CC BY
17
Summary
RELATION BETWEEN PNPLA3 POLYMORPHIC GENE AND THE DEVELOPMENT OF NON-ALCOHOLIC FATTY LIVER DISEASE Kolesnikova O.V.
Keywords: non-alcoholic fatty liver disease, PNPLA3, development association.
This paper presents the findings of the investigation aimed to determine the relationship between the development of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) and PNPLA3 polymorphism. It has been shown that carriage of G-allele rs738409 predisposes tor the development of NAFLD. Genetic polymorphism of the PNPLA3 gene is associated with levels of AST, ALT, GGT, total cholesterol, triglycerides, and liver fat. These data allow us to suggest the participation of the PNPLA3gene not only in the development but also in the progression of NAFLD.
УДК: 616.24-002.5:612.017 Кужко М.М., Бутов Д.О.
ОСОБЛИВОСТ1 ПРОДУКЦП ЦИТОК1Н1В У ХВОРИХ НА ВПЕРШЕ Д1АГНОСТОВАНИЙ ТУБЕРКУЛЬОЗ ЛЕГЕНЬ
ДУ «Нацюнальний шститут фт^атри i пульмонологи iм. Ф. Г. Яновського НАМН Украши», м. Кшв, Харшський нацюнальний медичний ушверситет
Метою роботи було вивчення стану показникгв цитоттв (ттерлейкт (1Л)-2, 1Л-4 та 1Л-8) у хворих на вперше д{агностований туберкульоз легень (ВДТБЛ). Проведено досл{дження 1Л-2, 1Л-4 та 1Л-8 у 180 людей, з них 30 в{дносно здорових доноргв та 150 хворих на ВДТБЛ. На тдстав{ результат1в проведеного {муноферментного досл{дження у хворих на ВДТБЛ до початку лжу-вання ми спостер1гали тдвищення показнитв 1Л-2, 1Л-8 та зниження 1Л-4 у зр{внянш з в{днос-но здоровими донорами. Шсля проведеног двохм1сячног стандартног антимтобактер{альног те-ратг встановлено достов{рне зниження показнитв 1Л-2, 1Л-8 та тдвищення 1Л-4 у хворих на ВДТБЛ. Приведет показники можуть характеризувати субпопуляцшну кшьтсть та актив-тсть Т-хелпер{в.
Ключов1 слова: туберкульоз легень, цитокши, штерлейкш-2, штерлейк1н-4, 1нтерлейк1н-8.
Вступ
1мунна система оргашзму, в якш ютотну роль виконують легеш, забезпечуе системы та мiсцевi реакцп на антигенний вплив рiзного генезу. У Тх реалiзацN беруть участь рiзноманiтнi клп~инш елементи ^мфоцити, фагоцити, еозинофти, базофти, тромбоцити, ендотелюцити, ештелю-цити, фiбробласти та ш.) i гуморальш фактори (цитокши, медiатори, бюлопчно активы речови-ни, молекули адгези та ш.). Характер iмунноТ вщпов^ф залежить вщ виду антигену, його дози, тривалост впливу, а також функцюнального стану рiзних ланок iмунноТ системи, тюно взае-модie з iншими системами оргашзму (ендокрин-ною, нервовою). Клiтинна взаемодiя в iмуннiй вiдповiдi забезпечуеться системою цитомшв. Цитокiни - продукти секрецп клiтин, що беруть участь в iмунних процесах, визначаючи клiтинну взаемодю Мають про- i протизапальну, iмуно-стимулюючу, iмуносупресивну, гемопоетичну дiю. Дшть через рецептори на поверхнi кл^ин-мiшеней [12].
Дослiдження цитокiнiв стае невщ'емною час-тиною iмунологiчних дослщжень у клiнiцi. Характер та штенсивнють iмунноТ вiдповiдi залежить вщ оцiнки профiлiв цитокiнiв, дозволяе одержати шформацш про функцiональну активнiсть рiзних типiв iмунокомпетентних клiтин, про виразнють запального процесу i його прогноз, про стввщ-ношення процесiв активацп Т-хелперiв [13,16], про ефективнiсть застосування нових iмуномо-дулючих препаратiв [4,6], а також про мошторинг проведеноТ терапiТ [3,11].
