood intakes anemia develops having hypochromic normocytic character with significant anisocytosis develops and is compensated within one month since the first blood loss.
УДК: 612.12: 531.113
СОДЕРЖАНИЕ МАРКЕРОВ ТКАНЕВОГО МЕТАБОЛИЗМА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ НЕПОЛОВОЗРЕЛЫХ КРЫС ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ ГРАВИТАЦИОННЫХ ПЕРЕГРУЗОК И ИСПОЛЬЗОВАНИИ ГЛУТАРГИНА
Пикалюк B.C., Мороз Г.А, Кутя С.А.
Крымский государственный медицинский университет им. С.И. Георгиевского
В работе представлены результаты исследования содержания ТБК-активных продуктов, калия, кальция, фосфора, кислой и щелочной фосфатаз в сыворотке крови неполовозрелых крыс, подвергавшихся воздействию гравитационных перегрузок (9д, ежедневно, 10 минут, 10 и 30 дней) на фоне парентерального введения глутаргина. Установлено, что при систематическом воздействии гипергравитации в организме происходят сдвиги липидного, белкового и электролитного обмена. При нарушении метаболизма липидов активируется их перекисное окисление, свидетельством чего является изменение содержания ТБК-активных продуктов. Снижаются синтетические процессы (уменьшение содержания щелочной фосфатазы), на ранних стадиях гипоксии активируется гликолиз. При дальнейшем нарастании гипоксии наблюдается угнетение гли-колитических процессов, нарушение электролитного баланса, что приводит к изменению содержания ряда катионов в сыворотке крови. Применение глутаргина способствует нормализации сывороточного уровня большинства изучавшихся показателей.
Ключевые слова: гипергравитация, катионы, тканевой метаболизм
Предыдущими исследованиями, проведенными как в рамках научно-исследовательской работы кафедры нормальной анатомии КГМУ им. С.И. Георгиевского [1], так и другими авторами [2], были установлены факты активации переки-сного окисления липидов у половозрелых крыс, подвергавшихся систематическому влиянию гравитационных перегрузок. Известно, что одним из главных регуляторов свободнорадикаль-ных процессов в организме является оксид азота [3], синтез которого катализируется ферментом ЫО-синтазой, чья активность зависит от концентрации кальция [4]. В литературе имеются данные о снижении содержании кальция в сыворотке крови собак [5], находившихся в условиях повышенной гравитации (Зд), а также об изменении содержания кальция, фосфора и маркеров тканевого метаболизма у половозрелых крыс под действием гравитационных перегрузок величиной 9д [6]. Это позволяет предположить возможность использования донаторов оксида азота для повышения устойчивости организма к действию гипергравитации либо коррекции постперегрузочных повреждений.
глутаргин.
В связи с вышеизложенным целью нашего исследования было установление содержания ТБК-активных продуктов, калия, кальция, фосфора, кислой и щелочной фосфатаз в сыворотке крови двухмесячных крыс при систематическом воздействии гравитационных перегрузок, а также при использовании донатора оксида азота - глутаргина.
Материал и методы исследования
Экспериментальное исследование проведено на 48 двухмесячных крысах-самцах линии Ви-стар с исходной массой 120-130 г. Животные были разделены на четыре серии. Первую составили животные, ежедневно подвергавшиеся воздействию поперечных гравитационных перегрузок величиной 9д в виде следующих друг за другом трех "площадок" продолжительностью по 3 минуты каждая. Гипергравитацию моделировали путем вращения животных в периферических контейнерах на центрифуге Ц-2/500 (рабочий диапазон от 1 до 50 д, радиус плеча 50 см, градиент нарастания - 1,6 д/с, градиент спада -0,6-0,8 д/с). Контролем для первой серии служи-