На думку деяких aBTopiB, одними з основних цитомшв при туберкульозному запаленнi е ш-терлейкiн (1Л) -2, 1Л-4 та 1Л-8 [3,11,16].
Основними цитокiнопродукуючими лiмфоци-тами е Т-хелпери (Th). За спектром цитомшв, що вони синтезують, Th вiдносять до рiзних субпо-пуляцiй. 1Л-2 продукуеться активованими Th1, цей цитокiн стимулюе iмунну вщповщь за раху-нок активацп Т-кл^инних популяцiй, стимулюе синтез iнтерферону-Y та фактору некрозу пухлин (TNF) [1,4], е фактором росту i диферен^ровки В^мфоци™, бере участь у реалiзацiТ iмунного захисту i протипухлинноТ резистентност [1,4]. У протитуберкульозному захистi вш приймае участь, головним чином, у реак^ях пперчутли-востi уповiльненого типу, активуе цитотоксичш T-клiтини, моноцити та макрофаги, як пщвищу-ють синтез та секрецш TNF-a, 1Л-6, 1Л-8 [1].
Продукт Th 2 кл^ин - 1Л-4 е сильним росто-вим фактором для В-лiмфоцитiв, який сприяе Тх диферен^аци, активацiТ та розмноженню, пщ-тримуе пролiферацiю кл^ин, сприяе розвитку алергiчних реакцiй, володiе протипухлинною дн ею [1,4,17]. Як функцюнальний антагонiст цито-кiнiв, що продукуються Th1-клiтинами, вiн iнгiбуе деяк функцiТ макрофагiв, секрецiю ними 1Л-1, 1Л-6, TNF, тим самим здшснюючи протизапальну дiю. В той же час 1Л-4 пiдвищуе цитотоксичну ак-тивнiсть макрофагiв, посилюе Тх мiграцiю у вог-нище запалення, пщвищуе токсичнiсть TNFa, що приводить до фiброзу легень [4,6].
1Л-8 - низькомолекулярний цитокiн запалення, належить до амейства хемокiнiв, продуку-
Актуальт проблеми сучасно! медицини
еться пщ впливом бактерiальних ендотоксинiв та цитоюшв, головним чином TNF i IL-1, сприяе активацп моноцитiв i нейтроф^в, викликае ''х хемотаксис до зони запалення [3].
Контроль за розма'ттям субпопуляцш лГмФо-цитiв забезпечуе множиннють варiантiв цитокн новоТ продукцп та визначае перевагу Th1 або Th2 типу вiдповiдi клiтин на мкобактери тубер-кульозу [8,10,14]. T-хелпери першi розпiзнають антигенний пептид, пiсля отримання активуючо-го сигналу вони диференцшються у Th1 та Th2 типу [15,18]. Актива^я Th1 веде до формування кл^инного iмунiтету, а актива^я Th2 опосеред-ковуе гуморальний iмунiтет [7,19]. Th1 в основному продукують 1Л-2, а Th2 - виробляють 1Л-4 [5,9,17].
Таким чином, цтлю нашого дослiдження е вивчення стану показниш цитокiнiв (1Л-2, 1Л-4 та 1Л-8) у хворих на вперше дiагностований тубер-кульоз легень.
Матерiали та методи дослiдження
Пщ нашим спостереженням було 180 людей, з них: 30 практично здорових донорiв (контрольна група) i 150 хворих на вперше дiагностований туберкульоз легень (основна група) у вiцi вiд 20 до 70 рош. Хворi на вперше дiагностований туберкульоз легень знаходилися на обстеженн та лiкуваннi у Обласному протитуберкульозному диспансерi №1 м. Харш, Обласнiй туберкульоз-нiй лiкарнi №1 м. Харш, Обласному протитуберкульозному диспансерi №3 м. Змпв та Обласному протитуберкульозному диспансерi №4 м. 1зюм. У всiх хворих спостер^ався шфтьт-ративний туберкульоз легень. Стандартна тера-пiя проводилась на штенсивному етапi лiкування 4-5 основними протитуберкульозними препаратами ^зоыазид (0,3 г), рифампщин (0,6 г), тра-зинамщ (2,0 г), етамбутол (1,2 г) ^або стрептомн цин (1,0 г)) - з подальшим зменшенням штенси-вностi лiкування.
Всi хворi туберкульозом були обстежен iз за-стосуванням обов'язкових та додаткових мето-дiв дослiдження.
Рiвень цитокiнiв (1Л-2, 1Л-4 та 1Л-8) у сироват-
ц венозно'Т кровi вимiрювався iмуноферментним способом з використанням набору для iмунофе-рментного дослщження фiрми «Вектор-Бест», (Роая).
Забiр кровi для дослiдження проводився зранку (8-9 годин ранку) натще, у першi дн госпiталiзацil хворих та через два мюяц перебування у стацю-нарi. Пiсля забору кровi у хворих, всi зразки центрифугували. Видiлену сироватку заморожува-ли та одноразово використовували для визначен-ня рiвня цитокiнiв пiсля розморожування.
Результати дослщжень хворих обробили з використанням ^критерш Стьюдента [2]. Оцшю-вали отримаш даннi з визначенням середнього значення (М) та його стандартного вщхилення (т). Рiзниця вважалася достовiрною при зна-ченнi t-критерiю, яке вщповщало 95%, або (р <0,05).
Результати та 1х обговорення
До початку лкування у хворих на вперше дiа-гностований туберкульоз легень, спостер^алося достовiрне пiдвищення 1Л-2, 1Л-8 та зниження 1Л-4 при зютавлены з вiдносно здоровими донорами (контрольна група) (Табл.1).
Пюля проведено! двохмюячно'Т стандартно! терапи стан наведених показниш значно змши-вся. Так, стан 1Л-2 i 1Л-8 достовiрно знизився у хворих на вперше дiагностований туберкульоз легень (основна група). Якщо ми спостер^али зниження вище перерахованих показниш пiд час лкування хворих на вперше дiагностований туберкульоз легень, то вмiст 1Л-4, навпаки, до-стовiрно пiдвищувався у па^етчв з вперше дiа-гностованим туберкульозом легень (основна група).
Таким чином, у хворих на вперше дiагносто-ваний туберкульоз легень (основна група) ми спостер^али достовiрне пiдвищення 1Л-2, 1Л-8 та зниження 1Л-4 при зютавлены з вiдносно здоровими донорами (контрольна група). При засто-суванн стандартно! антимiкобактерiальноТ' тера-пи ми спостерiгали достовiрне зниження 1Л-2, 1Л-8, а 1Л-4 навпаки пщ впливом протитуберкульоз-но'Т терапи достовiрно пiдвищувався.
Таблиця 1
Стан концентрации/'нтерлейюну-2, /'нтерлейкну-4 та /'нтерлейюну-8 у хворих на туберкульоз легень та практично здорових донор1в (М ± т)
Групи n 1нтерлейкш-2, пг/л lнтерлейкiн-4, пг/л lнтерлейкiн-8, пг/л
до лкування через два мiсяцi проведено'' терапи до лiкування через два мюяц проведено'' терапи до лiкування через два мюяц проведено'' тера-пГ''
основна 150 35,34±0,71 27,06±0,93*# 10,83±0,36 21,07±0,49*# 21,8±0,3 17,28±0,24*#
контрольна 30 21,6±0,8 29,99±1,27 9,96±0,62
Прим1тки: 1. * - розб1жнють достов1рна (р<0,05) при зютавленн1 з практично здоровими донорами (контрольна група).
2. # - розб1жнють достов1рна (р<0,001) при зютавленн1 до лкування /' через два мсяц у хворих на туберкульоз легень (основна група).
Висновки
У хворих на вперше дiагностований деструк-тивний туберкульоз легень спостер^аеться до-стовiрне пщвищення 1Л-2, 1Л-8 та зниження 1Л-4 у зрiвняннi з вщносно здоровими. Стандартна антимiкобактерiальна терашя забезпечуе досто-
вiрне зниження 1Л-2, 1Л-8 та пiдвищення 1Л-4 в продовж двох мюя^в лiкування.
Таким чином, отримаш результати дослн дження дають змогу оцiнити динамiку гмунолоп-чних показникiв в лiкуваннi хворих на вперше дн агностований туберкульоз легень за рахунок
Том 12, Випуск 3(39)
55
в^рювання приведених цитоюыв, а саме опи-сати характеристику субпопуляцш Th за рахунок виробiтки тих чи шших цитокiнiв. Так, на початку лкування секреторна активнiсть та кшьмсть Th1 була пiдвищена, а Th2 знижена, про що свiдчить достовiрне пiдвищення 1Л-2, 1Л-8 та зниження 1Л-4 у зрiвняннi з вщносно здоровими. Пiсля проведено! терапп впродовж двох мiсяцiв секреторна активнють та кiлькiсть Th1 була знижена, а Th2 пiдвищена, про що свщчить достовiрне зниження 1Л-2, 1Л-8 та пiдвищення 1Л-4 в продовж двох мiсяцiв лкування.
Лiтература
Бережная Н.М. Иммунология злокачественного роста / Н.М.Бережная, В.Ф.Чехун. - К. : Наукова думка, 2005. - 791 с. Лапач С.Н. Статистические методы в медикобиологических исследованиях с использованием Excel / С.Н. Лапач, А.В. Чу-бенко, П.Н. Бабич. - К. : Морион, 2000. - 320 с. Панасюкова О. Р. Цитоюни i туберкульоз (огляд лтератури) [Електронний ресурс] / О. Р. Панасюкова, Л. П. Кадан, 2008. -Режим доступу: http://www.ifp.kiev.ua/
original/2008/panasiukova2008.pdf.
Петренко В.1. Роль цитоюшв та застосування Тх з метою iмуно-корекцп у хворих на туберкульоз легень / В.1. Петренко, Ю.А. Варченко // Туберкульоз, легеневi хвороби, В1Л iнфекцiя. -2010. - № 2 (02). - С.78-85.
Рабсон А. Основы медицинской иммунологии / А. Рабсон, А. Ройт, П. Делвз. - М. : Мир, 2006. - 320 с.
Сахно Л.В. Интерлейкин-2 в коррекции анергии Т-клеток у больных туберкулезом легких / Л.В. Сахно, М.А. Тихонова, А.А. Остапин [и др.] // Проблемы туберкулеза и болезней легких. -2006. - № 1. - Р. 48-52.
Свирщевская Е.В. Иммунитет при туберкулезе и аспергиллезе (обзор) / Е.В. Свирщевская, B.C. Митрофанов, Р. И. Шендеро-ва [и др.] // Проблемы медицинской микологии. - 2005. - Т.7, №1. - С. 3-13.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
Тюлькова Т.Е. Особенности функционирования иммунной системы при туберкулезной инфекции / Т. Е. Тюлькова, Ю. П. Чугаев, Э. А. Кашуба // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - 2008. - №11. - С. 48-55.
Черноусова Л.Н. Уровень цитокинов при инфицировании ex vivo макрафагов мыши микобактериями туберкулезного комплекса / Л. Н. Черноусова, Т. Г. Смирнова, С. Н. Андреевская [и др.] // Туберкулез и болезни легких. - 2009. - №8. - С. 4648.
Хасанова Р.Р. Роль цитокинов в модуляции субпопуляционно-го состава лимфоцитов крови у больных туберкулезом легких / Р.Р. Хасанова, О.В. Воронкова, О.И. Уразов [и др.] // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - 2008. - №3. - С. 3135.
Чернушенко Е.Ф. Цитокины в оценке иммунной системы у больных туберкулезом легких / Е.Ф. Чернушенко, Л.П. Кадан, О.Р. Панасюкова [и др.] // Укр. пульмон. журн. - 2010. - №2. -С. 39-43.
Чернушенко Е.Ф. Актуальные проблемы иммунологии во фтизиатрии и пульмонологии / Е.Ф. Чернушенко // Укр.пульмон.журн. - 2003. - №3. - С.94-96. Чернушенко Е.Ф. Противотуберкулезный иммунитет / Е.Ф. Чернушенко, Р.Г. Процюк // Укр. пульмон. журн. - 2010. - №4. -С. 53-58.
Kulpraneet M. Cytokine production in NK and NKT cells from Mycobacterium tuberculosis infected patients / M. Kulpraneet, S. Sukwit, K. Sumransurp [et al.] // Southeast Asian J. Trop. Med. Public. Health - 2007. - V. 38, №2. - P. 370-375. Ferraz J.C. Immune factors and immunoregulation in tuberculosis / J. C. Ferraz, F. B. Melo, M. F. Alluquerque [et al.] // Braz. J. Med. Biol. - 2006. - V. 11, № 39. - P. 1387-1397. Kulpraneet M. Cytokine production in NK and NKT cells from My-cobacterium tuberculosis infected patients / M. Kulpraneet, S. Sukwit, K. Sumransurp [et al.] // Southeast Asian J. Trop. Med. Public. Health. - 2007. - V. 38, №2. - P. 370-375. Rook G.A. Th2 cytokines in susceptibility to tuberculosis / G.A. Rook / Curr. Mol. Med. - 2007. - V. 7, № 3. - P.327-337. Stenger S. Immunological control of tuberculosis: role of tumour necrosis factor and more / S. Stenger // Ann Rheum Dis. - 2005. -V. 64, №4. - P. 24-28.
Them M.L. The effect of tuberculin testing on the development of cell-mediated immune responses during Mycobacterium bovis infection / M. L. Them, I. C. Hope, M. Mcaulay [et al.] // Immunol. and Immunopathol. - 2006. -V. 114, № 15. - P. 25-36.
Реферат
ОСОБЕННОСТИ ПРОДУКЦИИ ЦИТОКИНОВ У БОЛЬНЫХ С ВПЕРВЫЕ ДИАГНОСТИРОВАННЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ Кужко М.М., Бутов ДА
Ключевые слова: туберкулез легких, цитокины, интерлейкин-2, интерлейкин-4, интерлейкин-8.
Целью работы было изучение состояния показателей цитокинов (интерлейкин (ИЛ) -2, ИЛ-4 и ИЛ-8) у больных с впервые диагностированным туберкулезом легких (ВДТБЛ). Проведено исследование ИЛ-2, ИЛ-4 и ИЛ-8 у 180 человек, из них 30 относительно здоровых доноров и 150 больных ВДТБЛ. На основании результатов проведенного иммуноферментного исследования у больных ВДТБЛ до начала лечения мы наблюдали повышение показателей ИЛ-2, ИЛ-8 и снижение ИЛ-4 в сравнении с относительно здоровыми донорами. После проведенной двухмесячной стандартной антимикобактериальной терапии установлено достоверное снижение показателей ИЛ-2, ИЛ-8 и повышение ИЛ-4 у больных ВДТБЛ. Приведенные показатели могут характеризовать субпопуляционное количество и активность Т-хелперов.
Summary
FEATURES OF CYTOKINE PRODUCTION IN PATIENTS WITH NEWLY DIAGNOSED PULMONARY TUBERCULOSIS Kuzhko MM, Butov DA
Key words: pulmonary tuberculosis, cytokines, interleukin-2, interleukin-4, interleukin-8.
This research was aimed to study the status of cytokines indices (interleukin (IL) -2, IL-4 and IL-8) in patients with newly diagnosed pulmonary tuberculosis (NDPT). The study of IL-2, IL-4 and IL-8 were performed in 180 persons, among whom there were 30 relatively healthy donors and 150 patients with NDPT. Based on the results of research conducted by ELISA in patients with NDPT prior to treatment, we observed an increase in IL-2 and IL-8 indices and decreased IL-4 compared with respect to healthy donors. Following a two-month standard antimycobacterial therapy we found significant reductions in IL-2, IL-8 and increased IL-4 in patients with NDPT. These indices can characterize the number and activity of the subpopulation of T-helper cells.
8
9
3
4
7
